इस प्रक्रिया का समग्र लक्ष्य vivo स्ट्रोक के चूहे मॉडल में रक्त मस्तिष्क बाधा व्यवधान के वीवो आकलन में के लिए एक उच्च reproducible तकनीक प्रदान करने के लिए है ।
कोरोनरी स्ट्रोक vasogenic मस्तिष्क सूजन और बाद में प्राथमिक मस्तिष्क चोट है, जो रक्त मस्तिष्क बाधा (BBB) के विनाश के माध्यम से मध्यस्थता है की ओर जाता है । प्रेरित कोरोनरी स्ट्रोक के साथ चूहों की स्थापना की और BBB के कार्यात्मक अखंडता की जांच करने के लिए vivo में मॉडल के रूप में इस्तेमाल किया गया । कोरोनरी चोट के साथ मस्तिष्क के नमूनों में इवांस ब्लू (EB) के स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक का पता लगाने के अनुसंधान और उपंयास चिकित्सीय मोडलों के विकास के लिए विश्वसनीय औचित्य प्रदान कर सकता है । इस विधि reproducible परिणाम उत्पंन करता है, और विशेष उपकरणों के लिए एक की आवश्यकता के बिना किसी भी प्रयोगशाला में लागू है । यहां, हम चूहों में कोरोनरी स्ट्रोक की प्रेरण के बाद EB के extravasation का पता लगाने पर एक कल्पना और तकनीकी दिशानिर्देश पेश करते हैं ।
Vasogenic मस्तिष्क सूजन के कारण रक्त मस्तिष्क बाधा (BBB) व्यवधान कोरोनरी स्ट्रोक की एक महत्वपूर्ण जटिलता और स्ट्रोक रोगियों में जीवित रहने की दर का एक प्रमुख निर्धारक1,2रहता है । रक्त मस्तिष्क बाधा (BBB), जो मस्तिष्क केशिका endothelial कोशिकाओं (BCECs) द्वारा गठित और विशिष्ट neurovascular घटकों से बना है (जैसे, BCECs, pericytes, astroglial, और ंयूरॉन कोशिकाओं के बीच तंग जंक्शनों3), प्रदान करता है एक केंद्रीय तंत्रिका तंत्र (सीएनएस) और परिधीय रक्त परिसंचरण4,5के बीच विशेष और गतिशील इंटरफेस । ischemia के रूप में अपमान-reperfusion चोटों BBB के कार्यात्मक अखंडता को बाधित और मस्तिष्क पैरेन्काइमा में घूम ल्यूकोसाइट्स के बाद प्रवेश करने के लिए नेतृत्व कर सकता है कि अंततः मस्तिष्क सूजन और प्राथमिक मस्तिष्क चोटों ट्रिगर ६ , 7. पशु मॉडल एक स्ट्रोक की घटना के बाद BBB की शिथिलता का सटीक पता लगाने के लिए आवश्यक हैं । इस तरह के मॉडल अंतर्निहित pathophysiological तंत्र का अध्ययन और नई न्यूरोप्रोटेक्टिव रणनीतियों को शुरू करने के लिए बहुत महत्व के हैं । इन विट्रो सेल संस्कृति BBB के मॉडल आधारित अत्यधिक विकसित किया गया है और BBB physiopathology8,9,10के आणविक अध्ययन के लिए इस्तेमाल किया । फिर भी, vivo में पशु मॉडल है, जो मानव नैदानिक परिस्थितियों के समान BBB की कोरोनरी क्षति का उत्पादन, इस संबंध में बहुत सार्थक हैं । इवांस ब्लू (EB) के extravasation की मात्रात्मक जांच एक अच्छी तरह से स्वीकार किए जाते है और संवेदनशील तकनीक है कि BBB अखंडता और neurodegenerative रोगों में समारोह के आकलन के लिए इस्तेमाल किया गया है, कोरोनरी स्ट्रोक सहित11, 12 , 13 , 14. यह विधि किसी प्रायोगिक प्रयोगशाला में लागत-प्रभावी, साध्य, reproducible, और पूर्णत: लागू होती है । इसके कार्यांवयन ऐसे रेडियोधर्मी अनुरेखकों के रूप में उन्नत उपकरण की आवश्यकता नहीं है15 या चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग (एमआरआई)16, कि अन्य तरीकों के लिए आवश्यकताएँ हैं. इस लेख में, हम व्यापक रूप से BBB आकलन की बुनियादी तकनीकी प्रक्रियाओं का उपयोग कर EB extravasation के चूहे के मॉडल में कोरोनरी स्ट्रोक ।
इस प्रकार अब तक, इस तरह के autoradiography और रेडियोधर्मी अनुरेखकों का पता लगाने के रूप में विभिन्न तरीकों24,25, इम्यूनोफ्लोरेसेंस माइक्रोस्कोपी26,27, और EB extravasation तकनीक<sup class="xr…
The authors have nothing to disclose.
लेखक चिकित्सा विज्ञान के अर्दाबिल विश्वविद्यालय के अनुसंधान के लिए वाइस चांसलर के लिए आभारी है (अर्दाबिल, ईरान) वित्तीय सहायता के लिए (अनुदान नहीं: ९६०७) ।
Isoflurane | Piramal | AWN 34041100 | 20 – 25 °C |
2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride (TTC) | Molekula | 31216368 | 4 years |
Sprague–Dawley rats | Pasture Institute (Tehran, Iran) | 300-350g | |
Evans Blue | Sigma-Aldrich | 314-13-6 | |
Trichloroacetic acid | Sigma-Aldrich | 76-03-9 | 2 years |
Bupivacaine HCl (0.5%) | Delpharm Tours | below 25 °C | |
Bupernorphine | Exir (Iran) | ||
Sodium Carbonate | Sigma-Aldrich | 497-19-8 | |
Sodium chloride | Sigma-Aldrich | 7647-14-5 | |
Di- Sodium hydrogen phosphate | EMD Millipore | 231-448-7 | |
Potassium chloride | Sigma-Aldrich | 7447-40-7 | |
Ethanol | Sigma-Aldrich | 64-17-5 | |
silicone(Xantopren) | Heraeus | EN ISO 4823 | |
Activator universal plus | Heraeus | 66037445 | |
Micro-Dissecting forceps | Stoelting | 52100-41 | |
Spring Scisors | Stoelting | 52130-00 | |
Operating Scissors | Roboz | 52140-70 | |
Brain matrix | Stoelting | 51390 | |
Anesthesia Machine for Small Animals | | Kent Scientific | SS-01 | |
Power Lab system | AD Instruments | ML880 | |
Laser Doppler flowmeter | AD Instruments | ML191 | |
Heating feed back system | Harvard Appratus | 72-7560 | |
Vascular micro clamp | FineScience Tools | 18055-03 | |
Silk 5-0 suture thread | Ethicon | 682G | |
Ethilon 4-0 suture thread | Ethicon | EH6740G |