Summary
이 프로토콜 분석 endochondral 뼈 쥐에서 치유 하는 데 사용할 수 있습니다 대 퇴 골 골절의 표준화 된 안정화를 위한 intramedullary 나사를 사용 하 여 최소 침 습 osteosynthesis 기술을 설명 합니다.
Abstract
뼈 치료 모델은 골절 임상 골절 치료를 개선 하기 위해 치료의 복잡 한 메커니즘을 분석 하는 데 필요한. 지난 10 년 동안 정형 외과 연구에 마우스 모델의 증가 사용을 지적 했다, 대부분의 아마 마우스 모델 유전자 변형 종자 및 골절 치유의 분자 메커니즘의 분석에 대 한 특별 한 항 체의 많은 수를 제공 하기 때문에. 제어 하려면 biomechanical 조건, 잘 특징이 osteosynthesis 기법 또한 쥐에 필수입니다. 여기, 우리는 쥐의 대 퇴 골 골절을 안정화 설계 및 닫힌된 뼈 치유 모델의 사용에 보고. 의학 급료 스테인리스 intramedullary 나사 골절 압축을 통해 축 및 회전 안정성의 완전 한 부족을 보여 주로 사용된 간단한 intramedullary 핀에 비해 축 및 회전 안정성을 제공 합니다. Intramedullary 나사에 의해 달성 안정성 endochondral 치유의 분석을 수 있습니다. 굳은 살 조직, 나사, 안정화 후 받은 많은 양의 수확 생 화 학적 및 분자 분석에 대 한 조직에 이상적인 조건을 제공 합니다. 나사를 사용 하 여의 더 이점은 유도 하는 부드러운 조직에 손상 없이 나사 침 습 기법으로 대 퇴 골에 삽입할 수 있는 사실 이다. 결론적으로, 나사 폐쇄 골절 치유 모델을 제공 하는 표준화 된 biomechanical 조건에에서 이상적으로 사용 될 수 있는 독특한 이식입니다.
Introduction
뼈 치유 연구 생쥐에서 항 체와 유전자 조작 동물의 광범위 한 스펙트럼 때문에 큰 수요에 있다. 이러한 사실을 뼈1치유의 분자 메커니즘 연구를 허용 합니다. 지난 몇 년 동안, 다른 뼈 모델 마우스 되었습니다 치유 개발2. 이 모델은 오픈 모델, 어떤 뼈는 osteotomized 오픈 측면 수술 방법을 사용 하 고 닫힌된 모델, 뼈 골절은 골절 모델 Bonnares 및 아인혼3도입으로 나눌 수 있습니다. 이 기술을 사용 하 여, 표준화 된 가로 골절 제작 하실 수 있습니다 3-포인트 절곡 장치 그리고 intramedullary 임 플 란 트를 최소 침 습 기술 주요 연 조직 외상을 피하에 작은 중간 parapatellar 절 개를 통해 삽입 될 수 있다.
Intramedullary 나사는 쥐에 폐쇄 골절 안정화를 위해 적용할 수 있습니다. 나사 축 회전 안정성을 제공합니다. 이 인접 스레드 및 원심 머리4를 통해 골절 압축에 의해 이루어집니다. 스크류의 더 이점은 간단한 수술 기법, invasivity, 낮은 저급 이식 무게와, 가장 주목할만 하 게, 더 높은 안정성 표준된 제어 biomechanical 조건을 다른 intramedullary에 비해 제공 하 5이 식은. 사실, 가장 폐쇄 골절 모델에서 조각을 회전 및 축 안정성의 완전 한 부족 및 핀의 높은 위험 관련 된 간단한 핀에 의해서만 안정 하 고 전위 골절. 이 현저 하 게 지연 치유 또는 비-연합 형성 발생할 수 있습니다 치유 과정을 좌우할 수 있다.
그것은 잘 알려진 안정성 골절 고정을 치유 과정6,7에 엄청난 영향을가지고. 골절 간격에 micromovements 수 있습니다, 덜 엄격한 고정 결과 endochondral 치유 하는 동안 높은 경직 된 고정 intramembranous 치료 결과. Intramedullary 나사와 골절의 안정화 주로 endochondral 치료 많은 양의 굳은 살 조직, 특히 골절 치유의 2 주 후 표시 됩니다. 굳은 살 조직 많은 양의 수확을 다른 기술로 여러 매개 변수 분석을 수 있습니다.
여기, 우리는 설계 및 intramedullary 나사 마우스, 뿐만 아니라 그것의 이점 및 단점 정상적인 endochondral 뼈 치유에 대 한 실험 연구에의 응용 프로그램에 보고합니다.
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Protocol
모든 실험 동물의 사용에 대 한 건강의 국가 학회 지침에 따라 수행한 과정과 기관 지침 (Landesamt에 Verbraucherschutz, Zentralstelle Amtstierärztlicher Dienst, 자르브뤼켄, 따라 독일)입니다.
1입니다. 수술 및 임 플 란 트의 준비
- Microsurgical 악기 상자에서 메스 블레이드 (크기 15) 작은 면봉, 괜 찮 아 요 집게, 27 G 니 들, 비 resorbable 5-0 봉합가 위, 바늘 홀더를 선택 합니다.
- 가이드 와이어 (0.3/0.2 m m 직경, 10 cm 길이), 중심 드릴 비트 (0.5 m m 직경) 및 (그림 1, 참조 테이블의 재료) 핸드 드릴 intramedullary 나사를 풀으십시오.
참고: intramedullary 나사 (0.5 m m 직경, 17.2 m m 길이) 대 퇴 골에 역행 주입을 위한 의학 급료 스테인리스의 이루어집니다. 나사 (0.2 m m, 0.4 m m 길이) 코를 가진 인접 스레드 (0.5 m m, 4 m m 길이) 팁과 원심 원뿔 모양 머리 (직경 0.8 m m, 0.9 m m 길이) 축 및 회전 안정성 골절 압축을 달성 하는 있다. - 임 플 란 트 및 5 분 동안 소독 솔루션 (96% 알코올)를 모든 수술 기구를 노출 시킵니다 또는 소독 (스팀 살 균, 130 ° C, 25 분). 소독, 살 균 후 작업 헝겊에 악기를 놓습니다. 작업 천으로 직접 작은 동물성 가동 테이블에 인접 한 위치입니다.
2. 동물, 마 취 및 진통
- 나이, 긴장과 해결은 연구 질문에 따라 마우스의 섹스를 선택 합니다.
참고:이 연구에 대 한 12에 14-주-오래 된 남성 CD-1 마우스 사용 되었다. Intramedullary 나사를 사용 하 여 적절 한 몸 무게는 25-35 g 사이 이다. - 15 mg/kg xylazine 및 75 mg/kg 케 타 민의 복 주사와 마우스 anesthetize 발가락 핀치 여는 anesthetization를 확인 합니다. 마 취 동안 건조에서 동물 들의 눈을 보호 하기 위해 눈 윤 활 유를 적용 합니다. 마 취의 유도, 후 일정 체온을 유지 하는 열 라디에이터에서 마우스를 놓습니다. 절차 동안, 동물 마 취의 적절 한 평면 되도록 반복된 발가락 스푼으로 감시 되었다.
- 하루에 1에서 수술 전에 수술 후 3 일까지 진통에 대 한 tramadol-염 식 수 (1.0 mg/mL)에 적용 됩니다.
참고: 진통 및 감염 예방 해야 국가와 기관 각각 지침과 일치 하 여 실험 수행 되어야 하는.
3. 수술 및 Intramedullary 나사 주입
- 수술 하기 전에 전체 오른쪽 뒷 다리를 면도 하 고 depilatory 크림을 적용 합니다. 5 분 후 크림을 제거 하 고 물으로 다리를 청소 합니다. 그런 다음, 96% 알코올 소독 솔루션 적용. 완전 한 무 균 상태를 보장 하기 위해 알코올에 Betadine 또는 액체를 추가할 수 있습니다.
- 무 균 조건 하에서 작은 동물성 가동 테이블에 부정사 위치에 마우스를 놓습니다. 앞쪽 무릎의 condyles 접근 수 있도록 오른쪽 무릎을 구 부. 메스 블레이드를 사용 하 여 오른쪽 무릎에 5mm 중간 parapatellar 절 개를 수행 합니다.
- 메스 칼 날과 면봉으로 신중 하 게 슬 개 골 인 대를 동원. 그런 다음, 옆으로 대 퇴 골의 intercondylar 노치 노출 미세 집게와 슬 개 골을 이동 합니다.
- 두 condyles 사이의 대 퇴 골의 중간에 정확 하 게 intercondylar 노치를 엽니다. 드릴 구멍 깊이 1.0 m m를 초과 하지 않도록 확인 합니다.
- 느린 속도 ventrally 드릴 비트 및 핸드 드릴 (그림 1 c 와 D, 그림 2)을 중심으로 0.5 m m를 사용 하 여 대 퇴 골 축에 45 ° 오프셋에서 드릴링 수동 시작 합니다. 드릴링, 하는 동안 지속적으로 각도 0 ° 오프셋 (대 퇴 골 뼈 축 병렬)를 감소. 드릴링 1.0 m m의 깊이 도달 하면 중지 합니다.
- Intercondylar 노치에서 뼈를 연 후 대 퇴 골의 전체 길이 걸쳐 사용 intramedullary 구멍에 27g 바늘을 삽입 합니다. 27 G 바늘의 회전 동작을 통해 수동으로 대 퇴 골의 intramedullary 구멍 묶음 큰 trochanter에 외피 뼈 proximally 꿰뚫기 위하여 앞으로 바늘을 밀어.
- 27 G 바늘을 제거 하 고 대 퇴 골의 원심 부분을 통해 가이드 와이어를 적용.
- 피부 절 개를 메스 칼 날 (크기 15) proximally 가이드를 통해 만들고 가이드 와이어의 두 끝 다 밖에 서 때까지 가이드 와이어를 앞으로 밀어. 장소에 가이드 와이어를 계속 해야 합니다.
- 단두대를 사용 하 여 정의 된 폐쇄 골절을 만듭니다.
- 단두대 아래 오른쪽 다리와 가로 위치에 마우스를 놓습니다. 대 퇴 골의 diaphyseal 부분 단두대 중앙 배치는 다는 것을 확인 하십시오.
- 25.5 cm의 정의 된 거리에서 (200 g) 무게를 드롭.
- X 선 장치를 사용 하 여 가이드 와이어 (그림 3)의 위치 뿐만 아니라 골절 구성 및 골절 위치 제어 ( 재료의 표참조).
- 0.2 m m 가이드 와이어 선단부에 코를 가진 intramedullary 나사를 연결 하 고 지속적인 압력, 및 시계 방향으로 회전에서 대 퇴 골에 삽입.
- 드라이브 샤프트 충분 한 토크를 달성 하는 경우의 전단.
- Proximally 가이드 와이어를 제거 합니다.
- 슬 개 골 위치를 변경 하 고 슬 개 골 힘 줄 근육에 5-0 합성, monofilament, nonabsorbable 폴 리 프로필 렌 봉합 사를 사용 하 여 하나의 단일 봉합으로 해결. 같은 재료와 크기의 단일 봉합을 사용 하 여 상처를 닫습니다. 조각과 방사선학 x 선 장치를 사용 하 여 나사 위치의 감소를 제어 ( 재료의 표참조).
- 그들은 마 취에서 회복 될 때까지 열 라디에이터에서 동물을 유지. 두지 마십시오 동물 무인 그들은 복 부 recumbency을 유지 하기 위해 충분 한 의식 회복 할 때까지. 동물 시설에서 단일 케이지를 동물을 반환 합니다. 반환 하지 않습니다 동물 다른 동물의 회사를 첫 24 시간 동안 그들은 완전히 마 취에서 회복 하는 경우에.
- 동물을 신중 하 게 매일 모니터링 합니다. 수술 후 무 통 1.0 mg/mL의 복용량과 식 수에 tramadol-염 산을 사용 하 여 첫 3 일 동안 유지 합니다. 발성, 쉼 없는, 이동성, 신랑에 게 실패, 비정상적인 자세, 그리고 주변에 정상적인 관심의 부족의 부족에 의해 표시 된 경우, 수술 후 4 일에 동물 여전히 통증의 증거를 보여 진통을 계속 합니다. 동물 때 진통 종료 고통-무료.
- 실험의 끝에 바르의 과다에 의해 동물을 안락사.
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Representative Results
피부 절 개 상처 폐쇄 하에서 동작 시간은 20 분 이었다. 스테레오 현미경 없이 수술을 수행할 수 있습니다. Postoperatively, 동물 매일 감시 되었다. 동물의이 기간 후 통증의 증거를 보여주 때문에 수술 후 진통 2 일 후 종료 되었습니다. 동물 수술 후 2 일 이내에 정상적인 체중 부하를 또한 보여주었다. 상처 감염 되지 전체 관찰 기간 동안 관찰 되었다.
방사능 분석 후 2 주 브리징 골절 (그림 4A) 굳은 살 조직의 분명 한 형성 했다. 5 주 후, 골절 치유 되었습니다, 그리고 periosteal 굳은 살은 거의 완전히 리 모델링 (그림 4B).
굳은 살 및 2 주 후 골절 영역의 조직학 분석 했다 endochondral chondrogenic 프로세스 동안 연골 조직으로 치유의 일반 조직 유통 뼈 (그림 5A) 짠 하 고. 5 주 후, 연골 조직, 사라졌다 고 짠된 뼈 해 부 정상을 다시 구성 하기 위해 플레이트 뼈와 뼈 (그림 5B)의 부하를 들고 속성 변환 되었습니다.
2 주 표시 contralateral unfractured 뼈에 비해 37%의 굽 힘 강성 후 biomechanical 분석. 5 주 후, 굽 힘 강성 거의 100% 완전 한 치유 (그림 6)를 나타내는 했다.
그림 1: 임 플 란 트. A. 는 intramedullary 나사 (0.5 m m 직경, 17.2 m m 길이) 스레드 (0.5 m m 직경, 길이 4 m m)와 코 (0.2 m m, 0.4 m m 길이) 근 위는 원뿔 모양의 머리 (직경 0.8 m m, 0.9 m m 길이) 원심. 나 는 가이드 와이어 (0.3/0.2 m m 직경, 10 cm 길이). C.를 중심으로 드릴 비트 (0.5 m m 직경). D. 손 드릴입니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 2: 대 퇴 골 condyles 나타내는 항목의 그리기 회로도 intramedullary 나사에 대 한 포인트. 대 퇴 골 앞쪽 후부에 intercondylar 노치 condyles 보기 (왼쪽)와 화살 보기 (오른쪽). 십자가 (왼쪽) intramedullary 나사에 대 한 진입점, 화살표 (오른쪽) 시추를 시작 하는 대 퇴 골 축에 45 ° 오프셋을 나타냅니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 3: 삽입된 가이드 와이어와 가로 골절 대 퇴 골의 방사선 사진. 방사선 사진 (화살표) 대 퇴 골과 골절 브리지 intramedullary 강 내 가이드 와이어의 diaphyseal 부분에 가로 골절 구성을 보여줍니다. 스케일 바 대표 5 m m. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 4: 뼈 치유의 2, 5 주 후 방사선. A. 분명 한 굳은 살 형성을 보여주는 2 주 후, 나사와 안정 대 퇴 골의 방사선 분석. B. 안정화 하 나사와 5 주 후에 굳은 살의 개보수와 골절의 거의 완전 한 치유를 보여주는 대 퇴 골의 방사선 분석. 스케일 바 대표 5 m m. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 5: 뼈 치유의 2, 5 주 후에 조직학 단면도. A. 안정화 하는 나사와 2 주 후 endochondral 뼈 연골 (c)와 뼈 (b)는 굳은 살 내 조직을 치유 하는 동안 일반적인 조직 분포를 보여주는 대 퇴 골의 조직학 분석. B. 플레이트 뼈를 거의 완전 한 개장을 보여주는 5 주 후, 나사와 안정 대 퇴 골의 조직학 분석. 조직학 단면도 trichrome 방법 얼룩이 있었다. 스케일 바 나타냅니다 1000 µ m. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 6: Biomechanical 분석. 2 주 후 휨 강성의 biomechanical 분석 (흰색 바, n = 9) 5 주 (검은 바, n = 8). 굽 힘 강성 contralateral 비 골절 대 퇴 골에 %에서 주어진 다. 자료는 평균 ± 표준 오차 (SEM), 의미의로 주어진 * p < 2 주 대 0.05. 정규 분포 (Kolmogorov-스미 르노 프-테스트)와 동등한 차이 (F-검정) 가정 증명, 후 두 실험 그룹 사이 비교는 Student´s t-검정을 사용 하 여 수행 되었다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
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Discussion
수술의 중요 한 단계는의 리밍 뼈 축에 평행한 바늘의 최적의 방향으로 intercondylar 노치에 대 퇴 골 condyles 중간 나사 이식에 대 한 올바른 진입점을 찾을 수 있는 intramedullary 캐비티입니다. 잘못 된 항목 위치를 방지 하려면 최적의 보기 달성 될 때까지 외과 의사 노치를 준비 해야 한다. 리밍 동안 방향 제어, 쥐의 대 퇴 골 안정적인 위치에 손가락으로 개최 한다. 더 중요 한 단계는 대 퇴 골에 나사를 삽입 가이드 와이어를 통해 가이드 와이어 결과 골절 탈 구 근 뼈 조각에서 풀 수 있는 때문입니다. 이 경우에, 외과 의사는 뼈 파편을 다시, 스레드 하려고 할 수 있습니다 하지만이 책략은 주로 성공, 그리고 동물이 다음 연구에서 제외할.
또한, 수술은 어떤 합병증을 개발할 수 있습니다. 예를 들어는 condyles 최적의 볼을 옆으로 이동 하는 슬 개 골 인 대 파열 될 수 있습니다. 이 인 대의 나사 삽입 후 봉합 필요 합니다. 뼈는 condyles에서 열고 intramedullary 구멍 리밍, 동안에 condyles 버스트 수 있습니다. 이 경우에, 문제 해결, 나사 선단부에 적절 하 게 고쳐질 수 없습니다 있기 때문에 골절의 압축 달성 하지의 아무 가능성도 있다. 또 다른 합병증은 삽입된 가이드 와이어 또는 뼈에서 잘못 된 위치의 전위. 이 합병증 삽입 수술 시 정확한 위치를 확인 후 주의 처리와 방사선 분석에 의해 줄일 수 있습니다. 또한, 의사 주의 해야 하는 스크류의 돌출 마우스의 이동성을 제한 하거나 골절 압축을 줄일 수 있기 때문에 나사 완전히 삽입. 따라서, x 선 장치는 수술에 대 한 필수입니다. 수술 후에 방사선 확인 후 유일한 동물 연구 프로토콜에 포함 되어야 합니다.
실험의 끝에 intramedullary 나사 제거 또는 나사 제거 될 수 있다 또한 바늘 홀더, 또는 나사 머리를 특별 한 제거 장비에 연결 될 수 있기 때문에 어떤 어려움 없이 수행할 수 있습니다.
기술의 한 가지 한계는 intramedullary 나사 17.2 m m의 정의 된 길이 함께 한 크기에서 서만 회사에 의해 제공 됩니다 따라서 대 퇴 골의 크기는 고려 되어야 한다. Intramedullary 스크류의 사용에 더 한계는 vivo에서 마이크로 계산 된 단층 촬영-(CT) 또는 치유 과정의 자기 공명 영상 (MRI) 분석 임 플 란 트 소재, 이미지에 영향을 미치는 때문에 거의 가능 하지 않습니다. 품질입니다. 따라서, 이러한 분석은 안락사와 연구 기간 끝에 임 플 란 트의 제거 후 수행할 수 있습니다. 마지막으로, 축 안정성은 인접 스레드 및 원심 머리 뼈 파편의 압축을 통해 달성 하기 때문에 뼈 결함 치유, 분석 하는 나사를 사용할 수 없습니다.
뼈 치료 연구 중 오픈8,,910,11,12,13,14 를 사용 하 여 또는4,15, 폐쇄 16,17 뼈 치유 모델. 오픈 뼈 치유 모델 모델, 발음된 굳은 살 형성 없이 치유 하는 intramembranous의 더 높은 금액에 결과 치유 하는 닫힌된 뼈에 비해 파편의 더 엄격한 고정을 수 있습니다. 오픈 모델 약간 굳은 살 형성에 연관 되므로, 생 화 학적 및 분자 분석에 대 한 굳은 살 직물의 큰 금액을 필요로 하는 실험에 이러한 모델을 선호 하지 않을 수 있습니다. 오픈 모델의 더 불리는 주요 연 조직 외상 침략 측면 접근을 위한 필요 이다. 반대로 폐쇄 모델의 사용 단지 작은 덜 침략 적 절 개를 필요합니다. 지금까지 몇 가지 닫힌된 모델 쥐2에 존재 한다.
닫힌된 뼈 치유 모델, 대부분 간단한 intramedullary 핀을 사용 합니다. 그러나,이 기술은 명백한 단점이 있습니다. 특히, 축 및 회전 안정성의 부족. 이것은 이질적인 치료 응답5발생할 수 있습니다. 비록이 불리는 실험 결과18영향, 뼈 치유의 메커니즘을 분석 하는 것을 예정, 최근 연구 여전히 골절 핀 만으로 안정 또는 unstabilized7 남아도 murine 모델 사용 . 우리는 안정적인 osteosynthesis 기법, 임상 연습에 사용 되는 비교는 또한 쥐에 사용 해야 합니다 느낀다. 축 및 회전 안정성을 달성 하기 위해 intramedullary 나사는 원심 머리와 인접 스레드는 유도 골절 압축이 되어 개발 되었다. 관심, intramedullary 스크류의 응용 프로그램을 생성 하지 않으며 엄밀한 고정, 따라서, intramedullary 스크류 안정 골절된 femora의 비틀림 강성은 골절된 femora의 그것에 비해 훨씬 낮은 외부 fixator 또는 잠금 플레이트5안정. 그러나, 보다 적게 엄밀한 고정은 endochondral 뼈 치유, 공부만 덜 엄격한 고정 수 endochondral 치유 과정을 자극 하는 뼈 파편의 micromovements 때문에 필요 합니다. 그럼에도 불구 하 고, ex vivo 연구 이전에 같이 intramedullary 나사 별개 축 및 회전 안정성을 생성 합니다. Biomechanical 분석 공개 intramedullary 나사 0.34 ± 0.18의 비틀림 강성을 달성 Nmm/°에 비해 크게 높은 기존의 핀 달성 (0.00 ± 0.00 Nmm / °)5. 따라서, 여기에서 소개 하는 intramedullary 나사 쥐에서 연구 endochondral 골절 치유에 대 한 표준화 된 biomechanical 조건을 제공 하 고 최소한 침략 적 기술에 사용할 수 있는 유일한 이식 이다.
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Disclosures
저자 들은 아무 경쟁 금융 관심사 선언 합니다.
Acknowledgments
이 작품은 RISystem AG, 다보스, 스위스에 의해 지원 되었다.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Mouse Screw | RISystem AG | 221,100 | |
| Guide wire | RISystem AG | 521,100 | |
| Centering bit | RISystem AG | 590,205 | |
| Hand drill | RISystem AG | 390,130 | |
| Cotton-Swab (150 mm, small head) | Fink Walter GmbH | 8822428 | |
| Suture (5-0 Prolene) | Ethicon | 8614H | |
| Forceps | Braun Aesculap AG &CoKG | BD520R | |
| Scissors | Braun Aesculap AG &CoKG | BC100R | |
| Needle holder | Braun Aesculap AG &CoKG | BM024R | |
| 27 G needle | Braun Melsungen AG | 9186182 | |
| Scalpel blade size 15 | Braun Aesculap AG &CoKG | 16600525 | |
| Heat radiator | Sanitas | 605.25 | |
| Depilatory cream | Asid bonz GmbH | NDXZ10 | |
| Eye lubricant | Bayer Vital GmbH | 2182442 | |
| Xylazine | Bayer Vital GmbH | 1320422 | |
| Ketamine | Serumwerke Bernburg | 7005294 | |
| Tramadol | Grünenthal GmbH | 2256241 | |
| Disinfection solution (SoftaseptN) | Braun Melsungen AG | 8505018 | |
| CD-1 mice | Charles River | 22 | |
| X-ray Device | Faxitron MX-20, Faxitron X-ray Corporation | 2321A0988 | |
| Fracture device small | RISystem AG | 891,100 |
References
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