עבור חלק מהחולים, האפשרות היחידה לשימור פוריות היא הקפאה קריוגנית רקמת השחלה. למרבה הצער, שאיחרו revascularization מערערת הכדאיות הזקיקים. כאן, אנו מציגים פרוטוקול שיתוף להשתיל רקמה אנושית השחלות עם תאי אנדותל עבור זלוף ניצול כאסטרטגיה מבוססת תא שילוב מואצת עם משלוח ישיר paracrine של מולקולות ביו…
פוריות היא תופעת לוואי תכופים של כימותרפיה ו/או הקרנות, עבור חלק מהחולים, הקפאה קריוגנית של oocytes או עוברי הוא לא אופציה. כחלופה, מספר גדל והולך של חולים אלו בוחרים cryopreserve רקמות השחלה עבור בשתל בעקבות התאוששות, הפוגה. למרות שיפורים בתוצאות בקרב חולים שעברו אוטומטי-השתלת רקמת השחלה cryopreserved, revascularization יעיל של רקמות המושתל נשאר ולקידמה. כדי להמתיק איסכמיה ובכך לשפר את התוצאות בחולים העוברים השתלת אוטומטי, פיתחנו כלי הדם מבוססת תא אסטרטגיה האצת זלוף רקמת השחלה. נתאר שיטת שיתוף השתלת תאי אנדותל אקסוגני (המנהלים) עם cryopreserved רקמות השחלה במודל xenograft של עכברים. אנחנו מרחיבים גישה זו להעסיק. את המנהלים כי יש מהונדס לבטא צורונים הורמון אנטי-mullerian מעורבת (AMH), ובכך מאפשר paracrine מתמשכת איתות של הקלט שתלי השחלות. השתלת שיתוף עם המנהלים גדל נפח הזקיקים ופיתוח זקיק antral משופר, המנהלים לבטא AMH קידום השמירה של זקיקי הקדמוני השבתה הדרגתית. אסטרטגיה משולבת זו עשויה להיות כלי שימושי מקלים איסכמיה להתכוונן הפעלה הזקיקים בהקשר של שימור פוריות ו/או עקרות בכללותו.
הסרטן נשאר בין הגורמים המובילים. למוות בעולם המפותח, עדיין עשורים של מחקר הניבו התקדמות משמעותית במרבית הסוגים של סרטן, ובעוד כמה שיעורי הישרדות כמעט כפולים מקרים1. למרבה הצער, סוכנים כימותרפיות הם לעתים קרובות gonadotoxic, depleting השמורה של זקיקים הקדמוני של השחלות והפחתת פוריות2. זו אוכלוסיה גדלה יכולים להפיק תועלת שיטות שונות של שימור פוריות כולל הקפאה קריוגנית oocyte ו/או העובר, עם זאת, חולים הנזקקים בקש חניכה של טיפול בסרטן ומטופלים מראש המתבגר הם מושעים. אפשרויות אלה. לחלופין, בחרו חלק מהחולים cryopreserve רקמות השחלה לפני התחייבות משטר טיפולי שלהם, וגם על שחזור, רמיסיה, אוטומטי משתילים רקמה לשחזור פוריות3. ובכל זאת, עד כה, הישרדות השתל פלט הזקיקים בעקבות אוטומטי-השתלת עדיין נמוך יחסית4, בעיקר בשל רקמת איסכמיה, היפוקסיה5,6,7. למרות המאמצים הרבים כדי לשפר את הכדאיות של שתלי קורטיקלית השחלות באמצעות8,נוגדי חמצון9, pro-אנגיוגנזה ציטוקינים10,11,12,1 איסכמיה שתל 3או מניפולציות מכני14, ב- 5 עד 7 יום חלון שלאחר ההשתלה מערער את יכולת הקיום וההישרדות של שתל7. כדי לטפל בבעיה זו, פיתחנו אסטרטגיה המבוססת על התא כדי להקל על השקה של המארח וספינות השתל ובכך לזרז פגיעה reperfusion רקמת השחלה.
בנוסף העלבון איסכמי המושתל רקמת השחלה בחלון שלאחר ההשתלה, שיבוש איתות בין הזקיקים עשוי לתרום דלדול של מאגר ה-15,16. כי תאי אנדותל אקסוגני (המנהלים) לתרום כלי יציב ופועל בפריפריה של השתל, הם מציגים הזדמנות ייחודית להעביר קלט מולקולרית מוגדר לרקמות המושתלים. מהווה הוכחה של עיקרון, המנהלים היו מתוכנן אקספרס סופר-פיזיולוגיים רמות של הורמון אנטי-mullerian מעורבת (AMH), חבר הפיכת superfamily בטא (TGFβ) גורם גידול זה הוכח להגבלת פוליקולרי17. השוואה של הזקיקים הזרעון השתלים מושתלים במשותף עם שליטה והתאים לבטא AMH מאמת את פעילות ביולוגית ואת העוצמה של המנהלים מהונדסים.
לסיכום, על ידי שיפור שתל הכדאיות ודיכוי גיוס מוקדמת של מאגר הזקיקים, גישה זו יכול להגדיל את הפרודוקטיביות של מושתלים אוטומטי רקמת השחלה בחולים שעברו שימור פוריות. יתר על כן, הפלטפורמה מבוססת ExEC מאפשרת חקירה ניסויית של ווסתי מולקולרית כי היו מעורבים בהתפתחות הזקיקים.
כאן אנחנו מוכיחים את השתלת שיתוף של המנהלים מספק יתרון משמעותי רקמות השחלה הכדאיות ותפקוד בעקבות xenograft בעכברים. תקנים עבור יישומים קליניים של רקמות השחלה אוטומטית-השתלת לשימור פוריות לא היה סט של פרמטרים אופטימליים (גודל, השתלת באתר, משך הזמן של השתל, וכו ‘.) 32 , <sup class…
The authors have nothing to disclose.
עומר אדם אלכסנדר על האיורים.
ל. מ נתמכה על ידי פרס טייס מן במישור הקליני של קורנל, מרכז מדעים Translational ו- ASRM של מלגת מחקר.
המחברים רוצה להודות ג’יימס חברי המעבדה לקריאה ביקורתית של כתב היד.
Leibovitz’s L-15 medium | Gibco | 11415064 | |
Antibiotic-Antimycotic | Gibco | 15240062 | Anti-Anti X100 |
Sucrose | Sigma | S 1888 | |
Fibrinogen | Sigma | F 8630 | from bovine plasma |
Thrombin | Sigma | T 1063 | from human plasma |
DMSO | Sigma | D 2650 | |
DMEM | Gibco | 12491015 | |
Enzyme Cell Detachment Medium | Invitrogen | 00-4555-56 | Accutase |
Plastic paraffin film | Bemis NA | Parafilm M | |
Surgical paper tape 2.5 cm | 3M | 1530-1 | Micropore |
Surgical Paper tape 1.25 cm | 3M | 1530-0 | Micropore |
Perforated plastic Surgical tape 1.25 cm | 3M | 1527-0 | Transpore |
Monofilament Absorbable Suture | Covidien | UM-203 | Biosyn |
Braided Absorbable Suture | Covidien | GL-889 | Polysorb |
Povidone-iodine Solution USP 10% | Purdue Products | 67618-153-01 | Betadine Solution Swab Stick |
Cryoviales | Nunc | 377267 | CryoTube |
sterile ocular lubricant | Dechra | 17033-211-38 | Puralube |
1.7 ml micro-centrifuge tube | Denville | C-2172 | Eppendorf |
Anasthesia system | VetEquip | V-1 table top system with scavenging | |
Endothelial cells | Angiocrine Biosciences, Inc., San Diego, CA, USA | Isolated, transfected with E4-ORF- 1 and labeled endothelial cells | |
Trichrome stain | Sigma | HT15-1kt | Trichrome Stain (Masson) Kit |
Isolectin | Invitrogen | I32450 | isolectin GS-IB4 From Griffonia simplicifolia, Alexa Fluor™ 647 Conjugate |