Здесь мы представляем протокол получить большое поле зрения (FOV) трехмерной (3D) флуоресценции и OCT сетчатки изображения с помощью Роман изображений Мультимодальная платформа. Мы будем вводить настройки системы, метод выравнивания и оперативные протоколы. В естественных условиях изображений будет продемонстрирована, и представитель результаты будут предоставлены.
Хотя флуоресценции изображений широко используется в офтальмологии, большое поле зрения (FOV) трехмерной (3D) флуоресценции сетчатки изображение по-прежнему является большой проблемой с сетчатки искусства, визуализации формы потому, что они будут требовать, z укладка для Скомпилируйте объемный набор данных. Новая оптическая когерентная томография (Окт) и систем ангиография (OCTA) октября преодолеть эти ограничения представить трехмерные (3D) анатомические и сосудистой изображения, но краска бесплатный характер OCT не может визуализировать утечки свидетельствует о сосудистых дисфункция. Этот протокол описывает Роман косой, сканирование лазерная техника офтальмоскопия (Осло), которая обеспечивает 3D объемного флуоресценции сетчатки изображений. Настройка системы визуализации генерирует косой, сканирование слайдер хвост голубь и выравнивает окончательной визуализации системы под углом для обнаружения флуоресцентные поперечные изображения. Система использует лазерный метод сканирования и таким образом, позволяет легко включение октября как взаимодополняющие объемные структурных изображений модальности. В естественных условиях изображения на сетчатке крыс показано здесь. Флуоресцеин раствора внутривенно вводят производить объемные fluorescein ангиография (vFA).
Офтальмология и видение науки значительно выиграть от современные оптические методы визуализации, так как могут быть легко доступны сетчатки с светом. Флуоресценции сетчатки изображений является важным инструментом в области диагностики и управления хориоретинальной сосудистых заболеваний, таких как диабетическая ретинопатия (DR) и возрастной макулярной дегенерации (AMD), оба из которых являются ведущие причины слепоты в Соединенных Штатах.
Однако это все еще сложно приобрести большое поле зрения (FOV), трехмерные (3D) сетчатки изображений с помощью флуоресценции изображений. Фундус фотография не имеют возможности урегулирования глубины и не отвергают диффузный свет. В результате микширование сигналов от разных глубины снижает качество изображения. Сканирующий лазер офтальмоскопия (SLO) и конфокальный SLO (cSLO) может уменьшить эффект рассеянного света с помощью конфокальной шлюзовой1. Однако это трудно для SLO или cSLO, чтобы получить 3D изображения человека сетчатки вследствие ограничения их глубины фокуса. Адаптивная оптика SLO (AOSLO) может обеспечить превосходное разрешение и контрастность путем исправления аберраций волнового фронта, представленный человеческий глаз. Однако AOSLO по-прежнему потребуется z укладка для объемного изображения2. Оптическая когерентная томография (Окт)3 октября ангиография (OCTA) систем и преодолеть эти ограничения представить трехмерные (3D) изображения анатомических и сосудистой4,5,6, но краска бесплатный характер октября не может визуализировать утечки ориентировочные сосудистые дисфункции.
Этот протокол описывает Роман Мультимодальная платформа для 3D объемного флуоресценции сетчатки воображения, а именно наклонный сканирование лазерная офтальмоскопия (Осло). В этой системе визуализации наклонный сканирование генерируется ползунок хвост голубь, и окончательной визуализации системы выравнивается в угол обнаружения флуоресценции кросс-секционные изображений. Эта система использует лазерные методы проверки, и эти методы позволяют легко включения с октября как взаимодополняющие объемные структурных изображений модальности. Текущее разрешение глубина около 25 мкм в сетчатке крыса и поле зрения составляет 30°. По существу, Осло позволяет флуоресцентные версии OCT и одновременно может сочетаться с октября и оста над большой ПЗ.
В этом протоколе мы будем описывать установку Осло, метод выравнивания и строительства, метод в vivo томография сетчатки крыс и представитель результаты.
Здесь мы описали Осло, в естественных условиях объемного флуоресцентные сетчатки изображений технику с ПЗ свыше 30 °. По сравнению с октября, текущий стандарт медицинской помощи визуализации метод в офтальмологии, Осло предлагает аналогичные 3D визуализации возможность еще позвол?…
The authors have nothing to disclose.
Финансирование осуществляется из Эванс медицинский фонд финансирования от Бостонского медицинского центра, а также договор субподряда от НИЗ 5R01CA183101, Бу-CTSI пилот Грант 1UL1TR001430, Бу-Джослин пилотной программы и Бу-CTSI KL2TR001411.
Supercontinuum Laser Source | NKT Photonics | SuperK EXTREME EXU-OCT6 | |
Dichroic Mirror (DM1) | Thorlabs | DMLP650R | |
Dichroic Mirror (DM2) | Chroma | ZT514/1064rpc | |
Dichroic Mirror (DM3) | Thorlabs | DMLP900R | |
Single Mode Fiber (SMF 1) | Thorlabs | P3-460B-FC-2 | |
Single Mode Fiber (SMF 2) | Thorlabs | P3-780A-FC-2 | |
Optic Fiber Coupler | Thorlabs | TW850R5A2 | |
1:1 Telescope System | Thorlabs | AC254-100-A×2 | |
3:1 Telescope System | Thorlabs | AC254-150-A×2 | |
3:1 Telescope System | Thorlabs | AC254-50-A×2 | |
1:1 Telescope System | Thorlabs | AC254-100-A×2 | |
Galvo Mirrors (GM1,GM2) | Thorlabs | GVS201×2 | |
De-sacn Galvo Mirrors (GM3) | Thorlabs | GVS011 | |
Objective Lens | Olympus | UplanSApo 20×/0.75 | |
Final imaging system | Olympus | UplanFL N 10×/0.3 | |
Final imaging system | Computar | 12-36mm/1:2.8 | |
Camera | PCO | Pco.pixelfly usb | |
Filter | Thorlabs | FEL0800 | |
Mounted Continuously Variable ND Filter | Thorlabs | NDC-50C-4M-A | |
Line Scan Camera | Thorlabs | SPL2048-140K | |
Analog Output Board (AO1) | National Instrument | PCI-6731 | |
Analog Output Board (AO2) | National Instrument | PCIe-6351 | |
Long pass filter | Thorlabs | FEL0800 |