Summary
हम MPTP का उपयोग कर पार्किंसंस रोग के लिए एक murine मॉडल की स्थापना का वर्णन है, और मोटर समारोह को मापने के लिए सिलेंडर और खुले मैदान परीक्षणों का उपयोग व्यवहार आकलन. हम तो एक उदाहरण के रूप में एल डोपा का उपयोग करने के लिए कैसे पीडी दवाओं के अध्ययन में इस मॉडल को लागू करने के लिए दिखा ।
Abstract
पार्किंसंस रोग (पीडी) एक आम neurodegenerative विकार रोग, मिलाते हुए, कठोरता, आंदोलन और मनोभ्रंश की मंदी की घटना के कारण है । 1-मिथाइल-4-फिनाइल-1, 2, 3, 6-tetrahydropyridine (MPTP) मस्तिष्क के substantia नाइग्रा में dopaminergic न्यूरॉन्स को नष्ट करके कुछ पार्किंसंस जैसे लक्षण पैदा कर सकते हैं । यह इस प्रकार विभिंन पशु अध्ययन में पीडी मॉडल स्थापित किया गया है । यहां, चूहों MPTP इंजेक्शन प्राप्त (20 मिलीग्राम/दिन) सात दिन के लिए और व्यवहार परीक्षण आठवें दिन पर प्रदर्शन कर रहे हैं । यह मॉडल पीडी के अध्ययन में कुशलता से अनुकूलित है. यहां व्यवहारिक टेस्ट में सिलिंडर टेस्ट और ओपन फील्ड टेस्ट शामिल हैं । सिलेंडर प्रयोग जब एक अलग वातावरण में डाल उनके सामने पंजे लिफ्ट करने के लिए जानवरों की क्षमता का पता लगाने के लिए प्रयोग किया जाता है । के रूप में पीडी मॉडल चूहों मेहराब दिखाने-माउस अपनी पीठ मेहराब-पंजा लिफ्टिंग की संख्या में कमी । इस टेस्ट को अंजाम देना आसान है । खुले मैदान परीक्षण समय चूहों चल रहा है, घूमना, और शेष मोबाइल पर खर्च की मात्रा का पता लगाने के लिए प्रयोग किया जाता है । हम खुले क्षेत्र में जानवरों के आंदोलनों का विश्लेषण सॉफ्टवेयर का उपयोग और डेटा प्राप्त करते हैं । अंत में, हम एल डोपा, सबसे अधिक इस्तेमाल किया पीडी दवाओं में से एक का उपयोग, एक उदाहरण के रूप में दिखाने के लिए कैसे पीडी दवाओं के अध्ययन के लिए इस मॉडल को लागू करने के लिए. हमारे परिणाम संकेत मिलता है कि MPTP neurotoxicity मोटर घाटे जो एल-डोपा द्वारा शमन किया जा सकता है लाती है ।
Introduction
पार्किंसंस रोग (पीडी), पुराने व्यक्तियों के बीच सबसे आम बीमारियों में से एक, एक दीर्घकालिक neurodegenerative विकार1है। रोगियों को हमेशा मिलाते हुए, कठोरता, आंदोलन और पागलपन की मंदी है कि समय2के साथ खराब की घटना दिखाओ । संवेदी, नींद, और भावनात्मक समस्याओं सहित अंय लक्षण भी सामांयतः2मनाया जाता है । पीडी के कारण अभी भी स्पष्ट नहीं है, लेकिन यह आम तौर पर दोनों आनुवंशिक और पर्यावरणीय कारकों को शामिल करने के लिए माना जाता है, जो substantia नाइग्रा3में dopaminergic न्यूरॉन्स के नुकसान को प्रेरित, और के विभिन्न क्षेत्रों में Lewy निकायों और Lewy neurites के विकास ब्रेन4.
पीडी की पढ़ाई के अलावा, 1-मिथाइल-4-फिनाइल-1, 2, 3, 6-tetrahydropyridine (MPTP)5 प्रयोगात्मक मॉडल में कुछ पीडी लक्षण पुनः बनाने में व्यापक रूप से अनुकूलित है. १९८४ में, Langston एट अल. पहले पाया कि गिलहरी बंदरों में MPTP के इंजेक्शन6पार्किंसंस के परिणामस्वरूप । हालांकि MPTP कुतर मॉडल Lewy निकायों की उपस्थिति नहीं दिखाती है, जो पीडी का जो मार्कर है, MPTP मस्तिष्क7के substantia नाइग्रा में dopaminergic न्यूरॉन्स को नष्ट करके पार्किंसंस जैसे लक्षण का कारण बनता है । 6-hydroxydopamine (6-OHDA)8 और 1-मिथाइल-4-phenylpyridinium (करेंटली +)9, MPTP के इंजेक्शन से प्रेरित के रूप में पीडी के लिए अन्य दवा मॉडल की तुलना में निष्पादित करने के लिए आसान है और MPTP मॉडल कम समय लगता है. चूहों MPTP इंजेक्शन प्राप्त (20-30 मिलीग्राम/दिन) सात दिनों के लिए, और व्यवहार परीक्षण आठवें दिन10पर प्रदर्शन कर रहे हैं.
ओपन फील्ड टेस्ट11 सबसे पहले केल्विन एस हॉल, एक अमेरिकी12द्वारा विकसित किया गया था । विभिंन अध्ययनों में, विभिंन प्रकार के व्यवहार का परीक्षण किया जाता है । अनुसंधान में जो पार्किंसंस रोगों पर केंद्रित है, गतिवान गतिविधियों और गतिवान की गति जैसे व्यवहार को देखने के लिए परीक्षण कर रहे है यदि पशु के आसपास स्थानांतरित करने की क्षमता प्रभावित है । पीडी जानवरों की स्थापना का परीक्षण करने के लिए इस्तेमाल किया अन्य तरीकों के साथ तुलना में, खुले मैदान परीक्षण आसान है, क्योंकि उपकरण की जरूरत सरल है, और प्रोटोटाइप और डेटा विश्लेषण सॉफ्टवेयर (जैसे, MATLAB, एक्सेल) आसानी से इकट्ठा करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है और ग्राफ डेटा. इसके अलावा, भिंनता के गुणांक अपेक्षाकृत छोटे13है, जिसका अर्थ है कि खुला क्षेत्र परीक्षण का परिणाम विश्वसनीय है । अंय तरीकों पर एक और लाभ यह है कि इस प्रयोग में शामिल व्यवहार को अलग करना आसान है; चूहों या तो चल रहा है, घूमना या फिर भी खड़े हो सकते हैं । आमतौर पर ओपन फील्ड टेस्ट को कुतर पर इस्तेमाल किया जा सकता है जब शोधकर्ता को विषय की गतिशीलता का मूल्यांकन करने की जरूरत होती है ।
सिलेंडर परीक्षण भी forelimbs के असममित उपयोग का परीक्षण कहा जाता है । जब यह परीक्षण पहले बनाया गया था, यह है चूहे forelimbs14के असममित उपयोग परीक्षण किया गया । यहाँ, हम इस परीक्षण का उपयोग करने के लिए जानवरों की क्षमता का विश्लेषण करने के लिए बाहर खिंचाव और अपने forelimbs के दोनों का उपयोग करने के लिए नए परिवेश का पता लगाने. जब substantia नाइग्रा और कॉर्पस striatum मस्तिष्क में MPTP से क्षतिग्रस्त हो जाते हैं, तो जानवर अपनी पीठ को मेहराब में लगा देता है और अनजान वातावरण का पता लगाने और उसे एक्सप्लोर करने की संभावना कम हो जाती है । इस परीक्षण को अंजाम देना आसान है और एक प्रारंभिक परिणाम दे सकता है. हालांकि, इस परीक्षण उच्च आंतरिक परिवर्तनशीलता है, इसलिए यह आम तौर पर अन्य व्यवहार प्रयोगों के साथ साथ प्रयोग किया जाता है.
एल डोपा, जो भी लीवोडोपा या एल-3, 4-dihydroxyphenylalanine के रूप में जाना जाता है ले रही है, एक आम तरीका है पार्किंसंस रोग के इलाज के बाद से पीडी के एक कारण में डोपामाइन की कमी है । L-डोपा डोपामाइन के अग्रदूत है । लेकिन डोपामाइन के विपरीत, यह रक्त मस्तिष्क बाधा, जिसका अर्थ है कि यह मस्तिष्क क्षेत्र में डोपामाइन की एकाग्रता बढ़ाने में अधिक कुशल हो जाएगा पार कर सकते हैं । के बाद यह रक्त मस्तिष्क बाधा पार, एल-डोपा डोपामाइन में परिवर्तित कर दिया है l-एमिनो एसिड decarboxylase15.
यहाँ हम माप और एक सिलेंडर परीक्षण14 और एक संशोधित खुला क्षेत्र परीक्षण का उपयोग MPTP-प्रेरित-पीडी मॉडल चूहों में मोटर समारोह के विश्लेषण का वर्णन. हम एक उदाहरण के रूप में एल डोपा प्रशासन कैसे पीडी दवाओं के अध्ययन में इस मॉडल को लागू करने के लिए दिखाने के लिए । हमारे परिणाम संकेत मिलता है कि MPTP मोटर घाटे कि एल-डोपा द्वारा कम किया जा सकता है लाती है ।
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Protocol
यह अध्ययन पशु प्रयोगों पर विचार करने वाले अंतरराष्ट्रीय, राष्ट्रीय और संस्थागत नियमों के अनुसार किया गया. अध्ययन प्रोटोकॉल ननकाि विश्वविद्यालय की पशु नैतिकता समिति द्वारा अनुमोदित किया गया था ।
1. MPTP और एल-डोपा प्रशासन
नोट: दस सप्ताहीय मादा बालब/सी चूहों को इंस्टीट्यूट ऑफ जूलॉजी, चाइनीज एकेडमी ऑफ साइंसेज द्वारा प्रदान किया गया । चूहों एक 12 घंटे के प्रकाश के तहत पिंजरे के प्रति छह घर में थे/डार्क साइकिल (पर 08:00-20:00 पर रोशनी), 21-22 डिग्री सेल्सियस के एक निरंतर तापमान और ५५% ± 5% के सापेक्ष आर्द्रता । Autoclaved मानक चूहे वही तैयार की चाउ और पानी विज्ञापन libitum सभी जानवरों को दिया गया था ।
- acclimatization के एक सप्ताह के बाद, छह चूहों प्रत्येक के तीन समूहों में जानवरों को विभाजित ।
- 1 समूह के लिए, प्रशासन intraperitoneal इंजेक्शन (चरण १.५ देखें) के २५० µ l/माउस/दिन से खारा की दिवस 1 से दिन 7 और फिर प्रदर्शन intragastric प्रशासन (चरण १.६ देखें) के २५० µ एल/
- 2 समूहके लिए, 20 मिलीग्राम/kg/दिन के MPTP के intraperitoneal इंजेक्शन प्रतिदिन 1 दिन से 7 दिन तक और फिर 8 दिन पर २५० µ l/खारा के माउस के intragastric प्रशासन प्रदर्शन ।
- समूह 3के लिए, 20 मिलीग्राम/kg/दिन के MPTP के intraperitoneal इंजेक्शन 1 दिन से 7 दिन तक और फिर 8 दिन पर L-डोपा के 5 मिलीग्राम/
- intraperitoneal इंजेक्शन के रूप में इस प्रकार करते हैं ।
- एक बाँझ 1 मिलीलीटर एक 26 जी सुई के साथ सिरिंज में दवा लोड । सिरिंज से हवा को खत्म.
- इसके पेट का सामना करने के साथ माउस Scruff । सिर, गर्दन और एक सीधी रेखा में माउस के शरीर के रूप में अच्छी तरह से सिर के साथ ठीक रखें ।
- कोण सुई योनि घुसना करने के लिए । एक उचित दूरी के लिए सुई धक्का जब तक वहां थोड़ा प्रतिरोध है, और फिर दवा सुई । सुई को सुचारू रूप से बाहर खींचो ।
- intragastric प्रशासन निम्नानुसार कार्य करें ।
- एक बाँझ 1 मिलीलीटर एक मौखिक gavage सुई के साथ सिरिंज में दवा तैयार करते हैं । सिरिंज से हवा को खत्म.
- अपने पेट का सामना करना पड़ के साथ माउस पकड़ो । सिर, गर्दन और सिर के साथ एक सीधी रेखा में माउस के शरीर को स्थिर रखें ।
- सुई माउस के शरीर के समानांतर रखें, और यह माउस के मुंह के कोने से डालें, जीभ दबाने और ऊपरी जबड़े के खिलाफ आवक धक्का ।
- थोड़ा प्रतिरोध है, जो सुई से पता चलता है घेघा में प्रवेश कर रहा है सुचारू रूप से, ध्यान से एक उचित दूरी में सुई धक्का । इससे पहले कि सुई की नोक छाती के नीचे भाग तक पहुँच जाता है, दवा इंजेक्षन.
- सुई को सुचारू रूप से बाहर खींचो ।
2. सिलेंडर टेस्ट
नोट: व्यवहार परीक्षण 8 दिवस पर प्रदर्शन किया गया । एल डोपा व्यवहार परीक्षण से पहले ४० मिनट चूहों के तीसरे समूह के लिए इंजेक्शन था । यदि व्यवहार परीक्षण एक ही कमरे में जहां जानवरों के घर में नहीं किया जाता है, पशुओं के लिए परीक्षण से पहले 30-60 मिनट के लिए नए कमरे में आदत की जरूरत है ।
- MPTP की अंतिम खुराक के बाद परीक्षण 24 एच प्रदर्शन करते हैं ।
- एक मेज के केंद्र में एक पारदर्शी ग्लास सिलेंडर (ऊंचाई = १९.५ cm, व्यास = 15 सेमी, वजन ≥ 1 किग्रा) रखें । काले गत्ते के साथ तीन पक्षों पर सिलेंडर चारों ओर पर्यावरण प्रकाश के प्रभाव को कम करने के लिए । वीडियो रिकॉर्डिंग के लिए कैमरे का सामना कर रहे सिलेंडर के एक तरफ छोड़ दें ।
नोट: कार्डबोर्ड और सिलिंडर के बीच की दूरी लगभग 4 से 8 सेमी होनी चाहिए । - एक कैमरा संलग्न करें (> १,०००,०००-पिक्सेल संकल्प) पर ~ 40-60 सेमी दूर सिलेंडर से सुनिश्चित करने के लिए कि पूरा सिलेंडर दिख रहा है ।
नोट: यह न तो भी पास है और न ही बहुत दूर है, जबकि अपने आंदोलन के वीडियो रिकॉर्डिंग माउस को परेशान नहीं करने के लिए । - एक समय में सिलेंडर में एक चूहा प्लेस और एक बार में फिल्माने शुरू करते हैं । 3 मिनट के बाद फिल्माने बंद करो ।
नोट: इस प्रक्रिया के दौरान, माउस के व्यवहार को प्रभावित करने से बचने के क्रम में शोर या प्रकाश परिवर्तन से बचने के लिए प्रयास करें । - परीक्षण के बाद माउस को घर के पिंजरे में वापस रखें ।
- साफ पानी के साथ सिलेंडर और फिर भीतरी दीवार पर ७०% v/v इथेनॉल स्प्रे इसे साफ और माउस scents हटा दें । एक और माउस में रखा गया है इससे पहले कि सिलेंडर सूखी पोंछ ।
- वापस 0.5 x नियमित रूप से गति की दर से वीडियो चलाएं और प्रत्येक माउस की दीवार के खिलाफ पंजा लिफ्टों की संख्या गिनती ।
नोट: पंजा लिफ्टों हो जब माउस इसके hindlimbs पर पीछे, कंधे के स्तर और भूमि के ऊपर दोनों forelimbs उठाती है । एक forelimb लिफ्ट गिना नहीं है । आमतौर पर, एक माउस सिलेंडर दीवारों को छूने के लिए अपनी forelimbs उठाता है । यदि माउस कई बार लगातार बिना लैंडिंग के कंधे के स्तर से ऊपर अपनी forelimbs उठाता है, यह केवल एक बार के रूप में गिना जाना चाहिए ।
3. ओपन फील्ड टेस्ट
- MPTP खुराक के बाद ओपन फील्ड टेस्ट 24 एच प्रदर्शन ।
नोट: यह सिलेंडर परीक्षण के एक ही समय में किया जा सकता है । - एक पारदर्शी खुला क्षेत्र प्रतिक्रिया बॉक्स तैयार करें (४५ cm L x ४५ cm W x 25 cm H) एक काले कपड़े से नीचे एक लकड़ी की प्लेट के कवर के साथ । 1 m की ऊंचाई पर एक कैमरा (> १,०००,०००-पिक्सेल रिज़ॉल्यूशन) फ़ील्ड पर ठीक करें ।
नोट: वीडियो में रंग कंट्रास्ट सुनिश्चित करने के लिए खुला फ़ील्ड बॉक्स नीचे का रंग परीक्षण किए गए माउस रंग से भिंन होना चाहिए । - यह सुनिश्चित करने के लिए कैमरा समायोजित करें कि वीडियो के केंद्र में खुला फ़ील्ड रिएक्शन बॉक्स सही है.
- बॉक्स में एक परीक्षण माउस रखो, और माउस के बारे में 1 मिनट के लिए पर्यावरण के साथ ही परिचित करते हैं ।
- कंप्यूटर से जुड़े कैमरे का उपयोग करके एक 5 मिनट का वीडियो रिकॉर्ड करें ।
- सॉफ्टवेयर उपकरण का उपयोग कर वीडियो का विश्लेषण (जैसे, MATLAB) आंदोलन का पता लगाने के लिए आंकड़ा प्राप्त करने के लिए, स्थैतिक (वेग < 1 cm/s), घूमना (वेग 1-20 cm/s) और रनिंग (वेग > 20 सेमी/ प्रत्येक परीक्षण माउस की गति ।
नोट: वीडियो का विश्लेषण करते समय, हम माउस के पूरे शरीर को ट्रैक । एक शरीर की औसत गति का मतलब है, गुजरे समय से विभाजित पथ की कुल लंबाई । इसलिए, यदि कोई माउस नहीं चलती है, तो उसके तात्कालिक वेग को शून्य माना जाएगा. - खुले क्षेत्र प्रतिक्रिया बॉक्स में किसी भी मल को साफ करें । बॉक्स पर ७०% इथेनॉल स्प्रे और इसे पोंछ ।
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Representative Results
सिलेंडर परीक्षण में, दीवार के खिलाफ पीछे की कमी चूहों में मनाया गया (समूह 2) 1 दिन से MPTP के साथ इलाज किया 7 दिन और खारा के साथ 8 दिन पर नमक का इलाज चूहों (समूह 1) के साथ तुलना में, जबकि रियर की वृद्धि चूहों में मनाया गया था (समूह 3) सांसद के साथ इलाज TP दिन 1 से 7 दिन और एल-डोपा दिन 8 पर के रूप में चूहों (समूह 2) 1 दिन से MPTP के साथ इलाज के लिए 7 दिन और खारा पर दिन 8 (चित्रा 1) के साथ तुलना में ।
चित्रा 2 प्रतिनिधि निशान और स्थिर समय के वितरण से पता चलता है, समय चलने और चूहों के तीन समूहों के समय चल रहा है । (क) चूहों में खारा के साथ इलाज किया गया । में (ख) चूहों दिन 1 से MPTP के साथ इलाज 7 दिन और खारा 8 दिन में । (ग) चूहों में 1 दिन से MPTP के साथ 7 दिन और एल डोपा दिन 8 पर इलाज किया । जब एक माउस की गति के साथ खुले मैदान क्षेत्र में बढ़ रहा था < 1 cm/s, 1-20 cm/s, या > 20 cm/, यह स्थिर के रूप में ंयाय किया गया था, चलने या क्रमशः चल रहा है । चूहों केवल MPTP के साथ इलाज एक कम आंदोलन की गति, एक छोटे आंदोलन दूरी, एक लंबे समय तक स्थिर और खारा-चूहों, जो मोटर MPTP द्वारा प्रेरित घाटे का संकेत से एक कम समय चल रहा है दिखाया । चूहों दोनों MPTP और एल के साथ इलाज किया-डोपा एक उच्च आंदोलन की गति, एक लंबा आंदोलन दूरी, एक छोटे स्थिर समय और एक अब बस MPTP (चित्रा 2, चित्रा 3) के साथ इलाज चूहों से समय चल रहा है, जो पता चला कि एल डोपा का शमन दिखाया MPTP-प्रेरित मोटर घाटे ।
चित्रा 1: सिलेंडर परीक्षण में मोटर प्रदर्शन पर MPTP के प्रभाव । यह 8 वें दिन पर पालन की संख्या के विश्लेषण से पता चलता है । * का प्रतिनिधित्व करता है p < 0.05, * * एक तरह से ANOVA परीक्षण के लिए p < 0.01 का प्रतिनिधित्व करता है । सभी मान मतलब ± एसडी (एन = 6) का प्रतिनिधित्व करते हैं । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
चित्रा 2: चूहों के आंदोलन पथ और चूहों रहने, चलना, और खुले क्षेत्र परीक्षण में 5 मिनट के दौरान चलाने के समय का वितरण. (क) अनुपचारित चूहों । (ख) चूहों MPTP के साथ इलाज किया । (ग) पीडी मॉडल चूहों एल डोपा द्वारा बचाया । भागो: माउस के एक वेग के साथ बढ़ रहा था 20 से अधिक सेमी/चलो: माउस खुले मैदान में चल रहा था और 1-20 सेमी/के वेग के साथ s स्थैतिक: माउस स्थिर था (गति < 1 सेमी/खुले क्षेत्र में (n = 6) । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
चित्रा 3: मोटर MPTP द्वारा प्रेरित घाटे और एल के उपचारात्मक प्रभाव-डोपा खुले क्षेत्र परीक्षण में मोटर प्रदर्शन पर. (क) स्थैतिक का विश्लेषण, चलने और समय चल रहा है । (ख) औसत आंदोलन दूरी का विश्लेषण । (ग) औसत आंदोलन गति का विश्लेषण । p < 0.001 का प्रतिनिधित्व करता है, * * * * एक-तरफ़ा ANOVA परीक्षण के लिए p < 0.0001 का प्रतिनिधित्व करता है । सभी मान मतलब ± एसडी (एन = 6) का प्रतिनिधित्व करते हैं । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।
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Discussion
मस्तिष्क के substantia नाइग्रा में dopaminergic न्यूरॉन्स के विनाश के कारण, MPTP चूहों7में पार्किंसंस की तरह लक्षण का कारण बनता है. L-डोपा अपने नैदानिक उपयोग के बाद से पीडी के लिए सबसे पसंदीदा दवा है, क्योंकि यह पीडी के साथ रोगियों में सामान्य दैनिक गतिविधियों को बनाए रखने में मदद करता है, akinesia और कठोरता15सहित मोटर असामान्यताओं के प्रभावी दमन के साथ. MPTP के साथ इलाज किया चूहों सिलेंडर परीक्षण और ओपन फील्ड टेस्ट, जो MPTP मॉडल का अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है जैसे व्यवहार परीक्षण में विकलांगता दिखाया । सिलेंडर टेस्ट और ओपन फील्ड टेस्ट के लिए आमतौर पर सहज कार्रवाई के उपाय किए जाते हैं. यहाँ, हम पीडी के अध्ययन में उन्हें लागू करने के लिए इन दो व्यवहार परीक्षण संशोधित. के रूप में हमारे परिणामों में दिखाया गया है, एल डोपा ' जानवरों मोटर क्षमताओं में सुधार के द्वारा व्यवहार में विकलांगता को कम कर सकते हैं ।
आम तौर पर, चूहों अपने परिवेश का पता लगाने जब वे एक नए वातावरण के लिए शुरू रखा । इस प्रकार, जब एक पारदर्शी सिलेंडर में रखा, वे चारों ओर घूम रहा है और उनके शरीर को उठाने के लिए अपने forelimbs के साथ सिलेंडर दीवारों को छूने से सिलेंडर के भीतर का पता लगाने । चूहों MPTP जैसे neurotoxic एजेंटों के साथ नशे में धुत्त, इस कार्रवाई को कम । इससे हम पीडी स्टडी में सिलिंडर टेस्ट को लागू कर सकते हैं । पंजा लिफ्टों मात्रा शरीर के समर्थन के लिए forelimb का उपयोग करें और इस प्रकार मोटर प्रदर्शन16पर नई रासायनिक संस्थाओं के प्रभाव का मूल्यांकन करने के लिए उपयोग किया जाता है इंगित करते हैं । सिलेंडर परीक्षण भी इस तरह के पेशीशोषी पार्श्व स्केलेरोसिस और spinocerebellar शोष18के रूप में मोटर प्रांतस्था घावों, शामिल कई neurodegenerative रोगों में forelimb मोटर समारोह17 के लिए एक उपाय प्रदान करता है ।
ओपन फील्ड टेस्ट एक प्रायोगिक परीक्षण है पारंपरिक सामांय हरकत गतिविधि के स्तर परख के लिए इस्तेमाल किया, और समय है कि वे बॉक्स के केंद्र में रहने के संदर्भ में कुतर की इच्छा । आंदोलन पथ की माप, गति और समय चूहों रहने, चलना, और खुले मैदान में विशिष्ट क्षेत्र के बजाय पूरे क्षेत्र में क्रमशः चलाने पीडी19में मोटर समारोह का मूल्यांकन कर सकते हैं. सरल और आसानी से उपलब्ध कोडिंग सॉफ्टवेयर का लाभ ( सामग्री की तालिकादेखें), हम प्राप्त करने और हरकत समारोह कुशलता से संबंधित डेटा का विश्लेषण कर सकते हैं ।
सिलेंडर टेस्ट और ओपन फील्ड टेस्ट के लिए पीडी मॉडल चूहों में सहज लोकोमोटिव फंक्शन को मापने के लिए निम्नलिखित कारणों से चुना गया. व्यवहारिक परीक्षणों से पहले चूहों को प्रशिक्षित करने की जरूरत नहीं है । केवल कई मिनट की प्रतिक्रिया है, जो दक्षता सुनिश्चित करने के लिए आवश्यक हैं । परीक्षण करने के लिए आवश्यक उपकरणों की लागत कम है । हालांकि, इस उपाय का एक प्रमुख नुकसान यह है कि जानवरों की गतिविधि का स्तर काफी पर्यावरण परिवर्तन और व्यक्तिगत मतभेदों के कारण भिंन हो सकते हैं । परिणाम आंकड़ों में भिन्नता की मात्रा को कम करने के लिए सावधानी बरती जानी चाहिए । सबसे पहले, एक ही उंर के पशुओं, सेक्स, और आनुवंशिक पृष्ठभूमि20,21,22 एक ही समय में मूल्यांकन किया जाना चाहिए । दूसरे, उपकरण, सिलेंडर और खुले मैदान, से पहले और प्रत्येक माउस परीक्षण के बाद साफ किया जाना चाहिए । अंत में, पर्यावरण शांत और परीक्षा के दौरान परेशान रहते हैं ।
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Disclosures
लेखकों का खुलासा करने के लिए कुछ नहीं है ।
Acknowledgments
हमारा काम तिआनजिन स्नातक नवाचार और उद्यमिता के लिए प्रशिक्षण कार्यक्रम (अनुदान No. ६३१८३००४) द्वारा वित्त पोषित है । ननकाि विश्वविद्यालय में औषधीय रसायन जीवविज्ञान की राज्य प्रमुख प्रयोगशाला में यह परियोजना शुरू की गई. लेखक घोषणा करते हैं कि हितों का कोई टकराव नहीं है.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 70% Ethanol | Ruiboxing Company | RBX-64175 | |
| Camera | BASLER | acA645-100gm | |
| Cylinder test | Made in-house at Nankai University | N/A | |
| Excel | Microsoft | N/A | |
| Levodopa | Sigma-Aldrich | 72816 | |
| Matalb 2017a | Mathworks | N/A | |
| Mice | Institute of Zoology, Chinese Academy of Sciences | Balb/c | Adult female mice(10 weeks) |
| MPTP | Yuanye Biological Technology Company Ltd., Shanghai | S31504-500mg | |
| Open field test | Made in-house at Nankai University | N/A | |
| Syringe | Solelybio | S-xsgwz-w | Irrigation |
| Syringe | Jiangxi Fenglin Medical Application Co. | hc3824 | Intraperitoneal injection |
References
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