Summary
Mediante el uso de un modelo innovador de analógica terrestre, que son capaces de simular a una misión de espacio incluyendo un viaje a (0 g) y una estancia en Marte (0,38 g) en ratas. Este modelo permite una evaluación longitudinal de los cambios fisiológicos que ocurren durante las dos etapas hipo gravitatorio de la misión.
Abstract
Modelos de roedores terrestres son ampliamente utilizados para comprender las consecuencias fisiológicas del espacio de vuelo en el sistema fisiológico han sido rutinariamente empleadas desde 1979 y el desarrollo de hind extremidad descarga (HLU). Sin embargo, los próximos pasos en la exploración espacial ahora incluyen a los viajes a Marte donde la gravedad es el 38% de la gravedad de la tierra. Ya que ningún ser humano ha experimentado este nivel de gravedad parcial, un modelo sostenible basado en la tierra es necesario investigar cómo reaccionaría el cuerpo, ya deteriorado por el tiempo invertido en la microgravedad, a esta carga parcial. Aquí, utilizamos nuestro modelo innovador parcial de carga (PWB) para imitar a una misión corta y alojarte en Marte para evaluar las deficiencias fisiológicas en los músculos de extremidades inducidos por dos distintos niveles de gravedad reducida que aplica de manera secuencial. Esto podría proporcionar un modelo seguro, en tierra para estudiar las adaptaciones músculo-esqueléticas al cambio gravitacional y establecer contramedidas eficaces para preservar la salud y función de los astronautas.
Introduction
Objetivos de extraterrestres, incluyendo la luna y Marte, representan el futuro de la exploración espacial humana, pero ambos tienen considerablemente más débil gravedad que la tierra. Mientras que las consecuencias de la ingravidez sobre el sistema músculo-esquelético se han estudiado ampliamente en los astronautas1,2,3,4,5 y en roedores6, 7 , 8 , 9, el último gracias a la bien establecida trasera descarga (HLU) modelo10, muy poco se sabe acerca de los efectos de la gravedad parcial. La gravedad marciana es 38% de los de la tierra y este planeta se ha convertido en el foco de la exploración a largo plazo11; por lo tanto, es crucial para entender las alteraciones musculares que pueden ocurrir en esta configuración. Para ello, desarrollamos un sistema de cojinete (PWB) parcial de peso en ratas12, basado en el trabajo anterior realizado en ratones6,13, que fue validada con los resultados de músculo y hueso. Sin embargo, la exploración de Marte será precedida por un período prolongado de la microgravedad, que no se abordó en el modelo anteriormente descrito12. Por lo tanto, en este estudio, hemos alterado nuestro modelo para imitar un viaje a Marte, consta de una primera fase de descarga trasera total y seguida inmediatamente por una segunda fase del cojinete de peso parcial en el 40% de la carga normal.
A diferencia de la mayoría de los modelos HLU, optamos por utilizar un arnés pélvico (basado en el descrito por Chowdhury et al9) en lugar de una suspensión de la cola para mejorar el confort de los animales y debe poder moverse sin problemas y sin esfuerzo de HLU a PLP en cuestión de minutos. En conjunto, hemos utilizado las jaulas y los dispositivos de suspensión que anteriormente desarrollado y había descrito ampliamente12. Además de proporcionar datos confiables/consistentes, también previamente hemos demostrado que el punto de anclaje fijo del sistema de suspensión en el centro de la varilla no impidió que los animales de la mudanza, acicalamiento, alimentación o beber. En este artículo, describiremos Cómo descargar extremidades traseras de los animales (total y parcialmente), verificar sus niveles de gravedad alcanzado, así como para evaluar funcionalmente las resultantes alteraciones musculares con agarre fuerza y húmedo masa muscular. Este modelo sería extremadamente útil para los investigadores que buscan investigar las consecuencias de gravedad parcial (artificial o extraterrestre) en un sistema músculo-esquelético ya comprometido, permitiéndoles investigar cómo los organismos se adaptan a parcial de recarga y para el desarrollo de las contramedidas que podrían ser desarrollados para mantener la salud durante y después de vuelos espaciales tripulados.
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Protocol
Todos los métodos aquí descritos fueron aprobados por el institucional cuidado Animal y el Comité uso (IACUC), de Beth Israel Deaconess Medical Center bajo el número de protocolo 067-2016.
Nota: Se utilizan machos Wistar ratas de edad de 14 semanas al inicio del estudio (día 0). Las ratas están alojadas individualmente en jaulas personalizadas 24 h antes de línea de base para permitir la aclimatación.
1. miembro posterior descarga
Nota: El arnés pélvico se puede poner en animales anestesiados o despiertos. Aquí, la descripción del Protocolo se da en animales anestesiados. Use el apropiado equipo de protección personal (PPE) para manejar los animales.
- Colocar la rata en una caja de anestesia con isoflurano 3,5% y un flujo de oxígeno de 2 L/min.
Nota: Anestesia adecuada se confirma cuando un sujetador firme de la pata trasera no provocan una reacción. - Una vez que el animal está completamente anestesiado, colocar la rata en el Banco con gas anestésico de una ojiva con isoflurano 2% y un flujo de 1,5 L/min de oxígeno.
- Colocar la rata en una posición propensa y colocación del arnés pélvico en un movimiento rostro caudal.
- Curva el arnés pélvico para proporcionar un firme ajuste teniendo cuidado de no apretar suavemente los miembros posteriores para evitar abrasiones y malestar.
- Fije la cadena de acero inoxidable con la hebilla giratoria a la parte superior del arnés pélvico, donde se une un gancho en la base de la cola.
- Quite la rata de anestesia y colocar el animal en una jaula personalizada con la cadena en su máximo.
- Una vez que la rata está completamente despierto y móviles, acortar la cadena con la hebilla giratoria superior hasta los miembros posteriores ya no puede alcanzar la planta.
- Observar el animal durante unos minutos evaluar su comodidad y asegúrese de que en todo momento, ambos miembros posteriores permanecen completamente descargado.
2. parcial de peso
Nota: Este paso puede realizarse en animales despiertos y anestesiados.
- Convertir el dispositivo de suspensión HLU en una suspensión de PLP agregando la parte en forma de triángulo compuesto por cadenas de acero inoxidable y una barra trasera.
- Anestesiar el animal siguiendo los mismos procedimientos detallados para HLU (pasos 1.1 y 1.2).
- Coloque una chaqueta de la correa del tamaño adecuado en los miembros anteriores de la rata (M para las ratas de 400 g o inferior, L para las ratas pesando sobre 400 g) y cerrar usando el extensor de espalda sujetador.
- Coloque un cierre de la parte con forma de triángulo en el gancho situado en el extensor de sujetador posterior y el cierre opuesto en el gancho que se encuentra en el arnés pélvico en la base de la cola.
- Permitir que el animal a recuperarse de la anestesia en la jaula. Una vez despierto, verifique que la suspensión es igual en los miembros anteriores y los posteriores acortando la cadena y modificar la ubicación del cierre giratorio inferior si es necesario.
Nota: Este paso también se puede realizar usando una placa de fuerza para confirmar la carga igual en todos los miembros. - Colocar la rata en la cima de la escala para registrar el peso del cuerpo "cargado", es decir, el peso del animal y todo el aparato, sin acortamiento de la cadena.
- Acortar la cadena hasta que la báscula muestra el 40% del peso corporal "cargado" y record el alcanzado nivel de gravedad (expresada como el cociente entre la carga y el peso descargado).
- Observar al animal para asegurarse de que el peso descargado es estable y que la rata está igualmente cargada de todos los miembros.
- Retire todo el aparato de la balanza con la varilla y vuelva a colocar la rata en la jaula.
3. evaluación del miembro posterior agarre fuerza
- Sostenga la rata con un alojamiento tradicional colocando una mano debajo de las extremidades anteriores. Suavemente Sujete la cola con la segunda mano.
- Acercarse a las barras de agarre con las patas traseras y asegúrese de que ambas patas estén totalmente apoyados en la barra de.
Nota: Si la rata no agarren completamente la barra o no muestra ninguna evidencia de sujeción voluntaria, soltar ligeramente el sistema de seguridad. Si esto no funciona, volver a la rata a su jaula y vuelva a intentarlo pasados unos minutos. - Suavemente tire de la rata hacia detrás hasta que se libere de su agarre. Registro de la muestra en el transductor de fuerza máxima.
- Espere aproximadamente 30 s entre mediciones y repita la prueba 3 veces.
- Calcule el promedio de las tres mediciones para anotar a cuenta para la fatiga.
4. grabación del músculo húmedo masa
- Colocar la rata en una cámara de eutanasia de CO2 . Después de esperar el momento adecuado según las pautas IACUC y AVMA, confirmar la eutanasia mediante una observación visual de falta de respiración.
- Colocar la rata en la mesa de disección en una posición propensa y quitar la piel y la piel mediante la incisión de cerca de los tobillos con unas tijeras de disección pequeño. Utilice las manos para arrancar la capa de la piel.
- Usando las tijeras de disección pequeño, romper la fascia muscular y aislar el tendón calcáneo.
Nota: El tendón calcáneo es el punto de anclaje de músculos gastrocnemio y el sóleo. - Mientras sujeta el tendón del calcáneo con un pequeño par de pinzas, use las tijeras de disección para aislar los músculos gastrocnemio y sóleo del bíceps femoral, situado por encima.
- Una vez aislado, corte el punto de anclaje de los músculos gastrocnemio y sóleo en la zona poplítea.
- Suavemente tire el sóleo del gastrocnemius y separar cortando el tendón calcáneo.
- Colocar la rata en una posición supina. Cuidadosamente retire la fascia y pelar el tibial anterior de tobillo en un movimiento hacia arriba.
- Cortar el tibial anterior en su punto de fijación superior.
- Registrar la masa húmeda exacta de cada músculo suprimido usando una balanza de precisión tarado y un barco pesado.
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Representative Results
Tomando ventaja de las nuevas jaulas que hemos diseñado previamente y se describe en detalle12, utilizamos un dispositivo de suspensión basado en la cadena de acero inoxidable que es conveniente para trasera descarga (HLU, figura 1) y soporte parcial de peso (PWB, Figura 2). La ventaja fundamental de nuestro diseño es la capacidad para pasar de un tipo de descarga a otro en cuestión de minutos manteniendo un entorno idéntico para los animales. Se utilizó un arnés pélvico por encargo (figura 2A) que se une a una cadena única de acero inoxidable por encargo con un cierre giratorio en cada lado para HLU. Para modificar este dispositivo de suspensión y lograr la PLP, la adición de una sola pieza en forma de triángulo de cadena de acero inoxidable que incorpora una barra trasera inflexible, diseñada para sentarse sobre la columna vertebral (figura 3) es el único requisito. Estos pasos pueden realizarse en animales despiertos o anestesiados.
Con el versátil entorno en este experimento, podríamos descargar con éxito el miembro posterior de todos nuestros animales por 7 días sin complicaciones y rápidamente los exponga a una gravedad parcial en el 40% de su carga normal (PWB40, promedio alcanzado nivel de gravedad de 0,4076 g ± 0,0036 g). Durante la primera semana de HLU total, los animales muestran una significativa pérdida de peso (Figura 4A:-7.19 ± 0,87%, n = 9, p < 0.001), que ha visto en otros modelos de14y no difiere significativamente de lo que observamos en las ratas expuestas en el PWB40 de la misma duración (-5.53 ± 1,44%, n = 10, p = 0.37). Sin embargo, animales continuaban perdiendo peso con el tiempo al ser expuestos posteriormente a PWB40 (-9.06% ± 1,35% desde el inicio, p < 0.0001).
Fuerza trasera es una medida estándar de la función muscular que puede usarse en sentido longitudinal (Figura 4B). Nos dimos cuenta de una semana de descarga total condujo a una disminución media de fuerza de agarre del 50.16% ± 4.10% respecto a los valores basales (p < 0.0001). Después de una semana posterior de carga parcial en el 40% de la carga normal, no notó ninguna más cambios con respecto a la fuerza de agarre (-44.29% ± 4.67% comparado con el basal, p < 0.0001). En todos los puntos de tiempo, el cambio porcentual en la fuerza de agarre de la pata trasera era perceptiblemente diferente de los controles de edad comparable (p < 0.0001 para el día 7 y día 14, n = 11). Además, se observó que después de la terminación del estudio, animales que experimentaron la total descarga seguida de carga parcial (HLU-PWB40) muestran una mayor pérdida de fuerza de agarre en comparación con el grupo de PWB40 (p = 0,03).
Muscular masa húmeda fue grabado al final del experimento y en comparación con los datos obtenidos después de dos semanas de carga normal o dos semanas de PWB40 (figura 4) y los datos publicados previamente por nuestro grupo12. Encontramos que los grupos PWB40 y PWB40 HLU tienen significativamente menor húmeda masa de soleus (S), gastrocnemio (G), y de los músculos tibial anterior (TA) que los controles pareados por edad (PWB100). De hecho, grabamos una masa sóleo promedio de 0,1681 g ± 0,007 g para nuestros animales que fue significativamente menor que las ratas expuestas a PWB100 durante 2 semanas en nuestros experimentos previos (-24.60 ± 3.18%, p < 0.0001). Para el gastrocnemio, registramos una promedio masa húmeda de 2,192 g ± 0,096 g (-10.55 ± 3.93%, p = 0,038 vs PWB100) y una masa húmeda de g 0,759 ± 0,029 g para el tibial anterior (-14.40% ± 3.27%, p = 0,009 vs PWB100). Mientras que nuestro conjunto de datos destacó que los animales expuestos a un análogo de Marte-misión (HLU-PWB100) tenían una masa húmeda disminuida de los músculos sóleo y gastrocnemio en comparación con los animales expuestos a PWB40 por 2 semanas continuas (-8.75 ± 3.84% y-5.85% ± 4.14%, respectivamente), no observamos una diferencia significativa entre estos dos grupos.
Figura 1: Descripción de los dispositivos de suspensión y cómo convertir de HLU a PWB. (A) se basa en nuestro diseño anterior, utilizamos una varilla de aluminio sentado en la cima de la jaula para mantener una estable suspensión dispositivo compuesto por un llavero aseguró en el centro de la varilla (flecha 1), una cadena de acero inoxidable (flecha 2), y dos broches (flechas 3) del eslabón giratorio. (B) para convertir el dispositivo de suspensión para lograr PWB, una estructura de forma de triángulo se une con la hebilla giratoria de fondo. Esta pieza se compone de cadenas de acero inoxidable y una barra trasera de cloruro de polivinilo (PVC) que se encuentra por encima de la espina dorsal de la rata (flecha 1). A cada lado de la barra posterior está situado un broche para sujetar el arnés y la chaqueta, respectivamente (flecha 2). Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Figura 2: extremidades descarga utilizando un arnés pélvico. (A) frontal y lateral ven dibujos de la estructura de arnés utilizado para apoyar las extremidades posteriores de los animales. (B) el arnés pélvico fue colocado como se describe para ajustarse perfectamente alrededor de los miembros posteriores de la rata. El enlace de acero inoxidable colocado sobre la base de la cola y unido a la hebilla giratoria. La ubicación exacta y la forma del arnés pueden variar entre animales pero ratas deben ser cómodas y es necesario que sus miembros posteriores nunca toque el suelo. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Figura 3: soporte de peso parcial. La descarga parcial requiere la adición de una chaqueta al animal con el fin de apoyar las extremidades delanteras. La chaqueta se cierra entonces con un extensor de espalda sujetador y un gancho se une al extensor, situada entre los omóplatos. La chaqueta y el arnés pélvico se unen a los cierres situados en cada extremo de la varilla trasera. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Figura 4: ejemplos de carta recordativa longitudinal en animales expuestos a diferentes niveles de descargas. (A) cuerpo peso cambio (BW). Los animales se pesaron semanalmente sin el arnés o chaquetas y el peso corporal fue registrado. PWB100 = carga parcial en carga normal; PWB40 = carga parcial en el 40% de la carga normal; HLU-PWB40 = una semana de trasera descarga seguido de una semana de PWB40. Se presentan los resultados de la prueba post-hoc de Tukey siguiendo un ANOVA de 2 vías apilada como *: p < 0.05, **: p < 0.01, ***: p < 0.001, y ***: p < 0.0001 vs PWB100. (B) cambio en la fuerza de agarre de la pata trasera. Se midió la fuerza de agarre de la pata trasera, semanal y los resultados se expresaron en porcentaje de cambio de referencia para cada animal. Se presentan los resultados de la prueba post-hoc de Tukey siguiendo un ANOVA de 2 vías apilada como ***: p < 0.001 y ***: p < 0.0001 vs PWB100, α: p < 0.05 vs PWB40. (C) músculo húmedo masa después de 14 días. Muscular masa húmeda se registró en una escala de precisión inmediatamente después del sacrificio a los 14 días. Resultados son presentados como porcentaje de la masa húmeda obtenida en el grupo control de edad comparable (PWB100). S = sóleo; G = gastrocnemio; TA = tibial anterior. Se presentan los resultados de la prueba post-hoc de Tukey siguiendo un ANOVA unidireccional como *: p < 0.05, **: p < 0.01, y ***: p < 0.0001 vs PWB100. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
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Discussion
Este modelo presenta el primer análogo terrestre desarrollado para investigar los niveles sucesivos de descargas mecánicos y pretende simular un viaje a y alojarte en Marte.
Muchos pasos de este protocolo son esenciales para garantizar su éxito y deben ser examinados de cerca. En primer lugar, es fundamental para monitorear el bienestar de los animales y asegurar que están manteniendo un comportamiento normal (es decir, realizar tareas como comer, descansar y explorar), particularmente durante el estado de PLP donde mantener una relativamente normal postura fisiológica. En segundo lugar, a pesar del nivel de PLP siendo muy constante en el tiempo y que requieren una intervención humana mínima12,14, es esencial para registrar la gravedad parcial alcanzada para minimizar las variaciones entre animales. Además, cuando los animales son la transición de descarga mecánica total a la gravedad parcial (PWB40), ya muestran atrofia muscular considerable y la pérdida de función6,9,15, que pueden causar transitorio dificultades para reanudar cuadrúpedo portantes comportamiento y conducen a una marcha torpe momentáneo.
Debido al entorno variable, varios problemas pueden surgir y debe ser estrechamente grabados y dirigidas. Por ejemplo, un cambio de fluido ocurre durante el período HLU debido a la posición inclinada del animal, mientras no se presente durante el PWB16. En algunos casos, redistribución de líquido puede causar más sutil edema en la cara o las patas traseras y generalmente desaparece en las horas siguientes recarga. Asesoramos a los investigadores a la puntuación de la severidad del edema y evaluar todos los días. Si edema severo persiste por más de 48 h, los animales deben ser excluidos del experimento.
Mientras que el uso de un arnés pélvico proporciona confort a los animales y mayor comodidad para el investigador, algunos animales pueden, en ocasiones, ya sea total o parcialmente escapar de su arnés durante HLU o PLP. Hemos seguido el protocolo de exclusión basado en los trabajos previos en ratones6 en el que cualquier animal que se escapa de tres veces se extrae del estudio. Como nota lateral, los escapes son extremadamente raros; en nuestro trabajo menos del 1% de los animales tuvo que ser excluido durante un período de 1 año (1 animal de 148 animales estudiados). La valoración diaria del nivel del PLP es un momento crucial donde el experimentador puede asegurarse el ajuste exacto de la chaqueta y el arnés pélvico, por lo tanto, reducir al mínimo el riesgo de fuga. Al evaluar el peso y el bienestar de los animales diariamente, especial consideración se debe poner en el mantenimiento del arnés pélvico. Mientras que el específico pérdida de cabello es la consecuencia más común, abrasión puede aparecer si se daña el arnés pélvico (es decir, masticado). Asesoramos a los investigadores verificar diariamente el estado del arnés y reemplazar componentes dañados o en el mazo entero cuando sea necesario para prevenir la aparición de abrasión de la piel. Bienestar mínimo debe incluir lo siguiente: control de peso corporal, consumo de alimentos, porfiria, presencia de orina y las heces, pérdida de cabello, abrasión de la piel, edema.
Las garras de los animales también en ocasiones pueden quedar atrapadas en el sujetador del gancho-y-lazo o tela, por lo tanto comprometer su equilibrio. Una manera simple y eficiente para evitar que esto suceda es suavemente recortar las garras bajo anestesia antes de poner la chaqueta. Este paso puede repetirse cuando sea necesario durante el curso del estudio.
Especial atención debe prestarse durante la transición de HLU a PWB. Mientras que se observó que todos los animales son capaces de caminar con poca dificultad inmediatamente después de ser colocado en PWB, la cantidad de tiempo necesario para poner la misma cantidad de peso en el frente y los miembros posteriores variaron entre ratas. Si una rata no demuestra paso relativamente normal en 24 h a todos los miembros, se recomienda que deben ser excluido del estudio.
Este nuevo modelo diseñado para imitar ambientes gravitatorios secuenciales es confiable y sostenible en el tiempo. Sin embargo, algunas limitaciones existen y están aún por resolverse. En primer lugar, esta combinación de modelos sólo está diseñada para evaluar las alteraciones que ocurren en las extremidades traseras de los animales, como el modelo HLU sólo genera microgravedad artificial en las extremidades posteriores. Por lo tanto, no es adecuado para investigar este análogo terrestre alternativamente HLU-PWB fore alteraciones de los miembros. En segundo lugar, durante el período de 14 días, nuestros animales muestran una continua pero no peligrosa para la vida la pérdida de masa de cuerpo entero, destacando el complejo reajuste de las ratas de descarga parcial (Figura 4A). En nuestro estudio previo del modelo rata PWB, los animales expuestos en PWB40 y PWB20 para dos semanas presentaron una pérdida significativa en sólo los primeros 7 días y recuperó peso posteriormente12. Esto fue probablemente debido a que las ratas fueron capaces de adaptarse a los cuadrúpedos descarga después de un período inicial de adaptación. Sin embargo, en este estudio, las ratas nunca totalmente adaptadas a los descarga/parcial-recarga diferentes dos períodos de una semana cada uno, es probable que explicar la pérdida de peso sostenida. Sería importante ampliar estos periodos de total y parcial-descarga para confirmar que los animales completamente pueden adaptar y colocar en cada ambiente. Niveles de estrés no han sido evaluados en este modelo todavía y pueden fácilmente controlarse en el futuro usando el muestreo de sangre regular usando la cola que sigue siendo totalmente accesible.
Nuestras evaluaciones longitudinales de función muscular y músculo masa demostrada una semana de descarga trasera causaron una tremenda disminución en la fuerza de agarre de la pata trasera (Figura 4B) con una de nuestras ratas exhibiendo una reducción del 70% en la fuerza de agarre. Como era de esperar, después de 14 días, los animales muestran una menor fuerza de agarre de animales que habían sido expuestos a los 14 días de PWB40 en nuestro estudio anterior12 mientras que la media húmeda masa de los músculos del miembro posterior no difirió significativamente entre los Grupos PWB40 y PWB40 HLU, pudimos establecer una correlación lineal fuerte entre los 3 grupos (PWB100, PWB40 y HLU + PWB40) sobre el sóleo media masa (R2 = 0,92; p < 0.0001).
Estos resultados confirman que parcial de carga después de un mecánico descarga compromete músculo salud total más que lo que se observaría durante un período continuo pero estable de descarga parcial. Hasta ahora, esta brecha en el conocimiento no se ha investigado. Otra evaluación de este fenómeno debe ser perseguida con el fin de desarrollar las contramedidas eficaces prevenir el descondicionamiento muscular en el contexto de una misión a la luna o en Marte. La fuerza de nuestro modelo también radica en su versatilidad ya que permite una variedad de diferentes experimentos con varios grados de descarga y longitudes diferentes de tiempo.
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Disclosures
Los autores no tienen nada que revelar.
Acknowledgments
Este trabajo fue financiado por la National Aeronautics and Space Administration (NASA: NNX16AL36G). Autores quisieran agradecer Semple de Carson para proporcionar los dibujos incluidos en este manuscrito.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 10G Insulated Solid Copper Wire | Grainger | 4WYY8 | 100 ft solid building wire with THHN wire type and 10 AWG wire size, black |
| 2 Custom design plexiglass walls | P&K Custom Acrylics Inc. | N/A | 2 clear plexiglass custom wall 3/16" tick, width 12 3/16", height 18 13/16", 1 rounded slot 0.25 in of diameter located at the center top of the wall |
| 3M Transpore Surgical Tape | Fisher Scientific | 18-999-380 | Transpore Surgical Tape |
| Accessory Grasping Bar Rat | Harvard Apparatus | 76-0479 | Accessory grasping bar rat, front or hind paws |
| Analytical Scale | Fisher Scientific | 01-920-251 | OHAUS Adventurer Analytic Balance |
| Animal Scale | ZIEIS by Amazon | N/A | 70 lb capacity digital scale big top 11.5" x 9.3" dura platform z-seal 110V adapter 0.5 ounce accuracy |
| Back Bra Extenders | Luzen by Amazon | N/A | 17 pcs 2 hook 3 rows assorted random color women spacing bra clip extender strap |
| Digital Force Gage | Wagner Instruments | DFE2-010 | 50 N Capacity Digital Grip Force Meter Chatillon DFE II |
| Gauze | Fisher Scientific | 13-761-52 | Non-sterile Cotton Gauze Sponges |
| Key rings and swivel claps | Paxcoo Direct by Amazon | N/A | PaxCoo 100 pcs metal swivel lanyard snap hook with key rings |
| Lobster Claps | Panda Jewelry International Limited by Amazon | N/A | Pandahall 100 pcs grade A stainless steel lobster claw clasps 13x8mm |
| Rat Tether Jacket - Large | Braintree Scientific | RJ L | Rodent Jacket |
| Rat Tether Jacket - Medium | Braintree Scientific | RJ M | Rodent Jacket |
| Silicone tubing | Versilon St Gobain Ceramics and Plastics | ABX00011 | SPX-50 Silicone Tubing |
| Stainless Steel Chains | Super Lover by Amazon | N/A | 4.5m 15FT stainless steel cable chain link in bulk 6x8mm |
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