Summary
Het protocol richt zich op het verzamelen van zeeschildpad monsters, een beschrijving van alle stappen van de dierlijke terugwinning en necropsie aan de indeling en kwantificering van de ingenomen mariene nest. Bovendien laten de representatieve resultaten zien hoe de verzamelde gegevens kunnen worden gebruikt om de mogelijke drempels voor een goede milieutoestand uit te werken.
Abstract
Het volgende protocol is bedoeld om te beantwoorden aan de vereisten van de kaderrichtlijnen voor de mariene strategie van de Europese Unie (KRMS) voor de D10C3 criteria die in de beschikking van de Commissie (EU) worden vermeld, met betrekking tot de hoeveelheid strooisel die door zeedieren wordt ingenomen. Gestandaardiseerde methodologieën voor de extractie van nest items opgenomen uit dode zeeschildpadden samen met richtlijnen over data-analyse worden verstrekt. Het protocol begint met de inzameling van dode zeeschildpadden en classificatie van steekproeven volgens de decompositie status. Turtle necropsie moet worden uitgevoerd in erkende centra en het protocol hier beschreven verklaart de beste procedure voor gastro-intestinale (GI) Tract isolatie. De drie delen van de GI (slokdarm, maag, darm) moeten worden gescheiden, geopend lengte en de inhoud gefilterd met behulp van een 1 mm mesh zeef. Het artikel beschrijft de indeling en kwantificering van de ingenomen nest, classificeren GI inhoud in zeven verschillende categorieën van mariene strooisel en twee categorieën van natuurlijke overblijfselen. De hoeveelheid ingenomen strooisel moet worden gerapporteerd als totale droge massa (gewicht in grammen, met twee decimalen) en overvloed (aantal punten). Het protocol stelt twee mogelijke scenario's voor om de goede milieu status (GES) te bereiken. Ten eerste: "er moet minder dan X% van de zeeschildpadden met Y g of meer plastic in de GI in monsters van 50-100 dode schildpadden uit elke sub-regio", waar Y is het gemiddelde gewicht van de ingeslikte plastic en X% is het percentage van de zeeschildpadden met meer gewicht (in grammen) van kunststof dan Y. De tweede, die van mening dat het voedsel blijven versus plastic als een proxy van de individuele gezondheid, is: "er moet minder dan X% van de zeeschildpadden met meer gewicht van plastic (in grammen) dan voedsel blijft in de GI in monsters van 50-100 dode schildpadden van elke sub-regio".
Introduction
Het mariene strooisel is een complex probleem aan te pakken aangezien het de oceanen via veelvoudige bronnen en vormen kan ingaan. Meer dan 80% van het nest dat wordt aangetroffen in mariene omgevingen is opgebouwd uit plastic1. De rol van dit materiaal vanuit economisch oogpunt neemt in de afgelopen 50 jaar toe. Als gevolg daarvan, de productie is ook toegenomen twentyfold sinds 1960, het bereiken van 335.000.000 ton in 2016. Deze waarde zal naar verwachting verdubbelen in de komende 20 jaar2. Bovendien is geschat dat ongeveer 5 tot 13.000.000 ton plastic belanden in de oceanen elk jaar (die gelijk is aan 1,5 tot 4% van de wereldwijde productie van kunststof)2,3. Kunststof beweging wordt beïnvloed door de fysische eigenschappen (bijv. drijfvermogen) of omgevingsvariabelen (bijv. getij en stroom), en plastic kan worden geaccumuleerd in alle mariene compartimenten4,5. Om het gezicht van de plastic probleem, is het belangrijk om in gedachten te houden dat, zoals vele andere milieuvraagstukken, is het grensoverschrijdende en dus governance-oplossingen zijn complex om te voldoen aan6. Om dit doel beter te bereiken moeten we rekening houden met regionale en internationale kaders, teneinde het milieubewustzijn en de bescherming van de zeeën in de hele wereld te verbeteren of te handhaven7. De uiteindelijke doelstelling van de kaderrichtlijn mariene strategie van de Europese Unie (KRMS) is het bereiken van een goede milieu status (GES) in de Europese wateren door 2020, ter bescherming van de mariene biodiversiteit en ter bevordering van een duurzaam gebruik van mariene milieus. Dit zal gebeuren door middel van 11 kwalitatieve descriptoren, waarvan tem 10 richt zich op het mariene strooisel en wordt gedefinieerd als "eigenschappen en hoeveelheden van het mariene strooisel geen schade toebrengen aan de kust-en mariene omgevingen". Binnen deze descriptor heeft de nieuwe beschikking van de Commissie8 besloten om criteria toe te voegen D10C3-"de hoeveelheid strooisel en micro-strooisel ingenomen door zeedieren is op een niveau dat geen afbreuk doet aan de gezondheid van de betrokken soorten"-omdat het worden beschouwd als relevante criteria bij de evaluatie van GES. Dientengevolge werden de lidstaten verzocht een lijst van soorten te produceren, methodologische normen te ontwikkelen en drempelwaarden te definiëren door middel van regionale of subregionale samenwerking.
Na de eerste wetenschappelijke publicatie in 18389, op de Storm-Petrel met een ingenomen kaars stok, meer dan 500 mariene soorten zijn opgenomen voor de inname van mariene strooisel10,11,12,13 ,14, en zeeschildpadden waren een van de eerste taxa opgenomen om plastic puin inslikken15. Gezien hun neiging tot het innemen van strooisel, hun brede verspreiding en de grote verscheidenheid aan habitats die tijdens hun leven werden gebruikt, werden zeeschildpadden, in het bijzonder de Loggerhead soorten Caretta caretta (Linnaeus 1758), gekozen als een potentiële indicator voor de Mediterraan bassin16, zoals de overzeese vogel Fulmarus glacialis (Linnaeus, 1761) voor noordelijke Europese wateren17. Zelfs na vijf decennia van onderzoek, is de bespreking van methode normalisatie zeer beperkt18 geweest en een samenhangende benadering door de wetenschappelijke gemeenschap om plastic opname door het wild te kwantificeren ontbreekt19. Gestandaardiseerde bemonsterings protocollen, en analytische opsporingsmethodes en metriek om plastic opname door mariene biota te beoordelen zijn nodig; een recente paper toonde de potentiële voordelen en beperkingen van het gebruik van mariene soorten als bio-indicatoren op plastic vervuiling20. Naar aanleiding van de Matiddi et al. voorstel in 201121 voor het gebruik van de Loggerhead als bio-indicator, en de technische groep voor de mariene nest verslag22, een specifiek protocol om te overwegen mariene nest ingenomen door zeeschildpad is ontwikkeld en getest door tien partners in zeven landen in de Middellandse Zee en de Atlantische Oceaan binnen het Europese project INDICIT (GA n ° 11.0661/2016/748064/SUB/ENV. C2). Dit protocol biedt gestandaardiseerde methodologieën voor de analyse van door zeeschildpadden ingenomen mariene nesten ter ondersteuning van de nieuwe beschikking van de Commissie (EU)8, criteria D10C3, waar drempelwaarden worden aangevraagd. Volgens de definitie van COM8is de drempelwaarde een getal of een bereik dat het mogelijk maakt om te beoordelen of het criterium van het kwaliteitsniveau is bereikt, en zodoende te helpen bij de beoordeling van de GES. Het voorgestelde protocol voor de beoordeling van het nest ingenomen door zeeschildpadden, zal nuttig zijn bij het verzamelen van gegevens over de samenstelling en de overvloed van strooisel en evalueren van de impact ervan op mariene omgevingen. Bovendien zal het verzamelen van dit type gestandaardiseerde gegevens helpen bij het definiëren van drempelwaarden. Hier beschouwen we twee soorten scenario's. Het eerste scenario houdt rekening met de Fulmar nest EcoQO monitoring, die wordt geïmplementeerd voor de OSPAR-gebied: "er moet minder dan X% van de zeeschildpadden met Y g of meer plastic in de GI in monsters van 50-100 dode schildpadden van elke sub-regio, waar Y is het gemiddelde e gewicht van plastic ingenomen overweegt alle monsters en X% is het percentage van de zeeschildpadden met meer gewicht (in grammen) van plastic dan Y. De tweede is gericht op het overwegen van een proxy van de individuele gezondheid niveau: "er moet minder dan X% van de zeeschildpadden met meer gewicht van plastic (in grammen) dan voedsel blijft in de GI in monsters van 50-100 dode schildpadden uit elke sub-regio", waar het gewicht van de ingenomen het plastiek wordt vergeleken met voedsel dat in elk individu blijft.
Protocol
Een reeks van "Basic" en "optionele" parameters worden voorgesteld om te worden verzameld. De fundamentele parameters komen overeen met de minimale parameters van fundamenteel belang om de criteria D10C3 te volbrengen, terwijl de optionele parameters kunnen verwerven meer kennis over zeeschildpadden ' gedrag/biologie. Een observatiegegevens blad en een lijst van materiaal dat nodig is voor het bemonsteren van personen in het veld en de analyse van strooisel in het laboratorium worden hier verstrekt om gegevensregistratie en statistische analyse te vergemakkelijken door het volgen van een gestandaardiseerde tabel. Marine nest subcategorieën worden gekozen op basis van de vorm en het type van de items. Overblijfselen van voedsel zeeschildpad en alles wat natuurlijke die niet-voedingsmiddelen (steen, hout, puim, enz.) worden gevraagd voor het overwegen van drempels en het dieet van het dier. Alle experimentele activiteiten van dit protocol zijn uitgevoerd op dode schildpadden volgens het recht van de betrokken landen en internationale regels. Alle secties moeten worden uitgevoerd in de erkende centra.
1. bemonstering van karkas: Vul het waarnemings blad (aanhangsel 1 van de aanvullende bestanden 1 en 2)
- Vul de contactgegevens in met inbegrip van naam, contactpersoon (telefoon, post) en instelling van de waarnemer (s) (data collector).
- Identificeer de soort als volgt: CC (Caretta caretta, Linnaeus 1758); Gelijkstroom (Dermochelys coriacea, Vandelli 1761); Cm (Chelonia mydas, Linnaeus 1758); Ei (Eretmochelys imbricata, Linnaeus 1766); Lo (Lepidochelys olivacea, Eschscholtz 1829); LK (Lepidochelys kempii, Garman 1880); ND (Natatordepressus, Garman 1880).
- Tags: als er al een tag bestaat op de flipper, specificeer dan het nummer (N °. Vermeld de aanwezigheid en het aantal elektronische chips. Anders, nota nr.
- De identificatiecode van het dier opgeven. Bijvoorbeeld: "twee letters voor het land" _ "twee letters voor de locatie (bijv. regio of instelling)" _ "YY" _ "MM" _ "DD" _ "chipnummer".
- Let op de datum van de ontdekking (yy/mm/dd).
- Geef de locatie op van de detectie die het herstel gebied of de coördinaten in decimale graden is.
- Rapport het lichaam van het specimen het niveau van de voorwaarde: 1 (levend), 2 (vers-dode onlangs), 3 (gedeeltelijk ontbonden-de interne organen zijn nog in goede voorwaarde), 4 (de geavanceerde ontbonden-huid schalen worden opgeheven of verloren), 5 (gemummificeerde-een deel van het skelet of een deel van het lichaam ontbreken). Zie Figuur 1.
- Ontdekkings omstandigheden: Let op de omstandigheden tussen de vier categorieën: stranding (dier gevonden op het strand of op de kust); Bijvangst/visserij (dieren die actief worden gevangen door vissers, bijvoorbeeld inslikken van een haak, gevangen in een net, teruggebracht door vissers, enz.); Gevonden op zee (dier ontdekt op de zeebodem); Dead in het herstel centrum (het dier kwam tot leven, maar stierf tijdens zijn herstel).
Figuur 1: het lichaam van het specimen niveau of de decompositie status. Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.
2. zeeschildpad necropsie: biometrie metingen en extractie van de inhoud van het maagdarmkanaal
- Schik voor het vervoer van het dier naar het erkende centrum voor necropsie. In het geval van een zeer ontbonden dier, beoordelen van de integriteit van het spijsverteringskanaal voor verwijdering in het erkende centrum. Als de necropsie niet onmiddellijk na het herstel kan worden gedaan, bevriezen het karkas bij-20 °C.
- Noteer vóór de necropsie-bewerking de biometrische metingen in de specifieke sectie van het herstelbestand. De gebogen schaallengte, Inkeping aan uiteinde23, is verplicht; de andere maatregelen zijn facultatief (b.v., gebogen Schaalbreedte, gewicht).
- Voer een extern onderzoek van het dierlijk lichaam uit en rapporteer de informatie in het specifieke gedeelte van het necropsie bestand. Inspecteer ook de mondholte voor mogelijke aanwezigheid van vreemd materiaal.
- Scheiden en verwijderen van de Plastron van de schaal door het maken van een incisie langs de rand zoals gemarkeerd door de gele lijn (Figuur 2a).
- Gebruik een kort mes of snijd met een horizontale kanteling vermijden beschadiging van het interieur delen (Figuur 2 b-c). Het ligament gehechtheid aan de borst-en bekkengordel moet worden gesneden wanneer de Plastron is losgemaakt van de schaal, zodat het gemakkelijk is om toegang te krijgen en te behandelen.
- Bloot de gastro-intestinale (GI) tractus het verwijderen van de borstspieren en het hart van de schildpad (figuur 2D).
- Optionele Evalueer de trofische status kwalitatief door de atrofie van de borstspieren te evalueren (geen-matig-streng) en dikke dikte in de gewrichts holtes en op het coelomic membraan (overvloedig-normaal-laag-geen).
- Haal de GI en plaats deze op de examen tafel. Doe dit met twee operators om de acties gemakkelijker te maken. Terwijl een exploitant houdt het karkas tot aan de ene kant, de andere scheidt de ligamenten van de verschillende organen en de membranen van de schaal met behulp van kleine messen of schaar en verwijdert de GI van het dier (figuur 2F).
- Isoleer de slokdarm, maag en darm met behulp van plastic klemmen. Plaats deze op de slokdarm dicht bij de mond, bij de slokdarm ventiel, op de Peg en op de cloacae, zo dicht mogelijk bij de anale opening zoals aangegeven door gele pijlen (figuur 2F).
- Registreer het geslacht van het dier indien mogelijk.
- Scheid de slokdarm, maag en darm definitief door het plaatsen van een tweede klem (die overeenkomt met het snijpunt) om morsen van de inhoud te voorkomen.
- Open de GI-sectie in de lengte met behulp van een schaar (of de vingers indien mogelijk), en vervolgens direct plaats het materiaal in een 1 mm gaas zeef door het reinigen van de GI muren met stromend water.
- Neem nota van elke anomalie in de GI (bijv. zweren, perforaties, adhesies, ontsteking).
- Inspecteer de inhoud in de zeef om eventueel teer, olie of breekbaar materiaal te detecteren dat afzonderlijk moet worden verwijderd en behandeld.
- Spoel de inhoud door de zeef om het vloeibare gedeelte, slijm en niet-identificeerbaar verteerd materiaal te verwijderen.
- Herhaal de volgorde voor elk GI gedeelte afzonderlijk.
- Bevriezen al het materiaal verzameld door de zeven of op te slaan in potten met 70% alcohol oplossing.
Nota: voor meer details op de anatomie van de overzeese schildpad Zie ook Wyneken (2001)24.
Figuur 2 : Opeenvolging van schildpad necropsie. (a) buik beeld van een dode schildpad. De gele lijn geeft de weg te snijden om de Plastron van de rest van de schildpad te scheiden. (b, c) Horizontale besnoeiingen om het beïnvloeden van de binnenlandse organen te verhinderen. (d) buik beeld van de geopende schildpad. eextractie van het GI-darmkanaal. fweergave van de gehele GI, gele pijlen geven aan waar de klemmen moeten worden bevestigd om de drie verschillende GI secties te scheiden. Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.
3. gegevensverzameling en-analyse: mariene nest classificatie
- Label de voorbeeldcode en de respectieve GI-sectie.
- Leeg de potten op een 1 mm gaas zeef, het verzamelen van al het materiaal.
- Het verzamelde materiaal opnieuw wassen met water om alcohol te elimineren en het strooisel te reinigen.
- Afzonderlijke mariene nesten van de organische componenten of andere materialen, het identificeren van de categorie van mariene strooisel door visuele analyse, het sorteren van het materiaal op een Petri schaaltje, en sub-duiken de verzamelde items in de verschillende categorieën.
- Vul het gegevensblad met verzamelde informatie.
- Gebruik de stereomicroscoop om een kijkje op alle niet-identificeerbare materialen te nemen.
- Droog het mariene strooisel bij kamertemperatuur of in een oven bij 35 °C voor 12 uur.
- Droog de organische Fractie in een oven bij 35 °C voor 12 uur of in een droger.
- Rapporteer het aantal en het droge gewicht van de verschillende categorieën van mariene strooisel.
- Meld het droge gewicht van de organische fractie onderverdeeld in levensmiddelen blijven (en) en natuurlijke non-food blijven (s). Totale droge massa (gewicht in gram, nauwkeurig op de 2ND decimale plaats) is de belangrijkste informatie die wordt gebruikt in de monitoring programma, gevolgd door het aantal items (overvloed).
- Record andere informatie, zoals de kleur van de items, het volume van het strooisel, verschillende gevallen van strooisel in de slokdarm, maag en darm, en incidentie per nest categorie, omdat dit nuttig is voor onderzoek en impactanalyse. De ruwe gegevens zullen gevarieerde informatie voor elke afzonderlijke sectie van de GI; de totale inhoud van het mariene strooisel binnen de drie delen zal in de eind gegevens worden verwerkt.
Representative Results
Dit protocol, afgeleid van de KRMS richtsnoer22 en is mede-gebouwd en verbeterd door meer dan 50 belanghebbenden (biologen van reddings-centra, stranding netwerken, dierenarts en onderzoekslaboratoria) uit 7 landen over de Middellandse Zee en de Europese Atlantische kusten, stelt zij een gehomogeniseerd, haalbare en gemakkelijke evaluatie van strooisel opname door zeeschildpadden voor. Het protocol is getest op loggerhead schildpadden, en de meeste van de manipulaties zijn ook van toepassing op andere zeeschildpad soorten. Het eerste belangrijke resultaat van dit protocol is de beschrijving van de mariene nest posten onder zeven categorieën op basis van hun visuele kenmerken (Figuur 3). Deze classificatie is afgeleid door de Fulmar EcoQo17,25, en gewijzigd volgens de auteurs ' ervaring in Sea Turtle ecologie. De eerste categorie, en meestal de minst overvloedige een, is industrieel plastic (ind Pla) bestaat uit plastic pellet en korrels, meestal cilindrische en ronde vorm, maar ook ovale of kubieke vormen, zelden gevonden te worden ingenomen door de Loggerhead schildpad 16 , 26. de tweede categorie bestaat uit de overblijfselen van blad-achtige (gebruik ze) materialen, zoals plastic zakken, landbouw platen of plastic folie. Ze verschijnen in onregelmatige vormen, maar zijn altijd dun en flexibel. De derde categorie omvat touwen, filamenten, en andere threadlike materialen zoals de overblijfselen van Ghost vistuig meestal gemaakt van nylon (gebruikvan). De vierde categorie omvat alle geschuimde kunststoffen (gebruik FOA) zoals polystyreen schuim of geschuimd zacht rubber. De vijfde categorie bevat fragmenten van hard plastic items (gebruik fra). Fragmenten zijn zeer overvloedig in de GI inhoud en ze kunnen worden gevonden in een verscheidenheid van verschillende kleuren. Ze zijn afgeleid van gebroken grotere stukken en zijn meestal stijf, met een onregelmatige vormen en scherpe kromme randen. Alle andere plastic items, waaronder elastieken, dichte rubber, ballon stukken, en zachte lucht geweerkogels, zijn gecategoriseerd als andere gebruiker plastic (gebruik POTH). Alle niet-plastic mariene nest, zoals sigarettenpeuken, Kranten, afval en harde verontreinigende stoffen zijn opgenomen in de laatste categorie van strooisel, andere dan plastic (andere), zelfs als ze niet gemakkelijk te vinden in zeeschildpadden. De andere twee categorieën niet geclassificeerd als mariene nest, zijn (i) overblijfselen van de schildpad natuurlijke voeding (Foo) en (II) een natuurlijke item, niet erkend als prooi voor de zeeschildpad, zoals steen, hout of puim (nfo).
Figuur 4 toont een voorbeeld van representatieve resultaten op de droge massa van mariene nest categorieën, waar blad-achtige plastic (gebruik ze) was de meest voorkomende klasse, en plastic zakken of delen van hen, waren de belangrijkste ingenomen items. Vergelijkbare resultaten worden weergegeven in Figuur 5 in termen van het aantal items (overvloed). Tabel 1 toont een voorbeeld van een droog massa analyse in zes verschillende gebieden, wat nuttig is voor het vaststellen van de drempelwaarde volgens de eisen van de KRMS van de Europese Unie. Deze gebieden moeten bijvoorbeeld worden vertegenwoordigd door landen of subregios van het Middellandse-Zeegebied. Het gerapporteerde gemiddelde wordt berekend aan de hand van alle onderzochte personen, met inbegrip van monsters zonder ingenomen mariene strooisel. Volgens ons voorbeeld is gebied 5 de duidelijkste zone van het Middellandse-Zeegebied en kunnen de gegevens uit dit gebied worden gebruikt om de drempelwaarde vast te stellen die moet worden bereikt. Voor dit gebied het eerste scenario zou kunnen zijn: "er moet minder dan 25% van de zeeschildpadden met 0,5 g of meer plastic in de GI in monsters van 50-100 zeeschildpadden". Het tweede scenario zou kunnen zijn: "er moet minder dan 32% van de zeeschildpadden met meer plastic gram dan voedsel blijft (Foo) in de GI in monsters van 50-100 zeeschildpadden".
Figuur 3 : Voorbeelden van mariene nest categorieën vastgesteld voor mariene schildpad inslikken monitoring. (a) ind Pla, (b) gebruik zij, (c) gebruik van (d) gebruik FOA, (e) gebruik fra, (f) gebruik POTH, (g) andere, (h) foo. Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.
Figuur 4 : Voorbeeld resultaten van gewichten van het mariene strooisel ingenomen door zeeschildpadden onder de verschillende categorieën. De gemiddelde gewichtswaarden worden gerapporteerd in gram items per individu (± SE). Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.
Figuur 5 : Voorbeeld resultaten voor het aantal mariene nest categorieën ingenomen door zeeschildpadden. Het gemiddelde aantal items per persoon (± SE) wordt gerapporteerd. Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.
| Gebied | Steekproefgrootte (n) | Gemiddelde waarde ± SE voor droog gewicht van ingeslikt plastic (g) | Percentage schildpadden met meer plastic dan de gemiddelde waarde (%) | Percentage schildpadden met meer plastic dan voedsel blijven (%) |
| 1 | 100 | 1.32 ± 0.03 | 27 | 64 |
| 2 | 100 | 1.61 ± 0.01 | 28 | 67 |
| 3 | 100 | 1.35 ± 0.02 | 26 | 62 |
| 4 | 95 | 0.73 ± 0.02 | 34 | 40 |
| 5 | 65 | 0.55 ± 0.03 | 25 | 32 |
| 6 | 50 | 0.90 ± 0.04 | 44 | 54 |
Tabel 1: voorbeeld van resultaten uit verschillende gebieden (bijvoorbeeld landen, subregios, enz.), met behulp van droge massa van mariene strooisel. Klik hier om deze tabel te downloaden als een Excel-bestand.
Supplementaire dossiers 1. Klik hier om dit bestand te downloaden.
Supplementaire dossiers 2. Klik hier om dit bestand te downloaden.
Discussion
Dit protocol maakt de evaluatie van de totale overvloed van mariene strooisel, en de identificatie van de belangrijkste nest categorieën ingenomen door zeeschildpadden. Het is minder duur in vergelijking met andere monitoring Programma's met zee-activiteiten, omdat zeeschildpadden kunnen worden verzameld na stranding op het strand of worden teruggewonnen door de vissers. De identificatie van mariene nest categorieën is gemakkelijk en snel, omdat de ondergrens van de post grootte 1 mm bedraagt. Een beperking van het protocol is het gebruik van zeeschildpadden gezien het feit dat alle 7 soorten zeeschildpadden zijn opgenomen in aanhangsel I van het Verdrag inzake de internationale handel in bedreigde wilde dier-en plantensoorten27; Daarom kan alleen geautoriseerd personeel omgaan met levende en dode dieren of delen daarvan. Turtle management en herstel moeten worden gerapporteerd en gecoördineerd met de overeenkomstige autoriteiten. Bij de behandeling van dode of levende wilde dieren moeten sanitaire voorzorgsmaatregelen worden genomen om de Risico's van zoönoses te minimaliseren. Dit protocol is getest op loggerhead soorten, maar het is van toepassing op alle zeven schildpadsoorten. De gegevensanalyse moet voor elke soort afzonderlijk worden uitgevoerd. Het lichaam van het specimen voorwaarden zoals beschouwd onder vijf niveaus van levend tot gemummificeerde schildpadden. Niveau 1 (Alive) wordt beschouwd voor een meer gedetailleerde indeling van het lichaam van het specimen voorwaarde in het geval de schildpad overleed in het Rescue Center na het herstel. Het protocol is van toepassing op dode individuen van niveaus 2 tot 4, maar ook op individuen die na terugwinning stierven (omstandigheden: dood bij het centrum van de terugwinning). Niveaus 2 en 3 zijn voldoende voor het Protocol, terwijl niveau 4 maakt het mogelijk om biometrie gegevens te meten en de beoordeling van de aanwezigheid/afwezigheid van de ingenomen nest voor de evaluatie van de frequentie van het voorkomen (FO%), en het percentage van de schildpadden met ingenomen mariene nest op de volledige steekproef. Individuen van niveau 5, waar in het algemeen de gastro-intestinale inhoud is verloren, kan niet worden overwogen voor het verzamelen en kwantificeren van strooisel inslikken. Het nemen van foto's van het dier voor de behandeling, zou kunnen bieden aanvullende informatie over het monster als de waarschijnlijke oorzaak van de dood of de belangrijkste verwondingen en verstrengeling. Het is belangrijk om een schaal staaf op de beelden te omvatten. Zelfs als vaak zeeschildpadden hadden vissen haken in hun GI, gegevens niet hoeven te worden opgenomen in de analyse, omdat de visserij haken waarop de beug slachtoffers actief zijn gevangen worden niet beschouwd als "mariene nest". Haak aanwezigheid moet worden opgenomen in de toelichting. Verzameling van gegevens moeten afzonderlijk worden uitgevoerd in elk deel van de GI (slokdarm, maag, darm), om de mate van tolerantie te evalueren mariene nest inslikken overweegt GI blokkade of de mogelijkheid om het te elimineren door middel van ontlasting, zoals aangetoond in eerdere studies16,28,29,30,31,32. Een kritieke stap van het protocol zou in de inzameling van het aantal punten kunnen worden gevonden. Meerdere stukken kunnen worden afgeleid uit versnippering van hetzelfde object in de GI of als gevolg van een aparte inname. Subjectieve interpretatie van een enkel item of meerdere afzonderlijke stukken kunnen overeenkomen met een potentiële bias in de opname-nummer (Figuur 6). Om deze reden, zijn de drempelwaarden uitgewerkt gebruikend slechts ingenomen mariene afval massa gegevens, zoals Fulmar EcoQO17,25.
Figuur 6 : Fragmentatie van enkele items kunnen optreden vóór inname of tijdens het voerproces, het produceren van bias in het tellen. Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.
Het protocol vereist de categorisering van verschillende plastic items op basis van hun vormen (gebruik ze, gebruik dan). Deze sub-divisie is nuttig om de bron van de mariene nest te identificeren met een lijst van items op basis van hun overvloed. Het helpt beleidsmakers in hun Programma's van maatregelen, die snel bewijs leveren van hun efficiency in het richten van punten door hun sterkte te evalueren. Bijvoorbeeld, het verbod van plastic zakken in de markten moet overeenkomen met een vermindering van het gebruik ze categorie ingenomen (Figuur 4, Figuur 5) in zeeschildpad monsters verzameld in de toekomst. De toepassing van dit protocol zal de EU-lidstaten in staat stellen te beantwoorden aan de KRMS vereisten, hun eigen basislijnen te evalueren en de drempelwaarden te bepalen waarop GES wordt bereikt. Drempels moeten worden bepaald in ongerepte of naast ongerepte gebieden. Vanwege de alomtegenwoordigheid van kunststof in het mariene milieu, een ongerepte gebied bestaat niet. Volgens het voorbeeld gegevens (tabel 1), gebied 5, was de duidelijkste zone en kan vertegenwoordigen de waarde (Y) te bereiken voor het Middellandse-Zeegebied. De lidstaten moeten drempels bepalen op basis van de aanzienlijke vermindering van hun eigen afstand van deze waarde. Volgens een recente herziening18, mariene nest inslikken eenheden moeten worden genormaliseerd om de grootte van de schildpad, vooral als het doel is het vergelijken van verschillende leeftijdsklassen. Toch is een relatie tussen de massa van de ingenomen nest en schildpadden grootte is gedetecteerd door verschillende auteurs met positieve, negatieve of nul waarden16,26,32,33, 34. Ons protocol omvat niet de grootte van dieren in het eerste scenario, maar het kan mogelijk zijn om de lichaams last te schatten, de evaluatie van de massa van de schildpad met behulp van gebogen schaallengte (CCL)35 en gebruik de verhouding van het gewicht van plastic gewicht van de schildpad in plaats van alleen gram ingeslikte kunststof (Y). In elk geval stellen wij voor verifiërend om het even welke mogelijke significante verschillen alvorens Oceanic stadium schildpadden met neritic degenen of vroege jonge exemplaren met volwassenen samen te voegen om de steekproeven16,26beter te stratificeren. Het tweede scenario heeft meer te maken met de individuele gezondheidsstatus en kan beter beantwoorden aan de criteria D10C3: "de hoeveelheid strooisel en micro strooisel die door zeedieren wordt ingenomen, bevindt zich op een niveau dat de gezondheid van de soort niet aantast betrokken ". In feite, het effect van de ingenomen plastic items bestaat het meest vaak in sub-dodelijke effecten in plaats van dodelijke degenen28,36,37,38,39. We hebben ook zelden gevonden een occlusie of een perforatie als gevolg van plastic inslikken, die kunnen leiden tot de dood van de schildpadden. Sub-Lethal effecten zijn niet gemakkelijk te worden opgespoord en te onderscheiden van de effecten als gevolg van andere verontreinigende stoffen40. Dieet verdunning of assimilatie van contaminanten gebeurt wanneer mariene nest is in de GI van de schildpad41. Aldus kon de steekproef met meer gram van plastiek dan voedsel overblijfselen op een dier in een zeer slechte gezondheids voorwaarde wijzen. Om te blijven in overeenstemming met de Fulmar EcoQO17,25 gebruikt door de Noord-Europese landen, beide scenario's overwegen plastic gewicht in plaats van mariene afval gewicht.
Tot slot is het belangrijk om de verschillen te verduidelijken tussen (i) het analyseren van de inname van plastic in zeeschildpadden als indicator van de impact op de bevolking met gevolgen voor het behoud van de bevolking en (II) het analyseren van de inname van plastic in zeeschildpadden als Bio-indicator van effect op het kust en mariene milieu20,40. Om de implicaties van deze impact op de instandhouding van de schildpadden populatie te begrijpen, is meer informatie nodig en is een betere data gelaagdheid noodzakelijk42. Door de confrontatie met het advies van 35 specialisten uit 13 landen, die zijn experts in de zeeschildpad biologie en het behoud, is het duidelijk dat zeeschildpadden zijn op grote schaal bestudeerd door de jaren heen, hoewel het nog steeds noodzakelijk is om de interacties te onderzoeken met de menselijke de bevolkings status en mogelijke bedreigingen43.
Dit betekent dat één enkel protocol niet als limitatief kan worden beschouwd voor alle thematische en dat er meer studies nodig zijn om de impact van plastic op populatieniveau te begrijpen.
Zelfs taai plastic kan worden beschouwd als een lage mate van schade aan zeeschildpadden veroorzaken, met betrekking tot bijvangst of vernietiging van habitats, de vermindering is een uitdaging in de afgelopen jaren en snelle methoden van de meting moet worden uitgewerkt. Er is een controverse in het gebruik van gestrande schildpadden voor monitoring doeleinden, omdat volgens sommige auteurs zij niet representatief zijn voor de hele bevolking40, terwijl anderen hebben verklaard dat gestrande schildpadden niet vertegenwoordigen een bias van mariene nest inname tarieven op de achtergrond populatie44. Bovendien is er in veel landen geen goed georganiseerd netwerk of systeem voor het koppelen van reddings centra aan vissers en is er een gebrek aan informatie over de bijvangst en de vrijlating van de sterfte door de visserij. Daarom kunnen gestrande monsters niet altijd worden beschouwd als zieke schildpadden zonder normale voeding gedrag voor een periode voordat sterven en het bereiken van het strand; velen van hen zijn "dood op zee" schildpadden aan wal gewassen en worden meestal gebruikt als monsters in het toezicht op activiteiten26,32,38,45. Wij zijn van mening dat gestrande monsters zijn nuttig bij het verstrekken van informatie over het niveau van de mariene strooisel overvloed in het milieu en we stellen voor het uitsluiten van alleen schildpadden met volledig leeg maagdarmkanaal uit deze analyse als ze kunnen ziek zijn van een lange tijd voor de dood. Het gebruik van dit protocol zou de evaluatie van de milieutoestand en de beschikbaarheid van mariene strooisels voor mariene organismen mogelijk maken. Het kan ook nuttig zijn bij het verbeteren van onze kennis over schildpad gedrag. De betekenis van de methode met betrekking tot de KRMS TS-ML richtsnoeren22, is te wijten aan de harmonisatie in zeven landen en het aantal monsters waarop het is getest (n = 700). Het lichaam van het specimen niveau is gedefinieerd en mariene strooisel opgenomen categorieën zijn verlaagd volgens de voorlopige resultaten. Bovendien is dit de eerste keer dat representatieve resultaten zijn getoond en verbonden met de GES-drempels.
Het protocol is een efficiënt hulpmiddel voor onderzoekers om het effect van plastic op het mariene milieu, globaal of op lokale schaal, en voor het vergelijken van gestandaardiseerde gegevens met naburige landen te begrijpen. Dit resultaat kon niet vóór, wegens de discrepantie in gegevens tussen verschillende landen worden bereikt, die om het even welke ruimte vergelijking verhinderen.
Disclosures
De auteurs hebben niets te onthullen.
Acknowledgments
Auteurs zijn dankbaar voor de Franse Rescue Centres (Jean-Batiste Senegas), stranding netwerken (Jacques Sacchi) en veterinaire laboratoria (Joanne Belfort) en Jessiaca Martin en Marie Schram, walvisachtigen en zeeschildpadden stranding netwerk van de Valencia Gemeenschap, met inbegrip van de mariene zoölogie eenheid van het Cavanilles Instituut (Universiteit van Valencia) en de biodiversiteit dienst van de Generalitat Valencia, het Portugese regionale fonds voor wetenschap en technologie van de Azoren (Maria Vale), de Italiaanse redding Centra (Stazione Zoologica "Anton Dohrn" Napels en Sardinië CREs) de veterinaire laboratoria (IZSLT M. Aleandri Roma; IZSAM G. Corneillie Teramo; IZSS G. Pegreffi Otistano;. IZS CReTaM Palermo), leden van de INDICIT Advisory Board en de PO voor hun suggestie, en de milieuministeries en regionale overheden van de deelnemende landen voor hun steun.
Twee anonieme recensenten voor hun suggesties en opmerkingen.
Het huidige protocol is uitgevoerd door INDICIT consortium in het kader van het Europese DG-ENV project GA No. 11.0661/2016/748064/SUB/ENV. C2.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| For the recovery of the animal and the collection of samples at the discovery site | |||
| Boots | |||
| Bottle/ziploc bags | |||
| Camera | |||
| Cooler | |||
| Cut-resistant gloves | |||
| Garbage bag | |||
| Glasses and protective mask or shield | |||
| Gloves | |||
| Integral protective suit | |||
| Measuring tape | |||
| Observation sheet | |||
| Pen | |||
| Permanent marker | |||
| Rope (to marke-off the zone) | |||
| Transport bins or containers for the turtle | |||
| For the collection of samples on dead individuals in laboratory and the extraction of the ingested litter from the digestive tract | |||
| In the laboratory room | |||
| Cold chamber or chest freezers (-20°C) with large storage capacity | |||
| Garbage bags | |||
| Proofer (not mandatory) | |||
| For manipulators | |||
| Boots | |||
| Cut-resistant gloves | |||
| Glasses and protective mask or shield | |||
| Gloves | |||
| Integral protective suit | |||
| For notes and report | |||
| Camera | |||
| Observation sheet | |||
| Pen | |||
| Permanent marker | |||
| For biometric measurements | |||
| Measuring tape | |||
| Sliding calliper | |||
| For the necropsy and the collection of samples | |||
| Clamps (at least 6) and/or kistchen string or plastic cable clamps | |||
| Clips with claws | |||
| Containers for samples (Bottle/zipped bags) | |||
| Metal containers | |||
| Scalpel (possible with interchangeable blade) | |||
| Scissors | |||
| For the analysis of ingested litter | |||
| Binocular (optional) | |||
| Measuring cylinders (10 ml, 25 ml, 50 ml) | |||
| Measuring decimetre | |||
| Precision balance (0.01 g) | |||
| Sieve with 1 mm mesh | |||
| Sieve with 5 mm mesh (optional – for the study of the ingested micro-plastics (1-5 mm)) |
References
- UNEP. Marine plastic debris and microplastics – Global lessons and research to inspire action and guide policy change. , United Nations Environment Programme. Nairobi. (2016).
- COM2018028. Communication From The Commission To The European Parliament, The Council, The European Economic And Social Committee And The Committee Of The Regions A European Strategy For Plastics In A Circular Economy. , (2018).
- Jambeck, J. R., et al. Plastic waste inputs from land into the ocean. Science. 347, 768-771 (2015).
- Mansui, J., Molcard, A., Ourmieres, Y. Modelling the transport and accumulation of floating marine debris in the Mediterranean basin. Marine Pollution Bulletin. 91, 249-257 (2015).
- Law, K. L. Plastics in the Marine Environment. Annual Review Marine Science. 9, 205-229 (2017).
- Vince, J., Hardesty, B. D. Plastic pollution challenges in marine and coastal environments: from local to global governance. Restoration Ecology. 25 (1), 123-128 (2017).
- Bürgi, E. Sustainable Development in International Law Making and Trade: International Food Governance and Trade in Agriculture. , Edward Elgar Publishing. (2015).
- COMMISSION DECISION (EU). 2017/848 of 17 May 2017 laying down criteria and methodological standards on good environmental status of marine waters and specifications and standardized methods for monitoring and assessment, and repealing Decision 2010/477/EU. , (2017).
- Provencher, J. F., et al. Quantifying ingested debris in marine megafauna: a review and recommendations for standardization. Analytical Methods. 9, 1454 (2017).
- CBD - Secretariat of the Convention on Biological Diversity and the Scientific and Technical Advisory Panel—GEF. Impacts of Marine Debris on Biodiversity: Current Status and Potential Solutions, Montreal. , Technical Series No. 67 (2012).
- Kühn, S., Rebolledo, E. L. B., Van Franeker, J. A. Deleterious effects of litter on marine life. Marine Anthropogenic Litter. Bergmann, M., Gutow, L., Klages, M. , Springer. 75-116 (2015).
- Derraik, J. G. The pollution of the marine environment by plastic debris: a review. Marine Pollution Bulletin. 44, 842-852 (2002).
- Gall, S. C., Thompson, R. C. The impact of debris on marine life. Marine Pollution Bulletin. , (2015).
- Laist, D. W. Overview of the biological effects of lost and discarded plastic debris in the marine environment. Marine Pollution Bulletin. 18, 319-326 (1987).
- Fritts, T. H. Plastic bags in the intestinal tracts of leatherback marine turtles. Herpetological Review. 13, 72-73 (1982).
- Matiddi, M., et al. Loggerhead Sea Turtles (Caretta caretta): a Target Species for Monitoring Litter Ingested by Marine Organisms in the Mediterranean Sea. Environmental Pollution. 230, 199-209 (2017).
- van Franeker, J., et al. Monitoring plastic ingestion by the northern fulmar Fulmarus glacialis in the North Sea. Environmental Pollution. 159, 2609-2615 (2011).
- Lynch, J. M. Quantities of marine debris ingested by sea turtles: global meta-analysis highlights need for standardized data reporting methods and reveals relative risk. Environmental Science & Tecnology. 52 (21), 12026-12038 (2018).
- Provencher, J., et al. Quantifying ingested debris in marine megafauna: a review and recommendations for standardization. Analytical Methods. 9, 1454 (2017).
- Bonanno, G., Orlando-Bonaca, M. Perspectives on using marine species as bioindicators of plastic pollution. Marine Pollution Bulletin. 137, 209-221 (2018).
- Matiddi, M., van Franeker, J. A., Sammarini, V., Travaglini, A., Alcaro, L. Monitoring litter by sea turtles: an experimental protocol in the Mediterranean. Proceedings of the 4th Mediterranean Conference on Sea Turtles, , (2011).
- MSFD-TSGML. Guidance on monitoring of marine litter in European Seas. A guidance document within the common implementation strategy for the marine strategy framework directive. EUR-26113 EN. JRC Scientific and Policy Reports JRC83985. , http://mcc.jrc.ec.europa.eu/documents/201702074014.pdf (2013).
- Bolten, A. B. Research and Management Techniques for the Conservation of Sea Turtles. IUCN/SSC Marine Turtle Specialist Group Publication. Eckert, K. L., Bjorndal, K. A., Abreu-Grobois, F. A., Donnelly, M. , 4 (1999).
- Wyneken, J. The Anatomy of Sea Turtles. U.S. Department of Commerce NOAA Technical Memorandum NMFS SEFSC 470. , https://www.sefsc.noaa.gov/turtles/TM_470_Wyneken.pdf (2001).
- van Franeker, J. A., Meijboom, A. Litter NSV, Marine Litter Monitoring by Northern Fulmar; a Pilot Study. Alterra-rapport. 401, (2002).
- Domènech, F., Aznar, F. J., Raga, J. A., Tomás, J. Two decades of monitoring in marine debris ingestion in loggerhead sea turtle, Caretta caretta, from the western Mediterranean. Environmental Pollution. 244, 367-378 (2018).
- CITES-Convention on International Trade in Endangered Species of Wild Fauna and Flora. , Annex I (2019).
- Tomas, J., Guitart, R., Mateo, R., Raga, J. A. Marine debris ingestion in loggerhead sea turtles, Caretta caretta, from the Western Mediterranean. Marine Pollution Bulletin. 44, 211-216 (2002).
- Nelms, S. E., et al. Plastic and marine turtles: a review and call for research. ICES Journal of Marine Science. 73 (2), 165-181 (2015).
- Fukuoka, T., et al. The feeding habit of sea turtles influences their reaction to artificial marine debris. Scientific Reports. 6 (28015), (2016).
- Hoarau, L., Ainley, L., Jean, C., Ciccione, S. Ingestion and defecation of marine debris by loggerhead sea turtles, Caretta caretta, from by-catches in the South-West Indian Ocean. Marine Pollution Bulletin. 84, 90-96 (2014).
- Nicolau, L., Marçalo, A., Ferreira, M., Sa, S., Vingada, J., Eira, C. Ingestion of marine litter by loggerhead sea turtles, Caretta caretta, in Portuguese continental waters. Marine Pollution Bulletin. 103, 179-185 (2016).
- Pham, C. K., et al. Plastic ingestion in oceanic-stage loggerhead sea turtles (Caretta caretta) off the North Atlantic subtropical gyre. Marine Pollution Bulletin. 121, 22-229 (2017).
- Clukeya, K. E., et al. Investigation of plastic debris ingestion by four species of sea turtles collected as bycatch in pelagic Pacific longline fisheries. Marine Pollution Bullettin. 120 (1-2), 117-125 (2017).
- Wabnitz, C., Pauly, D. Length-weight relationship and additional growth parameters for sea turtles. Von Bertalanffy growth parameters of non-fish marine organisms. 16, Fisheries Centre, University of British Columbia. 92-101 (2008).
- Lutz, P. L., Musick, J. A. Foraging ecology and nutrition in sea turtles. The Biology of Sea Turtles. , CRC Press. Boca Raton. CRC Marine Science Series 199-231 (1997).
- McCauley, S. J., Bjorndal, K. A. Conservation implications of dietary dilution from debris ingestion: sublethal effects in post-hatchling loggerhead sea turtles. Conservation Biology. 13, 925-929 (1999).
- Campani, T., et al. Presence of plastic debris in loggerhead turtle stranded along the Tuscany coasts of the Pelagos sanctuary for mediterranean marine mammals (Italy). Marine Pollution Bulletin. 74, 1330-1334 (2013).
- Deudero, S., Alomar, C. Revising interactions of plastics with marine biota: evidence from the Mediterranean in CIESM 2014. Marine litter in the Mediterranean and Black Seas. Briand, F. , CIESM Workshop Monograph n 46 CIESM (2014).
- Fossi, C., et al. Bioindicators for monitoring marine litter ingestion and its impacts on Mediterranean biodiversity. Environmental Pollution. 237, 1023-1040 (2018).
- Mccauley, S., Bjorndal, K. A. Conservation Implications of Dietary Dilution from Debris Ingestion: Sublethal Effects in Post-Hatchling Loggerhead Sea Turtles. Conservation Biology. 13, 925-929 (1999).
- Casale, P., Freggi, D., Paduano, V., Oliverio, M. Biased and best approaches for assessing debris ingestion in sea turtles, with a case study in the Mediterranean. Marine Pollution Bulletin. 110 (1), 238-249 (2016).
- Hamann, M., et al. Global research priorities for sea turtles: informing management and conservation in the 21st century. Endangered Species Research. 11, 245-269 (2010).
- Schuyler, Q. A., et al. Risk analysis reveals global hotspots for marine debris ingestion by sea turtles. Global Change Biology. 22, 567-576 (2016).
- Camedda, A., et al. Interaction between loggerhead sea turtles (Caretta caretta) and marine litter in Sardinia (Western Mediterranean Sea). Marine Environmental Research. 100, 25-32 (2014).
