Summary
El protocolo se centra en la recolección de muestras de tortugas marinas, describiendo todos los pasos desde la recuperación animal y la necropsia hasta la clasificación y cuantificación de la basura marina ingerida. Además, los resultados representativos muestran cómo utilizar los datos recogidos para elaborar los posibles umbrales para el buen estado medioambiental.
Abstract
El siguiente protocolo tiene por objeto responder a los requisitos fijados por las directivas marco de la estrategia Marina de la Unión Europea (MSFD) para los criterios D10C3 notificados en la decisión de la Comisión (UE), relacionados con la cantidad de basura ingerida por los animales marinos. Se proporcionan metodologías estandarizadas para extraer artículos de basura ingeridos de tortugas marinas muertas junto con directrices sobre análisis de datos. El protocolo comienza con la recolección de tortugas marinas muertas y la clasificación de las muestras de acuerdo con el estado de descomposición. La necropsia de tortuga debe realizarse en centros autorizados y el protocolo descrito aquí explica el mejor procedimiento para el aislamiento del tracto gastrointestinal (GI). Las tres partes de la IG (esófago, estómago, intestino) se deben separar, abrir longitudinales y contenidos filtrados utilizando un tamiz de malla de 1 mm. El artículo describe la clasificación y cuantificación de la basura ingerida, clasificando los contenidos de IG en siete categorías diferentes de basura marina y dos categorías de restos naturales. La cantidad de basura ingerida debe ser reportada como masa seca total (peso en gramos, con dos decimales) y abundancia (número de ítems). El protocolo propone dos escenarios posibles para lograr el buen estado medioambiental (GES). En primer lugar: "debe haber menos del X% de las tortugas marinas que tienen Y g o más de plástico en la IG en muestras de 50-100 tortugas muertas de cada subregión", donde Y es el peso promedio de plástico ingerido y X% es el porcentaje de tortugas marinas con más peso (en gramos) de plástico que Y. El segundo, que considera que el alimento permanece en comparación con el plástico como un apoderado de la salud individual, es: "debe haber menos del X% de las tortugas marinas que tienen más peso de plástico (en gramos) que los alimentos que permanecen en la IG en muestras de 50-100 tortugas muertas de cada subregión".
Introduction
La basura marina es un tema complejo para abordar, ya que puede entrar en los océanos a través de múltiples fuentes y formas. Más del 80% de la camada que se encuentra en ambientes marinos se compone de plástico1. El papel de este material desde una perspectiva económica ha ido en aumento en los últimos 50 años. Como consecuencia, su producción también ha aumentado veinte veces desde 1960, alcanzando 335 millones toneladas en 2016. Se espera que este valor se duplicará durante los próximos 20 años2. Por otra parte, se ha calculado que alrededor de 5 a 13 millones toneladas de plástico terminan en los océanos cada año (que es igual a 1,5 para 4% de la producción mundial de plástico)2,3. El movimiento de plástico se ve influenciado por sus propiedades físicas (p. ej., flotabilidad) o variables ambientales (por ejemplo, mareas y corriente), y el plástico se puede acumular en todos los compartimentos marinos4,5. Para afrontar el problema del plástico, es importante tener en cuenta que, como muchas otras cuestiones medioambientales, es transfronteriza y, por lo tanto, las soluciones de gobernanza son complejas para cumplir6. Para alcanzar mejor este objetivo, debemos tener en cuenta los marcos regionales e internacionales, a fin de mejorar o mantener la concienciación y la protección del medio ambiente marino en todo el mundo7. El objetivo final de la Directiva marco sobre la estrategia Marina de la Unión Europea (MSFD) es lograr un buen estado medioambiental (GES) en las aguas europeas en 2020, proteger la biodiversidad marina y promover el uso sostenible de los ambientes marinos. Esto se hará a través de 11 descriptores cualitativos, de los cuales el descriptor 10 se centra en la basura marina y se define como "las propiedades y las cantidades de basura marina no causan daño a los ambientes costeros y marinos". Dentro de este descriptor, la decisión8 de la nueva Comisión decidió añadir los criterios D10C3-"la cantidad de basura y microarena ingerida por los animales marinos está en un nivel que no afecta negativamente a la salud de las especies en cuestión"-puesto que era considerados como criterios pertinentes en la evaluación de GES. Como resultado, se solicitó a los Estados miembros que elaboraran una lista de especies, que elaboraran normas metodológicas y definieran valores umbral a través de la cooperación regional o subregional.
Después de la primera publicación científica en 18389, en la tormenta-Petrel con un palo de vela ingerido, más de 500 especies marinas han sido enumeradas para la ingestión de basura marina10,11,12,13 ,14, y las tortugas marinas se encontraban entre los primeros taxones grabados para ingerir desechos plásticos15. Dada su propensión a ingerir camada, su amplia distribución y la amplia gama de hábitats utilizados durante su vida, las tortugas marinas, en particular la especie Caretta caretta (linneo 1758), fue elegida como un indicador potencial para el Cuenca mediterránea16, como el ave de mar Fulmarus glacialis (Linneo, 1761) para aguas del norte de Europa17. Incluso después de cinco décadas de investigación, la discusión de la estandarización de métodos ha sido muy limitada a18 y un enfoque cohesionado de la comunidad científica para cuantificar la ingestión de plástico por la vida silvestre carece de19. Se necesitan protocolos de muestreo estandarizados y métodos de detección analítica y métricas para evaluar la ingesta de plástico por parte de la biota Marina; un documento reciente mostró los posibles beneficios y limitaciones del uso de especies marinas como bioindicadores sobre la contaminación plástica20. Siguiendo la propuesta matiddi et al., en 201121 , de utilizar el "Boba" como bio-indicador, y el grupo técnico sobre el informe22sobre la basura marina, se ha desarrollado y probado un protocolo específico para considerar la basura marina ingerida por la tortuga de mar por diez socios en siete países del mar Mediterráneo y del océano Atlántico dentro del proyecto europeo INDICIT (GA n° 11.0661/2016/748064/SUB/ENV. C2). Este protocolo proporciona metodologías estandarizadas para el análisis de la basura marina ingerida por las tortugas marinas con el fin de respaldar la nueva decisión de la Comisión (UE)8, criterios D10C3, donde se solicitan valores de umbral. De acuerdo con la definición proporcionada por COM8, el valor umbral es un número o un rango que permite evaluar si se alcanzó el criterio de nivel de calidad, ayudando así a evaluar el GES. El protocolo propuesto para evaluar la camada ingerida por las tortugas marinas, será útil para reunir datos sobre la composición y la abundancia de basura y evaluar su impacto en los ambientes marinos. Además, la recopilación de este tipo de datos estandarizados ayudará a definir los valores de umbral. Aquí consideramos dos tipos de escenarios. El primer escenario tiene en cuenta el monitoreo de la basura de fulmar EcoQO, que se implementa para el área de OSPAR: "debe haber menos del X% de las tortugas marinas que tienen Y g o más de plástico en la IG en muestras de 50-100 tortugas muertas de cada subregión, donde Y es el averag e peso de plástico ingerido teniendo en cuenta todas las muestras y X% es el porcentaje de tortugas marinas con más peso (en gramos) de plástico que Y. El segundo tiene como objetivo considerar un apoderado del nivel de salud individual: "debe haber menos del X% de las tortugas marinas que tienen más peso de plástico (en gramos) que los alimentos que permanecen en la IG en muestras de 50-100 tortugas muertas de cada subregión", donde el peso de ingerido plástico se compara con los alimentos que quedan en cada individuo.
Protocol
Se propone recopilar una serie de parámetros "básicos" y "opcionales". Los parámetros básicos corresponden a los parámetros mínimos fundamentales para cumplir los criterios D10C3, mientras que los parámetros opcionales permiten adquirir más conocimiento sobre el comportamiento/biología de las tortugas marinas. Aquí se proporciona una hoja de datos de observación y una lista de materiales necesarios para el muestreo de personas en el campo y el análisis de la basura en el laboratorio con el fin de facilitar el registro de datos y el análisis estadístico siguiendo una tabla estandarizada. Las subcategorías de basura marina se eligen según la forma y el tipo de artículos. Los restos de comida de tortuga de mar y cualquier cosa natural que no sean alimentos (piedra, madera, pómez, etc.) se solicitan para considerar los umbrales y la dieta del animal. Todas las actividades experimentales de este protocolo se han llevado a cabo sobre las tortugas muertas de acuerdo con la ley de los países implicados y las normas internacionales. Todas las necropsias deben realizarse en los centros autorizados.
1. muestreo de la carcasa: Llene la hoja de observación (Apéndice 1 en archivos suplementarios 1 y 2)
- Rellene los datos de contacto, incluidos el nombre, el contacto (teléfono, correo) y la institución del observador (recopilador).
- Identificar la especie de la siguiente manera: CC (Caretta caretta, Linneo 1758); DC (Dermochelys coriacea, Vandelli 1761); Cm (Chelonia mydas, Linneo 1758); EI (Eretmochelys imbricata, linneo 1766); Lo (Lepidochelys olivacea, Eschscholtz 1829); LK (Lepidochelys kempii, garman 1880); ND (Natator depressus, garman 1880).
- Etiquetas: Si ya existe una etiqueta en el Flipper, especifique el número (N °. Indicar la presencia y el número de chips electrónicos. De lo contrario, NOTA NO.
- Especifique el código de identificación del animal. Por ejemplo: "dos letras para el país" _ "dos letras para la ubicación (por ejemplo, región o institución)" _ "YY" _ "MM" _ "DD" _ "número de chip".
- Anote la fecha de la detección (AA/MM/DD).
- Especifique la ubicación de la detección, que es el área de recuperación o las coordenadas en grados decimales.
- Informe del nivel de condición corporal del espécimen: 1 (vivo), 2 (recién muerto recientemente), 3 (parcialmente descompuesto-los órganos internos siguen en buenas condiciones), 4 (las escamas de piel descompuestas avanzadas se levantaron o se pierden), 5 (momificado-falta parte del esqueleto o parte del cuerpo). Vea la figura 1.
- Circunstancias de descubrimiento: tenga en cuenta las circunstancias entre las cuatro categorías: stranding (animal que se encuentra en la playa o en la costa); Captura/pesca (animal capturado activamente por los pescadores, por ejemplo, la ingestión de un anzuelo, atrapado en una red, traído de vuelta por los pescadores, etc.); Encuentra en el mar (animal descubierto en la superficie del mar); Muerto en el centro de recuperación (el animal llegó con vida, pero murió durante su recuperación).
Figura 1: nivel de condición corporal o estado de descomposición del espécimen. Por favor, haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
2. necropsia de tortugas marinas: mediciones biométricas y extracción de los contenidos del tracto gastrointestinal
- Organizar el transporte del animal al centro autorizado para la necropsia. En el caso de un animal extremadamente descompuesto, evalúe la integridad del tracto digestivo antes de su eliminación en el centro autorizado. Si la necropsia no se puede hacer inmediatamente después de la recuperación, congelar la carcasa a-20 ° c.
- Antes de la operación necropsia, registre las mediciones biométricas en la sección específica del archivo de recuperación. La longitud del caparazón curvado, muesca a la punta23, es obligatoria; las otras medidas son opcionales (p. ej., ancho de caparazón curvado, peso).
- Realizar un examen externo del cuerpo animal y reportar la información en la sección específica del expediente necropsia. También inspeccionar la cavidad bucal para la posible presencia de material extraño.
- Separe y quite el plastrón del caparazón haciendo una incisión a lo largo del borde como se resalta por la línea amarilla (figura 2A).
- Utilice una cuchilla corta o corte con una inclinación horizontal evitando dañar las partes interiores (figura 2 b-c). El acoplamiento del ligamento a la faja pectorales y pélvica debe ser cortado cuando el plastrón se separa del caparazón para que sea fácil de acceder y manejarlo.
- Exponga el tracto gastrointestinal (GI) eliminando los músculos pectorales y el corazón de la tortuga (Figura 2D).
- Opcional Evaluar el estado trófico cualitativamente evaluando la atrofia de los músculos pectorales (ninguno-moderado-severo) y el espesor de la grasa en las cavidades articulares y en la membrana Celómica (abundante-normal-baja-ninguno).
- Extraiga la indicación geográfica y colóquelo en la mesa de examen. Haga esto con dos operadores para facilitar las acciones. Mientras que un operador mantiene la carcasa puesta en un lado, la otra separa los ligamentos de los diferentes órganos y las membranas del caparazón usando pequeñas cuchillas o tijeras y elimina el GI del animal (figura 2F).
- Aísle el esófago, el estómago y el intestino con abrazaderas de plástico. Colóquelo en el esófago cerca de la boca, en la válvula esofágica, en la clavija y en las cloacae, lo más cerca posible del orificio anal según lo indicado por las flechas amarillas (figura 2F).
- Registre el sexo del animal cuando sea posible.
- Separar el esófago, el estómago y el intestino definitivamente colocando una segunda abrazadera (correspondiente al punto de corte) para evitar derrames del contenido.
- Abra la sección GI longitudinalmente usando una tijera (o los dedos cuando sea posible), y luego coloque directamente el material contenido en un tamiz de malla de 1 mm limpiando las paredes GI con agua corriente.
- Tome nota de cada anomalía en la IG (p. ej., úlceras, perforaciones, adherencias, inflamación).
- Inspeccione el contenido del tamiz para detectar eventualmente cualquier alquitrán, aceite o material frágil que deba eliminarse y tratarse por separado.
- Enjuague el contenido a través del tamiz con el fin de eliminar la porción líquida, moco y materia digerida no identificable.
- Repita la secuencia para cada porción de GI por separado.
- Congelar todo el material recogido por los tamices o almacenarlo en frascos que contengan una solución de alcohol del 70%.
Nota: para más detalles sobre la anatomía de la tortuga marina ver también Wyneken (2001)24.
Figura 2 : Secuencia de necropsia de tortuga. (a) vista ventral de una tortuga muerta. La línea amarilla indica la forma de cortar con el fin de separar el plastrón del resto de la tortuga. (b, c) Cortes horizontales para evitar que afecten a los órganos interiores. (d) vista ventral de la tortuga abierta. (e) extracción del tracto gastrointestinal. (f) vista de toda la indicación geográfica, las flechas amarillas indican dónde deben acoplarse las abrazaderas para separar las tres secciones geográficas diferentes. Por favor, haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
3. recopilación y análisis de datos: clasificación de basura marina
- Etiquete el código de muestra y la sección GI respectiva.
- Vacíe los frascos en un tamiz de malla de 1 mm, reuniendo todo el material.
- Vuelva a lavar el material recogido con agua para eliminar el alcohol y limpiar la camada.
- Separar la basura marina de los componentes orgánicos u otros materiales, identificando la categoría de la basura marina por análisis visual, ordenando el material en una placa de Petri, y sumergiéndose los artículos recogidos en las diferentes categorías.
- Rellene la hoja de datos con la información recopilada.
- Utilice el estereomicroscopio para echar un vistazo más de cerca a cualquier material no identificable.
- Secar la basura marina a temperatura ambiente o en un horno a 35 ° c durante 12 h.
- Secar la fracción orgánica en un horno a 35 ° c durante 12 h o en un secador.
- Informe el número y el peso seco de las diferentes categorías de basura marina.
- Informe el peso seco de la fracción orgánica subdividida en alimentos (s) y permanecen (s) naturales no alimentarios. La masa seca total (peso en gramos, exacta a la posición decimal 2ND ) es la principal información utilizada en el programa de monitoreo, seguida por el número de artículos (abundancia).
- Registre otra información como el color de los artículos, el volumen de la basura, las diferentes incidencias de la basura en el esófago, el estómago y el intestino, y la incidencia por categoría de camada, ya que esto es útil para la investigación y el análisis de impacto. Los datos brutos proporcionarán información variada para cada una de las secciones de la indicación geográfica; el contenido total de la basura marina dentro de las tres partes se contabilizará en los datos finales.
Representative Results
Este protocolo, derivado de la directriz22 de la msfd, ha sido co-construido y mejorado por más de 50 partes interesadas (biólogos de centros de rescate, redes de varado, veterinarios y laboratorios de investigación) de 7 países de todo el Mediterráneo y las costas del Atlántico europeo, propone una evaluación homogeneizada, factible y fácil de la ingestión de basura por las tortugas marinas. El protocolo ha sido probado en tortugas bobas, y la mayoría de las manipulaciones también son aplicables a otras especies de tortugas marinas. El primer resultado importante de este protocolo es la descripción de los elementos de basura marinos bajo siete categorías de acuerdo con sus características visuales (figura 3). Esta clasificación ha sido derivada del fulmar ecoqo17,25, y modificada según la experiencia de los autores en ecología de las tortugas marinas. La primera categoría, y por lo general la menos abundante, es el plástico industrial (IND Pla) compuesto por pellets y gránulos plásticos, generalmente de forma cilíndrica y redonda, pero también formas ovaladas o cubicas, raramente encontradas para ser ingeridos por la tortuga cabezona 16 , 26. la segunda categoría comprende los restos de materiales tipo hoja (use She), como bolsas plásticas, Láminas agrícolas o láminas de plástico. Aparecen en formas irregulares pero siempre delgadas y flexibles. La tercera categoría incluye cuerdas, filamentos y otros materiales como los restos de equipo de pesca fantasma por lo general hecho de nylon (uso THR). La cuarta categoría incluye todos los plásticos espumados (use FOA) como espuma de poliestireno o caucho blando espumado. La quinta categoría incluye fragmentos de artículos de plástico duro (use FRA). Los fragmentos son muy abundantes en el contenido de IG y se pueden encontrar en una variedad de diferentes colores. Se derivan de piezas rotas más grandes y son generalmente rígidas, con formas irregulares y bordes torcidos afilados. Cualquier otro elemento de plástico, incluyendo elásticos, caucho denso, piezas de globos y balas de pistola de aire blando, se clasifican como otro plástico de usuario (use POTH). Toda la basura marina no plástica, como colillas de cigarrillos, periódicos, basura y contaminantes duros, se incluyen en la última categoría de basura que no sea el plástico (otros), incluso si no se encuentran fácilmente en las tortugas marinas. Las otras dos categorías no clasificadas como basura marina son (i) restos de la dieta natural de la tortuga (foo) y (II) cualquier elemento natural, no reconocido como presa de la tortuga marina como la piedra, la madera o el pómez (NFO).
La figura 4 muestra un ejemplo de resultados representativos en la masa seca de las categorías de basura marinas, donde el plástico tipo lámina (use She) era la clase más abundante, y las bolsas plásticas o partes de ellas, eran los principales elementos ingeridos. Resultados similares se muestran en la figura 5 en términos del número de elementos (abundancia). El cuadro 1 muestra un ejemplo del análisis de masa seca en seis áreas diferentes, lo que resulta útil para establecer el valor umbral de acuerdo con los requisitos de la msfd de la Unión Europea. Estas esferas deben estar representadas, por ejemplo, por países o subregiones de la cuenca mediterránea. El promedio reportado se calcula utilizando todas las personas examinadas, incluidas las muestras sin la basura marina ingerida. Según nuestro ejemplo, el área 5 representaba la zona más clara de la cuenca mediterránea y los datos de esta área podrían utilizarse para establecer el valor umbral a alcanzar. Para esta área el primer escenario podría ser: "debe haber menos del 25% de las tortugas marinas que tienen 0,5 g o más de plástico en la ig en muestras de 50-100 tortugas marinas". El segundo escenario podría ser: "debe haber menos del 32% de las tortugas marinas que tienen más gramos de plástico que restos alimentarios (foo) en la indicación geográfica en muestras de 50-100 tortugas marinas".
Figura 3 : Ejemplos de categorías marinas de basura establecidas para el monitoreo de la ingestión de tortugas marinas. (a) IND Pla, (b) Use ella, (c) uso THR, (d) Use Foa, (e) Use FRA, (f) Use Poth, (g) Other, (h) foo. Por favor, haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Figura 4 : Resultados de ejemplo de pesos de basura marina ingeridos por tortugas marinas en las distintas categorías. Los valores de peso promedio se notifican en gramos de artículos por persona (± SE). Por favor, haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Figura 5 : Resultados de ejemplo para el número de categorías de basura marinas ingeridas por las tortugas marinas. Se notifica el número medio de artículos por persona (± SE). Por favor, haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
| campo | Tamaño de la muestra (n) | Valor medio ± SE para el peso seco del plástico ingerido (g) | Porcentaje de tortugas con más plástico que valor medio (%) | Porcentaje de tortugas con más plástico que alimentos permanecen (%) |
| 1 | 100 | 1.32 ± 0.03 | 27 | 64 |
| 2 | 100 | 1.61 ± 0.01 | 28 | 67 |
| 3 | 100 | 1.35 ± 0,02 | 26 | 62 |
| 4 | 95 | 0,73 ± 0,02 | 34 | 40 |
| 5 | 65 | 0,55 ± 0.03 | 25 | 32 |
| 6 | 50 | 0.90 ± 0.04 | 44 | 54 |
Tabla 1: ejemplo de resultados de diferentes áreas (por ejemplo, países, subregiones, etc.), utilizando masa seca de basura marina. Por favor haga clic aquí para descargar esta tabla como un archivo de Excel.
Archivos suplementarios 1. Por favor haga clic aquí para descargar este archivo.
Archivos complementarios 2. Por favor haga clic aquí para descargar este archivo.
Discussion
Este protocolo permite la evaluación de la abundancia total de basura marina, y la identificación de las principales categorías de basura ingeridos por las tortugas marinas. Es menos costoso en comparación con otros programas de monitoreo con actividades marítimas porque las tortugas marinas podrían ser recolectadas después de varar en la playa o ser recuperadas por los pescadores. La identificación de las categorías de basura marinas es fácil y rápida, ya que el límite inferior del tamaño del artículo es de 1 mm. Una limitación del protocolo es el uso de tortugas marinas teniendo en cuenta que las 7 especies de tortugas marinas figuran en el Apéndice I de la Convención sobre el comercio internacional de especies amenazadas de fauna silvestre y flora27; por lo tanto, sólo el personal autorizado puede manejar animales vivos y muertos o partes de ellos. El manejo y la recuperación de las tortugas deben ser reportados y coordinados con las autoridades correspondientes. Se deben tomar precauciones sanitarias al manipular animales salvajes muertos o vivos para minimizar los riesgos de zoonosis. Este protocolo ha sido probado en especies de bobas, pero es aplicable a todas las especies de tortugas. El análisis de datos debe llevarse a cabo por separado para cada especie. Las condiciones corporales del espécimen se consideran bajo cinco niveles, desde vivos hasta tortugas momificadas. El nivel 1 (Alive) se considera para una clasificación más detallada de la condición corporal de la muestra en caso de que la tortuga muriera en el centro de rescate después de la recuperación. El protocolo es aplicable a las personas muertas de los niveles 2 a 4, pero también a las personas que murieron después de la recuperación (circunstancias: muertas en el centro de recuperación). Los niveles 2 y 3 son adecuados para el protocolo, mientras que el nivel 4 permite medir datos biométricos y evaluar la presencia/ausencia de basura ingerida para la evaluación de la frecuencia de ocurrencia (FO%), y el porcentaje de tortugas con basura marina ingerida en el muestra completa. Los individuos de nivel 5, donde generalmente se ha perdido el contenido gastrointestinal no pueden ser considerados para la recolección y cuantificación de la ingestión de basura. Tomar fotos del animal antes de manipular, podría proporcionar información adicional sobre la muestra como la causa probable de muerte o lesiones principales y el entrelazamiento. Es importante incluir una barra de escala en las imágenes. Aunque a menudo las tortugas marinas tuvieran ganchos de pesca en su IG, los datos no tienen que incluirse en el análisis porque los ganchos de pesca en los que se capturan activamente a las víctimas de palanja no se consideran "basura marina". La presencia del gancho debe ser grabada en las notas. La recolección de datos debe realizarse por separado en cada parte de la IG (esófago, estómago, intestino), con el fin de evaluar el grado de tolerancia a la ingestión de basura marina teniendo en cuenta la obstrucción GI o la capacidad de eliminarlo a través de la defecación, como se demostró en estudios anteriores16,28,29,30,31,32. Un paso crítico del Protocolo se puede encontrar en la colección del número de elementos. Varias piezas podrían derivarse de la fragmentación del mismo objeto dentro de la IG o como consecuencia de una ingestión separada. La interpretación subjetiva de un solo elemento o de varias piezas separadas podría corresponder a un sesgo potencial en el número de grabación (figura 6). Por esta razón, los valores de umbral se han elaborado utilizando sólo datos de masas de basura marina ingeridos, como el fulmar ecoqo17,25.
Figura 6 : La fragmentación de los elementos individuales podría ocurrir antes de la ingestión o durante el proceso de alimentación, produciendo sesgo en el conteo. Por favor, haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
El protocolo requiere la categorización de diferentes artículos de plástico según sus formas (USE SHE, USE THR). Esta subdivisión es útil para identificar la fuente de la basura marina con una lista de artículos según su abundancia. Proporciona a los formuladores de políticas en sus programas de medidas, proporcionando pruebas rápidas de su eficiencia en la focalización de los artículos mediante la evaluación de su fuerza. Por ejemplo, la prohibición de las bolsas plásticas en los mercados debe corresponder a una reducción de la categoría USE SHE ingerida (figura 4, figura 5) en muestras de tortugas marinas recogidas en el futuro. La aplicación de este protocolo permitirá a los Estados miembros de la UE responder a los requisitos de la MSFD, evaluar sus propias líneas de base y definir los valores de umbral en los que se logra GES. Los umbrales se deben determinar en las áreas prístinas o próximas a las vírgenes. Debido a la ubicuidad del plástico en el medio marino, no existe una zona prístina. De acuerdo con los datos de ejemplo (cuadro 1), el área 5, era la zona más clara y podía representar el valor (Y) a alcanzar para la cuenca mediterránea. Los Estados miembros deben decidir umbrales de acuerdo con la reducción significativa de su propia distancia de este valor. Según una revisión reciente18, las unidades de ingestión de basura marina deben normalizarse al tamaño de la tortuga, especialmente si el objetivo es comparar diferentes clases de edad. Sin embargo, una relación entre la masa de la basura ingerida y el tamaño de las tortugas ha sido detectada por diferentes autores con valores positivos, negativos o cero16,26,32,33, 34. Nuestro protocolo no incluye el tamaño de los animales en el primer escenario, pero podría ser posible estimar la carga corporal, evaluando la masa de la tortuga usando la longitud del caparazón curvado (CCL)35 y utilizar la relación de peso del peso plástico de la tortuga en lugar de sólo gramos de plástico ingerido (Y). En cualquier caso, sugerimos verificar las posibles diferencias significativas antes de fusionar las tortugas de etapa oceánica con las nerítica o los juveniles tempranos con adultos, con el fin de estratificar mejor las muestras16,26. El segundo escenario está más relacionado con el estado de salud individual y podría responder mejor a los criterios D10C3: "la cantidad de basura y la microcamada ingerida por los animales marinos está en un nivel que no afecta negativamente a la salud de la especie preocupados ". De hecho, el impacto de los elementos plásticos ingeridos se compone con mayor frecuencia en los efectos sub-letales en lugar de los letales28,36,37,38,39. También raramente encontramos una oclusión o una perforación debido a la ingestión de plástico, que podría causar la muerte de las tortugas. Los efectos sub-letales no son fáciles de detectar y se distinguen de los impactos debidos a otros contaminantes40. La dilución dietética o la asimilación de contaminantes ocurre cuando la basura Marina está dentro del GI de la tortuga41. Por lo tanto la muestra con más gramos de plástico que restos de comida podría indicar un animal en una condición de salud muy mala. Con el fin de permanecer en línea con el fulmar ecoqo17,25 utilizado por los países del norte de Europa, ambos escenarios consideran el peso plástico en lugar del peso de la basura marina.
Por último, es importante aclarar las diferencias entre (i) el análisis de la ingestión de plástico en las tortugas marinas como indicador del impacto en la población con consecuencias para la conservación de la población y (II) el análisis de la ingestión de plástico en las tortugas marinas como Bio-indicador de impacto en el entorno costero y marino20,40. Para entender las implicaciones de este impacto en la conservación de la población de tortugas, se necesita más información y es necesaria una mejor estratificación de los datos42. Al confrontar la opinión de 35 especialistas de 13 naciones, que son expertos en biología y conservación de tortugas marinas, es evidente que las tortugas marinas han sido ampliamente estudiadas a lo largo de los años, aunque todavía es necesario investigar las interacciones con los seres humanos actividades y, por tanto, evaluar el estado de la población y las amenazas potenciales43.
Esto significa que un único protocolo no puede ser considerado como exhaustivo para todos los temas y más estudios son necesarios para entender el impacto del plástico a nivel de la población.
Incluso el plástico duro podría ser considerado para causar un bajo nivel de daño a las tortugas marinas, con respecto a la captura o destrucción del hábitat, su reducción ha sido desafiante en los últimos años y los métodos rápidos de medición deben ser elaborados. Hay una controversia en el uso de tortugas varadas para fines de monitoreo porque, según algunos autores, no son representativos de toda la población40, mientras que otros han declarado que las tortugas varados no representan un sesgo de la Marina tasas de ingestión de basura en la población de fondo44. Además, en muchos países no hay una red o sistema bien organizado que vincule los centros de rescate con los pescadores y hay una falta de información sobre las capturas por captura y la mortalidad posterior a la liberación por parte de la pesca. Por lo tanto, las muestras varadas no siempre pueden considerarse como tortugas enfermas sin un comportamiento normal de alimentación durante un período de tiempo antes de morir y llegar a la playa; muchos de ellos son tortugas de "muerte en el mar" lavadas en tierra y generalmente se utilizan como muestras en las actividades de monitoreo26,32,38,45. Creemos que las muestras varadas son útiles para proporcionar información sobre el nivel de abundancia de basura marina en el medio ambiente y sugerimos excluir sólo las tortugas con el tracto gastrointestinal completamente vacío de este análisis, ya que podrían estar enfermos de un largo tiempo antes de la muerte. El uso de este protocolo permitiría evaluar el estado medioambiental y la disponibilidad de basura marina para los organismos marinos. También podría ser útil para mejorar nuestro conocimiento sobre el comportamiento de las tortugas. La importancia del método con respecto a las directrices del MSFD TS-ML22, se debe a la armonización en siete países y al número de muestras en las que ha sido probada (n = 700). Se ha definido el nivel de condición corporal del espécimen y se han reducido las categorías de basura marina en función de los resultados preliminares. Además, esta es la primera vez que se han mostrado los resultados representativos y se han conectado a los umbrales de GES.
El protocolo es una herramienta eficaz para que los investigadores comprendan el impacto del plástico en el medio marino, globalmente o a escala local, y para comparar datos estandarizados con los países vecinos. Este resultado no se pudo alcanzar antes, debido a las discrepancias en los datos entre los diferentes países, evitando cualquier comparación espacial.
Disclosures
Los autores no tienen nada que revelar.
Acknowledgments
Los autores están agradecidos a los centros de rescate franceses (Jean-Batiste Senegas), las redes de varitas (Jacques Sacchi) y los Laboratorios veterinarios (Joanne Belfort) y Jessiaca Martin y Marie Sabatte, la red de cetáceos y tortugas marinas de la Comunidad Valenciana Comunidad, incluyendo la unidad de Zoología Marina del Instituto Cavanilles (Universidad de Valencia) y el servicio de biodiversidad de la Generalitat Valenciana, el fondo regional Portugués para la ciencia y la tecnología de las Azores (Maria vale), el rescate italiano Centros (Stazione ZOOLOGICA "Anton Dohrn" Nápoles y sardo CREs) los Laboratorios veterinarios (IZSLT M. Aleandri Roma; IZSAM G. Caporale Teramo; IZSS G. Pegreffi Otistano;. IZS CReTaM Palermo), miembros de la Junta Asesora de INDICIT y el PO por su sugerencia, y los ministerios de medio ambiente y los gobiernos regionales de los países participantes por su apoyo.
Dos revisores anónimos para sus sugerencias y comentarios.
El presente Protocolo ha sido realizado por el consorcio INDICIT en el marco del proyecto europeo DG-ENV GA Nº 11.0661/2016/748064/SUB/ENV. C2.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| For the recovery of the animal and the collection of samples at the discovery site | |||
| Boots | |||
| Bottle/ziploc bags | |||
| Camera | |||
| Cooler | |||
| Cut-resistant gloves | |||
| Garbage bag | |||
| Glasses and protective mask or shield | |||
| Gloves | |||
| Integral protective suit | |||
| Measuring tape | |||
| Observation sheet | |||
| Pen | |||
| Permanent marker | |||
| Rope (to marke-off the zone) | |||
| Transport bins or containers for the turtle | |||
| For the collection of samples on dead individuals in laboratory and the extraction of the ingested litter from the digestive tract | |||
| In the laboratory room | |||
| Cold chamber or chest freezers (-20°C) with large storage capacity | |||
| Garbage bags | |||
| Proofer (not mandatory) | |||
| For manipulators | |||
| Boots | |||
| Cut-resistant gloves | |||
| Glasses and protective mask or shield | |||
| Gloves | |||
| Integral protective suit | |||
| For notes and report | |||
| Camera | |||
| Observation sheet | |||
| Pen | |||
| Permanent marker | |||
| For biometric measurements | |||
| Measuring tape | |||
| Sliding calliper | |||
| For the necropsy and the collection of samples | |||
| Clamps (at least 6) and/or kistchen string or plastic cable clamps | |||
| Clips with claws | |||
| Containers for samples (Bottle/zipped bags) | |||
| Metal containers | |||
| Scalpel (possible with interchangeable blade) | |||
| Scissors | |||
| For the analysis of ingested litter | |||
| Binocular (optional) | |||
| Measuring cylinders (10 ml, 25 ml, 50 ml) | |||
| Measuring decimetre | |||
| Precision balance (0.01 g) | |||
| Sieve with 1 mm mesh | |||
| Sieve with 5 mm mesh (optional – for the study of the ingested micro-plastics (1-5 mm)) |
References
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