Summary
Descriviamo l'uso di ultrasuoni ad alta frequenza con imaging a contrasto come un metodo per misurare il volume della vescica, lo spessore della parete della vescica, la velocità delle urine, il volume del vuoto, la durata del vuoto e il diametro uretrale. Questa strategia può essere utilizzata per valutare la disfunzione di vuoto e l'efficacia del trattamento in vari modelli murini di disfunzione del tratto urinario inferiore (LUTD).
Abstract
L'incidenza di iperplasia prostatica benigna clinica (BPH) e sintomi del tratto urinario più bassi (LUTS) sta aumentando a causa dell'invecchiamento della popolazione, con conseguente significativo carico economico e di qualità della vita. Sono stati sviluppati modelli murini transgenici e di altro genere per ricreare vari aspetti di questa malattia multifattoriale; tuttavia, mancano metodi per quanticare con precisione la disfunzione urinaria e l'efficacia delle nuove opzioni terapeutiche. Qui, descriviamo un metodo che può essere utilizzato per misurare il volume della vescica e lo spessore della parete detrustore, la velocità urinaria, il volume del vuoto e la durata del vuoto e il diametro uretrale. Ciò consentirebbe la valutazione della progressione della malattia e dell'efficacia del trattamento nel tempo. I topi erano anestesizzati con isoflurane, e la vescica è stata visualizzata dagli ultrasuoni. Per l'imaging non a contrasto, è stata scattata un'immagine 3D della vescica per calcolare il volume e valutare la forma; lo spessore della parete della vescica è stato misurato da questa immagine. Per l'imaging a differenza di contrasto, un catetere è stato posizionato attraverso la cupola della vescica utilizzando un ago calibro 27 collegato a una siringa da tubi PE50. Un bolo di 0,5 mL di contrasto è stato infuso nella vescica fino a quando non si è verificato un evento di minzione. Il diametro uretrale è stato determinato nel punto della finestra campione di velocità Doppler durante il primo evento di annullamento. La velocità è stata misurata per ogni evento successivo che produce una portata. In conclusione, gli ultrasuoni ad alta frequenza si sono rivelati un metodo efficace per valutare le misurazioni della vescica e dell'uretra durante la funzione urinaria nei topi. Questa tecnica può essere utile nella valutazione di nuove terapie per BPH/LUTS in un ambiente sperimentale.
Introduction
L'iperplasia prostatica benigna (BPH) è una malattia che si sviluppa negli uomini con l'età e colpisce quasi il 90% degli uomini sopra gli 80 anni di età1,2. Anche se lo sviluppo di BPH è generalmente associato con l'invecchiamento, altri fattori tra cui l'obesità e la sindrome metabolica possono portare alla BPH negli uomini relativamente più giovani3,4. Molte persone con BPH sviluppano sintomi del tratto urinario inferiore (LUTS) che diminuiscono significativamente la loro qualità di vita, e alcune complicazioni di esperienza che possono includere sanguinamento, infezione, ostruzione della vescica (BOO), calcoli della vescica, e insufficienza renale. Il costo del trattamento per BPH supera i 4 miliardi di dollari all'anno5,6,7. La diagnosi di LUTS causata da BPH si basa generalmente sull'uso del punteggio dell'indice dei sintomi AUA (AUASI), dell'uroflowmetria e della valutazione della dimensione della prostata8. L'eziologia di BPH/LUTS è complessa e multifattoriale, e lo sviluppo e la progressione della malattia sono stati associati con l'iperplasia prostatica (proliferazione della prostata), la contrattilità muscolare liscia e la fibrosi. I trattamenti attuali includono l'uso di bloccanti di z-adrenergici per regolare il tono muscolare liscio all'interno della vescica e della prostata per alleviare gli inibitori di LUTS e/o 5-riduttivi per diminuire il metabolismo degli androgeni e diminuire la dimensione della prostata. Migliori modelli di malattia, murino e altro, per consentire lo studio accurato degli effetti dei vari fattori causali e terapeutici in questo processo di malattia nel tempo è altamente auspicabile9.
I modelli di roditore sono stati ampiamente utilizzati per studiare l'urodinamica; tuttavia, la maggior parte degli studi si concentra sulla minzione femminile e sulla malattia10. Al fine di esaminare completamente tutti gli aspetti del LUTS maschile, sono stati sviluppati e utilizzati modelli di roditori per studiare diversi aspetti della BPH, tra cui cambiamenti nella proliferazione cellulare, funzione muscolare liscia, deposizione di collagene e infiammazione11, 12 mila , 13 del sistema , 14.Tuttavia, l'anatomia dei roditori e della prostata umana differiscono. Mentre la prostata umana è compatta e racchiusa da uno strato fibromuscolare condensato, la prostata del roditore è lobulare; e queste differenze complicano il confronto diretto della progressione della malattia e dell'efficacia del trattamento. Inoltre, LUTS sono difficili da valutare nei topi, dal momento che non è possibile misurare direttamente il fastidio. Invece, gli attuali metodi per studiare la malattia correlano le caratteristiche istologiche con caratteristiche fisiologiche (ad esempio, il volume della vescica e lo spessore della parete con uroflowmetria, saggi macchia vuota e dati endpoint di cistometria) che confrontano il livello di urinaria disfunzione tra modello BPH e animali di controllo12,15,16,17,18. Le caratteristiche fisiologiche sono spesso valutate come endpoint di necropsia post-mortem, e c'è un'incapacità all'interno dello stesso animale di osservare BOO nel tempo. Recentemente, abbiamo identificato una suddivisione dell'uretra pelvica (l'uretra prostatica) dove gli impianti ormonali esogeni causano un restringimento basato sulle valutazioni di necrosa post-mortem12. I metodi attuali non consentono la valutazione diretta, in vivo, del restringimento uretrale durante l'annullamento.
L'ecografia è una tecnica diagnostica e di valutazione non invasiva che è stata utilizzata con successo in altri modelli di malattia. Viene utilizzato per quantificare il volume degli organi e valutare il flusso vascolare19,20,21. L'ecografia viene utilizzata anche per visualizzare e guidare le microiniezioni, consentendo iniezioni mirate di cellule staminali o altri farmaci, e per valutare la funzione cardiaca sistolica e diastolica.
Questo protocollo descrive l'uso di ultrasuoni ad alta frequenza per valutare l'anatomia del tratto urinario inferiore e valutare la fisiologia urinaria nei topi anestesizzati. Descriviamo l'uso di ultrasuoni per misurare il volume della vescica e lo spessore della parete. Descriviamo anche l'uso di ultrasuoni a contrasto migliorato per misurare la velocità delle urine, il volume delle urine, la durata del vuoto e il diametro dell'uretra. L'uso degli ultrasuoni fornisce una comprensione più completa del tratto urinario inferiore in vivo, determina come la malattia altera la normale funzione di svuotamento e ci fornisce gli strumenti per valutare meglio l'efficacia delle nuove opzioni terapeutiche. Attualmente, il protocollo di imaging non a contrasto non è terminale, mentre l'attuale protocollo di imaging a contrasto avanzato è una procedura terminale.
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Protocol
Le procedure che coinvolgono soggetti animali sono state approvate dall'Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) dell'Università del Wisconsin – Madison.
1. Preparazione degli animali
- Posizionare un topo maschio C57Bl6/J di 24 mesi in una camera precaricata con 3-5% di isoflurane fino a quando il riflesso di raddrico è perso e la frequenza respiratoria rallenta.
- Se necessario, utilizzare i tagliacapelli per radere i capelli addominali dall'animale per la chirurgia e/o l'imaging. Rimuovere tutti i capelli rimanenti con una crema depilatoria.
- Posizionare il topo in posizione supina in un cono naso con 2% isoflurane su una piattaforma riscaldata per mantenere l'anestesia. Confermare la profondità dell'anestesia per perdita di movimento da parte dell'animale in risposta a un riflesso di ritiro del pedale (Figura 1B).
2. Set-up ad ultrasuoni
- Collegare una sonda MV707 con frequenza centrale di 30 MHz alla porta attiva, con l'applicazione preimpostata su "imaging addominale" (Figura 1A).
- Posizionare la sonda ad ultrasuoni parallelamente all'asse lungo della vescica (Figura 1C).
- Le immagini dell'asse lungo e corto della vescica, della prostata e dell'uretra sono realizzate in modalità B (Figura 1D).
- Utilizzare i micromanici "xy" per spostare il mouse.
3. Protocollo di imaging non a contrasto
- Misurare lo spessore della parete della vescica utilizzando lo strumento di misurazione della distanza lineare e tracciando il bordo esterno fino al bordo interno della parete della vescica b-mode dopo l'acquisizione.
- Misurare il volume 3D della vescica con lo strumento volumetrico sull'acquisizione della modalità 3D tracciando l'interno delle pareti della vescica per creare un contorno. Contorni multipli vengono quindi generati attraverso lo spessore della vescica per calcolare il volume.
4. Sospensione/attivazione del contrasto microbolle
- Attivare l'agente di contrasto (ad esempio, DEFINITY) agitando nel mixer vortice per 45 s per incapsulare le microbolle in soluzione. Questo passaggio è fondamentale per un miglioramento ottimale del contrasto.
5. Inserimento catetere
- Con il topo anestetizzato e registrato alla piattaforma riscaldata, esporre la vescica con un'incisione media naformie affilate/smussate attraverso la pelle e la parete addominale.
- Inserire nella vescica un ago calibro 27 collegato a una siringa con tubi flessibili in polietilene (PE 50). Precompilare il tubo con salina per garantire che nessuna bolla d'aria venga iniettata nella vescica.
6. Protocollo di imaging con contrasto avanzato
- Per confermare il posizionamento dell'ago, instillare 10 - L di salina nella vescica mentre viene osservato tramite ultrasuoni.
- Sostituire la siringa salina con una siringa contenente il contrasto per migliorare la visualizzazione delle pareti uretrali e gli eventi di annullamento, perché l'uretra è normalmente collassata. Una volta ottenuta una vista completa dell'asse lungo dell'uretra e salvato un'immagine, ruotare la sonda di 90 gradi per ottenere una vista breve dell'asse e un'immagine in modalità M.
- Instillare un bolo di microbolle a 0,5 mL per 3 s nella vescica fino a quando non si verifica un evento di minzione.
- Durante il primo evento di annullamento, misurare il diametro uretrale nel punto della finestra del campione di velocità Doppler utilizzando lo strumento distanza lineare e la misurazione da bordo a bordo.
- Con l'uretra correttamente posizionata, inclinare la sonda in relazione all'uretra per diventare più parallela al flusso di urina.
- Instillare un secondo bolo di microbolle nella vescica e misurare la velocità degli eventi utilizzando lo strumento VTI (Velocity Time Integral).
- Dopo la raccolta dei dati, eutanasia il topo con dislocazione cervicale.
7. Calcolo e analisi dei dati
- Selezionare lo strumento VTI per misurare la velocità tracciando le immagini registrate.
- Misurare il diametro dell'uretra dall'immagine in modalità B o in modalità M utilizzando la convenzione del bordo iniziale al bordo iniziale.
- Calcolare l'area della sezione trasversale (CSA) utilizzando la seguente formula (CSA) utilizzando le misurazioni dell'immagine ottenute sopra.
- Calcolare il volume vuoto utilizzando la CSA dell'uretra e moltiplicandolo per l'area sotto la traccia Doppler (velocity time integral)(CSA x VTI - volume).
- Calcolare l'effettivo volume di urina nulla supponendo un grammo per centimetro di metri cubi di densità.
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Representative Results
Gli ultrasuoni possono essere utilizzati con o senza miglioramento del contrasto a seconda del progetto sperimentale e della misurazione dell'endpoint. I topi sono anestesizzati con isoflurane e rasati e tutte le tracce di capelli rimossi con una crema depilatoria. Gli animali anestesizzati sono collocati su una piattaforma riscaldata con la sonda ad ultrasuoni posizionata lungo il lungo asse della vescica (Figura 1).
Figura 2 mostra immagini ad ultrasuoni rappresentativi di una vescica del topo acquisita senza agente di contrasto. La parete della vescica è iperecoica (bianca), e lo spessore della parete della vescica viene misurato utilizzando un pacchetto di misurazione software. Una proiezione di superficie della vescica può essere resa per determinare il volume della vescica, lo spessore della parete e il volume della parete (Tabella 1).
Per l'imaging della vescica migliorata dal contrasto e sul tratto urinario inferiore, un catetere deve essere inserito nella vescica e nelle microbolle iniettate. È importante attivare le microbolle per protocollo del produttore per un'imaging ottimale. Figura 3 Mostra un'immagine rappresentativa di una vescica piena di microbolle. La vescica è iperecoica (appare bianca nell'immagine). Una raffica ultrasonica a bassa frequenza distrugge le bolle e la vescica diventa transitoriamente ipoecoica (appare nera), prima della riforma delle bolle, confermando questa struttura come la vescica. Durante l'impulso di distruzione, la potenza di trasmissione va al 100% e la frequenza di trasmissione scende a 10 MHz. Un bolo di microbolle (0,5 mL per 3 s) attiva un evento di annullamento e consente di visualizzare l'uretra. L'uretra è confermata applicando una raffica ultrasonica a bassa frequenza durante l'evento di minzione e osservando la distruzione e la riforma delle microbolle. Durante l'evento di minzione è possibile effettuare diverse misurazioni. Il diametro del lume uretrale può essere acquisito prima e dopo la minzione insieme alla velocità di flusso dell'urina che passa attraverso quella regione dell'uretra e al deflusso totale (Figura 4). Utilizzando l'imaging a contrasto, le misurazioni sono state effettuate per tutta la lunghezza dell'uretra (Tabella 2). Da queste misurazioni vengono effettuati ulteriori calcoli per esaminare il flusso urinario e la conformità della vescica (Tabella 3).
Figura 1 . Configurazione ad ultrasuoni. (A) Configurazione complessiva della vista. (B) Posizionamento del mouse sulla piattaforma. (C) La vescica è esposta e cateterizzata con la sonda ad ultrasuoni allineata per l'imaging della vescica a lungo asse. (D) Gel ad ultrasuoni e sonda posto sulla vescica esposta e cateterizzata per un asse lungo e corto per l'imaging. Fare clic qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Figura 2 . Immagine senza contrasto della vescica del topo. (A) Immagine della vescica del topo senza microbolle. (B) Misure dello spessore della parete della vescica dall'immagine della vescica b-mode. (C) Ricostruzione 3D della vescica del topo. (D) Superficie e forma estrapolate dall'immagine 3D per un'ulteriore analisi. Fare clic qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Figura 3 . Acquisizione migliorata del contrasto della vescica e dell'uretra del mouse. (A) Vescica piena con microbolle. (B) Vescica piena con microbolle dopo l'evento di distruzione. (C) Uretra del topo con microbolle. (D) Uretra del mouse con microbolle dopo l'evento di distruzione. Uretra delineato in rosso. Fare clic qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
Figura 4 . Misure prese dall'uretra del topo. (A) Diari del lume urethral misurati durante un evento urinario. (B) Velocità del flusso urinario attraverso l'uretra del pene durante lo svuotamento. Fare clic qui per visualizzare una versione più grande di questa figura.
| processo | Volume della vescica (mm3) | Spessore della parete della vescica (mm) | Volume della parete della vescica (mm3) |
| 164 | 47.44 | 0.82 | 12.14 |
| 166 | 87.54 | 0.83 | 29.84 |
| 167 | 100.94 | 0.58 | 51.53 |
| 163 | 152.12 | 0.7 | 74.61 |
| 165 | 116.39 | 0.61 | 59.28 |
Tabella 1. Misurazioni ecografiche non invasive della vescica. Volume della vescica e spessore della parete della vescica misurato dagli ultrasuoni.
| Tipo di misura | Immagine obbligatoria | posizione | misura |
| Volume della vescica (mm3) | Modalità 3D della vescica | vescica | 335 |
| Spessore della parete della vescica (mm) | Modalità B della vescica | Distale al collo della vescica Prossimato al collo della vescica |
0.25 0.23 |
| Diametro uretra (mm) | Modalità B Urethra | Collo della vescica Uretra prostatica Uretra membranosa Uretra del Penile |
0.83 0.33 0.5 0.25 |
| Ora dell'evento urinario (ms) | Modalità Urethra PW | Collo della vescica Uretra prostatica Uretra membranosa Uretra del Penile |
3960 3740 3530 4490 |
| Tempo di accelerazione (ms) | Modalità Urethra PW | Collo della vescica Uretra prostatica Uretra membranosa Uretra del Penile |
580 440 240 180 |
| Accelerazione (mm/s2) | Modalità Urethra PW | Collo della vescica Uretra prostatica Uretra membranosa Uretra del Penile |
1218.08 3685.76 3054.79 11031.4 |
| Tempo di velocità integrale (cm) | Modalità Urethra PW | Collo della vescica Uretra prostatica Uretra membranosa Uretra del Penile |
184.2 490.48 157.55 676.93 |
| Velocità media (mm/s) | Modalità Urethra PW | Collo della vescica Uretra prostatica Uretra membranosa Uretra del Penile |
494.09 1256.82 467.04 1565 |
| Velocità di picco (mm/s) | Modalità Urethra PW | Collo della vescica Uretra prostatica Uretra membranosa Uretra del Penile |
780.74 1655.85 820.97 2190.94 |
| Sfumatura media (mmHg) | Modalità Urethra PW | Collo della vescica Uretra prostatica Uretra membranosa Uretra del Penile |
0.98 6.32 0.87 9.8 |
| Sfumatura di picco (mmHg) | Modalità Urethra PW | Collo della vescica Uretra prostatica Uretra membranosa Uretra del Penile |
2.44 10.97 2.7 19.2 |
| - Misure acquisite durante l'evento urinario |
Tabella 2. Misurazioni ad ultrasuoni della vescica e dell'uretra. Misurazioni della vescica e dell'uretra effettuate dagli ultrasuoni durante i vuoti urinari.
| Tipo di calcolo | formula |
| Area sezionale trasversale (mm2) | CSA -2 |
| Velocità di flusso (mm3/s) | Velocità di flusso : VELOCITÀ media CSA x |
| Volume vuoto stimato (mL) | V - (Velocità di flusso/1000) x (Tempo evento in secondi) |
| Allungamento volumetrico | Allungamento (Vdopo-Vprimadel )/Vprima |
Tabella 3. Calcoli con misurazioni a ultrasuoni. Calcoli e formule applicabili alle misurazioni ecografiche per valutare la funzione della vescica e il flusso urinario.
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Discussion
Le tecniche attuali per valutare il tratto urinario inferiore dei roditori sono limitate dalla loro capacità di correlare direttamente i cambiamenti nella fisiologia di voiding con cambiamenti nell'istologia prostatica conseguente alla progressione della malattia. I saggi spot void e l'uroflowmetry possono essere utilizzati per valutare gli eventi di minzione spontanea nei roditori, e queste tecniche possono essere utilizzate per valutare i cambiamenti in un periodo di tempo15,16,17. Tuttavia, per entrambe le tecniche, la pienezza della vescica non può essere valutata prima dell'inizio del test. Inoltre, i cambiamenti nella minzione possono verificarsi a causa del comportamento piuttosto che di un risultato diretto della progressione della malattia, rendendo difficile determinare l'impatto della malattia sulla minzione. La cistometria, un'altra tecnica per valutare la disfunzione della vescica nei roditori, può fornire una valutazione in vivo della funzione vescica16. Tuttavia, l'effetto dinamico della prostata del roditore sulla funzione di annullamento non è chiaro. Studi precedenti hanno documentato i cambiamenti istologici uretrali dei topi nei topi associati alla funzione di svuotamento modificata12. Tuttavia, questi studi possono guardare solo un punto temporale discreto, e vescica, prostata, e anatomia uretrale non sono valutati allo stesso tempo come test funzionale. Altri metodi di valutazione dei cambiamenti all'interno della vescica (cioè massa, volume) si verificano al momento dell'eutanasia11,12, rendendo impossibile osservare l'evoluzione di un processo di malattia nel tempo. Poiché c'è il rischio di minzione al momento del sacrificio e l'incapacità di regolare l'assunzione di acqua prima del sacrificio, la variabilità del volume della vescica misurato aumenta anche all'interno di gruppi di trattamento. Questo documento descrive l'uso degli ultrasuoni per immaginare il tratto urinario inferiore dei topi con o senza un agente di contrasto. Questa tecnologia consente la visualizzazione dei cambiamenti nelle dimensioni della vescica in un animale intatto, nonché la valutazione dei cambiamenti funzionali del volume della vescica, dello spessore della parete della vescica, del diametro del lumen uretrale e della velocità di contrasto che passa attraverso l'uretra. In particolare, l'ecografia potenziata a contrasto consente la visualizzazione del lume uretrale, in particolare nella regione prostatica, durante il voiding in un modo che individua una regione di potenziale disfunzione.
Per garantire la raccolta di dati ecografici coerenti e accurati, è fondamentale che un singolo ecografo addestrato raccolga e legga gli ultrasuoni nel corso dello studio. Per l'imaging a contrasto migliorato, è importante attivare le microbolle commerciali secondo il protocollo del produttore. Le microbolle attivate devono essere diluite con una soluzione salina dello 0,9%. Le microbolle non diluite sono così concentrate che impediscono la penetrazione delle onde ultragrafiche e ombreggiano strutture che si trovano sotto di loro. La diluizione delle bolle riduce anche i costi sperimentali. Le diluizioni delle bolle possono essere variate senza effetti sperimentali negativi in base alle esigenze dell'utente.
La valutazione del volume della vescica e dello spessore della parete della vescica in un animale intatto consente di esaminare la progressione della malattia e di valutare l'efficacia del trattamento nel tempo. Attualmente, i trattamenti per la BPH sono somministrati in modelli di roditori sia come la malattia è indotta o in un momento precedentemente determinato a provocare progressione significativa della malattia11,22,23. L'efficacia del trattamento è tipicamente determinata dopo un singolo periodo di tempo discreto, nonostante il fatto che la variabilità biologica possa influenzare il tempo necessario per rispondere al trattamento. Utilizzando questa nuova tecnica, un modello di roditore per la BPH può essere valutato dall'induzione del fenotipo della malattia attraverso l'intero protocollo di trattamento.
Un agente di contrasto consente di visualizzare il tratto urinario inferiore prima, durante e dopo un evento di minzione. Abbiamo già esaminato l'istologia uretrale in un modello murino di BPH. Abbiamo localizzato l'uretra prostatica come regione putativa che dà origine a disfunzioni urinarie. Questa regione contiene più condotti prostatici, collagene più denso e un lume più piccolo rispetto ai topi di controllo12. Inoltre, i topi sensibili alla BPH dimostrano disfunzioni di spoglie misurate da uroflowmetria e saggi spot vuoti. Utilizzando ultrasuoni con microbolle, possiamo valutare direttamente la regione dell'uretra prostatica per misurare la velocità di flusso, la durata e il diametro luminoso (Figura 3 e 4). Identificando la regione in cui il flusso è ostacolato mediante ultrasuoni, tale regione specifica può essere ulteriormente valutata istologicamente per determinare il componente principale della disfunzione.
Questa tecnica è riproducibile tra i ceppi di topi e attraverso una serie di età del topo e condizioni di trattamento. Oltre agli anziani, topi maschi, questa tecnica può essere utilizzata per valutare i topi più giovani con anomalie metaboliche che potrebbero portare a BPH/LUTD. La tecnica può essere utilizzata anche per valutare il vuoto del topo femminile e la funzione del tratto urinario inferiore. Anche se il protocollo ecografico con contrasto qui descritto è una procedura terminale, possiamo eseguire una cistostomia soprapubica, creando il potenziale per l'imaging a contrasto non terminale del tratto urinario inferiore24. Esperimenti futuri ottimizzeranno la visualizzazione delle funzioni del tratto urinario per consentire misure ripetute. A seconda delle domande sperimentali, le tecniche qui descritte possono essere combinate con altre tecniche di test urinario funzionale per ottenere maggiori informazioni sulla progressione della malattia e sull'efficacia del trattamento.
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Disclosures
Gli autori non hanno nulla da rivelare
Acknowledgments
Ringraziamo Emily Ricke, Kristen Uchtmann e il laboratorio Ricke per la loro assistenza con l'allevamento degli animali e il feedback su questo manoscritto. Vorremmo ringraziare il NIDDK e NIEHS per il loro sostegno finanziario per questi studi: U54 DK104310 (WAR, JAM, PCM, CMV, DEB), R01 ES001332 (WAR, CMV), K12 DK100022 (TTL, AR-A, DH). Il contenuto è di esclusiva responsabilità degli autori e non rappresenta le opinioni ufficiali della NIH.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 21mm Clear Tubing | Supera Anesthesia Innov | 301-150 | |
| 27 gauge needle | BD | Z192376 | |
| 4 port Manifold | Supera Anesthesia Innov | RES536 | |
| DEFINITY | Lantheus Medical Imaging | DE4 | |
| F/AIR Canister | Supera Anesthesia Innov | 80120 | |
| Graefe forceps (Serrated, Straight) | F.S.T. | 11050-10 | |
| Inlet/Outlet Fittings | Supera Anesthesia Innov | VAP203/4 | |
| Isoflurane | Midwest Vet Supply | 193.33161.3 | |
| Isoflurane Vaporizer | Supera Anesthesia Innov | VAP3000 | |
| MV707 probe | Fujifilm VisualSonics Inc | ||
| Oxygen Flowmeter | Supera Anesthesia Innov | OXY660 | |
| Polyethylene 50 tubing | BD | 427516 | |
| Pressure Reg/Gauge | Supera Anesthesia Innov | OXY508 | |
| Rebreathing Circuits | Supera Anesthesia Innov | CIR529 | |
| Small Mice Nose Cone | Supera Anesthesia Inov | ACC526 | |
| Sterile saline | Midwest Vet Supply | 193.74504.3 | NaCl 0.9%, Injectable |
| Straight Sharp/Blunt Scissors | Fine Scientific Tools (F.S.T) | 14054-13 | |
| Syringe | BD | 309646 | 5mL |
| Vevo 770 | Fujifilm VisualSonics Inc | ||
| VIALMIX | Lantheus Medical Imaging | VMIX |
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