Summary
Nós descrevemos uma aproximação técnica nova para estudar respostas fotossintética em umas plantas mais elevadas que envolvem medidas simultâneas da fluorescência da clorofila a e da reflectância da folha usando um Pam e um radiómetro espectral para a deteção dos sinais do mesma área foliar em Arabidopsis.
Abstract
A análise da fluorescência da clorofila a é amplamente utilizada para medir comportamentos fotossintéticos em plantas intactas, e resultou no desenvolvimento de muitos parâmetros que medem eficientemente a fotossíntese. A análise da reflectância foliar fornece diversos índices de vegetação em ecologia e agricultura, incluindo o índice de reflectância fotoquímico (PRI), que pode ser usado como um indicador de dissipação de energia térmica durante a fotossíntese, pois se correlaciona com têmpera não fotoquímica (NPQ). No entanto, como o NPQ é um parâmetro composto, sua validação é necessária para entender a natureza do parâmetro PRI. Para obter evidências fisiológicas para avaliação do parâmetro PRI, medimos simultaneamente a fluorescência de clorofila e a reflectância foliar no ciclo xantofilo mutante defeituoso (npq1) e no tipo selvagem de plantas de Arabidopsis. Adicionalmente, o parâmetro qZ, que provavelmente reflete o ciclo da xantofilo, foi extraído dos resultados da análise de fluorescência de clorofila, monitorando a cinética de relaxamento do NPQ após a comutação da luz. Essas medidas simultâneas foram realizadas por meio de um fluorômetro de clorofila de modulação de amplitude de pulso (PAM) e um radiômetro espectral. As sondas de fibra de ambos os instrumentos foram posicionadas próximas umas das outras para detectar sinais da mesma posição foliar. Uma fonte de luz externa foi usada para ativar a fotossíntese, e as luzes de medição e luz saturada foram fornecidas a partir do instrumento PAM. Este sistema experimental permitiu-nos de monitorar o PRI Light-dependent na planta intata e revelou que as mudanças luz-dependentes no PRI diferem significativamente entre o tipo selvagem e o mutante npq1 . Além disso, o PRI foi correlacionado fortemente com o QZ, significando que QZ reflete o ciclo do xantofila. Juntas, essas medidas demonstraram que a medida simultânea da reflectância foliar e da fluorescência da clorofila é uma abordagem válida para a avaliação dos parâmetros.
Introduction
A reflectância foliar é utilizada para sentir remotamente os índices de vegetação que refletem a fotossíntese ou traços nas plantas1,2. O índice de vegetação de diferença normalizada (NDVI), que é baseado em sinais de reflexão infravermelha, é um dos índices de vegetação mais conhecidos para a detecção de propriedades relacionadas à clorofila, e é usado nas ciências ecológicas e agrícolas como um indicador de respostas ambientais em árvores ou culturas3. Em estudos de campo, embora muitos parâmetros (por exemplo, índice de clorofila (IC), índice de água (WI), etc.) tenham sido desenvolvidos e utilizados, poucas verificações detalhadas do que esses parâmetros diretamente (ou indiretamente) detectam foram realizados usando mutantes.
A análise da modulação por amplitude de pulso (PAM) da fluorescência da clorofila é um método efetivo para mensurar as reações fotossintéticas e os processos envolvidos no fotosistema II (PSII)4. A fluorescência da clorofila pode ser detectada com uma câmera e usada para a triagem de mutantes de fotossíntese5. No entanto, a detecção de câmera de fluorescência de clorofila requer protocolos complexos, como o tratamento escuro ou pulsos de saturação de luz, que são difíceis de implementar em estudos de campo.
A energia de luz solar absorvida pela folha é consumida principalmente por reações fotossintéticas. Em contrapartida, a absorção de excesso de energia luminosa pode gerar espécies reactivas de oxigénio, o que provoca danos às moléculas fotossintéticas. O excesso de energia luminosa deve ser dissipado como calor através de mecanismos de têmpera não fotoquímica (NPQ)6. O índice de reflectância fotoquímica (PRI), que reflete mudanças dependentes da luz nos parâmetros de reflectância foliar, é derivado da reflectância de banda estreita em 531 e 570 nm (comprimento de onda de referência)7,8. É relatado para correlacionar com NPQ na análise da fluorescência da clorofila9. No entanto, como o NPQ é um parâmetro composto que inclui o ciclo da xantofilo, a tradição do estado e a Fotoinibição, é necessária uma validação detalhada para entender o que o parâmetro PRI mede. Nós focamos no ciclo de xantofila, um sistema de dissipação térmica que envolve o de-epoxidation de pigmentos do xantofila (Violaxanthin a antheraxanthin e o zeaxanthin) e um componente principal de npq porque as correlações entre o PRI e a conversão destes os pigmentos foram relatados em estudos precedentes8.
Muitos mutantes relacionados à fotossíntese foram isolados e identificados em Arabidopsis. O mutante npq1 não acumula o zeaxantina porque carreg uma mutação no de-epoxidase do violaxantina (VDE), que catalisa a conversão de violaxantina a zeaxantina10. Para estabelecer se o PRI detecta somente mudanças em pigmentos do xantofila, Nós medimos simultaneamente o PRI e a fluorescência da clorofila na mesma área de folha em npq1 e no selvagem-tipo e então no npq dissecado em escalas de tempo variando do abrandamento escuro para extrair componente relacionado com a xantofilo11. Essas medições simultâneas fornecem uma técnica valiosa para a atribuição de índices de vegetação. Além disso, desde que o PRI correlaciona com a produtividade preliminar bruta (GPP), a habilidade de atribuir o PRI precisamente a um componente tem aplicações importantes na ecologia12.
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Protocol
1. cultivo de plantas de Arabidopsis
- Mergulhe sementes de Arabidopsis Arabidopsis thaliana em água desionizada esterilizada em um microtubo, e incubar por 2 dias a 4 ° c no escuro.
- Coloc aproximadamente quatro das sementes imbibed, frio-tratadas na superfície do solo usando uma micropipeta. Incubar os vasos plantados em uma câmara de crescimento com uma luz de 16 h (120 μmol fótons m– 2 s– 1) e 8 h de período escuro a 22 ° c e 20 ° c, respectivamente.
- Cresça uma planta por o potenciômetro diluindo outras plântulas após a germinação. Prepare pelo menos cinco potes. Incubar as plantas na câmara de crescimento por um adicional de 4 semanas. Três plantas são usadas para os experimentos.
- Use a folha madura mais jovem e totalmente aberta para medições de fotossíntese.
2. Configurando o estágio da amostra, os instrumentos fotossintéticos e a fonte luminosa
Nota: para este protocolo, foi utilizado um estágio de amostra personalizado para a fixação de folhas e sondas de detecção (Figura 1).
- Prenda uma placa de aço de 10 cm2 com um furo do diâmetro de 1 cm no estágio feito-à-medida da amostra. O tamanho do furo nesta placa pode ser mudado para acomodar amostras diferentes da folha ou espécies de planta. O estágio tem um grampo para fixar as pontas de prova da deteção e um ajustador para ajustar a distância entre as pontas de prova e a amostra da folha.
- Prepare pontas de prova finas da fibra para medir a fluorescência da clorofila e a reflectância da folha. Estas pontas de prova finas da fibra serão posicionadas pròxima de modo que meçam sinais da mesma posição da folha.
Nota: um fluorômetro de clorofila PAM e um radiômetro espectral foram adaptados para detecção de sinais de fluorescência de clorofila A e reflectância foliar, respectivamente. Ambos os instrumentos usam pontas de prova finas da fibra com diâmetros de 1 milímetro e de 2 milímetros, respectivamente. - Ajuste estas duas pontas de prova firmemente junto e envolva-as com a fita plástica.
- Grampeie as pontas de prova gravadas no estágio da amostra usando um suporte de lente coaxial (veja Figura 1), e posicione-os verticais à superfície da folha.
Nota: o campo de visão do cabo de fibra óptica no radiômetro espectral é α = 25 °. Neste método, a distância entre as pontas da sonda de fibra e a superfície foliar é inferior a 1 cm. Conseqüentemente, a área de medição da folha é quase a mesma que aquela da fibra. - Prenda uma guia de luz biforked feita das fibras de vidro à fonte luminosa do halogênio e irradie o estágio da amostra de ambos os sentidos em ângulos de aproximadamente 45 °.
Nota: uma lâmpada do halogênio, que seja próxima à distribuição do comprimento de onda da luz solar natural, é usada como a luz acóica para induzir a fotossíntese. A fonte luminosa do halogênio foi adaptada com um filtro frio incorporado, que remova comprimentos de onda longos do infravermelho próximo, para impedir aumentos na temperatura de superfície da folha (λ = 400 a 800 nanômetro). - Ajuste a fonte luminosa de modo que a luz ilumina uniformemente o estágio da amostra sem sombras da carcaça.
3. Configurando medições simultâneas de reflectância foliar e fluorescência de clorofila
Nota: todas as etapas são executadas no quarto escuro para evitar a deteção da luz à excepção da luz acóica. Uma luz verde-fraca (por exemplo, luz verde-cellophaned) deve ser desligada antes das medições reais.
- Medindo a distância entre a amostra foliar e as sondas na fase de amostragem.
- Coloque uma folha de teste no porta-folhas do estágio da amostra no escuro. Pressione a folha contra uma chapa de aço no palco (quadrado preto na Figura 1).
- Gire sobre o PAM e irradie a amostra da folha com uma luz de medição. Os valores das intensidades de fluorescência da clorofila são confirmados por meio do software de controle do PAM (vide tabela de materiais).
- Mova o ajustador de modo que a intensidade da fluorescência mede aproximadamente 100. Meça a distância entre a sonda e a folha. Fixe o ajustador e registre o valor da distância no ajustador.
- Desligue a luz de medição. Retire a folha de teste.
-
Medindo as intensidades de irradiância da luz acóica
Nota: para observar os comportamentos fotossintéticos dependentes da luz, a luz acóica de intensidade variável é utilizada para irradiar a amostra foliar.- Defina um medidor quântico leve na posição onde a folha de amostra seria colocada.
- Irradiar a luz da fonte luminosa do halogênio e medir a intensidade.
- Determine quais posições do mostrador da fonte luminosa gerariam intensidades de 30, 60, 120, 240 e 480 μmol fótons m– 2 s– 1.
Nota: as plantas de Arabidopsis são cultivadas 120 μmol fótons m– 2 s– 1; Conseqüentemente, as intensidades da irradiância da luz acóica são selecionadas para fornecer uma escala de intensidades pequenas e grandes. - Marque cada intensidade de irradiância no mostrador.
- Medir um padrão de reflexão.
Nota: é necessário um padrão de reflexão para calcular a razão de reflectância foliar em cada intensidade de irradiância.- Coloque uma placa branca como um padrão de reflectância na posição da amostra foliar.
- Ligue um radiômetro espectral. O sinal de refletância é mostrado pelo software de controle do radiômetro espectral. Neste momento, não há dados espectrais porque não há luz irradiante.
- Ligue a lâmpada de halogéneo para irradiar com 480 μmol fótons m– 2 s– 1, a maior intensidade de irradiância neste teste.
- Ajuste a força de detecção do radiômetro para evitar a saturação.
- Grave a reflectância espectral entre 450 – 850 nm em intervalos de 1 nm iluminação com 30, 60, 120, 240 e 480 μmol fótons m– 2 s– 1.
Nota: um sinal eléctrico de linha de base (corrente escura) é corrigido e subtraído a cada medição espectral.
4. medições simultâneas de reflectância foliar e fluorescência de clorofila a , e cálculo de parâmetros fotossintéticos
- Defina uma planta na posição da amostra da folha.
- Transfira a planta de Arabidopsis da câmara crescida à sala escura controlada com a mesma temperatura e umidade que aquela da câmara do crescimento.
- Incubar a planta por 1 h no escuro a 22 ° c para dissipar elétrons do centro de reação PSII e para relaxar de têmpera não fotoquímica.
- Coloque a planta inteira adaptada à escuridão em uma tomada de laboratório a etapa da amostra (Figura 1).
- Fixe a folha da amostra ao suporte da folha de modo que a superfície da folha seja perpendicular às pontas de prova da deteção.
- Medição do rendimento quântico máximo de PSII.
- Ligue o PAM e comece a gravar a curva. Esse valor é chamado 0.
- Gire sobre a luz de medição, e espere aproximadamente 30 s para que a curva responda. Esse valor é chamado F0.
- Dê um pulso saturado de 4000 μmol fótons m– 2 s– 1 para 0,8 s do Pam.
- Obter o maior valor do pico na curva com maior intensidade de fluorescência. Esse valor é chamado FM.
- Calcule o rendimento quântico máximo de PSII no escuro (fV/fM), usando a seguinte equação.
FV/fm = (fm – f0)/ f m
- Mensuração de comportamentos fotossintéticos no estado estacionário.
- Gire sobre a lâmpada do halogênio como a fonte luminosa externa com a luz de medição sobre após a gravação FM (Veja 4.2.4). Em primeiro lugar, irradiar a amostra foliar com a luz mais fraca (30 μmol fótons m– 2 s– 1).
- Gire sobre o radiómetro espectral ao mesmo tempo para monitorar a reflectância da folha.
- Aguarde 20 min ou mais para que a reação fotossintética atinja o estado estacionário as condições de luz. A intensidade da fluorescência do estado estacionário é chamada FS.
- Forneça um pulso saturando em intervalos de 1 minuto durante a iluminação com a luz acóica. O valor máximo de fluorescência obtido a luz pulsada é chamado de FM′.
- Registre os dados de FM′ em 20 min depois de ligar a luz acóica.
- Tome dados da reflectância da folha com uma média de 10 varreduras em um tempo de integração otimizado, com uma subtração de corrente escura.
- Cálculo de parâmetros fotossintéticos em estado estacionário.
- Calcule os rendimentos quânticos da fotoquímica PSII (ΦPSII), que pode ser estimada irradiando-se com pulsos saturados luz acóica, utilizando a seguinte equação.
ΦPSII = (fm′- fS)/ fm′ - Estimar o fluxo de elétrons lineares (LEF) do centro de reação PSII como segue 4.
LEF = a intensidade da irradiância da luz acóica × ΦPSII × 0,5 × 0,84 - Calcule o NPQ, que pode ser expressado a dissipação térmica, usando a seguinte equação.
npq = (f m- fm ′)/ fm′
Nota: a energia luminosa é principalmente consumida por reações de fotossíntese. No entanto, quando as plantas absorvem mais energia luminosa do que a energia consumida pela fotossíntese, os mecanismos para a dissipação térmica são induzidos para evitar o excesso de energia. - Utilizando os dados espectrais adquiridos com o radiômetro as mesmas condições de luz, calcular a razão de reflectância foliar da seguinte forma.
Relação da reflectância = RLeaf /rpadrão - Calcule PRI de 531 nm e 570 nm da seguinte forma. Estes dois comprimentos de onda são extraídos da relação da reflectância.
PRI = (R531– r570)/(r531+ r570)
Nota: R é uma reflectância.
- Calcule os rendimentos quânticos da fotoquímica PSII (ΦPSII), que pode ser estimada irradiando-se com pulsos saturados luz acóica, utilizando a seguinte equação.
- Medição da cinética de relaxamento da têmpera não fotoquímica.
- Desligue a luz acóica depois de adquirir o FS e a reflectância foliar.
- Monitore a fluorescência da clorofila por PAM por 10 minutos depois de desligar a luz.
- Forneça um pulso saturando em intervalos de 1 minuto durante o abrandamento escuro. O valor máximo de fluorescência induzido pelo pulso de saturação o escuro é chamado de FM′ ′. Obter dez de FM′ ′ em um teste.
- Salve os dados de FM′ ′ em 2 min e 10 min depois de desligar a luz acóica.
- Gire a luz acóica no conjunto para a próxima intensidade de irradiância, 60 μ mol fótons m– 2 s– 1.
- Repita uma adaptação leve por 20 min e um relaxamento escuro por 10 min com luz de saturação pulsante em intervalos de 1 min. grave todos os dados conforme descrito acima. Repita todas as etapas e medições usando a irradiação em 120, 240 e 480 μ mol fótons m– 2 s– 1.
- Cálculo dos parâmetros da têmpera não fotoquímica da cinética de relaxamento.
Nota: a indução Light-dependent de NPQ é relaxada desligando a fonte luminosa13. É possível fraccionar cada função NPQ ajustando os prazos de relaxamento.- Estimar a fração qE (têmpera dependente de energia) usando FM′ ′ após 2-min adaptação escura.
qE = (fM2m′ ′ –fm′)/ fm′
Nota: a fração qE é rapidamente invertida dentro de 1 – 2 min. Esta fração inclui principalmente a protonação de PSBS e parte da conversão da xantofilo, que dependem do δph induzido pela luz através da membrana tilacóides13. Ambos são reversíveis na repartição do gradiente. - Calcule a fração qZ (zeaxantina dependente de têmpera) usando FM′ ′ após adaptação escura de 10 min.
QZ = (fM10m′ ′ –fm′)/ fm′
Nota: uma cinética de relaxamento de NPQ a aproximadamente 10 min após a luz acóica fora reflete um ciclo de xantofilo14. A maior parte da conversão da xantofilo é revertida em escalas temporais mais longas de aproximadamente 10 min (qZ) porque a conversão requer uma reação enzimática de VDE (violaxantina de-epoxidase). A fração é relaxada igualmente pela avaria do δph através da membrana do tilacóides. - Calcule o qI (estado fotoinibitório) da seguinte forma.
qI = (fm–fM10m′ ′)/ fm′
Nota: a recuperação mais lenta entre frações NPQ é pensado para ser Fotodano de PSII (indicando o volume de negócios D1). Esta fração do estado fotoinibitório (qI), que não se recupera por 10 min15.
- Estimar a fração qE (têmpera dependente de energia) usando FM′ ′ após 2-min adaptação escura.
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Representative Results
A Figura 1 apresenta um diagrama esquemático do conjunto experimental para medir simultaneamente a fluorescência da clorofila e a reflectância foliar. As sondas de fibra do PAM e do radiômetro espectral foram ajustadas perpendicularmente à superfície foliar no suporte foliar no estágio de amostra feito medida, e uma lâmpada halógena foi usada para irradiação acóica de luz de direções esquerda e direita sem fundição Sombras. Os sinais PAM e refletância foliar foram detectados utilizando o software dos sistemas separados. Este sistema experimental foi utilizado para comparar as plantas de Arabidopsis Wild-Type (col) e npq1 Mutant (falta de zeaxantina) (Figura 2). O ΔPRI calculado a partir da reflectância foliar foi plotado contra o fluxo de elétrons lineares de luz dependente do PSII estimado pelo PAM (Figura 2a). O PRI é relatado para ser afetado não somente pelo xantofila mas igualmente por carotenóides16. O PRI foi corrigido por ser PRI em cada intensidade de luz menos PRI na menor intensidade de luz (ΔPRI) para observar apenas as alterações de PRI dependentes da luz11. Os resultados mostraram que o ΔPRI correlacionou-se negativamente com o LEF em plantas de tipo selvagem, mas não em npq1. Também foi dissecado o qZ, que representa o ciclo da xantofilo, a partir da cinética de relaxamento escuro do NPQ e plotou-o como ΔPRI na Figura 2b. Os resultados mostram que o qZ está fortemente correlacionado com ΔPRI (r2 =-0,87, p-valor < 0, 1), implicando que o PRI reflete o ciclo da xantofilo.
Figura 1: diagrama esquemático do sistema experimental para medição simultânea de fluorescência de clorofila a e reflectância foliar. Os detalhes são descritos na seção protocolo. Um potenciômetro da planta foi posicionado por um jaque do laboratório (seta dobro-dirigida contínua). Uma lâmpada halógena foi usada para irradiar várias intensidades de luz para ativar a fotossíntese (seta sólida fina). Os sinais da fluorescência da clorofila a foram detectados usando um sistema da modulação da amplitude de pulso (PAM); a linha vermelha indica a sonda de fibra do fluorômetro de clorofila PAM. A reflectância foliar foi detectada por um radiômetro espectral iluminação luminosa; a linha azul indica a sonda de fibra do radiômetro espectral. A luz de medição (seta pontilhada) e a luz saturada curta (seta sólida grossa) também foram fornecidas pelo fluorômetro de clorofila PAM. As luzes saturadas foram pulsada com intervalos de 1 min durante a adaptação de luz para 20 min e relaxamento escuro por 10 min. por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Figura 2: alterações nos parâmetros fotossintéticos em plantas de Arabidopsis do tipo selvagem Columbia (quadrados pretos) e npq1 mutante (quadrados vermelhos). ΔPRI (PRI em cada intensidade de irradiância menos PRI na menor intensidade de 30 μmol fótons m-2 s-1) foi plotado contra (a) a taxa de fluxo de elétrons lineares (LEF) e (B) QZ após relaxamento escuro por 10 min. A intensidade da irradiância da luz acóica foi de 30, 60, 120, 240 e 480 μmol fótons m-2 s-1. Pontos de dados e barras de erro representam médias ± SD para n= 3. A linha em B é uma curva de regressão que se aplica a todos os pontos de dados. Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
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Discussion
Neste estudo, nós obtivemos a evidência adicional para mostrar que o PRI representa pigmentos do xantofila medindo simultaneamente a fluorescência da clorofila e a reflectância da folha.
Uma luz do halogênio, que tenha comprimentos de onda similares à luz solar, foi adaptada para o uso como uma fonte luminosa acóica para ativar a fotossíntese. Inicialmente, utilizamos uma fonte de luz LED branca para evitar danos térmicos da superfície foliar, mas isso produziu cinética lenta de relaxamento escuro e qI excepcionalmente alto (têmpera fotoinibitória), possivelmente por PSII fotoprejudicial. Nós, portanto, adaptamos a lâmpada de halogéneo com um built-in filtro frio para reduzir a produção de calor. Esta fonte luminosa não causou nenhuma anomalia na recuperação escura ou no qI.
A variável mais importante em nosso método é a relação posicional entre a folha, a fonte luminosa e as sondas de detecção. Nós testamos medindo a fluorescência da clorofila e a reflectância da folha dos vários ângulos diagonais com irradiar claro diretamente acima à folha. No entanto, a intensidade dos sinais de detecção diferiu dependendo do ângulo. Para evitar essa variabilidade, as sondas foram fixadas verticalmente acima da amostra foliar (Figura 1). A fonte luminosa foi realizada por meio de fibras bifurcadas que irradiaram a superfície foliar dos lados esquerdo e direito para gerar uma luz irradiante uniforme (Figura 1).
Estudos de reflectância foliar têm sido utilizados principalmente em ecologia para determinar vários índices de vegetação vegetal em configurações de campo, como diferenças entre espécies de plantas, condições nutricionais ou alterações sazonais. No entanto, poucos estudos testaram e verificaram esses índices de vegetação em plantas modelo como a Arabidopsis e o tabaco, cujos mutantes poderiam possuir uma riqueza de informações genéticas e os dados de análises Ômicas. Verificar e desenvolver índices de vegetação para essas plantas poderia identificar novos parâmetros fotossintéticos representados em índices de vegetação inovadores, o que contribuiria para a disciplina de ecologia.
Este estudo centrou-se na cinética de relaxamento escuro do NPQ para verificar o comportamento do ciclo da xantofilo. Novos parâmetros relacionados à fotossíntese estão atualmente em desenvolvimento para análise de fluorescência de clorofila (por exemplo, estimativas do estado redox da piscina de plastoquinona (qL) ou a atividade do fluxo de elétrons cíclicos em torno de psi17,18 ). A medida simultânea da fluorescência da clorofila e da reflectância da folha em mutantes relacionados de Arabidopsis avançará a pesquisa nos mecanismos moleculars da fotossíntese e ajudará a utilizar este conhecimento em estudos de campo. Um estudo recente relatou que a fluorescência da clorofila nas plantas pode remotamente ser senti da reflectância espectral da folha. O parâmetro chama fluorescência de clorofila induzida por energia solar (SIF) é medido utilizando uma linha Fraunhofer, linhas escuras absorvidas por oxigênio, luz solar 12,19. Se os índices de vegetação atualmente desenvolvidos foram reatribuídos utilizando essas técnicas, seria possível avaliar remotamente as respostas fotossintéticas em plantas sem o uso de tratamentos especiais, como pulsos saturados ou adaptação escura.
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Disclosures
O autor não tem nada a revelar.
Acknowledgments
Agradecemos ao Dr. Kouki Hikosaka (Universidade Tohoku) por estimular discussões, assistência com um espaço de trabalho e instrumentos para experimentos. O trabalho foi apoiado em parte por KAKENHI [Grant Numbers 18K05592, 18J40098] e Naito Foundation.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Halogen light source | OptoSigma | SHLA-150 | |
| Light quantum meter | LI-COR | LI-1000 | |
| PAM chlorophyll fluorometer | Walz | JUNIOR-PAM | |
| PAM controliing software | Walz | WinControl-3.27 | |
| Reflectance standard | Labsphere, Inc. | SRT-99-050 | |
| Spectral radiometer | ADS Inc. | Field Spec3 | |
| Spectral radiometer controlling software | ADS Inc. | RS3 |
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