Daha yüksek tesislerde fotosentetik tepkileri incelemek için yeni bir teknik yaklaşım tanımlıyoruz. Arabidopsis’te aynı yaprak alanı.
Klorofil bir floresan analizi yaygın bozulmamış bitkilerde fotosentetik davranışları ölçmek için kullanılır, ve verimli fotosentez ölçmek birçok parametre geliştirilmesi ile sonuçlandı. Yaprak yansıtma analizi, fotosentez sırasında termal enerji dağılımının bir göstergesi olarak kullanılabilen fotokimyasal yansıma indeksi (PRI) de dahil olmak üzere ekoloji ve tarımda çeşitli bitki idekleri sağlar. fotokimyasal olmayan söndürme (NPQ). Ancak, NPQ bileşik bir parametre olduğundan, PRI parametresinin doğasını anlamak için doğrulaması gereklidir. PRI parametresinin değerlendirilmesi için fizyolojik kanıt elde etmek için, aynı anda kanthophyll döngüsü kusurlu mutant(npq1)ve yabani tip Arabidopsis bitkilerde klorofil floresan ve yaprak yansıması ölçüldü. Ayrıca, büyük olasılıkla xanthophyll döngüsünü yansıtan qZ parametresi, ışığı kapattıktan sonra NPQ gevşeme kinetiği izleyerek klorofil floresan analizi sonuçlarından çıkarıldı. Bu eşzamanlı ölçümler pulse-genlik modülasyonu (PAM) klorofil florometresi ve spektral radyometre kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Her iki cihazdan gelen lif probları aynı yaprak konumundan gelen sinyalleri tespit etmek için birbirine yakın konumlandırılmış. Fotosentezi etkinleştirmek için harici bir ışık kaynağı kullanıldı ve pam aletinden ölçüm ışıkları ve doymuş ışık sağlandı. Bu deneysel sistem bozulmamış bitki ışık bağımlı PRI izlemek için bize sağladı ve PRI ışık bağımlı değişiklikler vahşi türü ve npq1 mutant arasında önemli ölçüde farklılık ortaya koymuştur. Ayrıca, PRI güçlü qZ ile ilişkili olduğunu, qZ xanthophyll döngüsünü yansıtan anlamına gelir. Bu ölçümler birlikte yaprak refleks ve klorofil floresansının eşzamanlı olarak ölçülmesinin parametre değerlendirmesi için geçerli bir yaklaşım olduğunu göstermiştir.
Yaprak yansıtma, bitkilerde fotosentez ivediliği veya özellikleri yansıtan bitki ideklerini uzaktan algılamak için kullanılır1,2. Kızılötesi yansıma sinyallerine dayanan normalleştirilmiş fark bitki indeksi (NDVI), klorofil ile ilgili özelliklerin saptanmasında en yaygın bilinen bitki indekslerinden biridir ve ekoloji ve tarımsal bilimlerde ağaçlarda veya bitkilerde çevresel tepkilerin göstergesi3. Saha çalışmalarında, birçok parametre (örneğin, klorofil indeksi (CI), su indeksi (WI), vb. geliştirilmiş ve kullanılmış olsa da, bu parametrelerin doğrudan (veya dolaylı olarak) algılandığı birkaç ayrıntılı doğrulama mutantlar kullanılarak yapılmıştır.
Klorofil floresansının pulse-genlik modülasyonu (PAM) analizi fotosentetik reaksiyonları ve fotosistem II (PSII)4ile ilgili süreçleri ölçmek için etkili bir yöntemdir. Klorofil floresan bir kamera ile tespit edilebilir ve fotosentez mutantlar tarama için kullanılan5. Ancak, klorofil floresan kamera tespiti, saha çalışmalarında uygulanması zor olan karanlık tedavi veya ışık doygunluğu darbeleri gibi karmaşık protokoller gerektirir.
Yaprak emilen güneş ışığı enerjisi ağırlıklı olarak fotosentetik reaksiyonlar tarafından tüketilir. Buna karşılık, aşırı ışık enerjisinin emilimi fotosentetik moleküllere zarar veren reaktif oksijen türleri oluşturabilir. Aşırı ışık enerjisi olmayan fotokimyasal söndürme (NPQ) mekanizmaları6ile ısı olarak dağıtılmalıdır. Yaprak yansıtma parametrelerindeki ışığa bağlı değişiklikleri yansıtan fotokimyasal yansıma indeksi (PRI), 531 ve 570 nm (referansdalga boyu) 7,8dar bant yansıtıcısından türetilmiştir. Klorofil floresananalizinde NPQ ile ilişkili olduğu bildirilmiştir9. Ancak, NPQ xanthophyll döngüsü, devlet geleneği ve fotoinhibisyonu içeren kompozit bir parametre olduğundan, ayrıntılı doğrulama PRI parametre ölçer anlamak için gereklidir. Biz xanthophyll döngüsü, xanthophyll pigmentlerin de-epoksidasyon içeren bir termal dağılım sistemi (antheraxanthin ve zeaxanthin için violaxanthin) ve NPQ ana bileşeni üzerinde duruldu çünkü PRI ve bu dönüşüm arasındaki korelasyon pigmentler önceki çalışmalarda bildirilmiştir8.
Arabidopsis’te fotosenteze bağlı birçok mutant izole edilmiş ve tanımlanmıştır. Bu viyolaxanthin de-epoksidaz bir mutasyon taşır çünkü npq1 mutant zeaxanthin birikmez (VDE), hangi zeaxanthin dönüşümkatalizler 10 . PRI sadece xanthophyll pigmentler değişiklikleri algılar olup olmadığını belirlemek için, aynı anda npq1 ve yabani tip aynı yaprak alanında PRI ve klorofil floresan ölçülen ve daha sonra karanlık gevşeme değişen zaman ölçeklerinde npQ diseksiyon ayıklamak için xanthophyll ile ilgili bileşen11. Bu eşzamanlı ölçümler bitki ideklerinin atanması için değerli bir teknik sağlar. Ayrıca, PRI brüt birincil verimlilik (GPP) ile ilişkili olduğundan, PRI’yi tam olarak bir bileşeneatama yeteneği ekoloji 12’de önemli uygulamalara sahiptir.
Bu çalışmada, PRI’nin klorofil floresansını ve yaprak reflektünü eş zamanlı olarak ölçerek kanthophyll pigmentlerini temsil ettiğini gösteren ek kanıtlar elde ettik.
Güneş ışığına benzer dalga boylarına sahip bir halojen ışık, fotosentezi etkinleştirmek için aktinik ışık kaynağı olarak kullanılmak üzere uyarlanmıştır. Biz başlangıçta yaprak yüzeyinin termal hasar görmesini önlemek için beyaz bir LED ışık kaynağı kullanılır, ama bu üretilen ya…
The authors have nothing to disclose.
Dr. Kouki Hikosaka’ya (Tohoku Üniversitesi) tartışmaları uyaran, çalışma alanı yla ilgili yardımları ve deneyler için araçlar için müteşekkiriz. Çalışma kısmen KAKENHI [hibe numaraları 18K05592, 18J40098] ve Naito Vakfı tarafından desteklenmiştir.
Halogen light source | OptoSigma | SHLA-150 | |
Light quantum meter | LI-COR | LI-1000 | |
PAM chlorophyll fluorometer | Walz | JUNIOR-PAM | |
PAM controliing software | Walz | WinControl-3.27 | |
Reflectance standard | Labsphere, Inc. | SRT-99-050 | |
Spectral radiometer | ADS Inc. | Field Spec3 | |
Spectral radiometer controlling software | ADS Inc. | RS3 |