Summary
Præsenteret her er en protokol til vurdering af biventrikulær hjertefunktion hos mus ved at generere trykvolumensløjfer (PV) fra højre og venstre ventrikel i samme dyr ved hjælp af lukket brystkateterisering. Fokus er på det tekniske aspekt af kirurgi og dataindsamling.
Abstract
Vurdering af hjertefunktion er afgørende for at udføre kardiovaskulær og lunge-vaskulær præklinisk forskning. Trykvolumensløjfer (PV-sløjfer) genereret ved registrering af både tryk og volumen under hjertekateterisering er afgørende ved vurdering af både systolisk og diastolisk hjertefunktion. Venstre og højre hjertefunktion er nært beslægtede, hvilket afspejles i ventrikulær indbyrdes afhængighed. Således er registrering af biventrikulær funktion i samme dyr vigtig for at få en fuldstændig vurdering af hjertefunktionen. I denne protokol er en lukket brysttilgang til hjertekateterisering i overensstemmelse med den måde, kateterisering udføres hos patienter, vedtaget hos mus. Selvom det er udfordrende, er den lukkede bryststrategi en mere fysiologisk tilgang, fordi åbning af brystet resulterer i store ændringer i forbelastning og efterbelastning, der skaber artefakter, især et fald i systemisk blodtryk. Mens ekkokardiografi med høj opløsning bruges til at vurdere gnavere, er hjertekateterisering uvurderlig, især ved vurdering af diastolisk tryk i begge ventrikler.
Beskrevet her er en procedure til at udføre invasive, lukkede bryst-, sekventielle venstre og højre ventrikulære trykvolumen (PV) sløjfer i samme dyr. PV-sløjfer erhverves ved hjælp af adgangsteknologi med et musetryk-volumenkateter og trykvolumensystemerhvervelse. Proceduren er beskrevet, begyndende med halsdissektionen, som er nødvendig for at få adgang til højre jugularvene og højre halspulsåre, til indsættelse og placering af kateteret og endelig dataindsamlingen. Derefter diskuteres de kriterier, der kræves for at sikre erhvervelse af PV-sløjfer af høj kvalitet. Endelig beskrives analysen af venstre og højre ventrikulære PV-sløjfer og de forskellige hæmodynamiske parametre, der er tilgængelige til kvantificering af systolisk og diastolisk ventrikulær funktion.
Introduction
Ifølge Verdenssundhedsorganisationen (WHO) er hjertesygdomme den største dødsårsag på verdensplan for både mænd og kvinder 1,2,3. Mange undersøgelser fokuserer på diagnosticering og forbedring af nedsat hjertefunktion4. For disse applikationer er høj kvalitet og reproducerbar evaluering af hjertefunktionen kritisk. High fidelity og reproducerbare kateterdata er nødvendige for at vurdere både etiologisk og terapeutisk respons. For eksempel er vurderingen af hjertefunktionen afgørende for at evaluere effektiviteten af lægemidler og andre behandlinger i prækliniske modeller af myokardieinfarkt5. Mens mange kardiovaskulære undersøgelser fokuserer på venstre ventrikelfunktion, er højre ventrikelfunktion også en kritisk determinant for funktionel kapacitet og prognose hos patienter med lunge-vaskulær sygdom 6,7. Hos patienter med fremskreden hjerteinsufficiens er vedvarende forhøjede højresidige og venstresidede påfyldningstryk prædiktive for den kombinerede risiko for død, kardiovaskulær hospitalsindlæggelse og hjertetransplantation8. I kombineret aorta- og mitralklapsygdom er præoperativ myokardiefunktion (afspejlet i parametre som hjerteindeks og venstre ventrikulær udstødningsfraktion) den vigtigste forudsigelse for langsigtet overlevelse9. Højre ventrikelfunktion er den vigtigste prædiktor for både sygelighed og dødelighed ved pulmonal arteriel hypertension10,11. Vurdering af højre ventrikelfunktion er således en nødvendig komponent i et omfattende præklinisk studie ved hjælp af modeller for pulmonal arteriel hypertension12,13,14.
Venstre og højre ventrikulær funktion studeres ofte uafhængigt. Men fordi funktionerne i venstre og højre ventrikler er tæt forbundet, er det ideelt at opnå en biventrikulær vurdering af systolisk og diastolisk funktion fra en enkelt test15. For eksempel deler højre ventrikel skrå fibre i det interventrikulære septum med venstre ventrikel, som udgør en af de mekaniske forbindelser mellem venstre og højre ventrikulær kontraktil funktion16,17. Dette fænomen, kendt som systolisk ventrikulær interaktion, tillader venstre ventrikulær sammentrækning at øge højre ventrikulær sammentrækning. Ventrikulære interaktioner under diastol er også vigtige. Under diastol påvirker volumenet af en ventrikel volumenet af den modsatte ventrikel og ændrer derved diastolisk overholdelse og forspænding18,19. Under patologiske tilstande kan nedsat funktion af en ventrikel eller nedsat volumenbelastning direkte eller indirekte forringe funktionen af den anden ventrikel20. Som følge af systolisk ventrikulær interaktion kan et globalt fald i venstre ventrikelfunktion reducere højre ventrikels kontraktile ydeevne15. Hos patienter med hjertesvigt på grund af systolisk funktion i venstre ventrikel og øget diastolisk tryk i slutningen er lungearterietrykket forhøjet, hvilket indirekte øger efterbelastningen af højre ventrikel21,22. Omvendt udøver øget højre ventrikulært tryk og volumenoverbelastning ved svær pulmonal hypertension en mekanisk kompression på venstre hjerte. Denne D-formede udfladning af venstre ventrikel, forårsaget af et venstreskift i det interventrikulære septum, reducerer venstre ventrikulære volumener og nedsat systolisk og diastolisk funktion 23,24,25,26,27. Således er vurderingen af både venstre og højre ventrikel afgørende for at evaluere global hjertefunktion i prækliniske modeller af menneskelig sygdom.
Hjertefunktion kan også vurderes ved ikke-invasiv ekkokardiografi, magnetisk resonansbilleddannelse (MR) og invasiv kateterisering28,29,30. Ekkokardiografi er den mest almindeligt anvendte billeddannelsesmodalitet i kardiovaskulær forskning, fordi den er relativt billig og tilgængelig31. Ekkokardiografi har imidlertid flere tekniske begrænsninger, herunder indirekte måling af påfyldningstryk og begrænset evne til at kvantificere diastolisk funktion. Derudover er kvaliteten af de data, der opnås ved ekkokardiografi, stærkt operatørafhængig. Hjerte-MR er en relativt ny tilføjelse til præklinisk billeddannelsesvåbenarium, der har stort potentiale for kvantitativ vurdering af biventrikulær funktion. Kvantificering med hjerte-MR er nøjagtig, da den ikke gør geometriske antagelser om ventrikulær form, i modsætning til ekkokardiografi32. MR-billedplatformen er imidlertid dyr og er sjældent tilgængelig. Desuden kræver behandlingen af MR-data kvalificeret støtte fra en fysiker eller tilsvarende videnskabsmand, hvilket mangler i mange prækliniske laboratorier33. Tilsvarende giver brugen af mikrocomputertomografi (MicroCT) i prækliniske undersøgelser kvantitative tredimensionelle (3D) anatomiske data med høj opløsning, der kan opnås ikke-invasivt, hvilket muliggør langsgående undersøgelser34. Imidlertid kræver MicroCT-billeddannelse injektion af kontrastmidler, som ofte er dyre. MicroCT-billeddannelsesplatformen er ligesom MR også dyr og kræver også en dygtig tekniker.
I modsætning hertil er kateterisering en invasiv teknik, der består af indførelsen af et kateter i højre og / eller venstre ventrikel for at måle tryk og / eller volumen. De nødvendige værktøjer til at udføre hjertekateterisering er ikke så dyre som ekkokardiografi, CT eller MR. Der kræves dog betydelige tekniske færdigheder til kateterisering og bedøvelse af små dyr. Kateterisering muliggør direkte og nøjagtige vurderinger af hjertefunktionen28. I denne protokol anvendes et PV-kateter til at vurdere hjertefunktionen. Denne teknologi, der er baseret på de forskellige elektriske ledningsegenskaber for blod og hjertemuskel, muliggør samtidig registrering af tryk og volumen i hjertehulen og generering af PV-sløjfer i realtid 5,35. Kort fortalt består kateteret af både excitationselektroder og optageelektroder. Excitationselektroderne genererer et elektrisk felt inde i højre eller venstre ventrikel. Den indre optageelektrode måler spændingsændring, som er proportional med en ændring i modstand. Afledt ventrikulært volumen er baseret på Ohms lov (spænding = strøm x modstand), hvorfra konduktans (dvs. den inverse modstand) beregnes. I denne indstilling er den målte konduktansværdi en kombination af blodkonduktans og muskelkonduktans. På det elektriske område er blod rent resistivt, mens muskler har både kapacitive og resistive egenskaber. Den kapacitive egenskab af muskel forårsager en tidsforsinkelse i det målte signal. Sporing af denne forsinkelse, kendt som "fase" -vinklen, rapporterer hjertevævsindtrængning i marken, når hjertet trækker sig sammen. Denne måling er størst ved systole og lavest ved diastol. Denne egenskab tillader adskillelse af muskelkomponenten i konduktansen fra blodets og tillader en tæt tilnærmelse af absolutte systoliske og diastoliske volumener. Trykvolumensløjfer giver en række hæmodynamiske parametre, der ikke let kan måles ved andre metoder, såsom simpel retrograd kateterisering ved hjælp af væskefyldte katetre til måling af hjertetryk. Trykvolumensløjfer måler ventrikulære tryk, men giver også data om kontraktilitet, elastans, effekt, energi og effektivitet. Derudover giver solcellesløjfer robuste kvantitative målinger36. Således har vurdering af hjertefunktion ved PV-sløjfer genereret ved kateterisering vist sig som guldstandarden i præklinisk forskning37. Derudover er prækliniske teknikker relevante for sygdom hos mennesker, hvor hjertekateterisering, omend med væskefyldte katetre, er almindelig. Imidlertid kræver hjertekateterisering hos gnavere upåklagelig anæstesi og fremragende teknik for at forhindre overdreven blodtab, hypoventilation eller ændringer i kropstemperaturen.
Hos humane patienter udføres hjertekateterisering i lukket brystkonfiguration, og vaskulær adgang opnås via jugular eller subclavian vene for højre ventrikel og den radiale eller lårbensarterie for venstre ventrikel. På grund af musens lille størrelse er den lukkede brysttilgang ofte udfordrende. Således anvender undersøgelser udført på mus almindeligvis en åben brysttilgang. Denne teknik indebærer åbning af thorax, hvorved hjertet blotlægges, og lette indsættelsen af kateteret via punktering af venstre og / eller højre ventrikulær apex38. Mens denne tilgang er teknisk mindre udfordrende og ret reproducerbar, omfatter dens største begrænsninger blødning og andre komplikationer ved apikal indsættelse af katetre og et markant fald i intrakardielt tryk som følge af åbning af brysthulen til atmosfærisk tryk. Åbning af thoraxen i en ventileret gnaver inducerer et 5-10 mm Hg fald i venstre ventrikulært systolisk tryk og 2-5 mm Hg fald i højre ventrikulært tryk39. Derfor blev der udviklet en lukket brysttilgang, der er mindre traumatisk for hjertet og giver mere fysiologisk relevante målinger, der lettere oversættes til klinisk vurdering af hjertefunktionen.
Protocol
Alle eksperimenter blev udført i overensstemmelse med Queen's University biosikkerhed og etiske retningslinjer (ROMEO / TRAQ # 6016826). De fulgte procedurer blev udført i overensstemmelse med institutionelle retningslinjer. Dette er en terminal procedure. På grund af invasiviteten af højre og venstre kateterisering skal dyrene aflives umiddelbart efter dataindsamling. Eutanasi bør udføres i henhold til institutionens retningslinjer for dyreforsøg.
1. Eksperimentel forberedelse og opsætning
- Læg kateteret i en 10 ml sprøjte med saltvand/heparin ved stuetemperatur 30 min. før forsøget påbegyndes (figur 1A).
- Efter 30 minutter kalibreres kateteret (f.eks. baseline og anskaffelsessystem) i henhold til producentens anbefalinger. Anskaffelsessystemet viser høje og lave kalibreringsværdier, der bruges til at kalibrere anskaffelsessystemet, før et eksperiment startes. Udskriv disse værdier, og sørg for, at de stemmer overens.
- Brug knappen "Pressure Balance Control", "Grov +/- " eller "Fin +/-" til at indstille basistrykværdien til nul.
- Udfør en topunktskalibrering for højt og lavt signal.
- På kontrolkonsollen skal du trykke på "Systemindstilling" i "Katetermenuen".
- Tryk på "Send kalibreringssignal" i "Systemindstillingsmenu" for at sende det lave signal. Sørg for, at tryk, volumen, fase og størrelse er på henholdsvis 0 mm Hg, 0 μL, 0° og 0 μs.
- Tryk på "Enter" for at sende det høje signal. Sørg for, at tryk, volumen, fase og størrelse er på henholdsvis 100 mm Hg, 150 μL, 20° og 5.000 μs.
- Tryk på "Enter" for at vende tilbage til "Systemindstillingsmenu".
- Tryk på "6" for at vende tilbage til "Katetermenuen". Tryk derefter på "Hent data".
- En 30 G kanyle bøjes til ca. 90° (figur 1B,C). Denne bøjede nål vil blive brugt til at punktere jugular- og carotisbeholderne.
2. Anæstesi og kropstemperaturkontrol
- Anbring musen (28 g, C57BL/6 i denne protokol) i et anæstesikammer, der indeholder bedøvelsesgas (dvs. ilt 100%, isofluran 3-4% til induktion).
- Når dyret bedøves og ikke reagerer på pote eller haleklemme, anbringes musen liggende på varmepuden indstillet til 37 °C.
- Tilslut musen til åndedrætsværnet gennem en næsekegle, der giver en blanding af 100% ilt og 2% isofluran. For automatisk at beregne de anbefalede ventilationsindstillinger skal du indtaste dyrets vægt i ventilatorens proprietære software ved hjælp af berøringsskærmen. Beregningerne bruger følgende formel:
tidevandsvolumen = 6,2 x dyremasse1,01 (kg)
Respirationshastighed = 53,5 x dyremasse-0,26 (kg). - Tænd bedøvelseslinjen fra anæstesikammeret til næsekeglen.
- Indsæt temperaturfeedbacksonden i endetarmen og pudesonden mellem puden og bagsiden af musen, og indstil den ønskede kropstemperatur til 37 °C-37,5 °C. Kontroller dyrets temperatur på skærmen (figur 2A, B).
- Tape ned de forreste poter og en distal pote af musen til varmetæppet ved hjælp af kirurgisk tape, hvilket efterlader en bagpote fri til at overvåge dybden af anæstesi.
3. Adgang til kirurgisk websted
- Udfør en 2 cm H-formet ventral midterlinje cervikal snit fra manubriumet til niveauet af hyoidbenet.
- Reflekter huden væk fra de underliggende muskler. Hvis det er nødvendigt, kan disse muskler udskæres for bedre visualisering.
- Flyt forsigtigt den submandibulære kirtel til side.
- Disseker det cervikale bløde væv og udsæt sternocleidomastoid og sternohyoidmusklen med tang ved hjælp af den stumpe dissektionsmetode.
- Opdel fascia i midten, overliggende den parrede sternohyoid. Lad det parrede sternohyoid trække sig sideværts tilbage for at udsætte luftrøret. Vær forsigtig med ikke at beskadige halspulsårerne og vagusnerverne, der løber langs luftrøret.
- Før tang under luftrøret for at hæve det. Før derefter en 4.0 kirurgisk silkesutur under luftrøret og lav en potentiel knude midt i suturen, som senere strammes for at sikre endotrachealrøret (figur 3A).
- Brug en saks til at lave et lille snit mellem bruskringene i luftrøret under strubehovedets niveau. Indsæt endotrakealrøret (figur 3B).
- Tilslut trakeostomirøret til åndedrætsværnet og start ventilation med 100% ilt og 2% isofluran. Stram knuden omkring luftrøret for at fastgøre endotrachealrøret og tape åndedrætsværnsslangen til operationsbordet. Sørg for, at luftrøret ikke er blokeret eller kollapset (figur 3C).
4. Højre jugular og højre carotis isolering
- Højre halspulsisolering
- Brug stump dissektion til at forskyde sternohyoidmusklen sideværts for at udsætte og isolere den højre halspulsåre.
- Isoler halspulsåren fra vagusnerven ved stump dissektion ved hjælp af tang.
- Pass tre kirurgiske suturer (4.0) under halspulsåren, undtagen vagusnerven.
- Højre jugular veneisolering
- Fortræng den submandibulære og parotidkirtel sideværts for at visualisere den højre jugular vene. Bluntly dissekere og udsætte den højre jugular vene ved hjælp af tang. Dissekere forsigtigt venen og fjern den omgivende fascia.
- Pass tang under jugularvenen.
- Før en kirurgisk sutur under jugularvenen, og bind den derefter på kraniesiden af venen. Påfør blid trækkraft på denne sutur i retning af hovedet ved hjælp af en hæmostatisk klemme.
- Pass to yderligere suturer under jugularvenen. Træk forsigtigt den mest distale sutur i kaudale retninger ved hjælp af en hæmostatisk klemme. Lav en løs, potentiel knude i den midterste sutur.
- Sæt flere dråber opvarmet, fysiologisk saltvand på karret på stedet for forventet venotomi.
5. Kirurgiske procedurer for højre ventrikulær og venstre ventrikulær kateterisering
- Højre ventrikulær kateterisering (figur 4 A-D).
- Brug stereomikroskopet til at identificere jugularvenen.
- Påfør forsigtigt overlegen trækkraft på venen. Udfør en venotomi ved at indsætte en 30 G buet nål mellem kraniesuten og den midterste sutur. Indsæt nålen i en vinkel på 140° i forhold til venen for at sikre, at den kommer ind på en koaksial måde.
- Når den indsættes, udvides venotomien ved at bevæge nålen. Indsæt kateterspidsen i venotomien under nålen. Bind derefter forsigtigt den midterste sutur og fastgør kateteret.
BEMÆRK: Vær yderst forsigtig med ikke at binde suturen for stramt, da overskydende kraft kan beskadige kateteret. - Slip den kaudale sutur, og før kateteret ind i højre ventrikel, detekter den klassiske højre ventrikulære trykbølgeform på en kontinuerlig skærm.
- Stabiliser det højre ventrikulære tryk. Sørg for korrekt placering af kateteret i højre ventrikel for at generere en optimal PV-sløjfe.
- Stabiliser størrelsen, som afspejler blodet og musklerne, for at generere trykstørrelsessløjfer (dvs. Y-aksetryk, X-aksestørrelse). Drej om nødvendigt forsigtigt kateterakslen for at opnå optimal placering af kateteret langs aksen i højre ventrikel.
BEMÆRK: Den maksimale faseværdi, som afspejler musklen, skal være under 7°.
- Stabiliser størrelsen, som afspejler blodet og musklerne, for at generere trykstørrelsessløjfer (dvs. Y-aksetryk, X-aksestørrelse). Drej om nødvendigt forsigtigt kateterakslen for at opnå optimal placering af kateteret langs aksen i højre ventrikel.
- Når tryk-størrelsessløjfesignalet er optimalt, skal du trykke på "Enter" på konsollen under erhvervelsen for at udføre en baseline-scanning. Sørg for, at den puls, der rapporteres på skærmen i slag pr. minut (bpm), er i et fysiologisk område (dvs. 400-600 bpm).
- Generer PV-sløjferne. Skift "Størrelse" til "Volumen" som en parameter for X-aksen, og hold trykket som Y-aksen. Når PV-sløjfesignalet er optimalt, skal du optage i 30 s.
- Stop optagelsen. Træk kateteret tilbage og tør forsigtigt af med gasbind. Sæt kateteret i heparin / natriumchloridopløsning og bind den kaudale sutur for at stoppe blødning fra jugularvenen.
- Kateterisering af venstre ventrikel (figur 5 A-D).
- Løft forsigtigt den højre carotis, som tidligere var isoleret (5A) ved at glide buede tang under arterien.
- Bind den tidligere sutur og derved okkluderer arterien. Påfør derefter forsigtigt kranielt rettet trækkraft ved hjælp af en hæmostatisk klemme.
- Træk den mest distale sutur i kaudal retning ved hjælp af en hæmostatisk klemme. Lav en løs potentiel knude på den midterste sutur.
- Sæt flere dråber opvarmet, fysiologisk saltvand på karret på stedet for den forventede arteriotomi. Fokus på kraniesektionen mellem den kaudale og den midterste sutur ved hjælp af stereotaxisk mikroskop.
- Anvend forsigtigt overlegen trækkraft på arterien. Udfør en arteriotomi ved at indsætte en 30 G buet nål mellem kraniesuturen og den midterste sutur. Indsæt nålen ved 140° i forhold til arterien for at sikre, at den kommer ind på en koaksial måde.
- Indsæt kateterspidsen i arteriotomien og stram derefter den midterste sutur for at sikre kateteret. Slip samtidig den distale sutur og før kateteret ind i aorta for at starte optagelsen. Sørg for, at trykkanalen viser et typisk aortaspor.
- Før kateteret retrograd over aortaklappen ind i venstre ventrikel. Indgang i venstre ventrikel vil fremgå af det pludselige markante fald i diastolisk tryk fra aorta.
- Stabiliser venstre ventrikulært tryk. Sørg for korrekt placering af kateteret i venstre ventrikel for at generere en optimal PV-sløjfe.
- Stabiliser størrelsen, som afspejler blodet og musklerne, for at generere trykstørrelsessløjfer (dvs. Y-aksetryk, X-aksestørrelse). Drej om nødvendigt forsigtigt kateterakslen for at opnå optimal placering af kateteret langs aksen i venstre ventrikel.
BEMÆRK: Den maksimale faseværdi, som afspejler musklen, skal være under 7°.
- Stabiliser størrelsen, som afspejler blodet og musklerne, for at generere trykstørrelsessløjfer (dvs. Y-aksetryk, X-aksestørrelse). Drej om nødvendigt forsigtigt kateterakslen for at opnå optimal placering af kateteret langs aksen i venstre ventrikel.
- Stop optagelsen. Træk kateteret tilbage og læg det i heparin/natriumchloridopløsning. Bind derefter den kaudale sutur.
- Rengør kateteret med et enzymatisk rengøringsmiddel (f.eks. endozim).
BEMÆRK: Efter operationen aflives dyret i henhold til institutionens retningslinjer for dyreforsøg.
6. Analyse af data
- Udfør PV-loop-analysen i henhold til etablerede anbefalinger.
- Vælg det optimale tryk-volumen-spor (ideelt set en hel, stabil 30 sek. optagelse). På softwaren skal du klikke på "Advance", klikke på "Loops" og derefter klikke på "Offline Calculation".
- Vælg volumen som volumenkanal og tryk som trykkanal.
- For ensartede resultater er mindst 20 sløjfer nødvendige.
Representative Results
Kateteret blev anbragt i en 10 ml sprøjte indeholdende en opløsning af hepariniseret saltvand ved stuetemperatur 30 minutter før kateteriseringen (figur 1A). En 30 G nål blev bøjet ~ 90 ° (figur 1B, C), og en 1,45 mm diameter trakeotomi kanyla blev fremstillet (figur 1C).
Vedligeholdelse af fysiologisk kropstemperatur er kritisk. Musen blev tapet ned og forbundet til åndedrætsværnet gennem en næsekegle. Feedbacksonden blev placeret mellem puden og bagsiden af musen. En rektal sonde blev indsat for at overvåge dyrets kropstemperatur (figur 2A). Kropstemperatur (37,1 °C) og pudetemperatur (40,7 °C) blev overvåget (figur 2B).
Fotografier af de kritiske trin i intubationsproceduren er vist i figur 3A-C. Vellykket og uhindret intubation resulterede i en regelmæssig respirationsfrekvens med stabilt toptryk (figur 2B).
Billeder af de kritiske trin i højre hjertekateterisering, fra isolering af halsvenen (figur 4A-C) til indsættelse af kateteret i halsvenen, er vist i figur 4D. Figur 5 viser de kritiske trin i venstre hjertekateterisering, herunder isolering af højre halspulsåre (figur 5 A, B) og kateterindsættelse (figur 5 C, D)
Kateteret blev indført i jugularvenen og avanceret ind i højre ventrikel. Derefter blev det højre ventrikulære tryk stabiliseret, og den korrekte positionering verificeret. Alle kateterets elektroder (6 mm lang akselængde) skulle være inden for højre ventrikelkamre og ikke i kontakt med ventrikelvæggene. Optimal placering af kateteret som skematisk repræsenteret i figur 6A genererede optimale PV-sløjfer (dvs. trekantede, regelmæssige). Forkert placering som skematisk repræsenteret i figur 6B (dvs. kontakt med ventrikelvæggen) vil resultere i fejlbehæftede PV-sløjfer (dvs. kollapsede og uregelmæssige sløjfer).
Kateteret blev indført i carotis, avanceret ind i aorta og derefter avanceret retrograd over aortaklappen ind i venstre ventrikel. Det venstre ventrikeltryk blev stabiliseret og højre positionering verificeret. Alle kateterets elektroder (6 mm lang akselængde) skal være inden for venstre ventrikelkamre og ikke i kontakt med ventrikelvæggene. Optimal placering af kateteret som skematisk repræsenteret i figur 6C genererede optimale PV-sløjfer (dvs. rektangulære, regelmæssige). Forkert placering som skematisk repræsenteret i figur 6D (dvs. kontakt med ventrikelvæggen) resulterede i fejlbehæftede PV-sløjfer (dvs. kollapsede, ikke-rektangulære og uregelmæssige sløjfer).
Repræsentativ hæmodynamik genereret af venstre og højre PV-sløjfer viste en puls på 410 bpm, hjerteudgang på 9,107 μL / min og slagvolumen på 24,5 μL. Specifikke højre ventrikulære parametre viste et systolisk tryk i højre ventrikel på 21,9 mm Hg, diastolisk tryk i højre ventrikel 1,049 mm Hg, udstødningsfraktion på 56,1%, dp/dt maks. 1,469 mm Hg/s, dp/dt max på -1.504 mm Hg/s, endediastolisk volumen på 38,4 μL, slagarbejde på 0,068 mJ, trykvolumenareal på 0,089 mJ, pulmonal arteriel elastans (Ea) på 0,83 mm Hg/μL og Tau-faktor på 12,8 ms. Specifikke venstre ventrikulære parametre viste et systolisk tryk i venstre ventrikel på 77,1 mm Hg, diastolisk tryk i venstre ventrikel på 2,33 mm Hg, uddrivningsfraktion på 59,1%, dp/dt maks. 4,695 mm Hg/s, dp/dt maks. på -3.553 mm Hg/s, slutdiastolisk volumen på 36,9 μL, slagarbejde på 0,14 mJ, trykvolumenareal på 0,22 mJ, arteriel elastans (Ea) på 5,37 mm Hg/μL og Tau-faktor på 15,1 ms (tabel 1).
| Hæmodynamiske parametre | |
| HR (BPM) | 410,6 ± 23,3 |
| CO (μL/min) | 9107 ± 1016 |
| SV (μL) | 24,5 ± 2,3 |
| RV-funktion | |
| RVSP (mmHg) | 21.9 ± 2.15 |
| RVEDP (mmHg) | 1.042 ± 0.12 |
| EF (%) | 56.1 ± 4.4 |
| dP/dt max (mmHg/s) | 1469 ± 170 |
| dP/dt max (- mmHg/s) | 1504 ± 215 |
| EDV (μL) | 38.4 ± 3.7 |
| SW (mJoule) | 0,068 ± 0,008 |
| PVA (mJoule) | 0,084 ± 0,009 |
| Ea (mmHg/μL) | 0,83 ± 0,09 |
| Tau-faktor (ms) | 12,8 ± 0,8 |
| Funktionen LETRÅD | |
| LVSP (mmHg) | 77,1 ± 2,4 |
| LVEDP (mmHg) | 2,33 ± 0,17 |
| EF (%) | 59,1 ± 3,6 |
| dP/dt max (mmHg/s) | 4695 ± 355 |
| dP/dt max (- mmHg/s) | 3553 ± 373 |
| EDV (μL) | 36,9 ± 4,8 |
| SW (mJoule) | 0,14 ± 0,013 |
| PVA (mJoule) | 0.22 ± 0.03 |
| Ea (mmHg/μL) | 5.37 ± 0.9 |
| Tau-faktor (ms) | 15.07 ± 1.7 |
| CO, hjerteudgang; Ea, arteriel elastans; EDV, slut diastolisk volumen; HR, puls; LVEDP, venstre ventrikulær ende diastolisk volumen; LVSP, systolisk tryk på venstre ventrikel; PVA, trykvolumenareal; RVEDP, diastolisk tryk i højre ventrikulære ende; RVSP, systolisk tryk på højre ventrikel; SV, slagvolumen; SW, slagtilfælde arbejde; Tau-faktor, Tau Mirsky. N= 6 mus. Værdier udtrykkes ± SEM | |
Tabel 1: Tabel over hæmodynamiske parametre. Venstre og højre ventrikulær hæmodynamisk parameter målt i seks mus.
Figur 1: Eksperimentel forberedelse og opsætning. (A) Kateter i en 10 ml sprøjte saltvand/heparin, (B), (C) 30 G kanyle bøjet til ca. 90°, (D) trakeotomi kanyle, 1,45 mm diameter. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 2: Anæstesi, kropstemperaturkontrol . (A) Mus med tre poter tapet, forbundet til åndedrætsværn gennem en næsekegle, med feedback og rektal sonder indsat. Bemærk, at varmepuden er under det kirurgiske tæppe. (B) Temperaturmonitorstyring, der viser kropstemperatur (rektal) og pudetemperatur (feedback) og ventilationsparametre: respirationsfrekvens (indstillet RR), gennemsnitlig tidevandsvolumen (Meas TV), toptryk (PeakPress) og minutventilation (MinVol). Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 3: Intubationsprocedure. (A) Skindet blev trukket væk og skåret. Den submandibulære kirtel blev forsigtigt flyttet til side. Sternocleidomastoid og sternohyoid muskel blev trukket fra hinanden, og derefter blev tang passeret under luftrøret ved hjælp af blid, stump dissektion. (B) Kirurgisk silke (4.0) blev ført under luftrøret, og der blev lavet et lille snit anteriort mellem to bruskringe i luftrøret. Trakeostomien blev indsat og bundet. (C) Trakeostomirøret var forbundet til ventilatoren, og suturen blev bundet rundt om slangen. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 4: Kateterisering af højre ventrikel. (A), (B), (C) Den højre jugularvene blev isoleret, derefter blev en kirurgisk sutur passeret nedenunder og bundet på kraniesiden af venen. Blid trækkraft blev påført denne sutur i retning af hovedet ved hjælp af en hæmostatisk klemme. To yderligere suturer blev passeret distalt under halsvenen. Den mest distale sutur blev trukket forsigtigt i kaudale retninger ved hjælp af en hæmostatisk klemme. En løs, potentiel knude blev lavet i den midterste sutur. (D) Kateteret blev indsat i jugularvenen, den midterste sutur blev bundet til kateteret. Billederne i (C) og (D) forstørres gennem et stereomikroskop. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 5: Kateterisering af venstre ventrikel. (A), (B) Den højre carotis blev isoleret, derefter blev en kirurgisk sutur passeret under jugularvenen og bundet på kraniesiden af venen. Blid trækkraft blev påført denne sutur i retning af hovedet ved hjælp af en hæmostatisk klemme. To yderligere suturer blev passeret under halspulsåren. Den mest distale sutur blev forsigtigt trukket i kaudale retninger ved hjælp af en hæmostatisk klemme. En løs, potentiel knude i den midterste sutur blev lavet. (C) Kateterspidsen blev indsat i halspulsåren, og derefter blev den midterste sutur bundet til kateteret for at sikre det. (D) Kateteret blev forsigtigt fremført retrograd ned ad halspulsen mod aorta. Billederne i (B), (C), (D) forstørres gennem et stereomikroskop. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 6: Skematisk gengivelse af kateterpositionering og resulterende PV-sløjfer. (A) Optimal kateterplacering i højre ventrikel. Spidsen af kateteret er midt i ventriklen, isoleret fra ventrikelvæggene. Repræsentative PV-sløjfer som følge af en optimal kateterplacering i højre ventrikel (dvs. stabil, trekantet). (B) Forkert kateterplacering i højre ventrikel. Kateterets spids er i kontakt med ventrikelvæggene. Repræsentativ PV sløjfer støj som følge af en suboptimal kateterplacering i højre ventrikel (dvs. kollapset, uregelmæssig). (C) Optimal kateterplacering i venstre ventrikel. Spidsen af kateteret er midt i ventriklen, isoleret fra ventrikelvæggene. Repræsentative PV-sløjfer som følge af optimal kateterplacering i venstre ventrikel (dvs. stabil, rektangulær). (D) Forkert kateterplacering i venstre ventrikel. Kateterets spids er i kontakt med ventrikelvæggene. Repræsentative PV-sløjfer som følge af en suboptimal kateterplacering i venstre ventrikel (dvs. kollapset, uregelmæssig). Et 50 Hz FIR-støjfilter blev anvendt til at generere PV-sløjferne. Klik her for at se en større version af denne figur.
Discussion
Vurdering af hjertefunktion er et kritisk skridt for præklinisk kardiovaskulær og lunge-vaskulær forskning. I dette arbejde foreslog vi en protokol for en lukket bryst biventrikulær vurdering af hjertefunktionen hos mus. Gennem denne tilgang kan man generere højre ventrikel og venstre ventrikel PV-sløjfer i samme mus. Denne tilgang giver en robust og komplet vurdering af hjertefunktionen, hvilket muliggør måling af systolisk og diastolisk funktion samt slagvolumen og hjerteudgang. I modsætning til den åbne brysttilgang, der klassisk anvendes til gnaverkateterisering, resulterer denne lukkede brystteknik i mere stabil fysiologi og mere fysiologisk relevante data. Mens teknisk mere udfordrende og afhængig af operatørens færdigheder for at kunne placere kateteret i højre og venstre ventrikel, begrænser den lukkede brysttilgang traumet og blødningen forbundet med åben brystkirurgi og reducerer de drastiske trykændringer forbundet med at udsætte lungerne for atmosfærisk tryk. Den lukkede brysttilgang efterligner også bedre hjertekateteriseringsproceduren udført hos patienter, hvilket øger relevansen af at anvende denne teknik i præklinisk forskning.
Den kirurgiske procedure er det kritiske trin i protokollen. Selv når du bruger et kirurgisk mikroskop til kateterindsættelse i jugularvenen eller halspulsåren, hvilket anbefales, kræver denne procedure øvelse og teknisk dygtighed. Omhyggelig dissektion af karrene fri for omgivende fascia ved hjælp af blid, stump dissektion vil øge kanyleringens succes og samtidig minimere risikoen for blødning. For at minimere blodtab er det afgørende at kannulere carotis i sekventielle trin: 1) indføre kateterspidsen i halspulsåren; 2) bind forsigtigt suturen omkring den del af arterien, der indeholder kateteret; 3) frigør den sikre sutur, hvilket tillader kateterbevægelse, samtidig med at der opretholdes blid opadgående trækkraft for at minimere blødning; og 4) fremfør kateteret til aorta. Placering af kateteret i ventriklen, som bestemt ved realtidsbølgeformovervågning, er den mest udfordrende del af denne protokol. Alle kateterets elektroder skal være inden for ventrikelhulen, og ingen bør røre væggen. Enhver forkert placering af kateteret vil resultere i uregelmæssige PV-sløjfer og vil påvirke eller udelukke dataindsamling negativt. At genkende den karakteristiske trykvolumenbølgeform, der skyldes at have alle elektroder i ventriklen, gør det muligt for en at være sikker på en passende kateterposition. Det er afgørende at opnå en stabil ventrikulær trykbølgeform og stabile trykstørrelsessløjfer, før der skiftes til PV-tilstand og volumenoptagelse. Korrekt kendskab til hjertefysiologi og anatomi er afgørende for succesen med denne procedure. Online aflæsning af PV-sporene fra atriummet, tricuspidventilområdet og højre ventrikel viser kateterets fremrykning og hjælper med at opnå korrekt positionering. Det er afgørende at kende den normale puls (400-600 bpm) og forventede bølgeformer og tryk (f.eks. Systolisk tryk i højre ventrikel, 18-25 mm Hg, diastolisk tryk <5 mm Hg; systolisk tryk i venstre ventrikel 60-120 mm Hg40, diastolisk tryk <8 mmHg) hos mus for at give operatøren mulighed for at evaluere rigtigheden af de observerede data.
Kvaliteten og reproducerbarheden af dataene afhænger af procedurens hastighed og blodtab eller blødning. Proceduren fra anæstesi til afslutning af dataindsamling tager i gennemsnit ~ 30-40 min / mus. Højre hjertekateterisering fra indsættelse af kateteret til dataindsamling tager 5-10 minutter, venstre hjertekateterisering fra indsættelsen af kateteret til dataindsamlingen tager yderligere 10-15 minutter. Data af publikationskvalitet opnås i ~75% af tilfældene. Sekvensen af trin i hjertekateteriseringen skal holdes konstant mellem dyrene. I denne procedure intuberes musene først, efterfulgt af højre ventrikulær kateterisering og endelig venstre ventrikulær kateterisering. Beslutningen om at fortsætte i denne rækkefølge er baseret på den større vanskelighed og blødningsrisiko ved venstre hjerte versus højre hjertekateterisering. En uspecifik 50 Hz støjoptagelsesartefakt kan observeres. Denne støj kunne mindskes ved hjælp af et FIR-filter med en høj cutoff ved 50 Hz og en lav cutoff på 0 på softwaren. Opret et nyt kanal/filter/FIR-filter til volumenkanalen. Et hakfilter på 50 Hz kan også anvendes under dataindsamling for at eliminere netstøj og fjerne enhver radiofrekvensinterferens.
Jo hurtigere kateteriseringen udføres, desto bedre er kvaliteten af dataene. Baseret på tidligere erfaringer anbefales det at indhente dataene inden for 15 min. Øget kateteriseringstid øger den fysiologiske stress på dyret og øger risikoen for arytmi på grund af kateterets tilstedeværelse i hulrummet. Disse kræfter kan reducere slagvolumen og forringe bølgeformernes reproducerbarhed og fortolkningsevne. Derudover er spidsen af kateteret skarp og kan beskadige eller punktere ventriklen. Dette er især vigtigt for højre ventrikel, som er ~ 1/3rd tykkelsen af venstre ventrikel.
Invasiv trakeostomi og mekanisk ventilation med positivt tryk resulterer i stabil og kontrolleret vejrtrækning af musene og mindsker variationen i erhvervelsen af PV-sløjfer. Imidlertid er positivt slutekspiratorisk tryk (PEEP) en markant kontrast til normal ventilation, som er et undertryksfænomen. Sammen sænker ventilation med positivt tryk og PEEP hjerteudgangen og reducerer det rigtige hjertetryk. Selvom det kræves for erhvervelse af stabile data, vil mekanisk ventilation såvel som kardiodepressive virkninger af anæstesien påvirke PV-sløjferne og bør betragtes som en begrænsning. Forbigående standsning af mekanisk ventilation under den korte optagelse af PV-sløjfer bruges til at eliminere denne potentielle kilde til artefakter. Bemærk, at ventilationseffektiviteten kan bekræftes ved kapnografiovervågning af kuldioxid.
De tekniske færdigheder, der kræves til den lukkede brysttilgang, kan være en begrænsning af denne teknik. Ligeledes er det udfordrende at opnå korrekt, stabil positionering af kateteret i ventriklen. Oddsene for succes stiger med operatørens erfaring og med musenes størrelse og vægt. Kateterisering af mus under 20 g er ekstremt udfordrende. Den unikke kammergeometri i højre ventrikel kan påvirke volumenmålingen og bør overvejes. Det anvendte bedøvelsesmiddel, hjertefrekvenser, temperaturer og dyrestamme kan påvirke de hæmodynamiske parametre og bør rapporteres og overvåges nøje.
Afslutningsvis udføres både højre og venstre ventrikulær kateterisering i samme mus i denne protokol. Afhængigt af en videnskabsmands specifikke mål kan venstre eller højre ventrikulær kateterisering udføres uafhængigt ved anvendelse af den relevante del af den biventrikulære procedure. Den præsenterede tilgang er imidlertid optimal til fuldstændig vurdering af hjertefunktionen.
Disclosures
Ingen
Acknowledgments
Forfatterne vil gerne anerkende hjælpen og samarbejdet med Queen's University dyrefacilitet personlig. Forfatterne vil gerne anerkende hjælpen fra Austin Read, TMED MSc-kandidat.
Denne undersøgelse blev delvist støttet af US National Institutes of Health (NIH) tilskud NIH 1R01HL113003-01A1 (SLA), NIH 2R01HL071115-06A1 (SLA), Canada Foundation for Innovation og Queen's Cardiopulmonary Unit (QCPU) 229252 og 33012 (SLA), Tier 1 Canada Research Chair i mitokondriel dynamik og translationel medicin 950-229252 (SLA), Canadian Institutes of Health Research (CIHR) Foundation Grant CIHR FDN 143261, William J. Henderson Foundation (SLA), Canadian Vascular Network Scholar Award (FP) og Paroian Family scholarship fra pulmonal hypertension association of Canada (FP)
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| ADVantage Pressure-Volume System (ADV500) | Transonic | FY097B | |
| Endozime AW triple plus | Ruhof | 34521 | |
| Fiber optic dual Gooseneck | Volpi Intralux | # 6000-1 | |
| Forceps | F.S.T | 11052-10 | |
| Forceps | F.S.T | 11251-20 | |
| Gauze sponges | Dermacea | 441400 | |
| Hemostatic clamp | F.S.T | 13003-10 | |
| Hemostatic clamp | F.S.T | 13018-14 | |
| Heparin sodium | Sandoz | 023-3086 | 100 U/L |
| High-fidelity admittance catheter | Scisence; Transonic | FTH-1212B-3518 | |
| Isofluorane | Baxter | CA2L9108 | |
| labScribe v4 software | iworx | LS-30PVL | |
| Needle (30 gauge) | BD | 305106 | |
| sodium chloride injection | Baxter | JB1309M | 0.9%(wt/vol) |
| Stereo microscope | Cole-Parmer | OF-48920-10 | |
| Surgical suture | SERAFLEX | ID158000 | black braided silk, 4.0 |
| Surgical tape | 3M, Transpore | SN770 | |
| Tabletop Single Animal Anesthesia Systems | Harvard apparatus | 72-6468 | |
| Tracheotomy canula 1.45 mm diameter | Harvard apparatus | 72-1410 | |
| Ventilator, far infrared warming pad for mice and rats PhysioSuite | Kent scientific corporation | # PS-02 |
References
- Nowbar, A. N., Howard, J. P., Finegold, J. A., Asaria, P., Francis, D. P. 2014 Global geographic analysis of mortality from ischaemic heart disease by country, age and income: Statistics from World Health Organisation and United Nations. International Journal of Cardiology. 174 (2), 293-298 (2014).
- Nowbar, A. N., Gitto, M., Howard, J. P., Francis, D. P., Al-Lamee, R. Mortality From Ischemic Heart Disease. Circulation. Cardiovascular quality and outcomes. 12 (6), 005375 (2019).
- Finegold, J. A., Asaria, P., Francis, D. P. Mortality from ischaemic heart disease by country, region, and age: Statistics from World Health Organisation and United Nations. International Journal of Cardiology. 168 (2), 934-945 (2013).
- McClellan, M., Brown, N., Califf, R. M., Warner, J. J. Call to Action: Urgent Challenges in Cardiovascular Disease: A Presidential Advisory From the American Heart Association. Circulation. 139 (9), 44-54 (2019).
- Clark, J. E., Marber, M. S. Advancements in pressure-volume catheter technology - stress remodelling after infarction. Experimental Physiology. 98 (3), 614-621 (2013).
- Price, L. C., Wort, S. J., Finney, S. J., Marino, P. S., Brett, S. J. Pulmonary vascular and right ventricular dysfunction in adult critical care: current and emerging options for management: a systematic literature review. Critical Care. 14 (5), London, England. 169 (2010).
- Ryan, J. J., et al. Right Ventricular Adaptation and Failure in Pulmonary Arterial Hypertension. The Canadian Journal of Cardiology. 31 (4), 391-406 (2015).
- Cooper, L. B., et al. Hemodynamic Predictors of Heart Failure Morbidity and Mortality: Fluid or Flow. Journal of cardiac failure. 22 (3), 182-189 (2016).
- Turina, J., Stark, T., Seifert, B., Turina, M. Predictors of the long-term outcome after combined aortic and mitral valve surgery. Circulation. 100 (19), Suppl 48-53 (1999).
- Vonk Noordegraaf, A., Galiè, N. The role of the right ventricle in pulmonary arterial hypertension. European Respiratory Review : An Official Journal of the European Respiratory Society. 20 (122), 243-253 (2011).
- Vonk-Noordegraaf, A., et al. Right heart adaptation to pulmonary arterial hypertension: physiology and pathobiology. Journal of the American College of Cardiology. 62 (25), Suppl 22-33 (2013).
- Potus, F., et al. Downregulation of miR-126 Contributes to the Failing Right Ventricle in Pulmonary Arterial Hypertension. Circulation. 132 (10), 932-943 (2015).
- Potus, F., Hindmarch, C., Dunham-Snary, K., Stafford, J., Archer, S. Transcriptomic Signature of Right Ventricular Failure in Experimental Pulmonary Arterial Hypertension: Deep Sequencing Demonstrates Mitochondrial, Fibrotic, Inflammatory and Angiogenic Abnormalities. International Journal of Molecular Sciences. 19 (9), 2730 (2018).
- Xiong, P. Y., et al. Biventricular Increases in Mitochondrial Fission Mediator (MiD51) and Proglycolytic Pyruvate Kinase (PKM2) Isoform in Experimental Group 2 Pulmonary Hypertension-Novel Mitochondrial Abnormalities. Frontiers in Cardiovascular Medicine. 5, 195 (2019).
- Schwarz, K., Singh, S., Dawson, D., Frenneaux, M. P. Right Ventricular Function in Left Ventricular Disease: Pathophysiology and Implications. Heart, Lung and Circulation. 22 (7), 507-511 (2013).
- Buckberg, G., Hoffman, J. I. E. Right ventricular architecture responsible for mechanical performance: Unifying role of ventricular septum. The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 148 (6), 3166-3171 (2014).
- Buckberg, G. D. The ventricular septum: the lion of right ventricular function, and its impact on right ventricular restoration. European Journal of Cardio-Thoracic Surgery. 29, Supplement_1 272-278 (2006).
- Farrar, D. J., Chow, E., Brown, C. D. Isolated Systolic and Diastolic Ventricular Interactions in Pacing-Induced Dilated Cardiomyopathy and Effects of Volume Loading and Pericardium. Circulation. 92 (5), 1284-1290 (1995).
- Dickstein, M. L., Todaka, K., Burkhoff, D. Left-to-right systolic and diastolic ventricular interactions are dependent on right ventricular volume. The American Journal of Physiology. 272 (6), Pt 2 2869-2874 (1997).
- Slater, J. P., et al. Systolic ventricular interaction in normal and diseased explanted human hearts. The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 113 (6), 1091-1099 (1997).
- Rosenkranz, S., et al. Pulmonary hypertension due to left heart disease: Updated Recommendations of the Cologne Consensus Conference 2011. International Journal of Cardiology. 154, 34-44 (2011).
- Ranchoux, B., et al. Metabolic Syndrome Exacerbates Pulmonary Hypertension due to Left Heart Disease. Circulation Research. 125 (4), 449-466 (2019).
- Habib, G., Torbicki, A. The role of echocardiography in the diagnosis and management of patients with pulmonary hypertension. European Respiratory Review : An official Journal of the European Respiratory Society. 19 (118), 288-299 (2010).
- Brierre, G., et al. New echocardiographic prognostic factors for mortality in pulmonary arterial hypertension. European Journal of Echocardiography. 11 (6), 516-522 (2010).
- Badano, L. P., et al. Right ventricle in pulmonary arterial hypertension: haemodynamics, structural changes, imaging, and proposal of a study protocol aimed to assess remodelling and treatment effects. European Journal of Echocardiography: the Journal of the Working Group on Echocardiography of the European Society of Cardiology. 11 (1), 27-37 (2010).
- Ibrahim, E. -S. H., Bajwa, A. A. Severe Pulmonary Arterial Hypertension: Comprehensive Evaluation by Magnetic Resonance Imaging. Case Reports in Radiology. 2015, 946920 (2015).
- Pinsky, M. R. The right ventricle: interaction with the pulmonary circulation. Critical Care. 20 (1), London, England. 266 (2016).
- Kosova, E., Ricciardi, M.
- Lindqvist, P., Calcutteea, A., Henein, M. Echocardiography in the assessment of right heart function. European Journal of Echocardiography. 9 (2), 225-234 (2007).
- Fogel, M. A. Assessment of Cardiac Function by Magnetic Resonance Imaging. Pediatric Cardiology. 21 (1), 59-69 (2000).
- Janardhanan, R., Kramer, C. M.
- Attili, A. K., Schuster, A., Nagel, E., Reiber, J. H. C., vander Geest, R. J. Quantification in cardiac MRI: advances in image acquisition and processing. The International Journal of Cardiovascular Imaging. 26 (1), 27-40 (2010).
- Urboniene, D., Haber, I., Fang, Y. -H., Thenappan, T., Archer, S. L. Validation of high-resolution echocardiography and magnetic resonance imaging vs. high-fidelity catheterization in experimental pulmonary hypertension. American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 299 (3), 401-412 (2010).
- Ashton, J. R., et al. Anatomical and functional imaging of myocardial infarction in mice using micro-CT and eXIA 160 contrast agent. Contrast Media & Molecular Imaging. 9 (2), 161 (2014).
- Larson, E. R., Feldman, M. D., Valvano, J. W., Pearce, J. A. Analysis of the Spatial Sensitivity of Conductance/Admittance Catheter Ventricular Volume Estimation. IEEE Transactions on Biomedical Engineering. 60 (8), 2316-2324 (2013).
- Sasayama, S., et al. Assessment of cardiac function by left heart catheterization: an analysis of left ventricular pressure-volume (length) loops. Journal of Cardiography. Supplement. (1), 25-34 (1984).
- Lindsey, M. L., Kassiri, Z., Virag, J. A. I., de Castro Brás, L. E., Scherrer-Crosbie, M. Guidelines for measuring cardiac physiology in mice. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 314 (4), 733-752 (2018).
- Townsend, D. Measuring Pressure Volume Loops in the Mouse. Journal of Visualized Experiments JoVE. (111), e53810 (2016).
- Provencher, S., et al. Standards and Methodological Rigor in Pulmonary Arterial Hypertension Preclinical and Translational Research. Circulation Research. 122 (7), 1021-1032 (2018).
- Lips, D. J., et al. Left Ventricular Pressure-Volume Measurements in Mice: Comparison of Closed-Chest Versus Open-Chest Approach. Basic Res Cardiol. 99 (5), 351-359 (2004).
