Summary
Presentert her er en protokoll for å vurdere biventrikulær hjertefunksjon hos mus ved å generere trykk-volum (PV) sløyfer fra høyre og venstre ventrikkel i samme dyr ved hjelp av lukket brystkateterisering. Fokuset er på det tekniske aspektet ved kirurgi og datainnsamling.
Abstract
Vurdering av hjertefunksjon er viktig for å utføre kardiovaskulær og pulmonal vaskulær preklinisk forskning. Trykk-volum-sløyfer (PV-sløyfer) generert ved registrering av både trykk og volum under hjertekateterisering er avgjørende når man vurderer både systolisk og diastolisk hjertefunksjon. Venstre og høyre hjertefunksjon er nært beslektet, reflektert i ventrikulær gjensidig avhengighet. Derfor er registrering av biventrikulær funksjon i samme dyr viktig for å få en fullstendig vurdering av hjertefunksjonen. I denne protokollen er en lukket brysttilnærming til hjertekateterisering i samsvar med måten kateterisering utføres hos pasienter vedtatt hos mus. Mens det er utfordrende, er den lukkede bryststrategien en mer fysiologisk tilnærming, fordi åpning av brystet resulterer i store endringer i forspenning og etterbelastning som skaper artefakter, særlig et fall i systemisk blodtrykk. Mens høyoppløselig ekkokardiografi brukes til å vurdere gnagere, er hjertekateterisering uvurderlig, spesielt når man vurderer diastolisk trykk i begge ventriklene.
Beskrevet her er en prosedyre for å utføre invasive, lukkede bryst, sekvensielle venstre og høyre ventrikulær trykkvolum (PV) sløyfer i samme dyr. PV-sløyfer er anskaffet ved hjelp av admittansteknologi med et musetrykk-volumkateter og trykk-volumsysteminnsamling. Prosedyren er beskrevet, som begynner med halsdisseksjonen, som er nødvendig for å få tilgang til høyre vena jugularis og høyre halspulsåre, til innsetting og posisjonering av kateteret, og til slutt datainnsamlingen. Deretter diskuteres kriteriene som kreves for å sikre oppkjøpet av PV-sløyfer av høy kvalitet. Til slutt beskrives analysen av venstre og høyre ventrikkels PV-sløyfer og de forskjellige hemodynamiske parametrene som er tilgjengelige for å kvantifisere systolisk og diastolisk ventrikkelfunksjon.
Introduction
Ifølge Verdens helseorganisasjon (WHO) er hjertesykdom den ledende dødsårsaken over hele verden for både menn og kvinner 1,2,3. Mange studier fokuserer på å diagnostisere og forbedre nedsatt hjertefunksjon4. For disse applikasjonene er høy kvalitet og reproduserbar evaluering av hjertefunksjonen kritisk. High fidelity og reproduserbare kateterdata er nødvendig for å vurdere både etiologiske og terapeutiske responser. For eksempel er vurdering av hjertefunksjon viktig for å evaluere effekten av legemidler og annen behandling i prekliniske modeller av hjerteinfarkt5. Mens mange kardiovaskulære studier fokuserer på venstre ventrikkelfunksjon, er høyre ventrikkelfunksjon også en kritisk determinant for funksjonsevne og prognose hos pasienter med lungevaskulær sykdom 6,7. Hos pasienter med avansert hjertesvikt predikerer vedvarende forhøyet høyresidig og venstresidig fyllingstrykk den kombinerte risikoen for død, kardiovaskulær sykehusinnleggelse og hjertetransplantasjon8. Ved kombinert aorta- og mitralklaffsykdom er preoperativ myokardfunksjon (reflektert i parametere som hjerteindeks og venstre ventrikkels ejeksjonsfraksjon) den viktigste prediktoren for langtidsoverlevelse9. Høyre ventrikkelfunksjon er den viktigste prediktoren for både sykelighet og mortalitet ved pulmonal arteriell hypertensjon10,11. Dermed er vurdering av høyre ventrikkelfunksjon en nødvendig komponent i en omfattende preklinisk studie ved bruk av modeller av pulmonal arteriell hypertensjon12,13,14.
Venstre og høyre ventrikulær funksjon studeres ofte uavhengig. Men fordi funksjonene til venstre og høyre ventrikler er nært knyttet, er det ideelt å oppnå en biventrikulær vurdering av systolisk og diastolisk funksjon fra en enkelt test15. For eksempel deler høyre ventrikkel skrå fibre i interventrikkelseptum med venstre ventrikkel, som utgjør en av de mekaniske koblingene mellom venstre og høyre ventrikkelkontraktil funksjon16,17. Dette fenomenet, kjent som systolisk ventrikulær interaksjon, tillater venstre ventrikulær sammentrekning for å øke høyre ventrikulær sammentrekning. Ventrikulære interaksjoner under diastol er også viktige. Under diastolen påvirker volumet av en ventrikkel volumet av motsatt ventrikkel, og endrer dermed diastolisk etterlevelse og preload18,19. Ved patologiske forhold kan nedsatt funksjon av en ventrikkel, eller nedsatt volumbelastning, direkte eller indirekte svekke funksjonen til den andre ventrikkelen20. Som en konsekvens av systolisk ventrikkelinteraksjon kan en global reduksjon i venstre ventrikkelfunksjon redusere kontraktil ytelse i høyre ventrikkel15. Hos pasienter med hjertesvikt på grunn av systolisk funksjon i venstre ventrikkel og økt endediastolisk trykk er lungearterietrykket forhøyet, noe som indirekte øker etterbelastningen i høyre ventrikkel21,22. Omvendt utøver økt høyre ventrikkeltrykk og volumoverbelastning ved alvorlig pulmonal hypertensjon en mekanisk kompresjon på venstre hjerte. Denne D-formede flattningen av venstre ventrikkel, forårsaket av en venstreforskyvning i interventrikkelseptum, reduserer venstre ventrikkelvolum og nedsatt systolisk og diastolisk funksjon 23,24,25,26,27. Dermed er vurderingen av både venstre og høyre ventrikler avgjørende for å evaluere global hjertefunksjon i prekliniske modeller av menneskelig sykdom.
Hjertefunksjonen kan også vurderes ved ikke-invasiv ekkokardiografi, magnetisk resonanstomografi (MR) og invasiv kateterisering28,29,30. Ekkokardiografi er den mest brukte bildebehandlingsmodaliteten i kardiovaskulær forskning fordi den er relativt billig og tilgjengelig31. Ekkokardiografi har imidlertid flere tekniske begrensninger, blant annet indirekte måling av fylltrykk og begrenset evne til å kvantifisere diastolisk funksjon. I tillegg er kvaliteten på dataene oppnådd ved ekkokardiografi svært operatøravhengig. MR hjerte er et relativt nytt tilskudd til preklinisk bildearmamentarium som har stort potensial for kvantitativ vurdering av biventrikulær funksjon. Kvantifisering med hjerte-MR er nøyaktig, da den ikke gjør geometriske antagelser om ventrikkelform, i motsetning til ekkokardiografi32. Imidlertid er MR-bildebehandlingsplattformen dyr, og er sjelden tilgjengelig. Videre krever behandling av MR-data dyktig støtte fra en fysiker eller tilsvarende forsker, noe som mangler i mange prekliniske laboratorier33. Tilsvarende gir bruk av mikrocomputertomografi (MicroCT) i prekliniske studier kvantitative høyoppløselige tredimensjonale (3D) anatomiske data som kan oppnås ikke-invasivt, slik at longitudinelle studier34. Imidlertid krever MicroCT-avbildning injeksjon av kontrastmidler, som ofte er dyre. MicroCT-bildeplattformen, som MR, er også dyr og krever også en dyktig tekniker.
I motsetning til dette er kateterisering en invasiv teknikk som består av innføring av et kateter i høyre og / eller venstre ventrikkel for å måle trykk og / eller volum. Verktøyene som kreves for å utføre hjertekateterisering er ikke så dyre som ekkokardiografi, CT eller MR. Betydelig teknisk ferdighet for kateterisering og smådyr anestesi er nødvendig, imidlertid. Kateterisering muliggjør direkte og nøyaktige vurderinger av hjertefunksjon28. I denne protokollen brukes et PV-kateter for innleggelse for å vurdere hjertefunksjonen. Denne teknologien, basert på de forskjellige elektriske ledningsegenskapene til blod og hjertemuskel, muliggjør samtidig registrering av trykk og volum i hjertehulen og generering av PV-sløyfer i sanntid 5,35. Kort fortalt består kateteret av både eksitasjonselektroder og opptakselektroder. Eksitasjonselektrodene genererer et elektrisk felt inne i høyre eller venstre ventrikel. Den indre opptakselektroden måler spenningsendring, som er proporsjonal med en endring i motstand. Avledning av ventrikkelvolum er basert på Ohms lov (spenning = strøm x motstand) hvorfra konduktans (dvs. den inverse av motstand) beregnes. I denne innstillingen er den målte konduktansverdien en kombinasjon av blodkonduktans og muskelkonduktans. I det elektriske feltet er blodet rent resistivt mens muskel har både kapasitive og resistive egenskaper. Den kapasitive egenskapen til muskel forårsaker en tidsforsinkelse i det målte signalet. Sporing av denne forsinkelsen, kjent som "fase" -vinkelen, rapporterer hjertevevsinntrenging i feltet når hjertet trekker seg sammen. Denne målingen er størst ved systole og lavest ved diastol. Denne egenskapen tillater separasjon av muskelkomponenten av konduktansen fra blodet og tillater en nær tilnærming av absolutte systoliske og diastoliske volumer. Trykk-volumsløyfer gir en rekke hemodynamiske parametere som ikke er lett målbare ved andre metoder, for eksempel enkel retrograd kateterisering ved bruk av væskefylte katetre for å måle hjertetrykk. Trykk-volum-sløyfer måler ventrikkeltrykk, men gir også data om kontraktilitet, elastans, kraft, energi og effektivitet. I tillegg gir PV-sløyfer robuste kvantitative målinger36. Dermed har vurdering av hjertefunksjon av PV-sløyfer generert ved kateterisering dukket opp som gullstandarden i preklinisk forskning37. I tillegg er prekliniske teknikker relevante for menneskelig sykdom der hjertekateterisering, om enn med væskefylte katetre, er vanlig. Imidlertid krever hjertekateterisering hos gnagere upåklagelig anestesi og utmerket teknikk for å forhindre overdreven blodtap, hypoventilasjon eller endringer i kroppstemperatur.
Hos mennesker utføres hjertekateterisering i lukket brystkonfigurasjon, og vaskulær tilgang oppnås via vena jugularis eller subclavia for høyre ventrikkel og arteria radialis eller femoralis for venstre ventrikkel. På grunn av den lille størrelsen på mus er den lukkede brysttilnærmingen ofte utfordrende. Dermed vedtar studier utført på mus vanligvis en åpen brysttilnærming. Denne teknikken innebærer å åpne thorax, dermed eksponere hjertet, og lette innsetting av kateteret via punktering av venstre og / eller høyre ventrikkelapex 38. Selv om denne tilnærmingen er teknisk mindre utfordrende og ganske reproduserbar, inkluderer dens viktigste begrensninger blødning og andre komplikasjoner ved apikal innsetting av katetre, og et markert fall i intrakardial trykk som følge av å åpne brysthulen til atmosfærisk trykk. Åpning av thorax hos en ventilert gnager induserer en 5–10 mm Hg reduksjon i systolisk trykk i venstre ventrikkel og 2–5 mm Hg reduksjon i høyre ventrikkeltrykk39. Derfor ble det utviklet en lukket brysttilnærming som er mindre traumatisk for hjertet og gir mer fysiologisk relevante målinger som lettere kan oversettes til klinisk vurdering av hjertefunksjonen.
Protocol
Alle eksperimenter ble utført i samsvar med Queen's University biosikkerhet og etiske retningslinjer (ROMEO / TRAQ # 6016826). Prosedyrene som ble fulgt, ble utført i henhold til institusjonelle retningslinjer. Dette er en terminal prosedyre. På grunn av invasiviteten til høyre og venstre kateterisering, bør dyrene avlives umiddelbart etter datainnsamling. Avlivning skal utføres i henhold til institusjonens retningslinjer for dyreforsøk.
1. Eksperimentell forberedelse og oppsett
- Legg kateteret i en 10 ml sprøyte med saltvann/heparin, romtemperert 30 minutter før forsøket starter (figur 1A).
- Etter 30 minutter kalibrerer du kateteret (f.eks. baseline og innsamlingssystem) i henhold til produsentens anbefalinger. Innsamlingssystemet viser høye og lave kalibreringsverdier som brukes til å kalibrere innsamlingssystemet før et eksperiment startes. Send ut disse verdiene, og kontroller at de samsvarer.
- Bruk knappen "Trykkbalansekontroll", "Grov +/- ", eller "Fin +/-" for å sette opp grunnlinjetrykkverdien til null.
- Utfør en topunktskalibrering for høyt og lavt signal.
- På kontrollkonsollen trykker du på "System Setting" i "Catheter Menu".
- Trykk på "Send kalibreringssignal" i "System Setting Menu" for å sende det lave signalet. Sørg for at trykket, volumet, fasen og størrelsen er på henholdsvis 0 mm Hg, 0 μL, 0 ° og 0 μs.
- Trykk "Enter" for å sende det høye signalet. Sørg for at trykk, volum, fase og størrelse er på henholdsvis 100 mm Hg, 150 μL, 20° og 5000 μs.
- Trykk "Enter" for å gå tilbake til "System Setting Menu".
- Trykk "6" for å gå tilbake til "Katetermenyen". Trykk deretter på "Hent data".
- Bøy en 30 G kanyle til ca. 90° (figur 1B,C). Denne bøyde nålen vil bli brukt til å punktere jugulære og karoten kar.
2. Anestesi og kroppstemperaturkontroll
- Plasser musen (28 g, C57BL/6 i denne protokollen) i et anestesikammer inneholdende bedøvelsesgass (dvs. oksygen 100 %, isofluran 3–4 % for induksjon).
- Når dyret er bedøvet og ikke reagerer på pote eller haleklype, plasser musen på ryggen på varmeputen som er satt til 37 °C.
- Koble musen til åndedrettsvernet gjennom en nesekjegle som gir en blanding av 100% oksygen og 2% isofluran. For automatisk å beregne de anbefalte ventilasjonsinnstillingene, skriv inn dyrets vekt i ventilatorens proprietære programvare ved hjelp av berøringsskjermen. Beregningene bruker følgende formel:
Tidevannsvolum = 6,2 x dyremasse1,01 (kg),
Respirasjonsfrekvens = 53,5 x dyremasse-0,26 (kg). - Slå på bedøvelseslinjen fra anestesikammeret til nesekeglen.
- Sett temperaturtilbakemeldingssonden inn i endetarmen og putesonden mellom puten og baksiden av musen, og still inn ønsket kroppstemperatur til 37 °C–37,5 °C. Kontroller dyrets temperatur på skjermen (figur 2A,B).
- Tape ned de fremre potene og en distal pote av musen til varmeteppet ved hjelp av kirurgisk tape, slik at en bakpote er fri til å overvåke anestesidybden.
3. Tilgang til operasjonsstedet
- Utfør et 2 cm H-formet ventral midtlinje cervikalt snitt fra manubrium til nivået av hyoidbenet.
- Reflekter huden bort fra de underliggende musklene. Om nødvendig kan disse musklene bli skåret ut for bedre visualisering.
- Flytt forsiktig submandibulær kjertel til side.
- Dissekere cervical bløtvev og eksponere sternocleidomastoid og sternohyoid muskel med tang ved hjelp av stump disseksjon metoden.
- Del fascia i midten, overliggende parret sternohyoid. La den parrede sternohyoiden trekke seg sideveis for å eksponere luftrøret. Vær forsiktig så du ikke skader halspulsårene og vagusnervene, som går langs luftrøret.
- Før tang under luftrøret for å heve det. Deretter passerer du en 4.0 kirurgisk silkessutur under luftrøret og lager en potensiell knute midt i suturen, som senere vil bli strammet for å sikre endotrakealrøret (figur 3A).
- Bruk saks til å lage et lite kutt mellom bruskringene i luftrøret under strupehodet. Sett inn endotrakealrøret (figur 3B).
- Koble trakeostomirøret til åndedrettsvernet og start ventilasjonen med 100% oksygen og 2% isofluran. Stram knuten rundt luftrøret for å feste endotrakealrøret og tape åndedrettsvernet til operasjonsbordet. Pass på at luftrøret ikke er blokkert eller kollapset (figur 3C).
4. Høyre jugular og høyre carotis isolasjon
- Høyre carotisisolat
- Ved stump disseksjon, forflytt sternohyoidmuskelen lateralt for å eksponere og isolere høyre halspulsåre.
- Isoler halspulsåren fra vagusnerven ved stump disseksjon ved hjelp av tang.
- Pass tre kirurgiske suturer (4.0) under halspulsåren, unntatt vagusnerven.
- Isolasjon av høyre vena jugularis
- Flytt submandibulær og parotidkjertel lateralt for å visualisere høyre jugularven. Dissekere sløvt og eksponere høyre halsvene ved hjelp av tang. Forsiktig dissekere venen og fjern den omkringliggende fascia.
- Før tang under halsvenen.
- Pass en kirurgisk sutur under halsvenen, og bind den deretter på kranialsiden av venen. Påfør forsiktig trekkraft på denne suturen i retning av hodet ved hjelp av en hemostatisk klemme.
- Pass ytterligere to suturer under halsvenen. Trekk forsiktig den mest distale suturen i en kaudal retning ved hjelp av en hemostatisk klemme. Lag en løs, potensiell knute i den midterste suturen.
- Sett flere dråper oppvarmet, fysiologisk saltvann på fartøyet på stedet for forventet venotomi.
5. Kirurgiske prosedyrer for høyre ventrikkel og venstre ventrikulær kateterisering
- Høyre ventrikkelkateterisering (figur 4 A–D).
- Bruk stereomikroskopet, identifiser halsvenen.
- Påfør forsiktig overlegen trekkraft på venen. Utfør en venotomi ved å sette inn en 30 G buet nål mellom kranialsuturen og den midterste suturen. Sett nålen i en 140° vinkel i forhold til venen for å sikre at den kommer inn på en koaksial måte.
- Når den er satt inn, utvider du venotomien ved å bevege nålen. Sett kateterspissen inn i venotomien, under kanylen. Bind deretter den midterste suturen forsiktig og fest kateteret.
MERK: Vær ekstremt forsiktig så du ikke knytter suturen for tett, fordi overflødig kraft kan skade kateteret. - Slipp den kaudale suturen, og før kateteret inn i høyre ventrikkel, detekter den klassiske høyre ventrikkeltrykkbølgeformen på en kontinuerlig skjerm.
- Stabiliser høyre ventrikkeltrykk. Sørg for riktig plassering av kateteret i høyre ventrikkel for å generere en optimal PV-sløyfe.
- Stabiliser størrelsen, som reflekterer blod og muskel, for å generere trykkstørrelsesløkker (dvs. Y-aksetrykk, X-aksestørrelse). Hvis nødvendig, roter kateterakselen forsiktig for å oppnå optimal plassering av kateteret langs aksen til høyre ventrikkel.
MERK: Den maksimale faseverdien, som reflekterer muskelen, skal være under 7 °.
- Stabiliser størrelsen, som reflekterer blod og muskel, for å generere trykkstørrelsesløkker (dvs. Y-aksetrykk, X-aksestørrelse). Hvis nødvendig, roter kateterakselen forsiktig for å oppnå optimal plassering av kateteret langs aksen til høyre ventrikkel.
- Når trykk-størrelses-sløyfesignalet er optimalt, trykker du på "Enter" på konsollen under anskaffelsen for å utføre en baseline-skanning. Sørg for at pulsen som rapporteres på skjermen i slag per minutt (bpm), er i et fysiologisk område (dvs. 400–600 bpm).
- Generer PV-løkkene. Endre "Magnitude" til "Volume" som en parameter for X-aksen og hold trykket som Y-aksen. Når PV-sløyfesignalet er optimalt, ta opp i 30 s.
- Stopp opptaket. Trekk kateteret tilbake og tørk forsiktig av med gasbind. Sett kateteret i heparin/natriumkloridoppløsning og bind den kaudale suturen for å stoppe blødning fra halsvenen.
- Venstre ventrikkelkateterisering (figur 5 A–D).
- Hev forsiktig høyre carotis, som tidligere var isolert (5A) ved å skyve buede tang under arterien.
- Bind den forrige suturen, og dermed okkluderer arterien. Påfør deretter kranialt rettet trekkraft forsiktig ved hjelp av en hemostatisk klemme.
- Trekk den mest distale suturen i en kaudal retning ved hjelp av en hemostatisk klemme. Lag en løs potensiell knute på den midterste suturen.
- Sett flere dråper oppvarmet, fysiologisk saltvann på karet på stedet for den forventede arteriotomien. Fokuser på kranialseksjonen, mellom caudal og midtsutur, ved hjelp av stereotaksisk mikroskop.
- Påfør forsiktig overlegen trekkraft på arterien. Utfør en arteriotomi ved å sette inn en 30 G buet nål mellom kranialsuturen og mellomsuturen. Sett nålen ved 140° i forhold til arterien for å sikre at den kommer inn på en koaksial måte.
- Sett kateterspissen inn i arteriotomien og stram deretter midtsuturen for å sikre kateteret. Samtidig slipper du den distale suturen og fører kateteret inn i aorta for å starte opptaket. Sørg for at trykkkanalen viser et typisk aortaspor.
- Advance kateteret retrograd over aortaklaffen inn i venstre ventrikkel. Inntreden i venstre ventrikkel vil være tydelig fra det plutselige markerte fallet i diastolisk trykk fra aorta.
- Stabiliser venstre ventrikulær trykk. Sørg for riktig plassering av kateteret i venstre ventrikkel for å generere en optimal PV-sløyfe.
- Stabiliser størrelsen, som reflekterer blod og muskel, for å generere trykkstørrelsesløkker (dvs. Y-aksetrykk, X-aksestørrelse). Hvis nødvendig, roter kateterakselen forsiktig for å oppnå optimal plassering av kateteret langs venstre ventrikkelakse.
MERK: Den maksimale faseverdien, som reflekterer muskelen, skal være under 7 °.
- Stabiliser størrelsen, som reflekterer blod og muskel, for å generere trykkstørrelsesløkker (dvs. Y-aksetrykk, X-aksestørrelse). Hvis nødvendig, roter kateterakselen forsiktig for å oppnå optimal plassering av kateteret langs venstre ventrikkelakse.
- Stopp opptaket. Trekk kateteret tilbake og legg det i heparin/natriumkloridoppløsning. Bind deretter den kaudale suturen.
- Rengjør kateteret med et enzymatisk vaskemiddel (f.eks. endozim).
MERK: Etter operasjonen, avlive dyret i henhold til institusjonens retningslinjer for dyreforsøk.
6. Dataanalyse
- Utfør PV-sløyfeanalysen i henhold til etablerte anbefalinger.
- Velg det optimale trykk-volumsporet (ideelt sett et helt, stabilt 30 s-opptak). På programvaren klikker du på "Advance", klikker "Loops", og klikker deretter "Offline Calculation".
- Velg volum som volumkanal og trykk som trykkkanal.
- For konsistente resultater er det nødvendig med minst 20 sløyfer.
Representative Results
Kateteret ble plassert i en 10 ml sprøyte inneholdende en oppløsning av heparinisert saltvann i romtemperatur 30 min før kateteriseringen (figur 1A). En 30 G nål ble bøyd ~90° (figur 1B, C), og en trakeotomikanyle med diameter på 1,45 mm ble fremstilt (figur 1C).
Vedlikehold av fysiologisk kroppstemperatur er kritisk. Musen ble teipet ned og koblet til åndedrettsvernet gjennom en nesekjegle. Tilbakemeldingssonden ble plassert mellom puten og baksiden av musen. En rektal sonde ble satt inn for å overvåke dyrets kroppstemperatur (figur 2A). Kroppstemperatur (37,1 °C) og temperatur på pute (40,7 °C) ble overvåket (figur 2B).
Fotografier av de kritiske trinnene i intubasjonsprosedyren er vist i figur 3A–C. Vellykket og uhindret intubasjon ga regelmessig respirasjonsfrekvens med stabilt topptrykk (figur 2B).
Bilder av de kritiske trinnene ved høyre hjertekateterisering, fra isolering av vena jugularis (figur 4A–C) til innsetting av kateteret i vena jugularis er vist i figur 4D. Figur 5 viser de kritiske trinnene ved venstre hjertekateterisering, inkludert isolering av høyre halspulsåre (figur 5 A,B) og kateterinnleggelse (figur 5 C,D)
Kateteret ble ført inn i vena jugularis og avansert inn i høyre ventrikkel. Deretter ble høyre ventrikkeltrykk stabilisert, og riktig posisjonering verifisert. Alle kateterelektrodene (6 mm lang akselengde) måtte være innenfor høyre ventrikkelkamre og ikke i kontakt med ventrikkelveggene. Optimal plassering av kateteret som skjematisk representert i figur 6A genererte optimale PV-sløyfer (dvs. trekantede, vanlige). Feil posisjonering som skjematisk representert i figur 6B (dvs. kontakt med ventrikkelveggen) vil resultere i feilaktige PV-sløyfer (dvs. kollapsede og uregelmessige sløyfer).
Kateteret ble ført inn i carotis, avansert inn i aorta, deretter avansert retrograd over aortaklaffen inn i venstre ventrikkel. Venstre ventrikkeltrykk ble stabilisert og høyre posisjonering verifisert. Alle kateterelektrodene (6 mm lang akselengde) skal være innenfor venstre ventrikkelkamre og ikke i kontakt med ventrikkelveggene. Optimal plassering av kateteret som skjematisk representert i figur 6C genererte optimale PV-sløyfer (dvs. rektangulære, vanlige). Feil posisjonering som skjematisk representert i figur 6D (dvs. kontakt med ventrikkelveggen) resulterte i feilaktige PV-sløyfer (dvs. kollapsede, ikke-rektangulære og uregelmessige løkker).
Representativ hemodynamikk generert av venstre og høyre PV-sløyfer viste en hjertefrekvens på 410 bpm, hjerteutgang på 9,107 μL / min og slagvolum på 24,5 μL. Spesifikke høyre ventrikkelparametere viste et systolisk trykk i høyre ventrikkel på 21,9 mm Hg, diastolisk trykk i høyre ventrikkelende 1,049 mm Hg, ejeksjonsfraksjon på 56,1 %, dp/dt maks på 1 469 mm Hg/s, dp/dt maks på -1,504 mm Hg/s, endediastolisk volum på 38,4 μL, slagarbeid på 0,068 mJ, trykk-volumareal på 0,089 mJ, pulmonal arteriell elastans (Ea) på 0,83 mm Hg/μL og Tau-faktor på 12,8 ms. Spesifikke venstre ventrikkelparametere viste et systolisk trykk i venstre ventrikkel på 77,1 mm Hg, diastolisk trykk i venstre ventrikkelende på 2,33 mm Hg, ejeksjonsfraksjon på 59,1 %, dp/dt max på 4 695 mm Hg/s, dp/dt max på -3 553 mm Hg/s, endediastolisk volum på 36,9 μL, slagarbeid på 0,14 mJ, trykk-volumareal på 0,22 mJ, arteriell elastans (Ea) på 5,37 mm Hg/μL, og Tau-faktor på 15,1 ms (tabell 1).
| Hemodynamiske parametere | |
| HR (BPM) | 410,6 ± 23,3 |
| CO (μL/min) | 9107 ± 1016 |
| SV (μL) | 24,5 ± 2,3 |
| RV (funksjon) | |
| RVSP (mmHg) | 21,9 ± 2,15 |
| RVEDP (mmHg) | 1,042 ± 0,12 |
| EF (%) | 56,1 ± 4,4 |
| dP/dt maks (mmHg/s) | 1469 ± 170 |
| dP/dt maks (- mmHg/s) | 1504 ± 215 |
| EDV (μL) | 38,4 ± 3,7 |
| SW (mJoules) | 0,068 ± 0,008 |
| PVA (mJoules) | 0,084 ± 0,009 |
| Ea (mmHg/μL) | 0,83 ± 0,09 |
| Tau-faktor (ms) | 12,8 ± 0,8 |
| LV (funksjon) | |
| LVSP (mmHg) | 77,1 ± 2,4 |
| LVEDP (mmHg) | 2,33 ± 0,17 |
| EF (%) | 59,1 ± 3,6 |
| dP/dt maks (mmHg/s) | 4695 ± 355 |
| dP/dt maks (- mmHg/s) | 3553 ± 373 |
| EDV (μL) | 36,9 ± 4,8 |
| SW (mJoules) | 0,14 ± 0,013 |
| PVA (mJoules) | 0,22 ± 0,03 |
| Ea (mmHg/μL) | 5,37 ± 0,9 |
| Tau-faktor (ms) | 15.07 ± 1.7 |
| CO, hjerteutgang; Ea, arteriell elastans; EDV, slutt diastolisk volum; HR, hjertefrekvens; LVEDP, diastolisk volum i venstre ventrikkelende; LVSP, venstre ventrikulær systolisk trykk; PVA, trykkvolumområde; RVEDP, diastolisk trykk i høyre ventrikkelende; RVSP, høyre ventrikulær systolisk trykk; SV, slagvolum; SW, hjerneslag arbeid; Tau faktor, Tau Mirsky. N = 6 mus. Verdier uttrykkes ± SEM | |
Tabell 1: Tabell over hemodynamiske parametere. Venstre og høyre ventrikulær hemodynamisk parameter målt i seks mus.
Figur 1: Eksperimentell klargjøring og oppsett. (A) Kateter i en 10 ml sprøyte med saltvann/heparin, (B), (C) 30 G kanyle bøyd til ca. 90°, (D) trakeotomi kanyle, 1,45 mm diameter. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 2: Anestesi, kroppstemperaturkontroll . (A) Mus med tre poter teipet, koblet til åndedrettsvern gjennom en nesekjegle, med tilbakemelding og rektalprober satt inn. Legg merke til at varmeputen er under operasjonsteppen. (B) Temperaturmonitorkontroll som viser kroppstemperatur (rektal) og pute (tilbakekobling) og ventilasjonsparametrene: respirasjonsfrekvens (innstilt RR), gjennomsnittlig tidalvolum (Meas TV), topptrykk (PeakPress) og minuttventilasjon (MinVol). Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 3: Intubasjonsprosedyre. (A) Huden ble trukket bort og kuttet. Den submandibulære kjertelen ble forsiktig flyttet til side. Sternokleidomastoid og sternohyoidmuskel ble trukket fra hverandre og deretter tang ført under luftrøret, ved hjelp av mild, butt disseksjon. (B) Kirurgisk silke (4.0) ble ført under luftrøret og et lite kutt ble gjort anteriort mellom to bruskringer i luftrøret. Trakeostomien ble satt inn og bundet. (C) Trakeostomirøret var koblet til respiratoren, og suturen ble bundet rundt slangen. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 4 Høyre ventrikkelkateterisering. (A), (B), (C) Høyre vena jugularis ble isolert, deretter ble en kirurgisk sutur ført under og bundet på kranialsiden av venen. Lett trekkraft ble påført denne suturen i retning av hodet ved hjelp av en hemostatisk klemme. Ytterligere to suturer ble ført distalt under halsvenen. Den mest distale suturen ble trukket forsiktig i en kaudal retning ved hjelp av en hemostatisk klemme. En løs, potensiell knute ble laget i midtsuturen. (D) Kateteret ble satt inn i vena jugularis, den midterste suturen ble bundet til kateteret. Bildene i (C) og (D) er forstørret gjennom et stereomikroskop. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 5 Venstre ventrikkelkateterisering. (A), (B) Høyre carotis ble isolert, deretter ble en kirurgisk sutur ført under vena jugularis og bundet på kranialsiden av venen. Lett trekkraft ble påført denne suturen i retning av hodet ved hjelp av en hemostatisk klemme. Ytterligere to suturer ble passert under halspulsåren. Den mest distale suturen ble forsiktig trukket i en kaudal retning ved hjelp av en hemostatisk klemme. Det ble laget en løs, potensiell knute i midtsuturen. (C) Kateterspissen ble ført inn i halspulsåren, og deretter den midterste suturen bundet til kateteret for å sikre den. (D) Kateteret ble forsiktig ført retrograd nedover carotisen mot aorta. Bildene i (B), (C), (D) er forstørret gjennom et stereomikroskop. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 6: Skjematisk fremstilling av kateterposisjonering og resulterende PV-sløyfer. (A) Optimal kateterplassering i høyre ventrikkel. Spissen av kateteret er midt i ventrikkelen, isolert fra ventrikkelveggene. Representative PV-sløyfer som følge av optimal kateterposisjonering i høyre ventrikkel (dvs. stabil, trekantet). (B) Feil kateterplassering i høyre ventrikkel. Spissen av kateteret er i kontakt med ventrikulære vegger. Representativ PV-sløyfestøy som følge av en suboptimal kateterposisjonering i høyre ventrikkel (dvs. kollapset, uregelmessig). (C) Optimal kateterplassering i venstre ventrikkel. Spissen av kateteret er midt i ventrikkelen, isolert fra ventrikkelveggene. Representative PV-sløyfer som følge av optimal kateterposisjonering i venstre ventrikkel (dvs. stabil, rektangulær). (D) Feil kateterplassering i venstre ventrikkel. Spissen av kateteret er i kontakt med ventrikulære vegger. Representative PV-sløyfer som følge av en suboptimal kateterposisjonering i venstre ventrikkel (dvs. kollapset, uregelmessig). Et 50 Hz FIR støyfilter ble brukt for å generere PV-sløyfer. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Discussion
Vurdering av hjertefunksjon er et kritisk trinn for preklinisk kardiovaskulær og pulmonal vaskulær forskning. I dette arbeidet foreslo vi en protokoll for en lukket brystbiventrikulær vurdering av hjertefunksjon hos mus. Gjennom denne tilnærmingen kan man generere høyre ventrikkel og venstre ventrikkel PV-sløyfer i samme mus. Denne tilnærmingen gir en robust og fullstendig vurdering av hjertefunksjonen, som muliggjør måling av systolisk og diastolisk funksjon, samt slagvolum og hjerteutgang. I motsetning til den åpne brysttilnærmingen som klassisk brukes til kateterisering av gnagere, resulterer denne lukkede brystteknikken i mer stabil fysiologi og mer fysiologisk relevante data. Mens det er teknisk mer utfordrende og avhengig av operatørferdigheter for å kunne plassere kateteret i høyre og venstre ventrikkel, begrenser den lukkede brysttilnærmingen traumer og blødninger forbundet med åpen brystkirurgi og reduserer de drastiske trykkendringene forbundet med å utsette lungene for atmosfærisk trykk. Den lukkede brysttilnærmingen emulerer også bedre hjertekateteriseringsprosedyren som utføres hos pasienter, noe som forbedrer relevansen av å bruke denne teknikken i preklinisk forskning.
Den kirurgiske prosedyren er det kritiske trinnet i protokollen. Selv når du bruker et kirurgisk mikroskop for kateterinnsetting i halsvenen eller halspulsåren, som anbefales, krever denne prosedyren praksis og teknisk dyktighet. Forsiktig disseksjon av karene fri fra omkringliggende fascia ved hjelp av mild, stump disseksjon vil øke suksessen med kanylering samtidig som risikoen for blødning minimeres. For å minimere blodtap er det avgjørende å kanylere karoten i sekvensielle trinn: 1) introdusere kateterspissen i halspulsåren; 2) Bind suturen forsiktig rundt den delen av arterien som inneholder kateteret; 3) slipp den sikre suturen, slik at kateterbevegelsen opprettholdes samtidig som du opprettholder forsiktig oppadgående trekkraft for å minimere blødning; og 4) flytte kateteret til aorta. Plassering av kateteret i ventrikkelen, som bestemmes av sanntids bølgeformovervåking, er den mest utfordrende delen av denne protokollen. Alle kateterets elektroder skal være innenfor ventrikkelhulen, og ingen skal berøre veggen. Enhver feil plassering av kateteret vil resultere i uregelmessige PV-sløyfer og vil påvirke eller utelukke datainnsamling negativt. Ved å gjenkjenne den karakteristiske trykk-volum-bølgeformen som følger av å ha alle elektroder i ventrikkelen, kan man være trygg på en passende kateterposisjon. Det er kritisk å oppnå en stabil ventrikkeltrykkbølgeform og stabile trykkstørrelsesløkker før du skifter til PV-modus og voluminnsamling. Riktig kunnskap om hjertefysiologi og anatomi er avgjørende for å lykkes med denne prosedyren. Online lesing av PV-sporene, fra atriumet, trikuspidalventilområdet og høyre ventrikkel, vil vise fremdriften av kateteret og bidra til å oppnå riktig posisjonering. Det er viktig å kjenne den normale hjertefrekvensen (400–600 bpm), og bølgeformer og trykk som forventes (f.eks. systolisk trykk i høyre ventrikkel, 18–25 mm Hg, diastolisk trykk <5 mm Hg; systolisk trykk i venstre ventrikkel 60–120 mm Hg40, diastolisk trykk <8 mmHg) hos mus for å tillate operatøren å evaluere sannheten til de observerte dataene.
Kvaliteten og reproduserbarheten av dataene vil avhenge av prosedyrens hastighet og blodtap eller blødning. Prosedyren fra anestesi til ferdigstillelse av datainnsamling tar i gjennomsnitt ~ 30-40 min / mus. Høyre hjertekateterisering fra innsetting av kateter til datainnsamling tar 5–10 min, venstre hjertekateterisering fra innsetting av kateter til datainnsamling tar ytterligere 10–15 min. Data om publiseringskvalitet oppnås i ~ 75% av tilfellene. Sekvensen av trinn i hjertekateteriseringen bør holdes konstant mellom dyrene. I denne prosedyren intuberes musene først, etterfulgt av høyre ventrikulær kateterisering, og til slutt venstre ventrikulær kateterisering. Beslutningen om å fortsette i denne rekkefølgen er basert på større vanskeligheter og blødningsrisiko for venstre hjerte versus høyre hjertekateterisering. En ikke-spesifikk 50 Hz støyopptaksartefakt kan observeres. Denne støyen kan reduseres ved hjelp av et FIR filter med høy cutoff ved 50 Hz og en lav cutoff på 0 på programvaren. For volumkanalen oppretter du et nytt kanal-/filter-/FIR-filter. Et hakkfilter på 50 Hz kan også brukes under datainnsamling for å eliminere nettstøy og fjerne radiofrekvensforstyrrelser.
Jo raskere kateteriseringen gjøres, desto bedre er kvaliteten på dataene. Basert på tidligere erfaring anbefales det å innhente dataene innen 15 min. Økt kateteriseringstid øker det fysiologiske stresset på dyret og øker risikoen for arytmi på grunn av tilstedeværelsen av kateteret i hulrommet. Disse kreftene kan redusere slagvolumet og svekke reproduserbarheten og tolkbarheten til bølgeformene. I tillegg er spissen av kateteret skarp og kan skade eller punktere ventrikkelen. Dette er spesielt viktig for høyre ventrikkel, som er ~ 1/3rd tykkelsen på venstre ventrikkel.
Invasiv trakeostomi og mekanisk ventilasjon med positivt trykk resulterer i stabil og kontrollert pusting av musene og reduserer variasjonen i PV-sløyfeoppkjøpet. Imidlertid er positivt endeekspiratorisk trykk (PEEP) en markert kontrast til normal ventilasjon, som er et negativt trykkfenomen. Sammen reduserer overtrykksventilasjon og PEEP hjertets minuttvolum og reduserer høyre hjertetrykk. Selv om det kreves for innsamling av stabile data, vil mekanisk ventilasjon samt kardiodepressive effekter av anestesien påvirke PV-sløyfene og bør betraktes som en begrensning. Forbigående stopp av mekanisk ventilasjon under kort registrering av PV-sløyfer brukes til å eliminere denne potensielle kilden til artefakter. Merk at ventilasjonseffektiviteten kan bekreftes ved kapnografiovervåking av karbondioksid.
De tekniske ferdighetene som kreves for lukket bryst tilnærming kan være en begrensning av denne teknikken. Likeledes er det utfordrende å oppnå riktig, stabil posisjonering av kateteret i ventrikkelen. Oddsen for suksess øker med operatørerfaring og med musens størrelse og vekt. Kateterisering av mus under 20 g er ekstremt utfordrende. Den unike kammergeometrien til høyre ventrikkel kan påvirke volummåling og bør vurderes. Bedøvelsen som brukes, hjertefrekvens, temperaturer og dyrebelastning kan påvirke hemodynamiske parametere og bør rapporteres nøye og overvåkes.
Avslutningsvis utføres både høyre og venstre ventrikulær kateterisering i samme mus i denne protokollen. Avhengig av forskerens spesifikke mål, kan venstre eller høyre ventrikulær kateterisering utføres uavhengig, ved hjelp av den relevante delen av biventrikulær prosedyre. Tilnærmingen som presenteres er imidlertid optimal for fullstendig vurdering av hjertefunksjonen.
Disclosures
Ingen
Acknowledgments
Forfatterne ønsker å anerkjenne hjelp og samarbeid med Queen's University dyreavdeling personlig. Forfatterne ønsker å anerkjenne hjelp fra Austin Read, TMED MSc kandidat.
Denne studien ble støttet delvis av US National Institutes of Health (NIH) tilskudd NIH 1R01HL113003-01A1 (SLA), NIH 2R01HL071115-06A1 (SLA), Canada Foundation for Innovation og Queen's Cardiopulmonary Unit (QCPU) 229252 og 33012 (SLA), Tier 1 Canada Research Chair i mitokondriell dynamikk og translasjonsmedisin 950-229252 (SLA), Canadian Institutes of Health Research (CIHR) Foundation Grant CIHR FDN 143261, William J. Henderson Foundation (SLA), Canadian Vascular Network Scholar Award (FP), og Paroian Family-stipendet fra pulmonal hypertension association of Canada (FP)
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| ADVantage Pressure-Volume System (ADV500) | Transonic | FY097B | |
| Endozime AW triple plus | Ruhof | 34521 | |
| Fiber optic dual Gooseneck | Volpi Intralux | # 6000-1 | |
| Forceps | F.S.T | 11052-10 | |
| Forceps | F.S.T | 11251-20 | |
| Gauze sponges | Dermacea | 441400 | |
| Hemostatic clamp | F.S.T | 13003-10 | |
| Hemostatic clamp | F.S.T | 13018-14 | |
| Heparin sodium | Sandoz | 023-3086 | 100 U/L |
| High-fidelity admittance catheter | Scisence; Transonic | FTH-1212B-3518 | |
| Isofluorane | Baxter | CA2L9108 | |
| labScribe v4 software | iworx | LS-30PVL | |
| Needle (30 gauge) | BD | 305106 | |
| sodium chloride injection | Baxter | JB1309M | 0.9%(wt/vol) |
| Stereo microscope | Cole-Parmer | OF-48920-10 | |
| Surgical suture | SERAFLEX | ID158000 | black braided silk, 4.0 |
| Surgical tape | 3M, Transpore | SN770 | |
| Tabletop Single Animal Anesthesia Systems | Harvard apparatus | 72-6468 | |
| Tracheotomy canula 1.45 mm diameter | Harvard apparatus | 72-1410 | |
| Ventilator, far infrared warming pad for mice and rats PhysioSuite | Kent scientific corporation | # PS-02 |
References
- Nowbar, A. N., Howard, J. P., Finegold, J. A., Asaria, P., Francis, D. P. 2014 Global geographic analysis of mortality from ischaemic heart disease by country, age and income: Statistics from World Health Organisation and United Nations. International Journal of Cardiology. 174 (2), 293-298 (2014).
- Nowbar, A. N., Gitto, M., Howard, J. P., Francis, D. P., Al-Lamee, R. Mortality From Ischemic Heart Disease. Circulation. Cardiovascular quality and outcomes. 12 (6), 005375 (2019).
- Finegold, J. A., Asaria, P., Francis, D. P. Mortality from ischaemic heart disease by country, region, and age: Statistics from World Health Organisation and United Nations. International Journal of Cardiology. 168 (2), 934-945 (2013).
- McClellan, M., Brown, N., Califf, R. M., Warner, J. J. Call to Action: Urgent Challenges in Cardiovascular Disease: A Presidential Advisory From the American Heart Association. Circulation. 139 (9), 44-54 (2019).
- Clark, J. E., Marber, M. S. Advancements in pressure-volume catheter technology - stress remodelling after infarction. Experimental Physiology. 98 (3), 614-621 (2013).
- Price, L. C., Wort, S. J., Finney, S. J., Marino, P. S., Brett, S. J. Pulmonary vascular and right ventricular dysfunction in adult critical care: current and emerging options for management: a systematic literature review. Critical Care. 14 (5), London, England. 169 (2010).
- Ryan, J. J., et al. Right Ventricular Adaptation and Failure in Pulmonary Arterial Hypertension. The Canadian Journal of Cardiology. 31 (4), 391-406 (2015).
- Cooper, L. B., et al. Hemodynamic Predictors of Heart Failure Morbidity and Mortality: Fluid or Flow. Journal of cardiac failure. 22 (3), 182-189 (2016).
- Turina, J., Stark, T., Seifert, B., Turina, M. Predictors of the long-term outcome after combined aortic and mitral valve surgery. Circulation. 100 (19), Suppl 48-53 (1999).
- Vonk Noordegraaf, A., Galiè, N. The role of the right ventricle in pulmonary arterial hypertension. European Respiratory Review : An Official Journal of the European Respiratory Society. 20 (122), 243-253 (2011).
- Vonk-Noordegraaf, A., et al. Right heart adaptation to pulmonary arterial hypertension: physiology and pathobiology. Journal of the American College of Cardiology. 62 (25), Suppl 22-33 (2013).
- Potus, F., et al. Downregulation of miR-126 Contributes to the Failing Right Ventricle in Pulmonary Arterial Hypertension. Circulation. 132 (10), 932-943 (2015).
- Potus, F., Hindmarch, C., Dunham-Snary, K., Stafford, J., Archer, S. Transcriptomic Signature of Right Ventricular Failure in Experimental Pulmonary Arterial Hypertension: Deep Sequencing Demonstrates Mitochondrial, Fibrotic, Inflammatory and Angiogenic Abnormalities. International Journal of Molecular Sciences. 19 (9), 2730 (2018).
- Xiong, P. Y., et al. Biventricular Increases in Mitochondrial Fission Mediator (MiD51) and Proglycolytic Pyruvate Kinase (PKM2) Isoform in Experimental Group 2 Pulmonary Hypertension-Novel Mitochondrial Abnormalities. Frontiers in Cardiovascular Medicine. 5, 195 (2019).
- Schwarz, K., Singh, S., Dawson, D., Frenneaux, M. P. Right Ventricular Function in Left Ventricular Disease: Pathophysiology and Implications. Heart, Lung and Circulation. 22 (7), 507-511 (2013).
- Buckberg, G., Hoffman, J. I. E. Right ventricular architecture responsible for mechanical performance: Unifying role of ventricular septum. The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 148 (6), 3166-3171 (2014).
- Buckberg, G. D. The ventricular septum: the lion of right ventricular function, and its impact on right ventricular restoration. European Journal of Cardio-Thoracic Surgery. 29, Supplement_1 272-278 (2006).
- Farrar, D. J., Chow, E., Brown, C. D. Isolated Systolic and Diastolic Ventricular Interactions in Pacing-Induced Dilated Cardiomyopathy and Effects of Volume Loading and Pericardium. Circulation. 92 (5), 1284-1290 (1995).
- Dickstein, M. L., Todaka, K., Burkhoff, D. Left-to-right systolic and diastolic ventricular interactions are dependent on right ventricular volume. The American Journal of Physiology. 272 (6), Pt 2 2869-2874 (1997).
- Slater, J. P., et al. Systolic ventricular interaction in normal and diseased explanted human hearts. The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 113 (6), 1091-1099 (1997).
- Rosenkranz, S., et al. Pulmonary hypertension due to left heart disease: Updated Recommendations of the Cologne Consensus Conference 2011. International Journal of Cardiology. 154, 34-44 (2011).
- Ranchoux, B., et al. Metabolic Syndrome Exacerbates Pulmonary Hypertension due to Left Heart Disease. Circulation Research. 125 (4), 449-466 (2019).
- Habib, G., Torbicki, A. The role of echocardiography in the diagnosis and management of patients with pulmonary hypertension. European Respiratory Review : An official Journal of the European Respiratory Society. 19 (118), 288-299 (2010).
- Brierre, G., et al. New echocardiographic prognostic factors for mortality in pulmonary arterial hypertension. European Journal of Echocardiography. 11 (6), 516-522 (2010).
- Badano, L. P., et al. Right ventricle in pulmonary arterial hypertension: haemodynamics, structural changes, imaging, and proposal of a study protocol aimed to assess remodelling and treatment effects. European Journal of Echocardiography: the Journal of the Working Group on Echocardiography of the European Society of Cardiology. 11 (1), 27-37 (2010).
- Ibrahim, E. -S. H., Bajwa, A. A. Severe Pulmonary Arterial Hypertension: Comprehensive Evaluation by Magnetic Resonance Imaging. Case Reports in Radiology. 2015, 946920 (2015).
- Pinsky, M. R. The right ventricle: interaction with the pulmonary circulation. Critical Care. 20 (1), London, England. 266 (2016).
- Kosova, E., Ricciardi, M.
- Lindqvist, P., Calcutteea, A., Henein, M. Echocardiography in the assessment of right heart function. European Journal of Echocardiography. 9 (2), 225-234 (2007).
- Fogel, M. A. Assessment of Cardiac Function by Magnetic Resonance Imaging. Pediatric Cardiology. 21 (1), 59-69 (2000).
- Janardhanan, R., Kramer, C. M.
- Attili, A. K., Schuster, A., Nagel, E., Reiber, J. H. C., vander Geest, R. J. Quantification in cardiac MRI: advances in image acquisition and processing. The International Journal of Cardiovascular Imaging. 26 (1), 27-40 (2010).
- Urboniene, D., Haber, I., Fang, Y. -H., Thenappan, T., Archer, S. L. Validation of high-resolution echocardiography and magnetic resonance imaging vs. high-fidelity catheterization in experimental pulmonary hypertension. American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 299 (3), 401-412 (2010).
- Ashton, J. R., et al. Anatomical and functional imaging of myocardial infarction in mice using micro-CT and eXIA 160 contrast agent. Contrast Media & Molecular Imaging. 9 (2), 161 (2014).
- Larson, E. R., Feldman, M. D., Valvano, J. W., Pearce, J. A. Analysis of the Spatial Sensitivity of Conductance/Admittance Catheter Ventricular Volume Estimation. IEEE Transactions on Biomedical Engineering. 60 (8), 2316-2324 (2013).
- Sasayama, S., et al. Assessment of cardiac function by left heart catheterization: an analysis of left ventricular pressure-volume (length) loops. Journal of Cardiography. Supplement. (1), 25-34 (1984).
- Lindsey, M. L., Kassiri, Z., Virag, J. A. I., de Castro Brás, L. E., Scherrer-Crosbie, M. Guidelines for measuring cardiac physiology in mice. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 314 (4), 733-752 (2018).
- Townsend, D. Measuring Pressure Volume Loops in the Mouse. Journal of Visualized Experiments JoVE. (111), e53810 (2016).
- Provencher, S., et al. Standards and Methodological Rigor in Pulmonary Arterial Hypertension Preclinical and Translational Research. Circulation Research. 122 (7), 1021-1032 (2018).
- Lips, D. J., et al. Left Ventricular Pressure-Volume Measurements in Mice: Comparison of Closed-Chest Versus Open-Chest Approach. Basic Res Cardiol. 99 (5), 351-359 (2004).
