Summary
Dyremodeller for alvorlig akutt pankreatitt muliggjør studiet av patofysiologiske endringer i utgangspunktet, noe som letter observasjon av utviklingen av inflammatoriske hendelser. Her gir vi en protokoll for induksjon av alvorlig akutt gallepankreatitt ved retrograd infusjon av natrium taurocholat i bukspyttkjertelen av bedøvede C57BL / 6 mus.
Abstract
Biliær akutt pankreatittinduksjon ved natrium taurocholatinfusjon har blitt mye brukt av det vitenskapelige samfunnet på grunn av representasjon av den menneskelige kliniske tilstanden og reproduksjon av inflammatoriske hendelser som tilsvarer utbruddet av klinisk biliær pankreatitt. Alvorlighetsgraden av bukspyttkjertelskader kan vurderes ved å måle konsentrasjonen, hastigheten og volumet av den infunderte gallesyren. Denne studien gir en oppdatert sjekkliste over materialene og metodene som brukes i protokollgjengivelsen og viser hovedresultatene fra denne akutte pankreatitt (AP) modellen. De fleste av de tidligere publikasjonene har begrenset seg til å reprodusere denne modellen hos rotter. Vi har brukt denne metoden hos mus, noe som gir ytterligere fordeler (dvs. tilgjengeligheten av et arsenal av reagenser og antistoffer for disse dyrene sammen med muligheten for å jobbe med genetisk modifiserte stammer av mus) som kan være relevante for studien. For akutt pankreatittinduksjon hos mus presenterer vi en systematisk protokoll, med en definert dose på 2,5% natrium taurocholat ved en infusjonshastighet 10 μL / min i 3 min i C57BL / 6 mus som når sitt maksimale nivå av alvorlighetsgrad innen 12 timer induksjon og fremhever resultater med resultater som validerer metoden. Med praksis og teknikk er den totale estimerte tiden, fra induksjon av anestesi til ferdigstillelse av infusjonen, 25 min per dyr.
Introduction
Hos mennesker er tilstedeværelsen av gallestein den vanligste årsaken til pankreatitt på grunn av hindringen av den terminale delen av choledochal, forstyrrer strømmen av bukspyttkjertelsekretjoner og forårsaker en intens inflammatorisk prosess i bukspyttkjertelen, med en økning i konsentrasjonen av fordøyelsesenzymer i serumet og inflammatoriske mediatorer1,2.
To ulike teorier er foreslått for å forklare utviklingen av akutt pankreatitt (AP). Teorien om "felles kanal" antyder at steinene som er tilstede i galleblæren hindrer det distale vanlige gallekanalsystemet, slik at gallesekresjon kan strømme retrograd inn i bukspyttkjertelen. Den andre teorien (teorien om "kanalobstruksjon" antyder at hindringen av bukspyttkjertelkanalen ved overflødig gallestein forårsaker blokkering i strømmen av bukspyttkjertelsekresjon til tolvfingertarmen, forårsaker ductal hypertensjon3. Selv om mekanismene som fører til akutt gallepankreatitt ikke er fullt ut forstått, er utfallet en intens inflammatorisk prosess. Fordøyelsesenzymutbrudd og bukspyttkjertel selvfordøyelse fører til histopatologiske endringer, en økning i inflammatoriske cytokiner (IL-1β, IL-6, TNF-α) i ascitisk væske og serum, og en økning i akutte faseproteiner4,5,6.
Alvorlig akutt pankreatitt er en tilstand som fortjener klinisk oppmerksomhet på grunn av involvering av flere organer og høy dødelighetsrisiko. Dyremodeller for reproduksjon av akutt pankreatitt (AP) er viktige da disse forklarer sykdommens patofysiologiske mekanismer og hjelper til med å overvåke utviklingen av inflammatoriske hendelser, fra de første stadiene av sykdommen. Dette er vanligvis ikke mulig i klinikkene2,7. I tillegg er tilgang til bukspyttkjertelvev lett i prekliniske studier, favoriserer belysningen av endringer knyttet til kliniske forhold8 sammen med muligheten for å jobbe med isogene arter, eliminere uønskede variabler og speile klinisk likhet med resultatene observert i den menneskelige tilstanden9.
Biliære og ikke-biliære modeller for induksjon av akutt pankreatitt hos rotter og musarter har blitt studert ofte i den vitenskapelige litteraturen. Ikke-biliære induksjonsmetoder inkluderer administrering av supramaksimale stimulerende doser av cholecystokinin secretagogue eller dens analoge cerulein10; administrering av nesten dødelige doser av L-arginin; eller administrering av et kolinmangel diett supplert med etionin11. Selv om disse metodene er enkle å reprodusere og resulterer i bukspyttkjertelbetennelse, replikerer de ikke mekanismene som i teorien utløser AP (dvs. refluks av gallesekresjon i bukspyttkjertelen). Teknikken som adresserer biliærmodellen er basert på retrograd infusjon av gallsyrer i bukspyttkjertelen og krever godt trente forskere for å utføre denne protokollen. Flere studier har blitt publisert ved hjelp av denne metoden hos rotter (tilsynelatende av tekniske årsaker siden disse forsøkene involverer kirurgiske prosedyrer)12,13. Imidlertid kan tilnærmingen hos mus gi mer interessante resultater i studiet av betennelse3,14,15. I denne studien vil vi vise en sjekkliste over trinnene som skal følges for reproduksjon av alvorlig akutt pankreatitt ved infusjon av natrium taurocholat i C57BL/6 bedøvede mus.
For arbeider som involverer behovet for eksperimenter med antistoffer og analyse av gen- og proteinuttrykket, er bruk av mus å foretrekke på grunn av det større arsenalet av materialer for disse dyrene og muligheten for å jobbe med isogene og knockout-arter, blant annet som kan brukes relevante for studier16. Mus C57BL/6 er en innavlet stamme av mus som opprinnelig ble utviklet for studiet av antitumoraktivitet og immunologi. Denne stammen blir i økende grad foretrukket av forskere for å være isogene, noe som gir større reproduserbarhet av resultater, noe som kan innebære bruk av et mindre antall dyr i et eksperiment og mindre variasjon av resultater mellom samme gruppe 17,18.
Perides et al. (2010)14 publiserte en protokoll for AP-induksjon hos mus ved natriumtaurocholatinfusjon. Her oppdaterer vi denne modellen ved hjelp av en høyere natriumtaurocholatkonsentrasjon (2,5 %) hos C57BL/6-mus, med et definert volum og infusjonshastighet (figur 1). Det maksimale alvorlighetsgraden nås innen 12 timer etter induksjon hos mus. Forhøyningen av konsentrasjonen av IL-6 både i serumet og i bukhulen er korrelert med utviklingen av AP. Med praksis er den totale estimerte tiden fra induksjon av anestesi til ferdigstillelse av infusjonen, 25 min per dyr. Det er viktig at en utdannet forsker utfører dette eksperimentet. For å sikre at oppløsningen injiseres riktig i den vanlige gallekanalen, utfør flere pilottreningsøkter ved hjelp av metylenblå i stedet for natrium taurocholat.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Denne protokollen ble godkjent av Etikkkomiteen for bruk av dyr fra USP Medicine School, Num. Project: 1343/2019-CEUA: FMUSP. For denne protokollen ble C57BL/6 mus, i alderen 6 uker, som veide 20 ± 2 g brukt (n = 9/gruppe).
1. Laparotomi
- Bedøv dyr med xylazin (10 mg/kg) og ketaminoppløsning (80 mg/kg), subkutant (0,1 ml/10 g kroppsvekt) ved hjelp av en 1 ml sprøyte og 13x0,45 mm nål 26G 1/2. Se etter tilstrekkelig anestesidybde ved å klemme tåen. Kontroller kroppstemperaturen ved hjelp av oppvarmede pads. Sørg for at alle kirurgiske materialer er sterile.
- Rengjør bukområdet med 5% povidon-jodoppløsning og bruk en trimmer for å fjerne hår mellom brystet og underlivet (ca. 2 cm2). Rengjør det kirurgiske området med 70% alkohol.
- Immobiliser dyret på operasjonsbrettet ved hjelp av kirurgisk tape. Bruk saks til å kutte 5 mm av huden horisontalt, på den øvre delen av magen og 1 cm under xiphoid-prosessen. Gjenta kuttet på bukhinnen. Dette vil resultere i en laparotomi med minimal eksponering av hulrommet.
2. Finne og eksponere bukspyttkjertelen
- Ved hjelp av en retraktor trekker du leveren mot musens hode, ~ 1 cm fra tarmen.
- Finn regionen av bukspyttkjertelen som vil bli injisert med natrium taurocholat (bukspyttkjertelhodet). Finn tolvfingertarmen med referanse til leveren- under leveren, på høyre side (til venstre som musen vises). Tolvfingertarmen er den første delen av tynntarmen og er koblet til den siste delen av magen.
- Ved hjelp av tang, løft leveren mot dyrehodet, og trekk forsiktig tynntarmen. Fest de to laterale endene av tynntarmen med en 6-0 polypropylen sutur for bedre å se den distale delen av den vanlige gallekanalen.
3. Alvorlig akutt pankreatittinduksjon
- Okkluder midlertidig den proksimale vanlige gallekanalen med et mikrovesselklemme for å forhindre at retrograd infusjon lekker ut i leveren. Den vanlige gallekanalen kan ses på leversiden av tolvfingertarmen, og krysset med tolvfingertarmen vil virke hvitt. Utsett orgelet ut av bukhulen.
- Punkter periampullærområdet (hvitaktig del av tynntarmens vegg) for å få tilgang til den vanlige gallekanalen med en 0,4 mm nål koblet til et 0,54 mm polyetylenrør.
- Lag en midlertidig okklusjon av den distale vanlige gallekanalen med 8-0 for å forhindre at natrium taurocholatoppløsningen lekker ut i tolvfingertarmen.
- Start infusjonspumpen og programmer en 2,5% natriumtaurocholatoppløsning (fortynnet i 0,9% saltvann) infusjon med en konstant hastighet på 10 μL / 10 g kroppsvekt i 3 min.
- Etter infusjonen, fjern mikrovesselklemmen, den midlertidige 8-0 og injeksjonsnålen fra gallepankreaskanalen for å rekonstituere gallens fysiologiske strøm.
- På slutten, suturer magen med 6-0 nonabsorbent monofilament polypropylen sutur. Tiden mellom laparotomien og endesugingen skal være maksimalt 30 min (se figur 1).
- Etter operasjonen, hus dyrene i polyetylen bokser foret med trespon og vann og mat ad libitum.
- Behandle kontrollmus på samme måte som de eksperimentelle musene, men sørg for at infusate bare består av saltvann. Utfør den kirurgiske prosedyren og infusjonen av saltoppløsning (10 ml/min, i 3 min) i en kontrollgruppe (SHAM) for å eliminere den inflammatoriske skjevheten forårsaket av kirurgi og kannasjon.
- Bruk tramadol 12,5 mg/kg subkutant hver 8.
4. Metoder for analyse
- Ved 12 timer etter AP-induksjon bedøves dyrene med xylazin (10 mg/kg) og ketamin (80 mg/kg) for å samle ca. 250 μL blod via orbital plexus.
- Hold huden forsiktig på ryggen, fremme et lite fremspring av øyebollet, og plasser det med øyet vendt oppover.
- Innpod en dråpe øyesalve som inneholder lokalbedøvelse i dyrets øye.
- Plasser enden av kapillærrøret i medialhjørnet på øyet og sett det forsiktig under øyebollet, med en vinkel på ~ 30 ° - 45 °. Roter kapillærrøret til blodstrømmen begynner. Husk at det ikke er nødvendig å bruke kraft til prosedyren.
- Når kolleksjonen er over, sørg for homeostase ved å holde øyelokkene lukket av lyskompresjon med gasbindet. Kast kapillærrøret i slipebeholderen19.
- Sentrifugerer serumet (700 x g, 15 min) og lagerfører supernatanten for amylase og IL-6 dosering (trinn 4,7 og 4,8).
- Avlive mus ved CO2-kvelning .
- Bruk en 27 G nål til å injisere 4 ml iskald 1x PBS i bukhulen. Tinet bukhuden og sørg for at nålen skyves sakte i bukhinnen for ikke å punktere noen organer. Etter injeksjonen masserer du forsiktig bukhinnen i 10 s for å fjerne celler som er festet til bukhinnen.
- Bruk saks og pinsett, lag et lite kutt (0,5 cm) på den indre huden og muskulaturen for å eksponere bukhulen. Sett inn en pærepipette i bukhinnen og samle væsken. Vær forsiktig så du ikke aspirerer fettvev eller andre organer.
- Samle så mye væske som mulig og deponer den innsamlede cellefjæringen i rør som holdes på is. Kast pærepipetten i den skarpe beholderen20. Sentrifuger peritonealvæsken (250 x g, 5 min) og lagre supernatanten for IL-6 dosering (trinn 4.9).
- Samle bukspyttkjertelområdet ved siden av tolvfingertarmen (<5mm).
- Behandle bukspyttkjertelen ved å fikse i 10% formalin og inkorporere den i parafin.
- Flekk lysbildene med hematoksylin og eosin for histopatologiske analyser under lysmikroskopi. Bruk Schmidts protokoll21 (bukspyttkjertelødem, acinarcelle, skade/nekrose, bukspyttkjertelbetennelse) for å vurdere omfanget av AP.
- Mål amylase (U/dL) ved hjelp av kommersielt tilgjengelige sett i henhold til produsentens anbefalinger.
- Mål IL-6 fra Luminex-analyser ved hjelp av kommersielle sett i henhold til produsentens anbefalinger.
- Oppbevar serum- og bukvæske supernatanten som er oppnådd i trinn 4.1 og 4.4 i en fryser ved -80 °C om nødvendig.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Pankreatitt alvorlighetsgrad ble scoret mellom 0-3 i henhold til Schmidts skala21 hvor null tilsvarer fraværet, 1 tilsvarer en mild tilstedeværelse (<25%), 2 tilsvarer en moderat tilstedeværelse (mellom 25 og 50%) og 3 tilsvarer en intens tilstedeværelse (> 50%) (Tabell 1). Målingene som ble utført var plasma amylase aktivitet, bukspyttkjertelen ødem, acinar celle, skade / nekrose, bukspyttkjertel betennelse (ved histologi analyse av H &E-farget seksjoner) og IL-6 cytokin konsentrasjon i serum og PerC væske. Etter 12 timer med alvorlig AP viste APTA-gruppen en økning i serumamylasekonsentrasjonen (6194 ± 336,7 U/dl), sammenlignet med sham-gruppen (3845 ± 135,7 U/dl). Samtidig viste APTA-gruppen økt IL-6 cytokinkonsentrasjon i serum- og PerC-væsken (figur 2). Figur 3 viser en representativ hematoksylin-eosinfarging av sham og APTA-gruppe .
Figur 1: Skjemaer med alvorlig akutt pankreatittinduksjon med 2,5 % natrium taurocholat hos C57BL/6 mus. (A) galleblæren; (B) vanlig galle kanal; (C) pankreasrør; (D) portal vene; (E) mikrovessel klips; (F) punkteringssted (nål festet til et polyetylenrør og koblet til infusjonspumpe); (G) midlertidig kanylefiksering i den vanlige gallekanalen. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 2: Representative resultater etter 12 timer med alvorlig akutt pankreatitt. (A) Dyrets serumamylasekonsentrasjon (U/dl). (B) IL-6 cytokinkonsentrasjon i serum- og PerC-væske. Forskjeller mellom grupper ble vurdert ved ubetalt t-testanalyse * p <0,05 hvis APTA ≠ sham (n = 9 / gruppe). Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
| Interstitiell ødem | Inflammatorisk infiltrasjon | Parenchyma nekrose | Parenchyma blødning | |
| UEKTE | 1±0* | 0.0 | 0.0 | 0.0 |
| APTA | 3±0* | 3±0 | 3±0 | 3±0 |
| *P<0,05 hvis SHAM≠APTA. |
Tabell 1: Histologiske endringer i bukspyttkjertelvev etter 12 timer med alvorlig AP. Bukspyttkjertelen ble behandlet og analysert i henhold til Schmidts skala21. Resultatene ble uttrykt som gjennomsnittlige ± SEM og forskjeller mellom gruppene ble vurdert av Student t-testen. * p <0.05 hvis APTA ≠ SHAM; (n=9/gruppe).
Figur 3: Representativehematoxylin-eosinfarging i bukspyttkjertelvev etter 12 timer med alvorlig AP. Histologiske endringer i (A) SHAM og (B) APTA bukspyttkjertelvev (Hematoxylin-Eosin farging- 40x forstørrelse). Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Metoden for å indusere akutt pankreatitt ved retrograd natrium taurocholatinfusjon er allerede vist hos rotter22,23,24. Tre lignende verk, publisert i 2008, 2010 og 2015, fungerte som referanse for protokollen3,14,15. I dette arbeidet viser vi alle de kritiske trinnene for å reprodusere denne metoden i C57BL / 6 mus og noen muligheter for å validere den.
Et kritisk skritt i denne testen blokkerer gallekanalen på hilumnivået med et mikrovesselklips (trinn 3.1) for å unngå natrium taurocholat refluks i leveren. Dette trinnet krever mye oppmerksomhet, siden portalvenen er ved siden av kanalen (figur 1D), så det må tas hensyn til ikke å blokkere den sammen. Nålen skal kun settes inn i den mest distale kanaldelen. Hvis det innføres dypt i kanalen, kan det føre til brudd med syren som overløper til kjertelen parenchyma og / eller til andre kanaler14. Kontroller at polyetylenrøret har luft inni for å forhindre hindring av den vanlige gallekanalen.
Denne modellen krever et snitt i musens underliv. Å sette kanylen gjennom bukspyttkjertelen krever erfaring, men det kan oppnås med trening15,25. Det er viktig å markere at alvorlighetsgraden av pankreatitt i denne modellen er proporsjonalt avhengig av konsentrasjonen, infusjonsvolumet, infusjonstrykket og tidspunktet for AP-induksjon. Dermed må en konstant infusjonsmaskin med kontrollert volum og trykk brukes.
For denne studien standardiserte vi en konsentrasjon på 2,5%, med en infusjonshastighet på 10 μL / min, i 3 min og konstant trykk. Ved 12 timer AP ble det observert økte inflammatoriske parametere og nekrose i bukspyttkjertelen vev, med dyr som døde innen 16 timer etter AP-induksjon.
Selv om hovedårsakene til AP er alkoholforbruk eller gallestein, er disse modellene ikke eksperimentelt reproduserbare26. For tiden innebærer den mest brukte protokollen for AP-induksjon hos mus 7 intraperitoneale injeksjoner av cerulein (50 μg / kg kroppsvekt) med 1 t intervaller27. Cerulein har også blitt brukt til å indusere en mild eller moderat akutt pankreatitt. Variasjonen i denne modellen begrenser bruken i å studere de ødeleggende effektene av sykdommen, noe som gir klinisk sykelighet og dødelighet10. Modeller som utløser høy dødelighet på kort tid er relevante for studiet av alvorlig AP (nekrotiserende), da de kan vurdere effektiviteten av nye legemidler eller intervensjoner. Blant disse modellene er hemorragisk AP-induksjon hos unge kvinnelige gnagere (mellom 4 og 6 uker) av et kolinmangel diett28 og L-arginin (f.eks. 3 x 3 g/kg eller 2 x 4 g/kg) basert akutt pankreatittinduksjon hos mus, men riktig dosering av L-arginin for å indusere AP bør testes av hvert laboratorium og i hver musestamme29. I 2015 viste en studie at en intra-ductal taurocholatinfusjon etterfulgt av distal vanlig gallekanalligasjon fører til en alvorlig, nekrotisk modell av pankreatitt hos mus3. Denne modellen er imidlertid ikke nyttig for å teste legemiddeleffekt og intervensjoner på grunn av sin irreversible tilstand.
Resultatene som ble funnet i denne studien korrelerer med nyere litteratur som forhøyelse av serum amylase konsentrasjon og IL-6 er forbundet med sykdomsprogresjon. Det er mulig at i fremtiden vil måling av proteiner som TNF-α, IL-1β og myeloperoxidase være en klinisk prognostisk parameter for alvorlig akutt pankreatitt30,31,32.
Til slutt resulterer protokollen som brukes i den nåværende studien for å indusere AP hos mus ved infusjon av natriumtaurocholat direkte inn i den vanlige gallekanalen, i alvorlig akutt pankreatitt med nekrose i bukspyttkjertelvev som kan observeres selv ved 12 timer etter induksjonen med høyde på IL-6 cytokin i serum og bukhinnevæske og med høy dødelighet (100% dødelighet i 16 h, data vises ikke).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har ingenting å avsløre.
Acknowledgments
Forfatterne takket være Post Graduation Program i Medical Clinic of University of São Paulo; Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) og University of São Paulo Medical School (FMUSP).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 0.4 mm needle | INTRAG MEDICAL TECH | 90183210 | 30G |
| 0.54 mm polyethylene tube | Tygon | 730010 | - |
| Styrofoam block | - | - | - |
| masking tape for mounting the mouse | Missner | 1236 | - |
| Infusion pump scheduled to 10µL / min. | Havard aparatus-Peristaltic Pump Series | MA1 55-7766 | Model 66 Small Peristaltic |
| Scissors and forceps | |||
| Antiseptic providine iodine | Pfizer | 12086OR | antisepsis |
| 70% ethanol | SIGMA | 459836 | Mix 700 mL 100% ethanol with 300 mL dH2O |
| Razor blade | Lord | bdk9a1ghk6 | For trichotomy |
| Sodium taurocholate | Sigma-Aldrich | 86339- 1G | CAS NUMBER- 345909-26-4 |
| microvessel clip | Medicon Surgical | 56.87.35 | Approximator, opening 4.0 mm, closing pressure 30 - 40 g |
| 6-0 prolene | Bioline | 5162 | Suture line |
| Ketamin NP (cloridrato de dextrocetamina) 50mg/mL | Cristália | ||
| Xilazine 2% | Syntec | ||
| Sterile saline solution (0.9% (wt/vol) saline) | Farmace | 105851 | |
| Methyl Blue | Sigma-Aldrich Chemicals | M5528 | |
| MILLIPLEX MAP Mouse Cytokine/Chemokine Magnetic Bead Panel - Immunology Multiplex Assay | MERCK | MCYTOMAG-70K | Simultaneously analyze multiple cytokine and chemokine biomarkers with Bead-Based Multiplex Assays using the Luminex technology, in mouse serum, plasma and cell culture samples. |
| Amylase Assay | Labtest | 11 | |
| Desmarres retractor 13-mm width |
ROBOZ | RS-6672 |
References
- Li, X., et al. Significantly different clinical features between hypertriglyceridemia and biliary acute pancreatitis: A retrospective study of 730 patients from a tertiary center. BMC Gastroenterology. 18 (1), 1-8 (2018).
- Rechreche, H., Abbes, A., Iovanna, J. L. Induction of antioxidant mechanisms in lung during experimental pancreatitis in rats. Indian Journal of Experimental Biology. 58 (5), 297-305 (2020).
- T, L., et al. Intraductal infusion of taurocholate followed by distal common bile duct ligation leads to a severe necrotic model of pancreatitis in mice. Pancreas. 44 (3), (2015).
- Botoi, G., Andercou, A. Interleukin 17-prognostic marker of severe acute pancreatitis. Chirurgia. 104 (4), 431-438 (2009).
- Li, D., Li, J., Wang, L., Zhang, Q. Association between IL-1beta, IL-8, and IL-10 polymorphisms and risk of acute pancreatitis. Genetics and Molecular Research. 14 (2), 6635-6641 (2015).
- Feng, C., et al. Effect of peritoneal lavage with ulinastatin on the expression of NF-kappaB and TNF-alpha in multiple organs of rats with severe acute pancreatitis. Experimental and Therapeutic Medicine. 10 (6), 2029-2034 (2015).
- Fang, D. Z., et al. Effects of sildenafil on inflammatory injury of the lung in sodium taurocholate-induced severe acute pancreatitis rats. International Immunopharmacology. 80, (2020).
- Ceranowicz, P., Cieszkowski, J., Warzecha, Z., Dembinski, A.
- Wan, M. H., et al. Review of experimental animal models of biliary acute pancreatitis and recent advances in basic research. HPB (Oxford). 14 (2), 73-81 (2012).
- Mayerle, J., Sendler, M., Lerch, M. M. Secretagogue (Caerulein) induced pancreatitis in rodents. Pancreapedia: The Exocrine Pancreas Knowledge Base. (1), (2013).
- Wang, N., et al. Resveratrol protects against L-arginine-induced acute necrotizing pancreatitis in mice by enhancing SIRT1-mediated deacetylation of p53 and heat shock factor 1. International Journal of Molecular Medicine. 40 (2), 427-437 (2017).
- Ma, Z. H., et al. Effect of resveratrol on peritoneal macrophages in rats with severe acute pancreatitis. Inflammation Research. 54 (12), 522-527 (2005).
- Souza, L. J., et al. Anti-inflammatory effects of peritoneal lavage in acute pancreatitis. Pancreas. 39 (8), 1180-1184 (2010).
- Perides, G., Acker, G. J. v, Laukkarinen, J. M., Steer, M. L. Experimental acute biliary pancreatitis induced by retrograde infusion of bile acids into the mouse pancreatic duct. Nature Protocols. 5 (2), 335-341 (2010).
- Wittel, U. A., et al. Taurocholate-induced pancreatitis: a model of severe necrotizing pancreatitis in mice. Pancreas. 36 (2), 9-21 (2008).
- Tao, L., Reese, T. A. Making mouse models that reflect human immune responses. Trends Immunology. 38 (3), 181-193 (2017).
- Vandamme, T. F. Use of rodents as models of human diseases. Journal of Pharmacy and Bioallied Science. 6 (1), 2-9 (2014).
- Song, H. K., Hwang, D. Y. Use of C57BL/6N mice on the variety of immunological researches. Laboratory Animal Research. 33 (2), 119-123 (2017).
- Bogdanske, J. J., Stelle, S. H. -V., Riley, M. V., Schiffman, B. M. Suturing Principles and Techniques in Laboratory Animal Surgery. 1st edition. (1), CRC Press. (2010).
- Ray, A., Dittel, B. N. Isolation of mouse peritoneal cavity cells. Journal of Visualized Experiments. (35), e1488 (2010).
- Schmidt, J., et al. A better model of acute pancreatitis for evaluating therapy. Annals of Surgery. 215 (1), 44-56 (1992).
- Liu, D. L., et al. Resveratrol improves the therapeutic efficacy of bone marrow-derived mesenchymal stem cells in rats with severe acute pancreatitis. International Immunopharmacology. 80, 106128 (2020).
- Yang, X. F., et al. Chaiqin chengqi decoction alleviates severe acute pancreatitis associated acute kidney injury by inhibiting endoplasmic reticulum stress and subsequent apoptosis. Biomedicine & Pharmacotherapy. 125 (12), 110024 (2020).
- Yang, X. F., et al. Chaiqin chengqi decoction alleviates severe acute pancreatitis associated acute kidney injury by inhibiting endoplasmic reticulum stress and subsequent apoptosis. Biomedicine & Pharmacotherapy. 125, 110024 (2020).
- Venglovecz, V., Z, R., Hegyi, P. The effects of bile acids on pancreatic ductal cells. Pancreapedia: The Exocrine Pancreas Knowledge Base. (1), (2019).
- Roberts, S. E., Akbari, A., Thorne, K., Atkinson, M., Evans, P. A. The incidence of acute pancreatitis: impact of social deprivation, alcohol consumption, seasonal and demographic factors. Alimentary Pharmacology and Therapeutics. 38 (5), 539-548 (2013).
- Lerch, M. M., Gorelick, F. S. Models of acute and chronic pancreatitis. Gastroenterology. 144 (6), 1180-1193 (2013).
- Nakamura, K., Fukatsu, K., Sasayama, A., Yamaji, T. An immune-modulating formula comprising whey peptides and fermented milk improves inflammation-related remote organ injuries in diet-induced acute pancreatitis in mice. Biosci Microbiota Food Health. 37 (1), 1-8 (2018).
- Kui, B., et al. New insights into the methodolgy of L-Arginine-induced acute pancreatitis. PLoS One. 10 (2), 011758 (2015).
- Xue, J., et al. Alternatively activated macrophages promote pancreatic fibrosis in chronic pancreatitis. Nature Communication. 6, 7158 (2015).
- Lesina, M., Wormann, S. M., Neuhofer, P., Song, L., Algul, H. Interleukin-6 in inflammatory and malignant diseases of the pancreas. Seminars in Immunology. 26 (1), 80-87 (2014).
- Rao, S. A., Kunte, A. R. Interleukin-6: An early predictive marker for severity of acute pancreatitis. Indian Journal of Critical Care Medicine. 21 (7), 424-428 (2017).
