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Cancer Research

छवि अधिग्रहण के माध्यम से त्वचा कैंसर के गैर-आक्रामक निदान के लिए ऑप्टिकल समेकन टोमोग्राफी के साथ परावर्तनीयता कॉन्फोकल माइक्रोस्कोपी का संयोजन

Published: August 18, 2022 doi: 10.3791/63789
Automatic Translation
1, 1, 1
1Dermatology Service, Department of Medicine, Memorial Sloan Kettering Cancer Center

Summary

यहां, हम परावर्तनीयता कॉन्फोकल माइक्रोस्कोपी (आरसीएम) और संयुक्त आरसीएम और ऑप्टिकल समेकन टोमोग्राफी (ओसीटी) के उपन्यास, गैर-आक्रामक इमेजिंग उपकरणों का उपयोग करके अच्छी गुणवत्ता वाली छवियों को प्राप्त करने के लिए प्रोटोकॉल का वर्णन करते हैं। हम चिकित्सकों को उनके नैदानिक अनुप्रयोगों से भी परिचित कराते हैं ताकि वे रोगी की देखभाल में सुधार के लिए तकनीकों को नियमित नैदानिक वर्कफ़्लो में एकीकृत कर सकें।

Abstract

त्वचा कैंसर दुनिया भर में सबसे आम कैंसर में से एक है। निदान हिस्टोपैथोलॉजिकल पुष्टि के लिए बायोप्सी के बाद दृश्य निरीक्षण और डर्मोस्कोपी पर निर्भर करता है। जबकि डर्मोस्कोपी की संवेदनशीलता अधिक है, कम विशिष्टता के परिणामस्वरूप 70% -80% बायोप्सी को हिस्टोपैथोलॉजी (डर्मोस्कोपी पर झूठे सकारात्मक) पर सौम्य घावों के रूप में निदान किया जाता है।

परावर्तनीयता कॉन्फोकल माइक्रोस्कोपी (आरसीएम) और ऑप्टिकल समेकन टोमोग्राफी (ओसीटी) इमेजिंग त्वचा कैंसर के निदान का मार्गदर्शन कर सकती है। आरसीएम एन-फेस परतों में सेलुलर आकृति विज्ञान की कल्पना करता है। इसने डर्मोस्कोपी पर मेलेनोमा और पिगमेंटेड केराटिनोसाइटिक त्वचा कैंसर के लिए नैदानिक विशिष्टता को दोगुना कर दिया है, सौम्य घावों की बायोप्सी की संख्या को आधा कर दिया है। आरसीएम ने संयुक्त राज्य अमेरिका में बिलिंग कोड हासिल किए और अब क्लीनिकों में एकीकृत किया जा रहा है।

हालांकि, इमेजिंग की उथली गहराई (~ 200 μm) जैसी सीमाएं, गैर-पिगमेंटेड त्वचा के घावों के लिए खराब विरोधाभास, और एन-फेस परतों में इमेजिंग के परिणामस्वरूप नॉनपिगमेंटेड बेसल सेल कार्सिनोमा (बीसीसी) का पता लगाने के लिए अपेक्षाकृत कम विशिष्टता होती है - बेसल सेल परत और गहरी घुसपैठ वाले बीसीसी के साथ सतही बीसीसी। इसके विपरीत, ओसीटी में सेलुलर रिज़ॉल्यूशन का अभाव होता है, लेकिन ऊर्ध्वाधर विमानों में ऊतक को ~ 1 मिमी की गहराई तक चित्रित करता है, जो बीसीसी के सतही और गहरे दोनों उपप्रकारों का पता लगाने की अनुमति देता है। इस प्रकार, दोनों तकनीकें अनिवार्य रूप से पूरक हैं।

एक "मल्टी-मोडल", संयुक्त आरसीएम-ओसीटी डिवाइस एक साथ एन-फेस और ऊर्ध्वाधर मोड दोनों में त्वचा के घावों की छवियां बनाता है। यह बीसीसी के निदान और प्रबंधन के लिए उपयोगी है (सतही बीसीसी के लिए नॉनसर्जिकल उपचार बनाम गहरे घावों के लिए सर्जिकल उपचार)। अकेले आरसीएम पर छोटे, गैर-पिगमेंटेड बीसीसी का पता लगाने के लिए विशिष्टता में एक उल्लेखनीय सुधार प्राप्त किया जाता है। आरसीएम और आरसीएम-ओसीटी डिवाइस त्वचा कैंसर के निदान और प्रबंधन में एक बड़ा प्रतिमान बदलाव ला रहे हैं; हालाँकि, उनका उपयोग वर्तमान में अकादमिक तृतीयक देखभाल केंद्रों और कुछ निजी क्लीनिकों तक सीमित है। यह पेपर इन उपकरणों और उनके अनुप्रयोगों के साथ चिकित्सकों को परिचित करता है, नियमित नैदानिक वर्कफ़्लो में ट्रांसलेशनल बाधाओं को संबोधित करता है।

Introduction

परंपरागत रूप से, त्वचा कैंसर का निदान घाव के दृश्य निरीक्षण पर निर्भर करता है, जिसके बाद डर्माटोस्कोप नामक मैग्निफाइंग लेंस का उपयोग करके संदिग्ध घावों पर करीब से नज़र डाली जाती है। एक डर्माटोस्कोप उपसतह जानकारी प्रदान करता है जो त्वचा के कैंसर के निदान के लिए दृश्य निरीक्षण पर संवेदनशीलता और विशिष्टता को बढ़ाता है 1,2. हालांकि, डर्मोस्कोपी में सेलुलर विवरण की कमी होती है, जिससे अक्सर हिस्टोपैथोलॉजिकल पुष्टि के लिए बायोप्सी होती है। डर्मोस्कोपी3 की कम और परिवर्तनशील (67% से 97%) विशिष्टता के परिणामस्वरूप झूठी सकारात्मकता और बायोप्सी होती है जो विकृति पर सौम्य घाव दिखाती है। बायोप्सी न केवल एक आक्रामक प्रक्रिया है जो रक्तस्राव और दर्द का कारण बनती है4 बल्कि स्कारिंग के कारण चेहरे जैसे कॉस्मेटिक रूप से संवेदनशील क्षेत्रों पर भी अत्यधिक अवांछनीय है।

मौजूदा सीमाओं को पार करके रोगी की देखभाल में सुधार करने के लिए, विवो इमेजिंग उपकरणों में कई नॉनइनवेसिव, 5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17,18 का पता लगाया जा रहा है . आरसीएम और ओसीटी डिवाइस दो मुख्य ऑप्टिकल नॉनइनवेसिव डिवाइस हैं जिनका उपयोग त्वचा के घावों, विशेष रूप से त्वचा के कैंसर के निदान के लिए किया जाता है। आरसीएम ने संयुक्त राज्य अमेरिका में वर्तमान प्रक्रियात्मक शब्दावली (सीपीटी) बिलिंग कोड हासिल कर लिया है और अकादमिक तृतीयक देखभाल केंद्रों और कुछ निजी क्लीनिकों 7,8,19 में तेजी से उपयोग किया जा रहा है। आरसीएम निकट-हिस्टोलॉजिकल (सेलुलर) रिज़ॉल्यूशन पर घावों की छवियां बनाता है। हालांकि, छवियां एन-फेस प्लेन (एक समय में त्वचा की एक परत का विज़ुअलाइज़ेशन) में हैं, और इमेजिंग की गहराई ~ 200 μm तक सीमित है, जो केवल सतही (पैपिलरी) डर्मिस तक पहुंचने के लिए पर्याप्त है। आरसीएम इमेजिंग त्वचा में विभिन्न संरचनाओं से परावर्तन विपरीत पर निर्भर करता है। मेलेनिन उच्चतम कंट्रास्ट प्रदान करता है, जिससे रंजित घाव उज्ज्वल और निदान करने में आसान हो जाते हैं। इस प्रकार, डर्मोस्कोपी के साथ संयुक्त आरसीएम ने मेलेनोमा 20 सहित रंजित घावों की डर्मोस्कोपी पर निदान (90% की संवेदनशीलता और82% की विशिष्टता) में काफी सुधार किया है। हालांकि, गुलाबी घावों में मेलेनिन कंट्रास्ट की कमी के कारण, विशेष रूप से बीसीसी के लिए, आरसीएम में कम विशिष्टता (37.5% -75.5%) 21 है। एक पारंपरिक ओसीटी डिवाइस, एक और आमतौर पर इस्तेमाल किया जाने वाला नॉनइनवेसिव डिवाइस, त्वचा के भीतर गहराई में 1 मिमी तक घाव ों की छवियां बनाता है और उन्हें ऊर्ध्वाधर विमान (हिस्टोपैथोलॉजी के समान) में कल्पना करता है। हालांकि, ओसीटी में सेलुलर रिज़ॉल्यूशन का अभाव है। ओसीटी मुख्य रूप से केराटिनोसाइटिक घावों, विशेष रूप से बीसीसी के निदान के लिए उपयोग किया जाता है, लेकिन अभी भी कम विशिष्टता9 है।

इस प्रकार, इन उपकरणों की मौजूदा सीमाओं को दूर करने के लिए, एक मल्टी-मोडल आरसीएम-ओसीटीडिवाइस बनाया गया है। यह उपकरण एक एकल, हैंडहेल्ड इमेजिंग जांच के भीतर आरसीएम और ओसीटी को शामिल करता है, जिससे घाव के सह-पंजीकृत एन-फेस आरसीएम छवियों और ऊर्ध्वाधर ओसीटी छवियों के एक साथ अधिग्रहण को सक्षम किया जा सकता है। ओसीटी घावों का वास्तुशिल्प विवरण प्रदान करता है और त्वचा के भीतर गहराई (~ 1 मिमी की गहराई तक) छवि बना सकता है। इसमें हैंडहेल्ड आरसीएम डिवाइस (~ 0.75 मिमी x 0.75 मिमी) की तुलना में ~2 मिमी 22 का एक बड़ा क्षेत्र (एफओवी) भी है। आरसीएम छवियों का उपयोग ओसीटी पर पहचाने गए घाव के सेलुलर विवरण प्रदान करने के लिए किया जाता है। इस प्रोटोटाइप का अभी तक व्यावसायीकरण नहीं किया गया है और क्लीनिक23,24,25 में एक जांच उपकरण के रूप में उपयोग किया जा रहा है।

त्वचा कैंसर के निदान और प्रबंधन में सुधार करने में उनकी सफलता के बावजूद (जैसा कि साहित्य द्वारा समर्थित है), इन उपकरणों का अभी तक क्लीनिकों में व्यापक रूप से उपयोग नहीं किया जाता है। यह मुख्य रूप से विशेषज्ञों की कमी के कारण है जो इन छवियों को पढ़ सकते हैं, लेकिन प्रशिक्षित तकनीशियनों की कमी के कारण भी है जो बेडसाइड8 पर नैदानिक-गुणवत्ता वाली छवियों को कुशलतापूर्वक (नैदानिक समय सीमा के भीतर) प्राप्त कर सकते हैं। इस पांडुलिपि में, लक्ष्य क्लीनिकों में इन उपकरणों के बारे में जागरूकता और अंततः अपनाने की सुविधा प्रदान करना है। इस लक्ष्य को प्राप्त करने के लिए, हम त्वचा विशेषज्ञों, डर्माटोपैथोलॉजिस्ट और मोह्स सर्जनों को आरसीएम और आरसीएम-ओसीटी उपकरणों के साथ प्राप्त सामान्य त्वचा और त्वचा कैंसर की छवियों से परिचित करते हैं। हम त्वचा कैंसर के निदान के लिए प्रत्येक उपकरण की उपयोगिता का भी विस्तार करेंगे। सबसे महत्वपूर्ण बात, इस पांडुलिपि का ध्यान इन उपकरणों का उपयोग करके छवि अधिग्रहण के लिए चरण-दर-चरण मार्गदर्शन प्रदान करना है, जो नैदानिक उपयोग के लिए अच्छी गुणवत्ता वाली छवियों को सुनिश्चित करेगा।

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Protocol

नीचे वर्णित सभी प्रोटोकॉल संस्थागत मानव अनुसंधान नैतिकता समिति के दिशानिर्देशों का पालन करते हैं।

1. आरसीएम डिवाइस और इमेजिंग प्रोटोकॉल

नोट: विवो आरसीएम उपकरणों में दो व्यावसायिक रूप से उपलब्ध हैं: वाइड-प्रोब आरसीएम (डब्ल्यूपी-आरसीएम) और हैंडहेल्ड आरसीएम (एचएच-आरसीएम)। WP-RCM एक डिजिटल डर्माटोस्कोप के साथ एकीकृत आता है। ये दो उपकरण अलग-अलग या संयुक्त इकाई के रूप में उपलब्ध हैं। नीचे डब्ल्यूपी-आरसीएम और एचएच-आरसीएम उपकरणों की नवीनतम पीढ़ी (पीढ़ी 4) का उपयोग करके छवि अधिग्रहण प्रोटोकॉल उनके नैदानिक संकेतों के साथ दिए गए हैं।

  1. घाव का चयन और नैदानिक संकेत
    1. निम्नलिखित प्रकार के घावों की तलाश करें: डर्मोस्कोपिक रूप से अस्पष्ट गुलाबी (बीसीसी, स्क्वैमस सेल कार्सिनोमा [एससीसी], एक्टिनिक केराटोसिस [एके], अन्य सौम्य घाव) या पिगमेंटेड घाव (नेवी और मेलेनोमा, पिगमेंटेड केराटिनोसाइटिक घाव); एक नेवस जो हाल ही में नैदानिक या डर्मोस्कोपी परीक्षा पर बदल गया है; भड़काऊ पैटर्न निर्धारित करने के लिए भड़काऊ घाव।
    2. घाव की सीमा निर्धारित करने के लिए लेंटीगो मैलाइंका (एलएम) मार्जिन के लिए मैपिंग करें और सबक्लिनिकल विस्तार जैसे कि एक्स्ट्रामेट्री पगेट रोग (ईएमपीडी) और एलएम के साथ बीमारी के लिए बायोप्सी साइटों का मानचित्रण और चयन करें।
    3. सामयिक दवाओं (इमिकीमोड), विकिरण, फोटोडायनामिक थेरेपी और लेजर एब्लेशन जैसे गैर-सर्जिकल उपचार की गैर-आक्रामक निगरानी करें।
  2. डिवाइस चयन के लिए, त्वचा की अपेक्षाकृत सपाट सतहों (ट्रंक और छोरों) पर स्थित घावों के लिए डब्ल्यूपी-आरसीएम डिवाइस और घुमावदार सतहों (नाक, इयरलोब, पलकें और जननांग) पर घावों के लिए एचएच-आरसीएम डिवाइस का उपयोग करें।
    नोट: इमेजिंग डिवाइस का चयन मुख्य रूप से घाव के स्थान पर निर्भर करेगा।
  3. इमेजिंग के लिए, रोगी को पूरी तरह से लेटी हुई कुर्सी या तकिए के साथ एक सपाट परीक्षा मेज पर रखें या समर्थन के लिए एक आर्मरेस्ट और एक सपाट इमेजिंग सतह प्राप्त करें।
    नोट: पुरानी पीढ़ी (पीढ़ी 3) डब्ल्यूपी-आरसीएम उपकरणों ने प्रति घाव ~ 30 मिनट लिया। वर्तमान में क्लीनिकों में उपयोग किए जा रहे नई पीढ़ी (पीढ़ी 4) डब्ल्यूपी-आरसीएम डिवाइस के साथ एक एकल घाव की इमेजिंग के लिए ~ 15 मिनट की आवश्यकता हो सकती है। बेहतर अधिग्रहण समय के बावजूद, रोगी को आराम से स्थापित करने से न्यूनतम गति कलाकृतियों को सुनिश्चित किया जाएगा और बेहतर गुणवत्ता वाली छवियों के अधिग्रहण में सहायता मिलेगी। निम्नलिखित चरण रोगी को सही ढंग से स्थिति में रखने में मदद कर सकते हैं:
  4. इमेजिंग की तैयारी के लिए, किसी भी गंदगी, लोशन या मेकअप को खत्म करने के लिए अल्कोहल वाइप के साथ घाव और आसपास की त्वचा को साफ करें। हवा के बुलबुले से बचने के लिए ऊतक खिड़की को संलग्न करने से पहले बालों वाली त्वचा की सतहों को शेव करें जो ऊतक माइक्रोस्ट्रक्चर के विज़ुअलाइज़ेशन में बाधा डाल सकते हैं।
    नोट: भारी सौंदर्य प्रसाधन या सनस्क्रीन को हटाने के लिए, शराब के साथ सफाई करने से पहले साइट को सौम्य साबुन और पानी से साफ करें।
  5. WP-RCM डिवाइस का उपयोग कर छवि अधिग्रहण (चित्र 1, चित्र 2, पूरक चित्रा S1, पूरक चित्रा S2और पूरक चित्रा S3)
    नोट: WP-RCM डिवाइस स्टैक, मोज़ेक, लाइव सिंगल-फ्रेम वीडियो और सिंगल-फ्रेम वाली छवियों को कैप्चर करने में सक्षम हैं।
    1. घाव (चित्रा 1) में एक डिस्पोजेबल प्लास्टिक विंडो कैप संलग्न करने के लिए, सर्वोत्तम छवियों के लिए घाव के लंबवत जांच को रखें। अनुलग्नक के उदाहरण के लिए चित्र 1A-F देखें। प्लास्टिक की खिड़की के केंद्र पर खनिज तेल की एक बूंद जोड़ें, इसे खिड़की की चौड़ाई में सावधानीपूर्वक फैलाएं (चित्रा 1 ए)। प्लास्टिक की खिड़की के चिपकने वाले पक्ष से पेपर बैकिंग को हटा दें। झुर्रियों से बचने के लिए त्वचा को धीरे से फैलाएं और खिड़की को संलग्न करें।
      नोट: खाद्य-ग्रेड खनिज तेल का उपयोग करें जो सुरक्षित है और इसमें उच्च चिपचिपाहट है। सुनिश्चित करें कि घाव केंद्रित है और इसकी संपूर्णता में कवर किया गया है। 8 मिमी x 8 मिमी से बड़े घावों के लिए, या तो डर्मोस्कोपी के आधार पर चिंता के क्षेत्रों की छवि बनाएं या पूरे घाव को कवर करने के लिए अलग-अलग इमेजिंग सत्र करें।
    2. डर्मोस्कोपी छवियों को प्राप्त करना (चित्रा 1 सी, डी)
      नोट: घाव के भीतर नेविगेट करने के लिए एक गाइड के रूप में सेवा करने के लिए एक डर्मोस्कोपी छवि का अधिग्रहण किया जाता है। डर्मोस्कोपी छवि और कॉन्फोकल छवि के बीच सही पंजीकरण सुनिश्चित करने के लिए निम्नलिखित चरणों का उपयोग किया जाना चाहिए।
      1. प्लास्टिक विंडो कैप पर डब्ल्यूपी-आरसीएम जांच को घुमाएं और जांच के लिए सम्मिलन के सर्वोत्तम कोण का अनुमान लगाएं (चित्रा 1 सी)। जांच के किनारे स्थित छोटे, सफेद तीर का पता लगाएं (चित्रा 1 सी) और इसे डर्मोस्कोपी कैमरा (चित्रा 1 सी) के किनारे पर तीर के साथ संरेखित करें।
      2. डर्मोस्कोपी कैमरा को प्लास्टिक विंडो कैप (चित्रा 1 डी) में डालें। छवि प्राप्त करने के लिए कैमरे पर ट्रिगर दबाएं। डर्माटोस्कोप को हटा दें। इमेजिंग सत्र शुरू करने से पहले, सुनिश्चित करें कि डर्माटोस्कोप छवि पूरे घाव की सतह को कवर करती है।
    3. आरसीएम जांच को प्लास्टिक डिस्पोजेबल कैप (चित्रा 1 ई, एफ) से जोड़ने के लिए, डिस्पोजेबल प्लास्टिक विंडो कैप (चित्रा 1 ई) के अंदर मटर के आकार के अल्ट्रासाउंड जेल की मात्रा रखें। कैप के भीतर जांच डालें जब तक कि एक तेज क्लिक न सुना जाए (चित्रा 1 एफ)।
      नोट: सर्वोत्तम छवियों के लिए, प्लास्टिक विंडो में प्रोब लंबवत (90 ° कोण पर) डालें। परीक्षा कुर्सी की ऊंचाई को चापलूसी की सतह प्राप्त करने, गति कलाकृतियों को कम करने, हवा के बुलबुले को बाहर निकालने (चित्रा 3 और चित्रा 4) और त्वचा के लिए सुरक्षित लगाव सुनिश्चित करने के लिए उठाया जा सकता है।
    4. आरसीएम छवियों को प्राप्त करना (चित्रा 2, पूरक चित्रा एस 1, और पूरक चित्रा एस 2)
      1. आरसीएम छवि अधिग्रहण (पूरक चित्रा एस 1) का मार्गदर्शन करने के लिए डर्मोस्कोपी छवि (चरण 5.2.) का उपयोग करें। घाव के केंद्र का चयन करें और त्वचा की सबसे ऊपरी (सबसे चमकीली) परत की पहचान करें - स्ट्रेटम कॉर्नियम की एन्यूक्लियेट परत (पूरक चित्रा एस 1)।
      2. इस स्तर पर इमेजिंग गहराई को शून्य पर सेट करें (पूरक चित्रा एस 1)।
        नोट: यह गहराई घाव के भीतर बाद की परतों की वास्तविक जेड-गहराई निर्धारित करने के लिए एक संदर्भ बिंदु के रूप में कार्य करती है।
      3. स्टैक आइकन दबाकर घाव के केंद्र (चित्रा 2 और पूरक चित्रा एस 1) में एक ढेर प्राप्त करें। ड्रॉप-डाउन मेनू से एक शारीरिक साइट का चयन करें: चेहरा या शरीर। 4.5 μm step-size और 250 μm गहराई सेट करें।
        नोट: स्ट्रेटम कॉर्नियम से ढेर शुरू करें और डर्मिस में सबसे गहरी दृश्य परतों पर समाप्त हों। पूरक चित्रा एस 1 एक स्टैक प्राप्त करने का एक उदाहरण दिखाता है, जबकि चित्रा 2 एक स्टैक का एक उदाहरण देता है।
      4. एक मोज़ेक प्राप्त करें: त्वचीय-एपिडर्मल जंक्शन (डीईजे) (पूरक चित्रा एस 2) पर पहला मोज़ेक लें। अधिग्रहित स्टैक में डीईजे परत की पहचान करें और फिर पूरे घाव को कवर करने के लिए 8 मिमी x 8 मिमी वर्ग का चयन करने के लिए माउस का उपयोग करें। कार्रवाई को पूरा करने के लिए मोज़ेक आइकन दबाएं (पूरक चित्रा एस 2)। विभिन्न गहराई पर कम से कम 5 मोज़ेक प्राप्त करें: स्ट्रेटम कॉर्नियम, स्ट्रेटम स्पिनोसम, सुप्राबेसल परत, डीईजे, और सतही पैपिलरी डर्मिस।
      5. बाद के मोज़ेक के अधिग्रहण का मार्गदर्शन करने के लिए डीईजे मोज़ेक खोलें। लाइव व्यू इमेजिंग पर उस क्षेत्र को लाने के लिए डीईजे मोज़ेक पर किसी भी संरचना पर क्लिक करें। एपिडर्मिस में मोज़ेक लेने के लिए डर्मिस पर मोज़ेक प्राप्त करने के लिए नीचे स्क्रॉल करें और फिर ऊपर (डीईजे से) ऊपर जाएं।
      6. रुचि के क्षेत्र की पहचान करने और ढेर लेने के लिए बेडसाइड पर मौजूद विशेषज्ञ आरसीएम रीडर द्वारा अधिग्रहित मोज़ेक का मूल्यांकन करें। बेडसाइड पर एक विशेषज्ञ की अनुपस्थिति में, 5 ढेर ों को पकड़ें: प्रत्येक चतुर्थांश में एक और घाव के केंद्र में एक डर्मोस्कोपी पर एक सजातीय पैटर्न के साथ (चरण 1.5.2.)। विषम घावों के लिए, सभी डर्मोस्कोपी सुविधाओं को कवर करने के लिए अतिरिक्त ढेर प्राप्त करें।
        नोट: एक "स्टैक" (चित्रा 2) उच्च-रिज़ॉल्यूशन, एकल-फ्रेम, छोटे क्षेत्र (एफओवी) छवियों (0.5 मिमी x 0.5 मिमी) का एक अनुक्रमिक संग्रह है जो एपिडर्मिस की सबसे ऊपरी परत से सतही डर्मिस (~ 200 μm) से शुरू होकर गहराई में प्राप्त होता है। एक "मोज़ेक" (पूरक चित्रा एस 2) "एक्स-वाई" (क्षैतिज और फेस प्लेन) में एक साथ अलग-अलग 500 μm x 500 μm छवियों को सिलाई करके प्राप्त छवियों का एक बड़ा FOV है।
    5. एक इमेजिंग सत्र पूरा करना
      1. डन इमेजिंग पर क्लिक करें।
      2. प्लास्टिक की खिड़की से माइक्रोस्कोप को अलग करें। रोगी की त्वचा को धीरे से तना हुआ पकड़कर प्लास्टिक की खिड़की को हटा दें और इसे निपटाएं। अल्कोहल स्वैब से त्वचा पर तेल पोंछ लें।
      3. माइक्रोस्कोप लेंस के आसपास सुरक्षात्मक शंकु को अलग करें। अल्ट्रासाउंड जेल को हटाने के लिए अल्कोहल स्वैब के साथ उद्देश्य लेंस की नोक को साफ करें। ऑब्जेक्टिव लेंस को पेपर टॉवल से सुखाएं। प्लास्टिक शंकु को माइक्रोस्कोप जांच से फिर से जोड़ें।
        नोट: छवियों को पढ़ा जा सकता है, और एक प्रशिक्षित चिकित्सक द्वारा बिस्तर पर एक रिपोर्ट उत्पन्न और हस्ताक्षरित की जा सकती है। एक विशेषज्ञ पाठक की अनुपस्थिति में, एक दूरस्थ विशेषज्ञ से या तो क्लाउड के माध्यम से छवियों को स्थानांतरित करके या लाइव टेलीकॉन्फोकल सत्र26 के माध्यम से परामर्श किया जा सकता है।
    6. एक कॉन्फोकल नैदानिक मूल्यांकन रिपोर्ट तैयार करना (पूरक चित्रा एस 3)
      1. नए मूल्यांकन पर क्लिक करें। ड्रॉपडाउन मेनू में पूर्वचयनित विकल्पों से निदान दर्ज करें।
      2. यदि किसी अन्य इमेजिंग सत्र की आवश्यकता है, तो अपर्याप्त छवियों का चयन करें और उन्हें पुनः प्राप्त करने की आवश्यकता है। यदि एक वर्णनात्मक निदान की आवश्यकता है, तो अन्य का चयन करें और फॉर्म के अंत में मुफ्त पाठ बॉक्स में वर्णन करें। बिलिंग7 (पूरक चित्रा S3A) के लिए CPT कोड दर्ज करें। रिपोर्ट चेकलिस्ट (पूरक चित्रा S3B) से इमेजिंग के दौरान देखी गई लागू सुविधाओं का चयन करें। चेकलिस्ट से लागू प्रबंधन का चयन करें।
        नोट: एचएच-आरसीएम इमेजिंग के लिए कोई बिलिंग कोड लागू नहीं है।
      3. फिनिश एंड साइन पर क्लिक करें। रिपोर्ट को पीडीएफ के रूप में जनरेट करें और प्रिंट करें। एक चिकित्सक द्वारा हस्ताक्षरित रिपोर्ट प्राप्त करें और इसे बिलिंग के लिए रोगी के चार्ट में जोड़ें।
  6. एचएच-आरसीएम डिवाइस का उपयोग कर छवि अधिग्रहण (चित्रा 5)
    नोट: एचएच-आरसीएम डिवाइस स्टैक, लाइव सिंगल-फ्रेम वीडियो और सिंगल-फ्रेम वाली छवियों को कैप्चर करने में सक्षम हैं।
    1. चिकित्सक द्वारा पहचाने गए घाव को एक पेपर रिंग के साथ घेर लें। अनुभाग 3 में दिए चरणों का उपयोग करें। रोगी को स्थिति देने और घाव स्थल की सफाई के लिए।
      नोट: घाव की सीमा को परिभाषित करने के लिए घाव के आकार के आधार पर पेपर रिंग (5-15 मिमी) के आकार का चयन करें और यह सुनिश्चित करें कि घाव के भीतर इमेजिंग की जाती है। यदि एक पेपर रिंग उपलब्ध नहीं है, तो घाव को परिभाषित करने के लिए पेपर टेप का उपयोग करें।
    2. माइक्रोस्कोप लेंस को कवर करने वाली प्लास्टिक टोपी को हटा दें। एचएच-आरसीएम के उद्देश्य लेंस पर मटर के आकार के अल्ट्रासाउंड जेल की मात्रा लागू करें और इसे प्लास्टिक कैप (पूरक चित्रा एस 3 ए) के साथ कवर करें। प्लास्टिक कैप के किनारे खनिज तेल की एक उदार बूंद जोड़ें जो त्वचा को छू जाएगी।
      नोट: यदि आवश्यक हो, तो बहुत शुष्क त्वचा के लिए तेल की मात्रा बढ़ाएं।
    3. दृढ़ दबाव के साथ त्वचा पर घाव स्थल पर जांच दबाएं। घाव के भीतर विभिन्न गहराई पर ऊपर और नीचे जाने के लिए एचएच-आरसीएम डिवाइस पर जेड-गहराई नियंत्रण का उपयोग करें (पूरक चित्रा एस 3 बी)। रुचि के क्षेत्रों में कई एकल-फ्रेम छवियां और ढेर प्राप्त करें। चरण 1.5.4.3 में वर्णित के रूप में ढेर लें।
    4. बड़े घावों के लिए जहां डब्ल्यूपी-आरसीएम डिवाइस को संलग्न नहीं किया जा सकता है, पूरे घाव की सतह पर एचएच-आरसीएम जांच को स्थानांतरित करके विभिन्न परतों पर निरंतर वीडियो लें। ऐसा करने के लिए वीडियो कैप्चर प्रतीक पर क्लिक करें। यदि आवश्यक हो, तो वाहिकाओं के भीतर रक्त कोशिकाओं की गति को रिकॉर्ड करें।
      नोट: इन वीडियो को बाद में मोज़ेक के समान बड़ी एफओवी छवियां प्रदान करने के लिए सॉफ्टवेयर का उपयोग करके सिला जा सकता है।
    5. इमेजिंग सत्र पूरा होने के बाद इमेजिंग दबाएं । तेल को हटाने के लिए अल्कोहल स्वैब से घाव को साफ करें। जांच के उद्देश्य लेंस से अल्ट्रासाउंड जेल को अल्कोहल वाइप के साथ साफ करके और प्लास्टिक टोपी को फिर से जोड़कर हटा दें।
      नोट: डब्ल्यूपी-आरसीएम डिवाइस के विपरीत, जिसे एक तकनीशियन द्वारा संचालित किया जा सकता है, एचएच-आरसीएम को एक आरसीएम रीडर द्वारा संचालित किया जाना चाहिए जो घाव के भीतर नेविगेट करने और सही निदान पर पहुंचने के लिए वास्तविक समय में छवियों की व्याख्या कर सकता है।

2. संयुक्त आरसीएम-ओसीटी डिवाइस और इमेजिंग प्रोटोकॉल

नोट: आरसीएम-ओसीटी डिवाइस का केवल एक प्रोटोटाइप है। इस डिवाइस में एक हैंडहेल्ड प्रोब है और इसका उपयोग एचएच-आरसीएम डिवाइस के समान शरीर की सभी सतहों पर किया जा सकता है। यह आरसीएम स्टैक (आरसीएम डिवाइस के समान) और ओसीटी रैस्टर्स (अनुक्रमिक, क्रॉस-अनुभागीय छवियों का एक वीडियो22) प्राप्त करता है। आरसीएम और ओसीटी दोनों छवियां ग्रे स्केल में हैं। आरसीएम छवियों में ~ 200 μm x 200 μm का FOV होता है, जबकि OCT छवि में 2 मिमी (चौड़ाई में) x 1 मिमी (गहराई में) का FOV होता है। नीचे उनके नैदानिक संकेतों के साथ आरसीएम-ओसीटी डिवाइस का उपयोग करके छवि अधिग्रहण प्रोटोकॉल है। चित्रा 6 आरसीएम-ओसीटी डिवाइस की एक छवि दिखाता है, जबकि चित्रा 7 आरसीएम-ओसीटी डिवाइस के सॉफ्टवेयर सिस्टम को दर्शाता है।

  1. घाव का चयन
    1. बीसीसी को खारिज करने के लिए डर्मोस्कोपिक रूप से अस्पष्ट गुलाबी या रंजित घाव की तलाश करें।
    2. प्रबंधन के लिए बीसीसी की गहराई का आकलन करें, और उपचार के बाद अवशिष्ट बीसीसी का आकलन करें।
  2. इमेजिंग के लिए रोगी की स्थिति: आरसीएम-ओसीटी डिवाइस के साथ एक घाव की इमेजिंग के लिए 20 मिनट तक की आवश्यकता हो सकती है। डिवाइस एचएच-आरसीएम डिवाइस के समान एक हैंडहेल्ड जांच भी है और इस प्रकार, घाव पर स्वतंत्र रूप से स्थानांतरित किया जा सकता है। रोगी की स्थिति के विवरण के लिए, अनुभाग 1.4 देखें। ऊपर।
  3. इमेजिंग के लिए साइट की तैयारी: इस जांच का उपयोग करते समय, सुनिश्चित करें कि घाव की सीमा अत्यधिक बालों और सामयिक अशुद्धियों से मुक्त है और स्पष्ट रूप से परिभाषित है। चरण 1.4.1 देखें। अधिक विवरण के लिए ऊपर।
  4. RCM-OCT डिवाइस का उपयोग कर छवि अधिग्रहण (चित्रा 6 और चित्रा 7)
    1. एचएच-आरसीएम (चरण 1.6.1-1.6.2) के लिए उपयोग की जाने वाली जांच के समान जांच तैयार करें।
    2. लाइन इमेजिंग मोड और रास्टर मोड में छवियां प्राप्त करें।
      1. इमेजिंग सेटिंग्स पर क्लिक करें (चित्रा 7 ए)। एक आरसीएम छवि (सेलुलर रिज़ॉल्यूशन) (चित्रा 7 बी) प्राप्त करने के लिए लाइन इमेजिंग मोड का चयन करें। चरण आकार को 5 μm पर सेट करें और चरणों की संख्या को 40 पर सेट करें (चित्रा 7A)।
      2. ग्रैब पर क्लिक करें। चरण 1.5.4.3 के बाद ढेर प्राप्त करें। एक बार पूरा होने के बाद, फ्रीज बटन पर क्लिक करें।
      3. इमेजिंग सेटिंग्स पर क्लिक करें। घाव वास्तुकला (चित्रा 7 बी) के लिए एक कोररिलेटिव ओसीटी वीडियो प्राप्त करने के लिए रास्टर मोड का चयन करें। तकनीशियन टैब (चित्रा 7 सी) पर स्विच करें। एक बार पूरा होने के बाद, ग्रैब बटन (चित्रा 7 ए) पर क्लिक करें और तुरंत सहेजें बटन दबाएं।
      4. चिकित्सक की रुचि के आधार पर कई ढेर और वीडियो प्राप्त करें।
      5. चरण 1.6.5 में वर्णित घाव और मशीन को साफ करें।

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Representative Results

परावर्तनीयता कॉन्फोकल माइक्रोस्कोपी (आरसीएम)
आरसीएम पर छवि व्याख्या:
आरसीएम छवियों की व्याख्या इस तरह से की जाती है जो हिस्टोपैथोलॉजी स्लाइड के मूल्यांकन की नकल करती है। मोज़ेक का मूल्यांकन पहले समग्र वास्तुशिल्प विवरण प्राप्त करने और चिंता के क्षेत्रों की पहचान करने के लिए किया जाता है, जैसे स्कैनिंग आवर्धन (2x) पर हिस्टोलॉजी अनुभागों का मूल्यांकन। इसके बाद सेलुलर विवरणों के मूल्यांकन के लिए मोज़ेक पर ज़ूम इन किया जाता है, जो उच्च आवर्धन (20x) पर स्लाइडों का मूल्यांकन करने के समान है। चित्रा 8 छवि विश्लेषण की ऐसी स्कीमा दिखाता है।

छवि की गुणवत्ता:
त्वचा में प्रासंगिक गहराई पर प्राप्त किसी भी महत्वपूर्ण कलाकृतियों के बिना उच्च गुणवत्ता वाली छवियां, सही निदान के लिए आवश्यक हैं। चित्र 4A ऐसी ही एक छवि दिखाता है। अव्याख्याय छवियों का मुख्य कारण कलाकृतियों या छवियों को प्राप्त करने में अनुभवहीनता से संबंधित है। चित्रा 3 और चित्रा 4 बी हवा के बुलबुले, सतह मलबे और गति कलाकृतियों जैसी कलाकृतियों के साथ छवियां दिखाते हैं, जो नैदानिक मूल्यांकन में बाधा डालते हैं। छवि अधिग्रहण के तकनीकी पहलू में महारत हासिल करने के अलावा, आरसीएम ऑपरेटर को प्रासंगिक गहराई पर छवि अधिग्रहण को सक्षम करने के लिए विभिन्न त्वचा परतों की आकृति विज्ञान से परिचित होना चाहिए।

आरसीएम पर सामान्य त्वचा परतों की उपस्थिति:
एन-फेस (क्षैतिज विमान) "निकट-हिस्टोलॉजी" गुणवत्ता की छवियां आरसीएम डिवाइस के साथ अलग-अलग गहराई पर प्राप्त की जाती हैं जो एपिडर्मिस की सबसे ऊपरी परत से शुरू होती हैं, त्वचा में सतही पैपिलरी डर्मिस तक। आरसीएम की अपनी शब्दावली है जो त्वचा में विभिन्न परतों की पहचान को सक्षम बनाती है 5,27। चित्रा 2 एक स्टैक से अलग-अलग गहराई पर प्राप्त पांच एकल-फ्रेम छवियों को दर्शाता है।

आरसीएम पर विभिन्न कोशिकाओं की उपस्थिति:
आरसीएम पर छवियां ग्रे स्केल में दिखाई देती हैं, त्वचा की विभिन्न कोशिकाओं के परिवर्तनीय आकार और अपवर्तक सूचकांकों के कारण बहुत उज्ज्वल संरचनाओं से लेकर अंधेरे संरचनाओं तक। मेलेनिन, केराटिन और कोलेजन त्वचा में उच्चतम प्रतिबिंब के स्रोत हैं28,29. इस प्रकार, मेलेनिन युक्त कोशिकाएं जैसे मेलानोसाइट्स (बैनल और घातक), मेलानाइज्ड केराटिनोसाइट्स और मेलानोफेज उज्ज्वल दिखाई देते हैं। इसी तरह, केराटिन में समृद्ध कोशिकाएं जैसे स्ट्रेटम कॉर्नियम और केराटिन सिस्ट उज्ज्वल दिखाई देते हैं। स्ट्रेटम ग्रैनुलोसम के केराटिनोसाइट्स में मौजूद केराटोहाइलिन ग्रैन्यूल भी उज्ज्वल दिखाई देते हैं। उच्च परावर्तकता का एक अन्य संभावित स्रोत लैंगरहैंस कोशिकाओं30 और भड़काऊ कोशिकाओं28,29 में बिर्कबेक कणिकाएं हैं। इसके विपरीत, इंट्रान्यूक्लियर सामग्री में परावर्तन की कमी होती है और कॉन्फोकल31 पर अंधेरा दिखाई देता है। यह म्यूसिन स्राव के लिए भी सच है। रक्त वाहिकाएं पैपिलरी डर्मिस में पाई जाती हैं। वे क्षैतिज या ऊर्ध्वाधर हाइपोरिफ्लेक्टिव संरचनाओं के रूप में दिखाई देते हैं। ल्यूकोसाइट्स इन हाइपोरिफ्लेक्टिव रक्त वाहिकाओंके भीतर उज्ज्वल, हाइपररिफ्लेक्टिव, गोल, छोटी कोशिकाओं के रूप में दिखाई देते हैं। लाइव इमेजिंग के दौरान ल्यूकोसाइट तस्करी प्रमुख है। चित्रा 9 आरसीएम पर सामान्य त्वचा परतों की उपस्थिति को दर्शाता है। वीडियो 1 आरसीएम पर ल्यूकोसाइट तस्करी का एक उदाहरण दिखाता है।

आरसीएम पर ट्यूमर-विशिष्ट विशेषताएं:
ट्यूमर-विशिष्ट विशेषताएं अच्छी तरह से स्थापित हैं और घातक घावों से सौम्य को अलग करने में सहायता करती हैं। उदाहरण के लिए, परिधीय पैलिसेडिंग और "फांक जैसी" जगह के साथ ट्यूमर नोड्यूल बीसीसी33 के लिए विशिष्ट विशेषताएं हैं। इसी तरह, एपिडर्मिस में पेजॉइड न्यूक्लियेटेड कोशिकाएं, डीईजे में एटिपिकल कोशिकाएं, और एक अव्यवस्थित एपिडर्मल पैटर्न मेलेनोमा34 के निदान का सुझाव देते हैं। आरसीएम पर एससीसी33 के निदान के लिए एटिपिकल और अव्यवस्थित हनीकॉम्ब पैटर्न प्रमुख विशेषताएं हैं। चित्रा 10 बीसीसी, मेलेनोमा और एससीसी का एक उदाहरण दिखाता है जैसा कि आरसीएम छवियों में देखा गया है।

संयुक्त RCM-OCT डिवाइस
आरसीएम-ओसीटी पर छवि व्याख्या:
आरसीएम-ओसीटी छवियों की व्याख्या के लिए, ढेर और रैस्टर दोनों का मूल्यांकन किया जाता है। स्टैक्स सेलुलर स्तर पर और घाव की विभिन्न गहराई पर जानकारी देते हैं, जबकि रैस्टर घाव का एक ऊर्ध्वाधर दृश्य प्रदान करता है और घाव की समग्र वास्तुकला पर जानकारी प्रदान करता है। यह ऊर्ध्वाधर दृश्य बीसीसी का पता लगाने के लिए महत्वपूर्ण है, विशेष रूप से सतही बीसीसी, जो कभी-कभी, आरसीएम पर अंधेरे छाया के रूप में दिखाई देते हैं और25 से चूक सकते हैं। ओसीटी छवियों के ऊर्ध्वाधर दृश्य में, बीसीसी ट्यूमर नोड्यूल निरंतरता के साथ एपिडर्मिस और क्लेफ्टिंग के अंधेरे क्षेत्र द्वारा डर्मिस से अलगाव स्पष्ट रूप से दिखाई देता है। चित्रा 11 बीसीसी के डर्मोस्कोपी, आरसीएम, ओसीटी और हिस्टोलॉजी सहसंबंध का एक उदाहरण दिखाता है।

आरसीएम-ओसीटी पर सामान्य त्वचा परतों की उपस्थिति:
त्वचा की परतें एचएच-आरसीएम डिवाइस के साथ प्राप्त आरसीएम छवियों के समान दिखाई देती हैं। अधिक विवरण "कॉन्फोकल पर विभिन्न त्वचा परतों की उपस्थिति" और "कॉन्फोकल पर विभिन्न कोशिकाओं की उपस्थिति" अनुभागों और चित्रा 9 में प्रदान किए गए हैं।

आरसीएम की तरह, ओसीटी रास्टर छवियां ग्रे स्केल हैं। हालांकि, ओसीटी रैस्टर्स पारंपरिक हिस्टोलॉजी स्लाइड के समान एक ऊर्ध्वाधर दृश्य दिखाते हैं लेकिन सेलुलर रिज़ॉल्यूशन की कमी होती है। ओसीटी छवियों में व्यावसायिक रूप से उपलब्ध पारंपरिक ओसीटी डिवाइस छवियों के समान उपस्थिति है। स्ट्रेटम कॉर्नियम एक पतली, उज्ज्वल (हाइपररिफ्लेक्टिव) रेखा के रूप में दिखाई देता है, जिसमें अंतर्निहित एपिडर्मिस रंग में भूरे (हाइपोरिफ्लेक्टिव) दिखाई देते हैं। पैपिलरी डर्मिस एपिडर्मिस की तुलना में उज्जवल दिखाई देता है, और सिग्नल35 के नुकसान के कारण रेटिकुलर डर्मिस का सबसे गहरा हिस्सा सबसे गहरा (गैर-चिंतनशील) दिखाई देता है। डीईजे को भूरे रंग के एपिडर्मिस और उज्ज्वल पैपिलरी डर्मिस के बीच एक संक्रमणकालीन क्षेत्र के रूप में पहचाना जा सकता है। चित्र 12 एक स्वस्थ स्वयंसेवक के हाथ पर सामान्य त्वचा से प्राप्त आरसीएम और ओसीटी छवियों को दर्शाता है।

यद्यपि सेलुलर रिज़ॉल्यूशन संभव नहीं है, कई संरचनाएं ओसीटी पर दिखाई देती हैं। रक्त वाहिकाओं को पैपिलरी डर्मिस में प्रतिबिंबित (सिग्नल-फ्री), क्षैतिज या ऊर्ध्वाधर, ट्यूबलर संरचनाओं के रूप में आसानी से देखा जा सकता है। बालों के रोम आमतौर पर डर्मिस में हाइपोरिफ्लेक्टिव, गोल या ट्यूबलर संरचनाएं होती हैं। उनके इनफंडिबुलम (बाल कूप का सबसे ऊपरी हिस्सा) को डर्मिस से निकलते हुए और लाइव रैस्टर इमेजिंग सत्र के दौरान एक कोण पर एपिडर्मिस से बाहर निकलते हुए देखा जाता है। वे अक्सर एपिडर्मिस36 की सतह पर एक संकेत छाया डालते हैं। कभी-कभी, बालों के रोम से बाल शाफ्ट निकलते देखे जा सकते हैं, जिससे उनकी पहचान आसान हो जाती है। चित्र 11 इन संरचनाओं का एक दृश्य प्रदान करता है।

आरसीएम-ओसीटी पर बीसीसी की उपस्थिति:
आरसीएम में बीसीसी की उपस्थिति पर आरसीएम के "ट्यूमर-विशिष्ट विशेषताओं" खंड में चर्चा की गई है। ओसीटी में, बीसीसी ट्यूमर नोड्यूल्स को आसानी से भूरे, गोल, हाइपोरिफ्लेक्टिव नोड्यूल्स के रूप में पाया जा सकता है जो "क्लेफ्टिंग" के एक प्रतिबिंबित, अंधेरे क्षेत्र से घिरा हुआ है। इस नोड्यूल को सतही बीसीसी में एपिडर्मिस के ऊपरी भूरे रंग के बैंड के साथ जुड़ा हुआ देखा जा सकता है। बीसीसी ट्यूमर नोड्यूल्स अक्सर हाइपररिफ्लेक्टिव, सफेद, मोटे कोलेजन बंडलोंसे घिरे होते हैं। अन्य उपप्रकार, जैसे घुसपैठ या मोर्फीफॉर्म बीसीसी, ओसीटी के साथ निदान करना चुनौतीपूर्ण हैं। चित्र 11 ओसीटी रास्टर द्वारा कैप्चर किए गए बीसीसी का एक दृश्य प्रदान करता है।

Figure 1
चित्र 1: WP-RCM अनुलग्नक: जनरेशन 4 WP-RCM डिवाइस. (A) प्लास्टिक विंडो के केंद्र पर खनिज तेल की एक बूंद रखें. (बी) घाव के ऊपर प्लास्टिक की खिड़की को केंद्रित करें। (सी) माइक्रोस्कोप सिर (हरे डैश्ड सर्कल) पर तीर को डर्माटोस्कोप पर तीर (पीले डैश्ड सर्कल) के साथ मिलान करें। (डी) डर्माटोस्कोप को प्लास्टिक विंडो में डालें और सही अभिविन्यास के साथ डर्मेटोस्कोपिक छवि लेने के लिए क्लिक करें। (ई) डर्माटोस्कोप को हटा दें और प्लास्टिक खिड़की के अंदर अल्ट्रासाउंड जेल जोड़ें। (एफ) माइक्रोस्कोप सिर को घाव के 90 ° कोण पर प्लास्टिक की खिड़की से पूरी तरह से संलग्न करें। संक्षिप्त नाम: WP-RCM = व्यापक-जांच परावर्तनीयता कॉन्फोकल माइक्रोस्कोपी। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

Figure 2
चित्र 2: एक स्टैक का एक उदाहरण। एक स्टैक जो सामान्य त्वचा से लगातार जेड-गहराई में प्राप्त एकल-फ्रेम छवियों का संग्रह दिखाता है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

Figure 3
चित्रा 3: कम गुणवत्ता वाली छवि। (ए) एपिडर्मल स्तर पर एक निम्न गुणवत्ता वाली छवि जिसमें कुछ हवा के बुलबुले (पीले तीर), एक बाहरी सामग्री (पीला सर्कल), सबसे अधिक संभावना एक पेपर फाइबर और प्लास्टिक कैप (लाल बॉक्स) के किनारे दिखाई देते हैं, जो त्वचा के लिए माइक्रोस्कोप के अनुचित लगाव का संकेत देते हैं। (बी, सी) पैनल ए से ज़ूम-इन क्षेत्र। स्केल पट्टियाँ = 50 μm. कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें.

Figure 4
चित्र 4: उच्च-गुणवत्ता बनाम निम्न-गुणवत्ता वाले कॉन्फोकल छवियों की तुलना। (A) बिना किसी कलाकृतियों के एपिडर्मिस के स्तर पर एक उच्च गुणवत्ता वाला मोज़ेक ( चित्रा 6 से)। (बी) एपिडर्मल स्तर पर एक कम गुणवत्ता वाला मोज़ेक कई बड़े बुलबुले (नीले तीर) दिखाता है, जो मूल्यांकन को प्रभावित कर सकता है। स्केल पट्टियाँ = 50 μm. कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें.

Figure 5
चित्रा 5: एक पीढ़ी 4 एचएच-आरसीएम डिवाइस का उपयोग करके एचएच-आरसीएम अनुलग्नक। (ए) प्लास्टिक कैप को हटा दें और लेंस के शीर्ष पर अल्ट्रासाउंड जेल जोड़ें। (बी) डिवाइस से प्लास्टिक कैप (हरे तीर) को फिर से जोड़ें और इमेजिंग के लिए घाव के ऊपर रखें। संक्षिप्त नाम: एचएच-आरसीएम = हैंडहेल्ड परावर्तनीयता कॉन्फोकल माइक्रोस्कोपी। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

Figure 6
चित्रा 6: आरसीएम-ओसीटी डिवाइस। (ए) संयुक्त आरसीएम-ओसीटी डिवाइस की हैंडहेल्ड प्रोब (पीला तीर)। (बी) आरसीएम-ओसीटी डिवाइस एक लाइव इमेजिंग विंडो के साथ एक ओसीटी छवि (काला तीर) और एक आरसीएम छवि (हरा तीर) एक साथ दिखाता है। संक्षेप: आरसीएम = परावर्तनीयता कॉन्फोकल माइक्रोस्कोपी; ओसीटी = ऑप्टिकल समेकन टोमोग्राफी। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

Figure 7
चित्रा 7: आरसीएम-ओसीटी सॉफ्टवेयर प्लेटफॉर्म। लाइव इमेजिंग विंडो से स्नैपशॉट एक साथ (ए) एक ओसीटी छवि (नीला हीरा) और सेलुलर रिज़ॉल्यूशन (पीला सितारा) के साथ एक आरसीएम छवि दिखाते हैं। चरण आकार, चरणों की संख्या, और जेड-गहराई सभी स्लाइडिंग स्केल सिस्टम (ब्लैक बॉक्स; काले तीर) द्वारा नियंत्रित होते हैं। (बी) "लाइन इमेजिंग" और "रास्टर" मोड (पीले तीर) के बीच टॉगलिंग; (सी) रैस्टर छवियों (काले सर्कल) को सहेजने के लिए उपयोग किया जाने वाला बटन। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

Figure 8
चित्रा 8: एपिडर्मिस के स्तर पर छवि विश्लेषण की स्कीमा। (ए) छवि का विश्लेषण पहले मोज़ेक स्तर (8 मिमी x 8 मिमी) पर किया जाता है, जो हिस्टोलॉजी में लगभग 4 एक्स आवर्धन से मेल खाती है। (बी) छवि अधिग्रहण के दौरान लाइव इमेजिंग विंडो में ज़ूम इन करके सेलुलर स्तर पर रुचि के क्षेत्रों का मूल्यांकन किया जा सकता है। यह पैनल पैनल ए में नारंगी बॉक्स वाले क्षेत्र से एक सबमोज़ेक ज़ूम-इन दृश्य दिखाता है, जो हिस्टोलॉजी पर लगभग 20 x आवर्धन दृश्य से मेल खाता है। स्केल बार = (A) 50 μm. कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

Figure 9
चित्रा 9: आरसीएम पर सामान्य त्वचा परतों की उपस्थिति। (ए) स्ट्रेटम कॉर्नियम: त्वचा की सबसे चमकदार और पहली परत जो एन्यूक्लिएटेड केराटिनोसाइट्स से बनी होती है। (बी) स्ट्रेटम स्पिनोसम: कसकर पैक, न्यूक्लियेटेड कोशिकाओं (नाभिक अंधेरे होते हैं) से बना होता है, जिसमें उज्ज्वल साइटोप्लाज्म होता है जो एक विशिष्ट "हनीकॉम्ब पैटर्न" बनाता है। (सी) स्ट्रेटम बेसल: बेसल केराटिनोसाइट्स के मेलेनिन कैप की उपस्थिति से गठित विशेषता "कोबलस्टोन पैटर्न" (पीले सर्कल) द्वारा पहचाना जाता है। (डी) डीईजे: स्ट्रेटम बेसल और पैपिलरी डर्मिस के बीच इंटरफ़ेस, जो उज्ज्वल "रिंग्ड पैटर्न" (पीला तीर) की विशेषता है। (ई) पेपिलरी डर्मिस उज्ज्वल कोलेजन फाइबर (हरे तीर) और रक्त वाहिकाओं से बना है। स्केल सलाखों = 50 μm. संक्षेप: आरसीएम = परावर्तनीयता कॉन्फोकल माइक्रोस्कोपी; डीईजे = डर्मोएपिडर्मल जंक्शन। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

Figure 10
चित्रा 10: सबसे आम त्वचा कैंसर से कॉन्फोकल छवियां। (ए) बेसल सेल कार्सिनोमा क्लेफ्टिंग (नीला तीर) और पैलिसैडिंग के साथ ट्यूमर नोड्यूल्स (पीला तीर) दिखाता है। (बी) स्क्वैमस सेल कार्सिनोमा एक एटिपिकल हनीकॉम्ब पैटर्न (पीला तारांकन) और बटन-होल वाहिकाओं (नीला हीरा) को दर्शाता है। (सी) मेलेनोमा एपिडर्मिस में उज्ज्वल, बड़े, गोल पेजॉइड कोशिकाओं (हरे तीर) के समूहों को दर्शाता है। FOV = (A-C) 750 μm x 750 μm. स्केल सलाखों = 50 μm. संक्षिप्त नाम: एफओवी = दृश्य का क्षेत्र। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

Figure 11
चित्रा 11: डर्मोस्कोपी, आरसीएम, ओसीटी, और आरसीएम-ओसीटी डिवाइस के साथ अधिग्रहित बीसीसी के हिस्टोपैथोलॉजी सहसंबंध। (ए) रेडियोथेरेपी के बाद छाती पर एक गुलाबी पपल (पीला सर्कल)। (बी) आरसीएम पर, बेसलॉइड ट्यूमर डोरियों (नीले तारे) के साथ पैलिसेडिंग (लाल तीर) और क्लेफ्टिंग (पीला तीर) डीईजे में एक निश्चित ट्यूमर नोड्यूल के बिना गाढ़े कोलेजन (हरे तारे) के साथ देखे जाते हैं। (सी) आरसीएम-ओसीटी डिवाइस के साथ कैप्चर किए गए एक ही घाव की एक ओसीटी छवि। एक अलग ग्रे ट्यूमर नोड्यूल (नीला तारा) को क्लेफ्टिंग (पीला तीर) के साथ एपिडर्मिस से जुड़ा हुआ देखा जाता है। गाढ़े कोलेजन बंडल देखे जाते हैं (हरा तारा)। (घ) एच एंड ई-दाग वाली बायोप्सी ने एच एंड ई दाग पर सतही बेसल सेल कार्सिनोमा निदान की पुष्टि की, जिसमें पैलिसैडिंग (लाल तीर), क्लेफ्टिंग (पीला तीर), और गाढ़ा कोलेजन बंडल (हरा तारा) (10 गुना आवर्धन) दिखाया गया। स्केल सलाखों = 500 μm. संक्षेप: आरसीएम = परावर्तनीयता कॉन्फोकल माइक्रोस्कोपी; ओसीटी = ऑप्टिकल समेकन टोमोग्राफी; बीसीसी = बेसल सेल कार्सिनोमा; डीईजे = डर्मोएपिडर्मल जंक्शन; एच एंड ई = हेमेटॉक्सिलिन और ईओसिन। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

Figure 12
चित्रा 12: सामान्य त्वचा से आरसीएम और ओसीटी छवियां। इन छवियों को एक स्वस्थ स्वयंसेवक के हाथ पर सामान्य त्वचा से प्राप्त किया गया था। (ए) डीईजे में एक एकल-फ्रेम एन-फेस आरसीएम छवि दिखाता है। (बी) सभी त्वचा परतों के साथ ऊर्ध्वाधर दृश्य में एक संबंधित ओसीटी छवि दिखाता है। एफओवी = (ए) 750 μm x 750 μm; (बी) 1.0 मिमी x 2.0 मिमी। स्केल बार = 50 μm. संक्षेप: आरसीएम = परावर्तनीयता कॉन्फोकल माइक्रोस्कोपी; ओसीटी = ऑप्टिकल समेकन टोमोग्राफी; डीईजे = डर्मोएपिडर्मल जंक्शन। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

वीडियो 1: एचएच-आरसीएम डिवाइस का उपयोग करके ल्यूकोसाइट तस्करी का आरसीएम वीडियो। आरसीएम डिवाइस के साथ कैप्चर किए गए इस वीडियो में ल्यूकोसाइट तस्करी के साथ एक पतला रक्त वाहिका दिखाई दे रही है। आसपास के डर्मिस उज्ज्वल भड़काऊ कोशिकाओं को दिखाते हैं। संक्षिप्त नाम: एचएच-आरसीएम = हैंडहेल्ड परावर्तनीयता कॉन्फोकल माइक्रोस्कोपी। कृपया इस वीडियो को डाउनलोड करने के लिए यहां क्लिक करें।

पूरक चित्रा एस 1: पीढ़ी 4 डब्ल्यूपी-आरसीएम डिवाइस का उपयोग करके "स्टैक" प्राप्त करना। घाव (हरा हीरा) के केंद्र का चयन करें और स्टैक विकल्प (नारंगी बॉक्स) पर क्लिक करें। सुनिश्चित करें कि स्टैक स्ट्रेटम कॉर्नियम (ब्लू क्रॉस) से शुरू होता है, जो त्वचा की पहली और चमकदार परत है। शून्य (नारंगी तारा) गहराई सेट करें जहां स्टैक की पहली परत शुरू होती है। उपयुक्त घाव स्थल (सफेद क्रॉस), दो परतों के बीच की दूरी और इमेजिंग की गहराई (पीला त्रिकोण) का चयन करें। लाइव दृश्य के ऊपर नीले बॉक्स में इस सिस्टम की अन्य कार्यक्षमताओं के अनुरूप आइकन होते हैं। बाएं से दाएं आइकन (नीले तीर): मोज़ेक को पकड़ने के लिए, एक क्यूब को पकड़ने के लिए, एक स्टैक को कैप्चर करने के लिए, एक एकल फ्रेम की गई छवि को कैप्चर करने के लिए, और एक वीडियो रिकॉर्डिंग को कैप्चर करने के लिए। संक्षिप्त नाम: WP-RCM = व्यापक-जांच परावर्तनीयता कॉन्फोकल माइक्रोस्कोपी। कृपया इस फ़ाइल को डाउनलोड करने के लिए यहाँ क्लिक करें.

पूरक चित्रा एस 2: पीढ़ी 4 डब्ल्यूपी-आरसीएम डिवाइस का उपयोग करके "मोज़ेक" प्राप्त करना। (ए) लाइव व्यू (ब्लू क्रॉस) का उपयोग करके, वांछित घाव की गहराई तक जाएं। इमेजिंग (हरे हीरे) के लिए कैप्चर किए जाने वाले घाव के पूरे क्षेत्र (यदि 8 मिमी से कम) या पूरे घाव के हिस्से का चयन करें। कैप्चर प्रारंभ करने के लिए मोज़ेक विकल्प (नारंगी बॉक्स) का चयन करें. (बी) पैनल ए में घाव से डीईजे में कैप्चर किए गए मोज़ेक का एक उदाहरण। संक्षिप्तीकरण: डब्ल्यूपी-आरसीएम = व्यापक-जांच प्रतिबिंब कॉन्फोकल माइक्रोस्कोपी; डीईजे = त्वचीय-उपकला जंक्शन। कृपया इस फ़ाइल को डाउनलोड करने के लिए यहाँ क्लिक करें.

पूरक चित्रा एस 3: एक कॉन्फोकल नैदानिक मूल्यांकन रिपोर्ट का उदाहरण। (ए) ड्रॉपडाउन मेनू (बी), बिलिंग के लिए सीपीटी कोड (पीला तीर), और कॉन्फोकल इमेजिंग सत्र (ब्लू स्टार) के दौरान देखी गई प्रासंगिक विशेषताओं का चयन करके निदान (काला तीर) भरें। संक्षिप्त नाम: सीपीटी = वर्तमान प्रक्रियात्मक शब्दावली। कृपया इस फ़ाइल को डाउनलोड करने के लिए यहाँ क्लिक करें.

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Discussion

इस लेख में, हमने विवो आरसीएम और आरसीएम-ओसीटी उपकरणों में उपयोग करके छवि अधिग्रहण के लिए प्रोटोकॉल का वर्णन किया है। वर्तमान में, दो व्यावसायिक रूप से उपलब्ध आरसीएम डिवाइस हैं: एक वाइड-प्रोब या आर्म-माउंटेड आरसीएम (डब्ल्यूपी-आरसीएम) डिवाइस और एक हैंडहेल्ड आरसीएम (एचएच-आरसीएम) डिवाइस। यह समझना महत्वपूर्ण है कि नैदानिक सेटिंग्स में इन उपकरणों का उपयोग कब करना है। कैंसर का प्रकार और स्थान डिवाइस के चयन को निर्धारित करने वाले मुख्य कारक हैं।

डब्ल्यूपी-आरसीएम डिवाइस सपाट और धीरे-धीरे लहरदार शरीर की सतहों पर घावों के लिए अच्छी तरह से अनुकूल है, जैसे कि ट्रंक और छोर, क्योंकि इसे त्वचा के संपर्क की आवश्यकता होती है। चूंकि जांच प्रमुख चौड़ा है, इसलिए इसे संकीर्ण क्षेत्रों या शरीर के कोनों से जोड़ा नहीं जा सकता है। हालांकि, एचएच-आरसीएम एक अधिक लचीला उपकरण है और इसमें एक संकीर्ण जांच सिर है। नतीजतन, इस उपकरण का उपयोग अक्सर शरीर के घुमावदार और अपेक्षाकृत लहरदार क्षेत्रों पर घावों को चित्रित करने के लिए किया जाता है, जिसमें नाक, पलकें, ईयरलोब और जननांग शामिल हैं, जहां डब्ल्यूपी-आरसीएम संलग्न नहीं किया जा सकता है।

दोनों डिवाइस एकल-फ्रेम, सेलुलर-रिज़ॉल्यूशन छवियां, ढेर और वीडियो प्राप्त कर सकते हैं और सभी त्वचा कैंसर की छवि बनाने के लिए उपयोग किया जा सकता है। हालांकि, डब्ल्यूपी-आरसीएम डिवाइस मोज़ेक प्राप्त करके ~ 8 मिमी x 8 मिमी तक मापने वाले पूरे घाव के विज़ुअलाइज़ेशन को सक्षम बनाता है। मोज़ेक घाव के वास्तुशिल्प विवरण (जैसे समरूपता और परिक्रमण) का अवलोकन प्रदान करते हैं। एक डब्ल्यूपी-आरसीएम डिवाइस घाव की डर्मोस्कोपी छवियों को प्राप्त करने के लिए एक डिजिटल डर्माटोस्कोप कैमरे से भी लैस है, जो इमेजिंग सत्र के दौरान आरसीएम छवि अधिग्रहण का मार्गदर्शन करता है। ये दोनों अनूठी विशेषताएं मेलेनोमा से नेवी को अलग करने के लिए मेलानोसाइटिक घावों के मूल्यांकन के लिए डब्ल्यूपी-आरसीएम डिवाइस को बेहतर बनाती हैं। इसके विपरीत, हैंडहेल्ड डिवाइस केराटिनोसाइटिक घावों के लिए अधिक उपयुक्त है क्योंकि इन घावों को आमतौर पर वास्तुशिल्प मूल्यांकन की आवश्यकता नहीं होती है, लेकिन छोटे-एफओवी, उच्च-रिज़ॉल्यूशन छवियों (0.75 मिमी x 0.75 मिमी) पर अधिक निर्भर होते हैं। हालांकि, एचएच-आरसीएम डिवाइस मेलेनोमा (लेंटीगो मैलाइशिया) और बीसीसी के लिए ट्यूमर मार्जिन मैपिंग के लिए बड़े घावों (>8 मिमी मापने) की इमेजिंग और बायोप्सी साइट चयन का मार्गदर्शन करने के लिए बहुत उपयोगी है।

आरसीएम मुख्य रूप से त्वचा के घावों को ट्राइजिंग करने में डर्मोस्कोपी के लिए एक पूरक उपकरण के रूप में उपयोग किया जाता है जो घातक दिखाई देते हैं और बायोप्सी की आवश्यकता होती है, जबकि सौम्य 7,19 घावों के लिए बायोप्सी को छोड़ दिया जाता है। अन्य संकेतों में एक संदिग्ध घाव की गैर-आक्रामक निगरानी, सामयिक या शल्य चिकित्सा उपचार19,37,38 की प्रतिक्रिया का आकलन करना, लेंटीगो मैलाइना (एलएम) 39,40,41 के बड़े चेहरे के घावों के सर्जिकल मार्जिन को चित्रित करना, एलएम और ईएमपीडी 42 के बड़े घावों में लक्षित बायोप्सी का मार्गदर्शन करना और भड़काऊ घावों 43,44 का निदान करना शामिल है। . आरसीएम का उपयोग करने का एक प्रमुख लाभ किसी भी बायोप्सी45 के बिना विवो में बेडसाइड निदान प्रस्तुत करने की क्षमता है, जिससे तत्काल प्रबंधन की सुविधा मिलती है। इसके अलावा, हिस्टोपैथोलॉजी मूल्यांकन के विपरीत, जहां घाव की मात्रा का केवल एक छोटा सा अंश विश्लेषण किया जाता है, आरसीएम वास्तविक समय45 में घाव की बहुत बड़ी मात्रा के विज़ुअलाइज़ेशन को सक्षम करता है और ल्यूकोसाइट तस्करी32,46 जैसी गतिशील घटनाओं पर जानकारी प्रदान करता है।

आरसीएम की कुछ सीमाएं हैं। डर्मोस्कोपी के विपरीत, आरसीएम इमेजिंग को प्रति घाव ~ 15 मिनट की आवश्यकता होती है, जो नैदानिक वर्कफ़्लो को बाधित कर सकती है, और छवि मूल्यांकन के लिए पैथोलॉजिकल विशेषज्ञता की आवश्यकता होती है। यह इमेजिंग की सीमित गहराई (~ 250 μm तक) के कारण डर्मिस या सबक्यूटिस में गहराई से स्थित घावों का मूल्यांकन करने के लिए उपयुक्त नहीं है।

"मल्टी-मोडल" संयुक्त आरसीएम-ओसीटी डिवाइस आरसीएम22 की सीमाओं को दूर करने के लिए बनाया गया था। प्रारंभिक अध्ययनों ने बीसीसी23,24,25,47 (55 रोगियों) के निदान और प्रबंधन में आरसीएम-ओसीटी के उपयोग के लिए आशाजनक परिणाम दिखाए हैं। आरसीएम-ओसीटी ने नैदानिक रूप से संदिग्ध, गैर-बायोप्सिड घावों में बीसीसी के निदान में एक उच्च सटीकता (100% संवेदनशीलता, 75% विशिष्टता) का प्रदर्शन किया और उचित प्रबंधन के लिए सटीक रूप से निर्धारित घाव की गहराई का प्रदर्शन किया। इसने पहले बायोप्सीकिए गए घावों में अवशिष्ट बीसीसी का पता लगाने में 100% संवेदनशीलता भी दिखाई। हाल ही में, मोनियर एट अल ने डर्मोस्कोपिक रूप से अस्पष्ट घावों (छोटे, गैर-पिगमेंटेड) 23 (18 रोगियों) में बीसीसी के मूल्यांकन के लिए वास्तविक दुनिया की नैदानिक सेटिंग्स में इस उपकरण का उपयोग किया। उन्होंने एक ही घाव पर आरसीएम-अलोन डिवाइस के साथ संयुक्त आरसीएम-ओसीटी डिवाइस के परिणामों की तुलना की। अध्ययन ने अकेले आरसीएम डिवाइस पर संयुक्त डिवाइस का उपयोग करके विशिष्टता में 62.5% से 100% और संवेदनशीलता में 90% से 100% तक उल्लेखनीय सुधार दिखाया, इस प्रकार इन दो ऑप्टिकल इमेजिंग उपकरणों के लाभ और पूरक प्रकृति का प्रदर्शन किया। नवरेट-डेचेंट एट अल द्वारा किए गए एक अध्ययन ने "जटिल बीसीसी" रोगियों में अवशिष्ट बीसीसी का पता लगाने के लिए अकेले आरसीएम डिवाइस पर आरसीएम-ओसीटी डिवाइस की उपयोगिता को भी साबित किया, जिसने उनके प्रबंधन में सहायता की और रोगी देखभालमें सुधार किया। त्वचाविज्ञान क्लीनिकों के बाहर, आरसीएम-ओसीटी का अध्ययन बीसीसी के प्रीसर्जिकल मूल्यांकन के लिए एक उपकरण के रूप में किया जा रहा है, जहां इसने 82.6% की उच्च संवेदनशीलता और 93.8% की उच्च विशिष्टता दिखाई है, जिसमें ओसीटी पर देखी गई गहराई और हिस्टोपैथोलॉजी47 (35 रोगियों) पर अंतिम गहराई के बीच उच्च सहसंबंध है। इस प्रकार, इस उपकरण को ज्यादातर बीसीसी निदान और प्रबंधन के लिए वर्णित किया गया है; मेलेनोमा और एससीसी के लिए इसकी उपयोगिता का पता लगाया जाना बाकी है।

बीसीसी मूल्यांकन के लिए इसके उपयोग से परे, बैंग एट अल ने स्तन कैंसर रोगियों48 (सात रोगियों) में त्वचीय मेटास्टेसिस (सीएम) का पता लगाने के लिए इस उपकरण का भी पता लगाया। उन्होंने पहली बार आरसीएम-ओसीटी पर सीएम की विशेषताओं का वर्णन किया, जो भविष्य में उनके निदान और प्रबंधन में सहायता करेगा। उच्च-रिज़ॉल्यूशन छवियों के संयोजन और गहराई से घावों का मूल्यांकन करने की क्षमता के साथ, वे चित्रित सभी छह घावों में सीएम का पता लगा सकते हैं और एक सौम्य संवहनी एक्टेटिक घाव से अंतर कर सकते हैं। सीएम के लिए डिवाइस की नैदानिक क्षमता को साबित करने के लिए अधिक घावों के साथ बड़े पैमाने पर अध्ययन की आवश्यकता है।

उपयोग किए गए डिवाइस के बावजूद, कलाकृतियों से बचने और उच्च गुणवत्ता वाली छवियों को सुनिश्चित करने के लिए निम्नलिखित चरणों को सावधानीपूर्वक निष्पादित किया जाना चाहिए। गति कलाकृतियों से बचने के लिए, रोगी को आराम से तैनात किया जाना चाहिए। इमेजिंग साइटों का समर्थन करने के लिए अतिरिक्त तकिए या पैर या आर्मरेस्ट प्रदान किए जा सकते हैं। इमेजिंग के दौरान जांच पर एक दृढ़ हाथ रखकर श्वास के कारण होने वाली गति कलाकृतियों को कम किया जा सकता है। किसी भी बाहरी सामग्री के कारण होने वाली कलाकृतियों को कम करने के लिए, इमेजिंग से पहले अल्कोहल स्वैब या साबुन और पानी के साथ घाव स्थल को साफ करें। यदि आवश्यक हो, तो हवा के बुलबुले के गठन को रोकने के लिए घाव स्थल पर बालों को ट्रिम करें। क्रॉस-संदूषण से बचने के लिए सभी सावधानियां बरती जानी चाहिए। प्रत्येक उपयोग के बाद डिस्पोजेबल प्लास्टिक विंडो को छोड़ दिया जाना चाहिए, और इमेजिंग जांच को प्रत्येक उपयोग के बाद कीटाणुनाशक पोंछे के साथ अच्छी तरह से साफ किया जाना चाहिए।

नॉनइनवेसिव इमेजिंग में प्रगति का उद्देश्य नैदानिक सटीकता में सुधार करना और दुनिया भर में उनके उपयोग का विस्तार करना है। मौजूदा एचएच-आरसीएम डिवाइस के परिवर्धन का पता लगाया गया है, जैसे कि घाव की सतह के आकृति विज्ञान के दोहरे दृश्य को सक्षम करने के लिए एक वाइड-फील्ड कैमरा का समावेश और घाव49 के भीतर गहरे सेलुलर विवरण। एचएच-आरसीएम के अन्य परिवर्धन में वीडियो मोज़ेकिंग शामिल है - एक तकनीक जो वीडियो को मोज़ेक छवि में परिवर्तित करती है, इस प्रकार एफओवी50 का विस्तार करती है। इन प्रौद्योगिकियों के उपयोग का विस्तार करने के लिए, सस्ते, छोटे और अधिक पोर्टेबलउपकरणों को 51,52,53 विकसित किया जा रहा है, जिसमें इंट्राओरल इमेजिंग54 के लिए उपयोग की जाने वाली एक छोटी, अधिक लचीली, हैंडहेल्ड जांच शामिल है। इसके अलावा, शोधकर्ता ट्यूमर का पता लगाने की संवेदनशीलता और विशिष्टता में सुधार के लिए लक्षित फ्लोरोसेंट जांचकी खोज कर रहे हैं। डीईजे55 को पकड़ने या कलाकृतियों को हटाने के लिए स्वचालित रूप से सर्वोत्तम गहराई की पहचान करके इमेजिंग को कैप्चर करने में सहायता करने के लिए विभिन्न कृत्रिम बुद्धि-आधारितएल्गोरिदम हैं। इसके अतिरिक्त, चिकित्सकों को स्वचालित रूप से57,58 त्वचा कैंसर का पता लगाने में मदद करने के लिए कुछ एल्गोरिदम विकसित किए जा रहे हैं। अंत में, विवो आरसीएम इमेजिंग26 में लाइव, रिमोट का उपयोग करके, एक दूरस्थ, विशेषज्ञ-निर्देशित तकनीशियन उच्च गुणवत्ता वाली छवियों को कैप्चर कर सकता है और वास्तविक समय निदान करने के लिए चिकित्सकों का मार्गदर्शन कर सकता है।

व्यावसायिक रूप से उपलब्ध प्रतिस्पर्धी डिवाइस लाइन-फील्ड कॉन्फोकल ओसीटी (एलसी-ओसीटी) 15,16 और फुल-फील्ड ओसीटी (एफएफ-ओसीटी) 17,18 हैं। ये डिवाइस ऊर्ध्वाधर (जैसे ओसीटी) और एन-फेस प्लेन (जैसे आरसीएम) दोनों में छवियां उत्पन्न कर सकते हैं। इन उपकरणों के साथ प्राप्त ओसीटी छवियों में आरसीएम-ओसीटी डिवाइस22 की ओसीटी छवियों के ~ 7 μm की तुलना में ~ 1-3 μm का उच्च पार्श्व रिज़ॉल्यूशन है। हालांकि, रिज़ॉल्यूशन में यह वृद्धि ~ 300-500 μm की कम इमेजिंग गहराई और ~ 1-2 मिमी से 500 μm x 500 μm की एक छोटी FOV की कीमत पर आरसीएम-ओसीटी डिवाइस की तुलना में आई है। इस प्रकार, वे किसी भी वास्तुशिल्प विवरण प्रदान करने के लिए आदर्श नहीं हैं। उनके उपयोग को सभी त्वचा कैंसर की इमेजिंग के लिए वर्णित किया गया है। अंत में, आरसीएम और आरसीएम-ओसीटी डिवाइस दोनों मूल्यवान गैर-आक्रामक नैदानिक उपकरण हैं और त्वचाविज्ञान में अद्वितीय नैदानिक अनुप्रयोग हैं। जबकि आरसीएम, एक स्टैंड-अलोन डिवाइस (विशेष रूप से डब्ल्यूपी-आरसीएम डिवाइस) के रूप में, मेलेनोमा सहित रंजित त्वचा के घावों के मूल्यांकन के लिए उत्कृष्ट है, आरसीएम-ओसीटी डिवाइस बीसीसी निदान और प्रबंधन के लिए अधिक मूल्यवान है। भविष्य में, मौजूदा आरसीएम-ओसीटी डिवाइस में बड़ी एफओवी छवियों (मेलेनोमा के मूल्यांकन के लिए आवश्यक) प्रदान करने के लिए मोज़ेकिंग क्षमताओं के एकीकरण का पता लगाया जा सकता है ताकि नैदानिक उपयोग के लिए एक व्यापक मल्टी-मोडल डिवाइस प्रदान किया जा सके, जो सभी त्वचा कैंसर के लिए नॉनइनवेसिव इमेजिंग के लिए "ड्रीम-मशीन" होगा।

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Disclosures

उकेलीन हैरिस का कोई प्रतिस्पर्धी वित्तीय हित नहीं है। डॉ. मिलिंद राजाध्यक्ष कैलिबर आईडी (पूर्व में, ल्यूसिड इंक) के पूर्व कर्मचारी हैं और उनके पास वाइवास्कोप कॉन्फोकल माइक्रोस्कोप बनाने और बेचने वाली कंपनी में इक्विटी है। विवास्कोप एक मूल प्रयोगशाला प्रोटोटाइप का वाणिज्यिक संस्करण है जिसे डॉ राजाध्यक्ष द्वारा विकसित किया गया था जब वह मैसाचुसेट्स जनरल अस्पताल, हार्वर्ड मेडिकल स्कूल में थे।

Acknowledgments

इमेजिंग के लिए स्वयंसेवक होने के लिए क्वामी केटोसुग्बो और एमिली कोवेन को एक विशेष धन्यवाद दिया जाता है। इस शोध को मेमोरियल स्लोन केटरिंग कैंसर सेंटर को किए गए राष्ट्रीय कैंसर संस्थान / राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान (पी 30-सीए008748) से अनुदान द्वारा वित्त पोषित किया जाता है।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Crystal Plus 500FG mineral oil STE Oil Company, Inc. A food grade, high viscous mineral oil used with our various devices during in vivo imaging.
RCM-OCT Physical Science Inc. - A “multi-modal” combined RCM-OCT device simultaneously images skin lesions in both horizonal and vertical modes.
Vivascope 1500 Caliber I.D. - A wide-probe RCM (WP-RCM) device that attaches to the skin to campture in vivo devices.
Vivascope 3000 Caliber I.D. - A hand-held RCM (HH-RCM) device that is moved across the skin to capture in vivo images.

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छवि अधिग्रहण के माध्यम से त्वचा कैंसर के गैर-आक्रामक निदान के लिए ऑप्टिकल समेकन टोमोग्राफी के साथ परावर्तनीयता कॉन्फोकल माइक्रोस्कोपी का संयोजन
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Harris, U., Rajadhyaksha, M., Jain, M. Combining Reflectance Confocal Microscopy with Optical Coherence Tomography for Noninvasive Diagnosis of Skin Cancers via Image Acquisition. J. Vis. Exp. (186), e63789, doi:10.3791/63789 (2022).

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