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JoVE Journal Cancer Research
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Cancer Research

Combinando Microscopia Confocal de Reflectância com Tomografia de Coerência Óptica para Diagnóstico Não Invasivo de Cânceres de Pele via Aquisição de Imagem

Published: August 18, 2022 doi: 10.3791/63789
Automatic Translation
1, 1, 1
1Dermatology Service, Department of Medicine, Memorial Sloan Kettering Cancer Center

Summary

Aqui, descrevemos protocolos para aquisição de imagens de boa qualidade usando novos dispositivos de imagem não invasivos de microscopia confocal de reflectância (RCM) e RCM combinado e tomografia de coerência óptica (OCT). Também familiarizamos os médicos com suas aplicações clínicas para que eles possam integrar as técnicas em fluxos de trabalho clínicos regulares para melhorar o atendimento ao paciente.

Abstract

O câncer de pele é um dos cânceres mais comuns em todo o mundo. O diagnóstico baseia-se na inspeção visual e dermatoscopia seguida de biópsia para confirmação histopatológica. Embora a sensibilidade da dermatoscopia seja alta, a menor especificidade faz com que 70%-80% das biópsias sejam diagnosticadas como lesões benignas na histopatologia (falsos positivos à dermatoscopia).

A microscopia confocal por reflectância (MCR) e a tomografia de coerência óptica (OCT) podem orientar de forma não invasiva o diagnóstico de cânceres de pele. O MCR visualiza a morfologia celular nas camadas en-face . Duplicou a especificidade diagnóstica para melanoma e cânceres pigmentados de pele queratinocítica em relação à dermatoscopia, reduzindo pela metade o número de biópsias de lesões benignas. A RCM adquiriu códigos de faturação nos EUA e está agora a ser integrada nas clínicas.

No entanto, limitações como a profundidade rasa (~200 μm) dos exames de imagem, o baixo contraste para lesões cutâneas não pigmentadas e a imagem nas camadas en-face resultam em especificidade relativamente menor para a detecção de carcinoma basocelular (CBC) não pigmentado — CBCs superficiais contíguos à camada basocelular e CBCs infiltrativos mais profundos. Em contraste, a OCT não tem resolução celular, mas obtém imagens de tecido em planos verticais até uma profundidade de ~1 mm, o que permite a detecção de subtipos superficiais e profundos de CBCs. Assim, ambas as técnicas são essencialmente complementares.

Um dispositivo combinado RCM-OCT "multimodal" fotografa simultaneamente lesões cutâneas nos modos en-face e vertical. É útil para o diagnóstico e manejo dos CBCs (tratamento não cirúrgico para CBCs superficiais vs. tratamento cirúrgico para lesões mais profundas). Uma melhora acentuada na especificidade é obtida para detectar pequenos CBCs não pigmentados em relação à RCM isoladamente. Os dispositivos RCM e RCM-OCT estão trazendo uma grande mudança de paradigma no diagnóstico e manejo dos cânceres de pele; no entanto, seu uso atualmente é limitado a centros acadêmicos de atendimento terciário e algumas clínicas privadas. Este artigo familiariza os clínicos com esses dispositivos e suas aplicações, abordando as barreiras translacionais no fluxo de trabalho clínico de rotina.

Introduction

Tradicionalmente, o diagnóstico do câncer de pele depende da inspeção visual da lesão, seguida de um olhar mais atento às lesões suspeitas usando uma lente de aumento chamada dermatoscópio. O dermatoscópio fornece informações subsuperficiais que aumentam a sensibilidade e a especificidade em relação à inspeção visual para o diagnóstico de cânceres cutâneos 1,2. No entanto, a dermatoscopia carece de detalhes celulares, muitas vezes levando a uma biópsia para confirmação histopatológica. A baixa e variável especificidade (67% a 97%) da dermatoscopia3 resulta em falsos positivos e biópsias que mostram lesões benignas na patologia. A biópsia não é apenas um procedimento invasivo que causa sangramento e dor4, mas também é altamente indesejável em regiões cosmeticamente sensíveis, como a face, devido a cicatrizes.

Para melhorar o atendimento ao paciente, superando as limitações existentes, muitos dispositivos de imagem in vivo não invasivos estão sendo explorados 5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17,18 . Os dispositivos RCM e OCT são os dois principais dispositivos ópticos não invasivos utilizados para o diagnóstico de lesões de pele, especialmente cânceres de pele. A RCM adquiriu códigos de faturamento da Terminologia Processual Atual (CPT) nos EUA e está sendo cada vez mais utilizada em centros acadêmicos de atendimento terciário e em algumas clínicas privadas 7,8,19. RCM imagens de lesões em resolução quase histológica (celular). No entanto, as imagens estão no plano en-face (visualização de uma camada de pele por vez), e a profundidade de imagem é limitada a ~200 μm, suficiente para atingir apenas a derme superficial (papilar). A imagem RCM baseia-se no contraste de reflectância de várias estruturas na pele. A melanina confere o maior contraste, tornando as lesões pigmentadas brilhantes e fáceis de diagnosticar. Assim, a RCD associada à dermatoscopia melhorou significativamente o diagnóstico (sensibilidade de 90% e especificidade de 82%) em relação à dermatoscopia das lesões pigmentadas, incluindo omelanoma20. No entanto, devido à ausência de contraste melanina nas lesões róseas, especialmente nos CBCs, a MCR tem menor especificidade (37,5%-75,5%)21. Um OCT convencional, outro dispositivo não invasivo comumente utilizado, visualiza lesões de até 1 mm de profundidade dentro da pele e as visualiza em um plano vertical (semelhante à histopatologia)9. No entanto, a OCT não tem resolução celular. A OCT é utilizada principalmente para o diagnóstico de lesões queratinocíticas, especialmente CBCs, mas ainda apresenta menor especificidade9.

Assim, para superar as limitações existentes nesses dispositivos, um dispositivo multimodal RCM-OCT foi construído22. Este dispositivo incorpora RCM e OCT dentro de uma única sonda de imagem portátil, permitindo a aquisição simultânea de imagens RCM en-face co-registradas e imagens verticais de OCT da lesão. A OCT fornece detalhes arquitetônicos das lesões e pode obter imagens mais profundas (até uma profundidade de ~1 mm) dentro da pele. Ele também tem um campo de visão maior (FOV) de ~2 mm22 em comparação com o dispositivo RCM portátil (~0,75 mm x 0,75 mm). As imagens de RCM são usadas para fornecer detalhes celulares da lesão identificada na OCT. Esse protótipo ainda não foi comercializado e está sendo utilizado como dispositivo experimental em clínicas23,24,25.

Apesar do sucesso no aprimoramento do diagnóstico e manejo dos cânceres da pele (como comprovado pela literatura), esses dispositivos ainda não são amplamente utilizados na clínica. Isso se deve, principalmente, à escassez de especialistas capazes de ler essas imagens, mas também à falta de técnicos treinados que possam adquirir imagens de qualidade diagnóstica de forma eficiente (dentro de um período de tempo clínico) à beira do leito8. Neste manuscrito, o objetivo é facilitar a conscientização e eventual adoção desses dispositivos nas clínicas. Para atingir esse objetivo, familiarizamos dermatologistas, dermatopatologistas e cirurgiões de Mohs com imagens de câncer de pele e pele normais adquiridas com os dispositivos RCM e RCM-OCT. Também vamos detalhar a utilidade de cada dispositivo para o diagnóstico de cânceres de pele. O foco deste manuscrito é fornecer orientações passo a passo para a aquisição de imagens com esses dispositivos, o que garantirá imagens de boa qualidade para uso clínico.

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Protocol

Todos os protocolos descritos abaixo seguem as diretrizes do comitê de ética em pesquisa com seres humanos da instituição.

1. Dispositivo RCM e protocolo de imagem

NOTA: Existem dois dispositivos RCM in vivo disponíveis comercialmente: RCM DE SONDA LARGA (WP-RCM) e RCM portátil (HH-RCM). O WP-RCM vem integrado com um dermatoscópio digital. Estes dois dispositivos estão disponíveis separadamente ou como uma unidade combinada. Abaixo estão os protocolos de aquisição de imagens utilizando a última geração (Geração 4) dos dispositivos WP-RCM e HH-RCM e suas indicações clínicas.

  1. Seleção das lesões e indicações clínicas
    1. Procurar os seguintes tipos de lesões: dermoscopicamente rósea (CBC, carcinoma espinocelular [CEC], ceratose actínica [CA], outras lesões benignas) ou pigmentada (nevos e melanoma, lesões queratinocíticas pigmentadas); nevo recentemente alterado no exame clínico ou dermatoscópico; lesões inflamatórias para determinar padrões inflamatórios.
    2. Realizar mapeamento das margens do lentigo maligno (LM) para determinar a extensão da lesão e mapeamento e seleção de sítios de biópsia para doença com extensão subclínica, como doença de Paget extramamária (EMPD) e ML.
    3. Realizar monitoramento não invasivo do tratamento não cirúrgico, como drogas tópicas (imiquimod), radiação, terapia fotodinâmica e ablação a laser.
  2. Para a seleção do dispositivo, use o dispositivo WP-RCM para lesões localizadas em superfícies relativamente planas da pele (tronco e extremidades) e o dispositivo HH-RCM para lesões em superfícies curvas (nariz, lóbulos das orelhas, pálpebras e genitália).
    NOTA: A seleção do dispositivo de imagem dependerá principalmente da localização da lesão.
  3. Para exames de imagem, posicione o paciente em uma cadeira totalmente reclinável ou em uma mesa de exame plana com travesseiros ou um apoio de braço para apoio e para obter uma superfície de imagem plana.
    NOTA: Os dispositivos WP-RCM de geração mais antiga (Geração 3) levaram ~30 minutos por lesão. A obtenção de imagens de uma única lesão pode exigir ~15 minutos com o dispositivo WP-RCM de última geração (Geração 4) atualmente sendo usado em clínicas. Apesar do melhor tempo de aquisição, o posicionamento confortável do paciente garantirá o mínimo de artefatos de movimento e auxiliará na aquisição de imagens de qualidade superior. Os seguintes passos podem ajudar no posicionamento correto do paciente:
  4. Para se preparar para exames de imagem, limpe a lesão e a pele circundante com um lenço com álcool para eliminar qualquer sujeira, loção ou maquiagem. Faça a barba nas superfícies pilosas da pele antes de fixar a janela de tecido para evitar bolhas de ar que possam dificultar a visualização das microestruturas teciduais.
    OBS: Para remover cosméticos pesados ou protetores solares, limpe o local com água e sabão suave antes de limpar com álcool.
  5. A aquisição de imagens utilizando o dispositivo WP-RCM (Figura 1, Figura 2, Figura suplementar S1, Figura suplementar S2e Figura suplementar S3)
    NOTA: Os dispositivos WP-RCM são capazes de capturar pilhas, mosaico, vídeos ao vivo de quadro único e imagens de quadro único.
    1. Para fixar uma tampa plástica descartável à lesão (Figura 1), posicione a sonda perpendicularmente à lesão para obter as melhores imagens. Consulte a Figura 1A-F para obter um exemplo de anexo. Adicione uma gota de óleo mineral no centro da janela de plástico, espalhando-a cuidadosamente pela largura da janela (Figura 1A). Remova o suporte de papel do lado adesivo da janela de plástico. Estique a pele suavemente para evitar enrugamento e prenda a janela.
      NOTA: Use óleo mineral de grau alimentício que é seguro e tem uma alta viscosidade. Certifique-se de que a lesão esteja centrada e coberta em sua totalidade. Para lesões maiores que 8 mm x 8 mm, seja por imagem de áreas de preocupação com base na dermatoscopia ou por sessões de imagem separadas para cobrir toda a lesão.
    2. Aquisição de imagens dermatoscópicas (Figura 1C,D)
      OBS: Uma imagem dermatoscópica é adquirida para servir de guia para navegar dentro da lesão. Os passos a seguir devem ser utilizados para garantir o perfeito registro entre a imagem dermatoscópica e a imagem confocal.
      1. Passe o mouse sobre a sonda WP-RCM sobre a tampa plástica da janela e aproxime-se do melhor ângulo de inserção para a sonda (Figura 1C). Localize a pequena seta branca localizada na lateral da sonda (Figura 1C) e alinhe-a com a seta na lateral da câmera de dermatoscopia (Figura 1C).
      2. Insira a câmera de dermatoscopia na tampa plástica da janela (Figura 1D). Pressione o gatilho da câmera para adquirir uma imagem. Retire o dermatoscópio. Antes de iniciar a sessão de imagem, certifique-se de que a imagem do dermatoscópio cubra toda a superfície da lesão.
    3. Para fixar a sonda RCM à tampa plástica descartável (Figura 1E,F), coloque uma quantidade de gel de ultrassom do tamanho de uma ervilha dentro da tampa plástica descartável da janela (Figura 1E). Insira a sonda dentro da tampa até que um clique nítido seja ouvido (Figura 1F).
      NOTA: Para obter as melhores imagens, insira a sonda perpendicularmente (em um ângulo de 90°) à janela de plástico. A altura da cadeira de exame pode ser elevada para obter uma superfície mais plana, reduzir artefatos de movimento, expelir bolhas de ar (Figura 3 e Figura 4) e garantir uma fixação segura à pele.
    4. Aquisição de imagens RCM (Figura 2, Figura Suplementar S1 e Figura Suplementar S2)
      1. Utilizar a imagem dermatoscópica (passo 5.2.) para guiar a aquisição da imagem do MMC (Figura Suplementar S1). Selecione o centro da lesão e identifique a camada mais alta (mais brilhante) da pele — a camada anucleada do estrato córneo (Figura Suplementar S1).
      2. Defina a profundidade de imagem para zero nesse nível (Figura Suplementar S1).
        NOTA: Esta profundidade serve como um ponto de referência para determinar a real profundidade z das camadas subsequentes dentro da lesão.
      3. Adquira uma pilha no centro da lesão (Figura 2 e Figura Suplementar S1) pressionando o ícone da pilha . Selecione um site anatômico no menu suspenso: rosto ou corpo. Ajuste de 4,5 μm de tamanho de passo e 250 μm de profundidade.
        NOTA: Comece as pilhas a partir do estrato córneo e termine nas camadas mais profundas visíveis na derme. A Figura suplementar S1 mostra um exemplo de como adquirir uma pilha, enquanto a Figura 2 fornece um exemplo de uma pilha.
      4. Adquira um mosaico: pegue o primeiro mosaico na junção dermoepidérmica (JDE) (Figura Suplementar S2). Identifique a camada de DEJ na pilha adquirida e, em seguida, use o mouse para selecionar um quadrado de 8 mm x 8 mm para cobrir toda a lesão. Pressione o ícone de mosaico para concluir a operação (Figura suplementar S2). Adquira pelo menos 5 mosaicos em várias profundidades: estrato córneo, estrato espinhoso, camada suprabasal, JDE e derme papilar superficial.
      5. Abra o mosaico DEJ para orientar a aquisição dos mosaicos subsequentes. Clique em qualquer estrutura no mosaico DEJ para exibir essa área na visualização ao vivo da imagem. Role para baixo para adquirir mosaicos na derme e depois para cima (do DEJ) para tirar mosaicos na epiderme.
      6. Obtenha os mosaicos adquiridos avaliados pelo leitor especialista em RCM presente à beira do leito para identificar a região de interesse e levar pilhas. Na ausência de um especialista à beira do leito, capturar 5 pilhas: uma em cada quadrante e outra no centro da lesão com padrão homogêneo à dermatoscopia (passos 1.5.2.). Para lesões heterogêneas, adquirir pilhas adicionais para cobrir todas as características da dermatoscopia.
        NOTA: Uma "pilha" (Figura 2) é uma coleção sequencial de imagens de alta resolução, de quadro único e pequeno campo de visão (FOV) (0,5mm x 0,5 mm) adquiridas em profundidade a partir da camada mais superior da epiderme até a derme superficial (~200 μm). Um "mosaico" (Figura Suplementar S2) é um grande FOV de imagens obtidas pela costura de imagens individuais de 500 μm x 500 μm em "X-Y" (plano horizontal en face ).
    5. Concluindo uma sessão de geração de imagens
      1. Clique em Imagens concluídas.
      2. Retire o microscópio da janela de plástico. Remova a janela de plástico segurando suavemente a pele do paciente e elimine-a. Limpe o óleo da pele com um cotonete com álcool.
      3. Desconecte o cone protetor ao redor da lente do microscópio. Limpe a ponta da lente objetiva com um cotonete de álcool para remover o gel de ultrassom. Seque a lente objetiva com um papel toalha. Reconecte o cone de plástico à sonda do microscópio.
        NOTA: As imagens podem ser lidas e um relatório pode ser gerado e assinado à beira do leito por um médico treinado. Na ausência de um leitor especialista, um especialista remoto pode ser consultado transferindo as imagens via nuvem ou por meio de uma sessão teleconfocal ao vivo26.
    6. Gerando um relatório de Avaliação Diagnóstica Confocal (Figura Suplementar S3)
      1. Clique em Nova Avaliação. Insira o diagnóstico nas opções pré-selecionadas no menu suspenso.
      2. Se outra sessão de imagem for necessária, selecione as imagens inadequadas e que precisam ser recapturadas. Se um diagnóstico descritivo for necessário, selecione outro e descreva na caixa de texto livre no final do formulário. Insira o código CPT para faturamento7 (Figura Suplementar S3A). Selecione os recursos aplicáveis vistos durante a geração de imagens na lista de verificação do relatório (Figura Suplementar S3B). Selecione o gerenciamento aplicável na lista de verificação.
        NOTA: Nenhum código de faturamento é aplicável para imagens HH-RCM.
      3. Clique em Concluir e assinar. Gere o relatório como PDF e imprima. Obtenha o laudo assinado por um médico e adicione-o ao prontuário do paciente para faturamento.
  6. Aquisição das imagens utilizando o aparelho HH-RCM (Figura 5)
    NOTA: Os dispositivos HH-RCM são capazes de capturar pilhas, vídeos ao vivo de quadro único e imagens de quadro único.
    1. Circunde a lesão identificada pelo médico com um anel de papel. Use as etapas detalhadas na seção 3. para posicionamento do paciente e limpeza do local da lesão.
      NOTA: Selecione o tamanho do anel de papel (5-15 mm) com base no tamanho da lesão para definir o limite da lesão e garantir que a imagem seja feita dentro da lesão. Se um anel de papel não estiver disponível, use fita adesiva para definir a lesão.
    2. Remova a tampa plástica que cobre a lente do microscópio. Aplique uma quantidade de gel de ultrassom do tamanho de uma ervilha na lente objetiva do HH-RCM e cubra-a com a tampa plástica (Figura Suplementar S3A). Adicione uma gota generosa de óleo mineral ao lado da tampa plástica que estará tocando a pele.
      NOTA: Aumentar a quantidade de óleo para pele muito seca, se necessário.
    3. Pressione a sonda até o local da lesão na pele com pressão firme. Use os controles de profundidade z no dispositivo HH-RCM para se mover para cima e para baixo em várias profundidades dentro da lesão (Figura Suplementar S3B). Adquira várias imagens de quadro único e pilhas nas regiões de interesse. Pegue pilhas conforme descrito na etapa 1.5.4.3.
    4. Para lesões grandes onde o dispositivo WP-RCM não pode ser fixado, faça vídeos contínuos em várias camadas movendo a sonda HH-RCM sobre toda a superfície da lesão. Clique no símbolo de captura de vídeo para fazer isso. Registre o movimento das células sanguíneas dentro dos vasos, se necessário.
      NOTA: Esses vídeos podem ser costurados posteriormente usando software para fornecer imagens FOV grandes semelhantes a mosaicos.
    5. Pressione Done Imaging após a conclusão da sessão de geração de imagens. Limpe a lesão com um cotonete de álcool para remover o óleo. Retire o gel de ultrassom da lente objetiva da sonda limpando-o com um lenço de álcool e reconectando a tampa plástica.
      NOTA: Ao contrário do dispositivo WP-RCM, que pode ser operado por um técnico, o HH-RCM deve ser operado por um leitor RCM que possa interpretar imagens em tempo real para navegar dentro da lesão e chegar a um diagnóstico correto.

2. Dispositivo combinado RCM-OCT e protocolo de imagem

NOTA: Existe apenas um protótipo do dispositivo RCM-OCT. Este dispositivo tem uma sonda portátil e pode ser usado em todas as superfícies do corpo, semelhante ao dispositivo HH-RCM. Ele adquire pilhas RCM (semelhante ao dispositivo RCM) e rasters OCT (um vídeo de imagens sequenciais e transversais22). As imagens RCM e OCT estão em escala de cinza. As imagens RCM têm um FOV de ~200 μm x 200 μm, enquanto a imagem OCT tem um FOV de 2 mm (em largura) x 1 mm (em profundidade). A seguir, o protocolo de aquisição das imagens com o aparelho RCM-OCT, bem como suas indicações clínicas. A Figura 6 mostra uma imagem do dispositivo RCM-OCT, enquanto a Figura 7 mostra o sistema de software do dispositivo RCM-OCT.

  1. Seleção das lesões
    1. Procure lesão dermoscopicamente equivocada rósea ou pigmentada para descartar CBC.
    2. Avaliar a profundidade do CBC para manejo e avaliar o CBC residual após o tratamento.
  2. Posicionamento do paciente para exames de imagem: A obtenção de imagens de uma única lesão pode exigir até 20 minutos com o dispositivo RCM-OCT. O dispositivo também é uma sonda portátil semelhante ao dispositivo HH-RCM e, portanto, pode ser movido livremente sobre a lesão. Para detalhes sobre o posicionamento do paciente, consulte a seção 1.4. acima.
  3. Preparo do local para exames de imagem: Ao usar esta sonda, certifique-se de que o limite da lesão esteja livre de pelos excessivos e impurezas tópicas e esteja claramente definido. Consulte a etapa 1.4.1. acima para mais detalhes.
  4. Aquisição de imagens utilizando o aparelho RCM-OCT (Figura 6 e Figura 7)
    1. Prepare a sonda de forma semelhante à utilizada para o HH-RCM (passos 1.6.1-1.6.2.)
    2. Adquira imagens no modo de imagem de linha e no modo raster .
      1. Clique nas configurações de imagem (Figura 7A). Selecione o modo de imagem de linha para adquirir uma imagem RCM (resolução celular) (Figura 7B). Defina o tamanho do passo para 5 μm e o número de passos para 40 (Figura 7A).
      2. Clique em Agarrar. Adquira pilhas seguindo a etapa 1.5.4.3. Depois de concluído, clique no botão Congelar .
      3. Clique em configurações de imagem. Selecione o modo raster para adquirir um vídeo correlativo da OCT para a arquitetura da lesão (Figura 7B). Alterne para a guia técnico (Figura 7C). Depois de concluído, clique no botão Grab (Figura 7A) e pressione imediatamente o botão salvar .
      4. Adquira várias pilhas e vídeos com base no interesse do médico.
      5. Limpar a lesão e a máquina conforme descrito no passo 1.6.5.

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Representative Results

Microscopia confocal de reflectância (RCM)
Interpretação de imagem em RCM:
As imagens de RCM são interpretadas de forma a mimetizar a avaliação das lâminas histopatológicas. Os mosaicos são avaliados primeiro para obter o detalhe arquitetônico geral e identificar áreas de preocupação, semelhante à avaliação de seções histológicas na ampliação da varredura (2x). Segue-se o zoom no mosaico para avaliação dos detalhes celulares, semelhante à avaliação de lâminas em alta magnificação (20x). A Figura 8 mostra este esquema da análise das imagens.

Qualidade de imagem:
Imagens de alta qualidade, sem artefatos significativos, adquiridas em profundidades relevantes na pele, são essenciais para o diagnóstico correto. A Figura 4A mostra uma dessas imagens. A principal razão para imagens ininterpretáveis está relacionada a artefatos ou inexperiência na aquisição de imagens. A Figura 3 e a Figura 4B mostram imagens com artefatos como bolhas de ar, debris superficiais e artefatos de movimento, que dificultam a avaliação diagnóstica. Além de dominar o aspecto técnico da aquisição da imagem, o operador do MCR deve estar familiarizado com a morfologia das várias camadas da pele para permitir a aquisição da imagem em profundidades relevantes.

Aparência de camadas normais da pele no RCM:
Imagens com qualidade de "quase histologia" na face (plano horizontal) são adquiridas com o dispositivo RCM em profundidades variadas, desde a camada mais superficial da epiderme até a derme papilar superficial na pele. A MCR possui terminologia própria que permite a identificação de várias camadas na pele 5,27. A Figura 2 mostra cinco imagens de quadro único adquiridas em diferentes profundidades a partir de uma pilha.

Aparecimento de várias células no RCM:
As imagens em RCM aparecem em escala de cinza, variando de estruturas muito claras a estruturas escuras devido aos tamanhos variáveis e índices de refração de diferentes células da pele. Melanina, queratina e colágeno são as fontes de maior refletância na pele28,29. Assim, células contendo melanina, como melanócitos (banais e malignos), queratinócitos melanizados e melanófagos aparecem brilhantes. Da mesma forma, células ricas em queratina, como o estrato córneo e os cistos de queratina, aparecem brilhantes. Grânulos de querato-hialina presentes nos queratinócitos do estrato granuloso também aparecem brilhantes. Outra possível fonte de alta refletividade são os grânulos de Birkbeck nas células de Langerhans30 e nas células inflamatórias28,29. Em contraste, o conteúdo intranuclear não tem reflectância e parece escuro no confocal31. Isso também é verdade para secreções de mucina. Os vasos sanguíneos são encontrados na derme papilar. Apresentam-se como estruturas hiporreflexivas horizontais ou verticais. Os leucócitos aparecem como células pequenas, brilhantes, hiperreflexivas, redondas e dentro desses vasos sanguíneos hiporreflexivos32. O tráfico de leucócitos é proeminente durante imagens ao vivo. A Figura 9 mostra o aparecimento de camadas normais da pele na MCR. O vídeo 1 mostra um exemplo de tráfico de leucócitos na RCM.

Características específicas do tumor na RCM:
Características tumor-específicas estão bem estabelecidas e auxiliam na diferenciação de lesões benignas de malignas. Por exemplo, nódulos tumorais com paliçada periférica e espaço "semelhante a fissura" são características específicas do CBC33. Da mesma forma, células pagetóide nucleadas na epiderme, atipias na JDE e padrão epidérmico desarranjado sugerem o diagnóstico demelanoma34. Padrões atípicos e desarranjados em favo de mel são características fundamentais para o diagnóstico de CEC33 em MCR. A Figura 10 mostra um exemplo de CBC, melanoma e CEC vistos em imagens de RCM.

Dispositivo combinado RCM-OCT
Interpretação de imagens em RCM-OCT:
Para interpretação de imagens RCM-OCT, tanto pilhas quanto rasters são avaliados. As pilhas fornecem informações no nível celular e em várias profundidades da lesão, enquanto o raster fornece uma visão vertical da lesão e fornece informações sobre a arquitetura geral da lesão. Essa visão vertical é crucial para a detecção de CBC, especialmente CBCs superficiais, que, por vezes, aparecem como sombras escuras na MCR e podem passar despercebidos25. Na visão vertical das imagens de OCT, a continuidade do nódulo tumoral de CBC com a epiderme sobrejacente e a separação da derme por uma área escura de fissura são claramente discerníveis. A Figura 11 mostra um exemplo de correlação entre dermatoscopia, MMC, OCT e histologia do CBC.

Aparência de camadas normais da pele no RCM-OCT:
As camadas da pele parecem semelhantes às imagens RCM adquiridas com o dispositivo HH-RCM. Mais detalhes são fornecidos nas seções "aparência de várias camadas de pele em confocal" e "aparência de várias células em confocal" e Figura 9.

Como o RCM, as imagens raster da OCT são em escala de cinza. No entanto, os rasters de OCT mostram uma visão vertical semelhante às lâminas histológicas tradicionais, mas não têm resolução celular. As imagens de OCT têm uma aparência semelhante às imagens de dispositivos OCT convencionais disponíveis comercialmente. O estrato córneo aparece como uma linha fina e brilhante (hiperreflexiva), com a epiderme subjacente aparecendo de cor acinzentada (hiporreflexiva). A derme papilar parece mais brilhante que a epiderme, e a parte mais profunda da derme reticular aparece a mais escura (não reflexiva) devido à perda de sinal35. A JDE pode ser identificada como uma zona de transição entre a epiderme acinzentada e a derme papilar brilhante. A Figura 12 mostra imagens de MCR e OCT adquiridas de pele normal na mão de um voluntário saudável.

Embora a resolução celular não seja possível, muitas estruturas são visíveis na OCT. Os vasos sanguíneos podem ser facilmente vistos na derme papilar como estruturas tubulares reflexivas (sem sinal), horizontais ou verticais. Os folículos pilosos são geralmente estruturas hiporreflexivas, redondas ou tubulares na derme. Seu infundíbulo (a parte mais superior do folículo piloso) é visto emergindo da derme e se projetando para fora da epiderme em um ângulo durante uma sessão de imagem raster ao vivo. Muitas vezes projetam um sinal de sombra na superfície da epiderme36. Às vezes, os fios de cabelo podem ser vistos emergindo dos folículos pilosos, facilitando sua identificação. A Figura 11 fornece uma visão dessas estruturas.

Aparência do CBC no RCM-OCT:
O aparecimento do CBC na RCM é discutido na seção "características específicas do tumor" da RCM. Na OCT, os nódulos tumorais do CBC podem ser prontamente detectados como nódulos acinzentados, redondos e hiporreflexivos, vistos circundados por uma área reflexiva e escura de "fissura". Este nódulo pode ser visto aderido com a faixa acinzentada sobrejacente da epiderme no CBC superficial. Os nódulos tumorais do CBC são frequentemente circundados por feixes de colágeno hiperreflexivos, brancos eespessados23. Outros subtipos, como CBCs infiltrativos ou morfeaformes, são difíceis de diagnosticar com OCT. A Figura 11 fornece uma visão do CBC capturado pela rasterização da OCT.

Figure 1
Figura 1: Conexão WP-RCM: dispositivo WP-RCM de geração 4. (A) Coloque uma gota de óleo mineral no centro da janela de plástico. (B) Centralizar a janela plástica sobre a lesão. (C) Combinar a seta na cabeça do microscópio (círculo tracejado verde) com a seta (círculo tracejado amarelo) no dermatoscópio. (D) Inserir o dermatoscópio na janela plástica e clicar para obter uma imagem dermatoscópica com orientação correta. (E) Retirar o dermatoscópio e adicionar gel ultrassonográfico dentro da janela plástica. (F) Fixar totalmente a cabeça do microscópio à janela plástica em um ângulo de 90° em relação à lesão. Abreviação: WP-RCM = microscopia confocal de reflectância de sonda larga. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figure 2
Figura 2: Um exemplo de uma pilha. Uma pilha mostrando uma coleção de imagens de quadro único adquiridas em profundidades z consecutivas da pele normal. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figure 3
Figura 3: Imagem de baixa qualidade. (A) Imagem de baixa qualidade ao nível da epiderme mostrando algumas bolhas de ar (setas amarelas), um material externo (círculo amarelo), provavelmente uma fibra de papel, e as franjas da tampa plástica (caixa vermelha), indicando a fixação inadequada do microscópio à pele. (B,C) Áreas ampliadas do painel A. Barras de escala = 50 μm. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figure 4
Figura 4: Comparação de imagens confocais de alta qualidade versus imagens confocais de baixa qualidade. (A) Mosaico de alta qualidade (Figura 6) ao nível da epiderme sem artefatos. (B) Um mosaico de baixa qualidade ao nível da epiderme mostra várias bolhas grandes (setas azuis), o que pode interferir na avaliação. Barras de escala = 50 μm. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figure 5
Figura 5: Fixação HH-RCM usando um dispositivo HH-RCM geração 4. (A) Retire a tampa plástica e adicione gel de ultrassom na parte superior da lente. (B) Recolocar a tampa plástica (seta verde) no dispositivo e colocá-la sobre a lesão para exames de imagem. Abreviação: HH-RCM = microscopia confocal de reflectância portátil. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figure 6
Figura 6: Dispositivo RCM-OCT. (A) A sonda portátil (seta amarela) do dispositivo combinado RCM-OCT. (B) O dispositivo RCM-OCT com uma janela de imagem ao vivo mostrando uma imagem OCT (seta preta) e uma imagem RCM (seta verde) simultaneamente. Abreviações: RCM = microscopia confocal de reflectância; OCT = tomografia de coerência óptica. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figure 7
Figura 7: Plataforma de software RCM-OCT. Instantâneos de janelas de imagens ao vivo mostrando simultaneamente (A) uma imagem OCT (diamante azul) e uma imagem RCM com resolução celular (estrela amarela). O tamanho do passo, o número de passos e a profundidade z são todos controlados pelos sistemas de escala deslizante (caixa preta; setas pretas). (B) Alternância entre os modos "imagem de linha" e "raster" (setas amarelas); (C) o botão usado para salvar imagens raster (círculo preto). Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figure 8
Figura 8: Esquema de análise das imagens ao nível da epiderme. (A) A imagem é analisada primeiramente no nível do mosaico (8 mm x 8 mm), o que corresponde a um aumento de aproximadamente 4x na histologia. (B) As áreas de interesse podem então ser avaliadas em nível celular ampliando a janela de imagem ao vivo durante a aquisição da imagem. Este painel mostra uma visualização ampliada em submosaico a partir da área de caixa laranja no painel A, o que corresponde a uma visualização de ampliação de aproximadamente 20x na histologia. Barra de escala = (A) 50 μm. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figure 9
Figura 9: Aparência das camadas normais da pele na MCR. (A) Estrato córneo: a camada mais brilhante e primeira da pele composta por queratinócitos anucleados. (B) Estrato espinhoso: composto por células nucleadas e bem compactadas (os núcleos são escuros) com citoplasma brilhante, criando um típico "padrão de favo de mel". (C) Estrato basal: identificado pelo característico "padrão de paralelepípedos" (círculo amarelo) formado pela presença da capa de melanina dos queratinócitos basais. (D) JDE: interface entre o estrato basal e a derme papilar, que se caracteriza pelo brilhante "padrão anelado" (seta amarela). (E) Derme papilar composta por fibras colágenas brilhantes (seta verde) e vasos sanguíneos. Barras de escala = 50 μm. Abreviações: RCM = microscopia confocal de reflectância; DEJ = junção dermoepidérmica. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figure 10
Figura 10: Imagens confocais dos cânceres de pele mais comuns. (A) Carcinoma basocelular mostrando nódulos tumorais (seta amarela) com fissura (seta azul) e paliçada. (B) Carcinoma de células escamosas apresentando padrão atípico em favo de mel (asteriscos amarelos) e vasos em botoeira (diamante azul). (C) Melanoma mostrando aglomerados de células pagtóides, grandes e arredondadas brilhantes (setas verdes) na epiderme. FOV = (A-C) 750 μm x 750 μm. Barras de escala = 50 μm. Abreviação: FOV = campo de visão. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figure 11
Figura 11: Correlação entre dermatoscopia, MCR, OCT e histopatologia do CBC adquirido com o aparelho RCM-OCT. (A) Pápula rosa no tórax pós-radioterapia (círculo amarelo). (B) Na MMC, observam-se na JED cordas tumorais basaloides (estrelas azuis) em paliçada (seta vermelha) e fenda (seta amarela) e colágeno espessado (estrela verde), sem nódulo tumoral definitivo. (C) Imagem de OCT da mesma lesão captada com o dispositivo RCM-OCT. Um nódulo tumoral cinza distinto (estrela azul) é visto conectado à epiderme juntamente com fenda (seta amarela). Observam-se feixes de colágeno espessados (estrela verde). (D) A biópsia corada pelo H&E confirmou o diagnóstico de carcinoma basocelular superficial na coloração H&E mostrando paliçada (seta vermelha), fenda (seta amarela) e feixes de colágeno espessados (estrela verde) (aumento de 10x). Barras de escala = 500 μm. Abreviações: RCM = microscopia confocal de reflectância; OCT = tomografia de coerência óptica; CBC = carcinoma basocelular; JDE = junção dermoepidérmica; H&E = hematoxilina e eosina. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Figure 12
Figura 12: Imagens de MCR e OCT de pele normal. Essas imagens foram adquiridas da pele normal na mão de um voluntário saudável. (A) Mostra uma imagem RCM de face única no DEJ. (B) Mostra uma imagem OCT correspondente em uma visualização vertical com todas as camadas da pele. FOV = (A) 750 μm x 750 μm; (B) 1,0 mm x 2,0 mm. Barra de escala = 50 μm. Abreviações: RCM = microscopia confocal de reflectância; OCT = tomografia de coerência óptica; DEJ = junção dermoepidérmica. Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.

Vídeo 1: Vídeo RCM do tráfico de leucócitos adquirido usando um dispositivo HH-RCM. Este vídeo capturado com um dispositivo RCM mostra um vaso sanguíneo dilatado com tráfico de leucócitos. A derme circundante mostra células inflamatórias brilhantes. Abreviação: HH-RCM = microscopia confocal de reflectância portátil. Clique aqui para baixar este vídeo.

Figura suplementar S1: Adquirindo uma "pilha" usando um dispositivo WP-RCM de geração 4. Selecione o centro da lesão (diamante verde) e clique na opção de pilha (caixa laranja). Certifique-se de que a pilha começa a partir do estrato córneo (cruz azul), a primeira e mais brilhante camada da pele. Defina a profundidade zero (estrela laranja) onde a primeira camada da pilha começa. Selecionar o local apropriado da lesão (cruz branca), espaçamento entre duas camadas e profundidade da imagem (triângulo amarelo). A caixa azul acima da visualização ao vivo contém ícones correspondentes às outras funcionalidades deste sistema. Ícones (setas azuis) da esquerda para a direita: para capturar um mosaico, para capturar um cubo, para capturar uma pilha, para capturar uma única imagem enquadrada e para capturar uma gravação de vídeo. Abreviação: WP-RCM = microscopia confocal de reflectância de sonda larga. Clique aqui para baixar este arquivo.

Figura suplementar S2: Adquirindo um "mosaico" usando um dispositivo WP-RCM geração 4. (A) Usando a visão ao vivo (cruz azul), vá até a profundidade de lesão desejada. Selecionar toda a área da lesão (se menor que 8 mm) ou a porção de toda a lesão a ser capturada para aquisição de imagem (diamante verde). Selecione a opção de mosaico (caixa laranja) para iniciar a captura. (B) Um exemplo de mosaico capturado no DEJ da lesão no painel A. Abreviações: WP-RCM = microscopia confocal de reflectância de sonda larga; DEJ = junção dermoepitelial. Clique aqui para baixar este arquivo.

Figura suplementar S3: Exemplo de um relatório de avaliação diagnóstica confocal. (A) Preencha o diagnóstico (seta preta) selecionando no menu suspenso (B), os códigos CPT para faturamento (seta amarela) e as características relevantes observadas durante a sessão de imagem confocal (estrela azul). Abreviação: CPT = Terminologia Processual Atual. Clique aqui para baixar este arquivo.

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Discussion

Neste artigo, descrevemos protocolos para aquisição de imagens utilizando dispositivos in vivo de RCM e RCM-OCT. Atualmente, existem dois dispositivos RCM disponíveis comercialmente: um dispositivo de RCM (WP-RCM) de sonda larga ou montado no braço e um dispositivo RCM (HH-RCM) portátil. É crucial entender quando usar esses dispositivos em ambientes clínicos. O tipo e a localização do câncer são os principais fatores que determinam a seleção do dispositivo.

O dispositivo WP-RCM é adequado para lesões em superfícies corporais planas e suavemente onduladas, como tronco e extremidades, pois requer contato com a pele. Como a cabeça da sonda é larga, ela não pode ser fixada a áreas estreitas ou cantos do corpo. No entanto, o HH-RCM é um dispositivo mais flexível e tem uma cabeça de sonda mais estreita. Como resultado, esse dispositivo é frequentemente usado para obter imagens de lesões em áreas curvas e relativamente onduladas do corpo, incluindo nariz, pálpebras, lóbulos das orelhas e genitália, onde o WP-RCM não pode ser fixado.

Ambos os dispositivos podem adquirir imagens de quadro único, resolução celular, pilhas e vídeos e podem ser usados para obter imagens de todos os cânceres de pele. No entanto, o dispositivo WP-RCM permite a visualização de uma lesão inteira medindo até ~ 8 mm x 8 mm através da aquisição de mosaicos. Os mosaicos fornecem uma visão geral dos detalhes arquitetônicos da lesão (como simetria e circunscrição). Um aparelho de WP-RCM também é equipado com uma câmera de dermatoscópio digital para aquisição de imagens dermatoscópicas da lesão, que orientam a aquisição das imagens de MMR durante toda a sessão de imagem. Ambas as características únicas tornam o dispositivo WP-RCM preferível para a avaliação de lesões melanocíticas para diferenciar nevos de melanoma. Em contraste, o dispositivo portátil é mais adequado para lesões queratinocíticas, pois essas lesões tipicamente não requerem avaliação arquitetural, mas são mais dependentes de imagens de alta resolução com FOV pequeno (0,75 mm x 0,75 mm). No entanto, o dispositivo HH-RCM é muito útil para obtenção de imagens de grandes lesões (medindo >8 mm), para mapeamento de margens tumorais para melanoma (lentigo maligno) e CBCs e para guiar a seleção do local da biópsia.

A RCD é usada principalmente como uma ferramenta complementar à dermatoscopia na triagem de lesões cutâneas que parecem malignas e necessitam de biópsia, poupando biópsia para lesõesbenignas7,19. Outras indicações incluem a monitorização não invasiva de uma lesão suspeita, a avaliação da resposta ao tratamento tópico ou cirúrgico19,37,38, o delineamento das margens cirúrgicas de grandes lesões faciais de lentigo maligno (LM)39,40,41, a orientação de biópsias direcionadas em lesões grandes de ML e EMPD 42 e o diagnóstico de lesões inflamatórias 43,44 . Uma grande vantagem do uso da MCR é a capacidade de realizar o diagnóstico à beira do leito in vivo sem qualquer biópsia45, facilitando o manejo imediato. Além disso, diferentemente da avaliação histopatológica, em que apenas uma pequena fração do volume da lesão é analisada, a MCR permite a visualização de volumes muito maiores da lesão em tempo real45 e fornece informações sobre fenômenos dinâmicos como o tráfico de leucócitos 32,46.

O RCM tem algumas limitações. Ao contrário da dermatoscopia, a imagem por MMC requer ~15 min por lesão, o que pode interromper o fluxo de trabalho clínico, e a avaliação por imagem requer experiência patológica. Não é adequado para avaliar lesões localizadas mais profundamente na derme ou subcutâneo devido à sua profundidade limitada de imagem (até ~250 μm).

O dispositivo combinado RCM-OCT "multimodal" foi construído para superar as limitações do RCM22. Proporciona os benefícios da imagem de resolução celular com RCM e as imagens mais profundas e verticais (semelhantes à histopatologia) da OCT. Estudos iniciais têm mostrado resultados promissores para o uso da RCM-OCT no diagnóstico e manejo deCBCs 23,24,25,47 (55 pacientes). O RCM-OCT demonstrou alta acurácia (sensibilidade de 100%, especificidade de 75%) no diagnóstico de CBCs em lesões clinicamente suspeitas, não biopsiadas e determinou com precisão a profundidade da lesão para o manejo adequado. Também mostrou sensibilidade de 100% na detecção de CBC residual em lesões previamente biopsiadas25. Recentemente, Monnier e col. utilizaram esse dispositivo em cenários clínicos reais para a avaliação do CBC em lesões dermoscopicamente equivocadas (pequenas, não pigmentadas)23 (18 pacientes). Eles compararam os resultados do dispositivo combinado RCM-OCT com o dispositivo RCM-isolado na mesma lesão. O estudo mostrou melhora acentuada na especificidade de 62,5% para 100% e na sensibilidade de 90% para 100% usando o dispositivo combinado sobre o dispositivo RCM isoladamente, demonstrando a vantagem e a complementaridade desses dois dispositivos de imagem óptica. Um estudo realizado por Navarrete-Dechent e col. também comprovou a utilidade do dispositivo RCM-OCT sobre o dispositivo RCM isoladamente para a detecção de CBC residual em pacientes com "CBC complexo", o que auxiliou no manejo dos mesmos e melhorou o atendimento ao paciente24 (10 pacientes). Fora das clínicas dermatológicas, o MCR-OCT vem sendo estudado como ferramenta para a avaliação pré-cirúrgica do CBC, onde tem mostrado alta sensibilidade de 82,6% e alta especificidade de 93,8%, com alta correlação entre a profundidade da OCT e a profundidade final da histopatologia47 (35 pacientes). Assim, esse dispositivo tem sido descrito principalmente para o diagnóstico e tratamento do CBC; sua utilidade para melanoma e CEC ainda precisa ser explorada.

Bang et al., além de seu uso para avaliação do CBC, também exploraram esse dispositivo para a detecção de metástases cutâneas (MC) em pacientes com câncer de mama48 (sete pacientes). Descreveram, pela primeira vez, as características do MC no MC-OCT, que auxiliariam seu diagnóstico e manejo no futuro. Com a combinação de imagens de alta resolução e a capacidade de avaliar lesões em profundidade, eles puderam detectar MC em todas as seis lesões de imagem e diferenciar-se de uma lesão ectasiada vascular benigna. Estudos em larga escala com maior número de lesões são necessários para comprovar o potencial diagnóstico do dispositivo para MC.

Independentemente do dispositivo utilizado, as etapas a seguir devem ser cuidadosamente executadas para evitar artefatos e garantir imagens de alta qualidade. Para evitar artefatos de movimento, o paciente deve ser posicionado confortavelmente. Travesseiros extras ou apoios para os pés ou braços podem ser fornecidos para apoiar os locais de imagem. Os artefatos de movimento causados pela respiração podem ser minimizados colocando-se uma mão firme na sonda durante a aquisição de imagens. Para reduzir os artefatos causados por qualquer material externo, limpe o local da lesão com um cotonete de álcool ou água e sabão antes de fazer a imagem. Se necessário, apague os cabelos no local da lesão para evitar a formação de bolhas de ar. Todas as precauções devem ser tomadas para evitar a contaminação cruzada. A janela de plástico descartável deve ser descartada após cada uso, e a sonda de imagem deve ser cuidadosamente limpa com um lenço desinfetante após cada uso.

Os avanços em imagem não invasiva visam melhorar a acurácia diagnóstica e expandir seu uso em todo o mundo. Adições ao dispositivo HH-RCM existente têm sido exploradas, como a incorporação de uma câmera de campo largo para permitir uma dupla visão da morfologia da superfície da lesão e dos detalhes celulares mais profundos dentro dalesão49. Outras adições ao HH-RCM incluem mosaico de vídeo - uma técnica que converte vídeo em uma imagem em mosaico, expandindo assim o FOV50. Para expandir o uso dessas tecnologias, dispositivos mais baratos, menores e mais portáteis estão sendo desenvolvidos 51,52,53, incluindo uma sonda portátil menor, mais flexível e para ser usada em imagens intrabucais 54. Além disso, os pesquisadores estão explorando sondas fluorescentes direcionadas para melhorar a sensibilidade e a especificidade da detecção tumoral31. Existem vários algoritmos baseados em inteligência artificial para ajudar na captura de imagens, identificando automaticamente a melhor profundidade para capturar o DEJ55 ou removendo artefatos56. Além disso, alguns algoritmos estão sendo desenvolvidos para ajudar os clínicos a detectar automaticamente os cânceres de pele57,58. Por fim, usando imagens RCM ao vivo, remotas e in vivo 26, um técnico remoto guiado por especialistas pode capturar imagens de alta qualidade e orientar os médicos a fazer diagnósticos em tempo real.

Dispositivos concorrentes comercialmente disponíveis são o OCT confocal de campo de linha (LC-OCT)15,16 e o OCT de campo total (FF-OCT)17,18. Esses dispositivos podem gerar imagens tanto em planos verticais (como OCT) quanto em planos en-face (como RCM). As imagens de OCT adquiridas com esses dispositivos têm uma resolução lateral maior de ~1-3 μm do que as ~7 μm de imagens de OCT do dispositivo RCM-OCT22. No entanto, esse aumento na resolução veio ao custo de uma profundidade de imagem reduzida de ~300-500 μm e um FOV menor de ~1-2mm a 500 μm x 500 μm em comparação com o dispositivo RCM-OCT. Assim, eles não são ideais para fornecer qualquer detalhe arquitetônico. Seu uso tem sido descrito para a obtenção de imagens de todos os cânceres de pele. Em conclusão, tanto os dispositivos RCM quanto os RCM-OCT são valiosas ferramentas diagnósticas não invasivas e têm aplicações clínicas únicas em dermatologia. Enquanto o RCM, como um dispositivo isolado (especialmente o dispositivo WP-RCM), é excelente para a avaliação de lesões pigmentadas da pele, incluindo melanoma, o dispositivo RCM-OCT é mais valioso para o diagnóstico e tratamento do CBC. No futuro, a integração de capacidades de mosaico para transmitir grandes imagens de FOV (essenciais para a avaliação do melanoma) no dispositivo RCM-OCT existente poderia ser explorada para fornecer um dispositivo multimodal abrangente para uso clínico, que seria a "máquina-sonho" para a imagem não invasiva para todos os cânceres de pele.

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Disclosures

Ucalene Harris não tem interesse financeiro concorrente. Dr. Jain é consultor da Enspectra Health Inc., Dr. Milind Rajadhyaksha é ex-funcionário e possui participação na Caliber ID (anteriormente, Lucid Inc.), a empresa que fabrica e vende o microscópio confocal VivaScope. O VivaScope é a versão comercial de um protótipo original de laboratório que foi desenvolvido pelo Dr. Rajadhyaksha quando ele estava no Massachusetts General Hospital, Harvard Medical School.

Acknowledgments

Um agradecimento especial é dado a Kwami Ketosugbo e Emily Cowen por serem voluntários para geração de imagens. Esta pesquisa é financiada por uma bolsa do Instituto Nacional do Câncer / Institutos Nacionais de Saúde (P30-CA008748) feita para o Memorial Sloan Kettering Cancer Center.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Crystal Plus 500FG mineral oil STE Oil Company, Inc. A food grade, high viscous mineral oil used with our various devices during in vivo imaging.
RCM-OCT Physical Science Inc. - A “multi-modal” combined RCM-OCT device simultaneously images skin lesions in both horizonal and vertical modes.
Vivascope 1500 Caliber I.D. - A wide-probe RCM (WP-RCM) device that attaches to the skin to campture in vivo devices.
Vivascope 3000 Caliber I.D. - A hand-held RCM (HH-RCM) device that is moved across the skin to capture in vivo images.

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Retratação Edição 186
Combinando Microscopia Confocal de Reflectância com Tomografia de Coerência Óptica para Diagnóstico Não Invasivo de Cânceres de Pele via Aquisição de Imagem
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Harris, U., Rajadhyaksha, M., Jain,… More

Harris, U., Rajadhyaksha, M., Jain, M. Combining Reflectance Confocal Microscopy with Optical Coherence Tomography for Noninvasive Diagnosis of Skin Cancers via Image Acquisition. J. Vis. Exp. (186), e63789, doi:10.3791/63789 (2022).

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