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Cancer Research

Combinaison de la microscopie confocale à réflectance avec la tomographie par cohérence optique pour le diagnostic non invasif des cancers de la peau par acquisition d’images

Published: August 18, 2022 doi: 10.3791/63789
Automatic Translation
1, 1, 1
1Dermatology Service, Department of Medicine, Memorial Sloan Kettering Cancer Center

Summary

Ici, nous décrivons les protocoles d’acquisition d’images de bonne qualité à l’aide de nouveaux dispositifs d’imagerie non invasifs de la microscopie confocale à réflectance (MCR) et de la MCR combinée et de la tomographie par cohérence optique (OCT). Nous familiarisons également les cliniciens avec leurs applications cliniques afin qu’ils puissent intégrer les techniques dans les flux de travail cliniques réguliers afin d’améliorer les soins aux patients.

Abstract

Le cancer de la peau est l’un des cancers les plus courants dans le monde. Le diagnostic repose sur l’inspection visuelle et la dermoscopie suivies d’une biopsie pour la confirmation histopathologique. Bien que la sensibilité de la dermoscopie soit élevée, la spécificité plus faible fait que 70% à 80% des biopsies sont diagnostiquées comme des lésions bénignes en histopathologie (faux positifs à la dermoscopie).

La microscopie confocale à réflectance (MCR) et la tomographie par cohérence optique (TCM) peuvent guider de manière non invasive le diagnostic des cancers de la peau. RCM visualise la morphologie cellulaire dans les couches en-face . Il a doublé la spécificité diagnostique du mélanome et des cancers de la peau kératinocytaires pigmentés par rapport à la dermoscopie, réduisant de moitié le nombre de biopsies de lésions bénignes. RCM a acquis des codes de facturation aux États-Unis et est maintenant intégrée dans les cliniques.

Cependant, des limitations telles que la faible profondeur (~ 200 μm) de l’imagerie, le faible contraste pour les lésions cutanées non pigmentées et l’imagerie dans les couches faciales entraînent une spécificité relativement plus faible pour la détection du carcinome basocellulaire non pigmenté (CBC) – CBC superficiels contigus à la couche basocellulaire et aux CBC infiltrants plus profonds. En revanche, l’OCT manque de résolution cellulaire, mais les images des tissus dans des plans verticaux jusqu’à une profondeur de ~1 mm, ce qui permet la détection de sous-types superficiels et profonds de CBC. Ainsi, les deux techniques sont essentiellement complémentaires.

Un dispositif combiné RCM-OCT « multimodal » permet d’imager simultanément les lésions cutanées en mode visage et vertical. Il est utile pour le diagnostic et la prise en charge des CBC (traitement non chirurgical des CBC superficiels vs traitement chirurgical des lésions plus profondes). Une amélioration marquée de la spécificité est obtenue pour la détection de petits CBC non pigmentés par rapport à la MCR seule. Les dispositifs RCM et RCM-OCT apportent un changement de paradigme majeur dans le diagnostic et la prise en charge des cancers de la peau; Cependant, leur utilisation est actuellement limitée aux centres universitaires de soins tertiaires et à certaines cliniques privées. Cet article familiarise les cliniciens avec ces dispositifs et leurs applications, en abordant les obstacles translationnels dans le flux de travail clinique de routine.

Introduction

Traditionnellement, le diagnostic du cancer de la peau repose sur une inspection visuelle de la lésion suivie d’un examen plus approfondi des lésions suspectes à l’aide d’une loupe appelée dermatoscope. Un dermatoscope fournit des informations souterraines qui augmentent la sensibilité et la spécificité par rapport à l’inspection visuelle pour le diagnostic des cancers de la peau 1,2. Cependant, la dermoscopie manque de détails cellulaires, conduisant souvent à une biopsie pour la confirmation histopathologique. La spécificité faible et variable (67% à 97%) de la dermoscopie3 se traduit par des faux positifs et des biopsies qui s’avèrent montrer des lésions bénignes sur la pathologie. Une biopsie n’est pas seulement une procédure invasive qui provoque des saignements et des douleurs4, mais elle est également hautement indésirable sur les régions cosmétiquement sensibles telles que le visage en raison de cicatrices.

Afin d’améliorer les soins aux patients en surmontant les limites existantes, de nombreux dispositifs d’imagerie in vivo non invasifs sont à l’étude 5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17,18 . Les dispositifs RCM et OCT sont les deux principaux dispositifs optiques non invasifs utilisés pour diagnostiquer les lésions cutanées, en particulier les cancers de la peau. RCM a acquis des codes de facturation CPT (Current Procedural Terminology) aux États-Unis et est de plus en plus utilisé dans les centres universitaires de soins tertiaires et certaines cliniques privées 7,8,19. RCM images des lésions à une résolution quasi histologique (cellulaire). Cependant, les images sont dans le plan du visage (visualisation d’une couche de peau à la fois), et la profondeur de l’imagerie est limitée à ~200 μm, suffisante pour atteindre le derme superficiel (papillaire) seulement. L’imagerie RCM repose sur le contraste de réflectance de diverses structures de la peau. La mélanine confère le contraste le plus élevé, rendant les lésions pigmentées lumineuses et plus faciles à diagnostiquer. Ainsi, la MCR associée à la dermoscopie a significativement amélioré le diagnostic (sensibilité de 90% et spécificité de 82%) par rapport à la dermoscopie des lésions pigmentées, dont le mélanome20. Cependant, en raison d’un manque de contraste de mélanine dans les lésions roses, en particulier pour les CBC, la MCR a une spécificité plus faible (37,5%-75,5%)21. Un dispositif OCT conventionnel, un autre dispositif non invasif couramment utilisé, image les lésions jusqu’à 1 mm de profondeur dans la peau et les visualise dans un plan vertical (similaire à l’histopathologie)9. Cependant, l’OCT manque de résolution cellulaire. L’OCT est principalement utilisée pour diagnostiquer les lésions kératinocytaires, en particulier les CBC, mais a encore une spécificité plus faible9.

Ainsi, pour pallier les limitations existantes de ces dispositifs, un dispositif multimodal MCR-OCT a été construit22. Ce dispositif intègre la MCR et la TCO au sein d’une seule sonde d’imagerie portative, ce qui permet l’acquisition simultanée d’images RCM en face co-enregistrées et d’images OCT verticales de la lésion. OCT fournit des détails architecturaux des lésions et peut imager plus profondément (jusqu’à une profondeur de ~ 1 mm) dans la peau. Il a également un champ de vision (FOV) plus grand de ~2 mm22 par rapport à l’appareil RCM portable (~ 0,75 mm x 0,75 mm). Les images RCM sont utilisées pour fournir des détails cellulaires de la lésion identifiée sur OCT. Ce prototype n’est pas encore commercialisé et est utilisé comme dispositif expérimental dans les cliniques23,24,25.

Malgré leur succès dans l’amélioration du diagnostic et de la prise en charge des cancers de la peau (comme le soutient la littérature), ces dispositifs ne sont pas encore largement utilisés dans les cliniques. Cela est principalement dû au manque d’experts capables de lire ces images, mais aussi au manque de techniciens formés capables d’acquérir efficacement des images de qualité diagnostique (dans un délai clinique) au chevetdu patient 8. Dans ce manuscrit, l’objectif est de faciliter la sensibilisation et l’adoption éventuelle de ces dispositifs dans les cliniques. Pour atteindre cet objectif, nous familiarisons les dermatologues, les dermatopathologistes et les chirurgiens de Mohs avec des images de la peau normale et des cancers de la peau acquis avec les dispositifs RCM et RCM-OCT. Nous détaillerons également l’utilité de chaque appareil pour le diagnostic des cancers de la peau. Plus important encore, l’objectif de ce manuscrit est de fournir des conseils étape par étape pour l’acquisition d’images à l’aide de ces dispositifs, ce qui garantira des images de bonne qualité pour une utilisation clinique.

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Protocol

Tous les protocoles décrits ci-dessous suivent les lignes directrices du comité d’éthique de la recherche sur des sujets humains de l’établissement.

1. Dispositif RCM et protocole d’imagerie

REMARQUE : Il existe deux dispositifs RCM in vivo disponibles dans le commerce : le RCM À SONDE LARGE (WP-RCM) et le RCM portable (HH-RCM). Le WP-RCM est intégré à un dermatoscope numérique. Ces deux appareils sont disponibles séparément ou en tant qu’unité combinée. Vous trouverez ci-dessous les protocoles d’acquisition d’images utilisant la dernière génération (génération 4) des dispositifs WP-RCM et HH-RCM ainsi que leurs indications cliniques.

  1. Sélection des lésions et indications cliniques
    1. Rechercher les types de lésions suivants : dermoscopiquement équivoque rose (CBC, carcinome épidermoïde [SCC], kératose actinique [AK], autres lésions bénignes) ou pigmentée (naevus et mélanome, lésions kératinocytaires pigmentées); un naevus qui a récemment changé à l’examen clinique ou à la dermoscopie; lésions inflammatoires pour déterminer les schémas inflammatoires.
    2. Effectuer la cartographie des marges du lentigo malin (LM) pour déterminer l’étendue de la lésion et la cartographie et la sélection des sites de biopsie pour la maladie avec extension subclinique telle que la maladie de Paget extramammaire (MPEM) et LM.
    3. Effectuer une surveillance non invasive des traitements non chirurgicaux tels que les médicaments topiques (imiquimod), la radiothérapie, la thérapie photodynamique et l’ablation au laser.
  2. Pour la sélection du dispositif, utilisez le dispositif WP-RCM pour les lésions situées sur des surfaces relativement planes de la peau (le tronc et les extrémités) et le dispositif HH-RCM pour les lésions sur les surfaces courbes (nez, lobes d’oreilles, paupières et organes génitaux).
    REMARQUE: Le choix de l’appareil d’imagerie dépendra principalement de l’emplacement de la lésion.
  3. Pour l’imagerie, placez le patient sur une chaise entièrement inclinable ou une table d’examen plate avec des oreillers ou un accoudoir pour soutenir et obtenir une surface d’imagerie plane.
    REMARQUE: Les appareils WP-RCM de l’ancienne génération (génération 3) prenaient ~ 30 minutes par lésion. L’imagerie d’une seule lésion peut nécessiter ~15 minutes avec l’appareil WP-RCM de nouvelle génération (génération 4) actuellement utilisé dans les cliniques. Malgré l’amélioration du temps d’acquisition, le positionnement confortable du patient assurera un minimum d’artefacts de mouvement et facilitera l’acquisition d’images de qualité supérieure. Les étapes suivantes peuvent aider à positionner correctement le patient :
  4. Pour vous préparer à l’imagerie, nettoyez la lésion et la peau environnante avec une lingette imbibée d’alcool pour éliminer toute saleté, lotion ou maquillage. Rasez les surfaces poilues de la peau avant de fixer la fenêtre de tissu pour éviter les bulles d’air qui peuvent entraver la visualisation des microstructures tissulaires.
    REMARQUE: Pour enlever les cosmétiques lourds ou les écrans solaires, nettoyez le site avec un savon doux et de l’eau avant de nettoyer avec de l’alcool.
  5. Acquisition d’images à l’aide du dispositif WP-RCM (Graphique 1, Graphique 2, Figure supplémentaire S1, Figure supplémentaire S2et Figure supplémentaire S3)
    REMARQUE: Les appareils WP-RCM sont capables de capturer des piles, des mosaïques, des vidéos mono-images en direct et des images à cadre unique.
    1. Pour fixer un capuchon de fenêtre en plastique jetable à la lésion (Figure 1), positionnez la sonde perpendiculairement à la lésion pour obtenir les meilleures images. Reportez-vous à la figure 1A-F pour un exemple de pièce jointe. Ajoutez une goutte d’huile minérale au centre de la fenêtre en plastique, en l’étalant soigneusement sur toute la largeur de la fenêtre (Figure 1A). Retirez le support en papier du côté adhésif de la fenêtre en plastique. Étirez doucement la peau pour éviter les rides et fixez la fenêtre.
      REMARQUE: Utilisez une huile minérale de qualité alimentaire qui est sûre et a une viscosité élevée. Assurez-vous que la lésion est centrée et couverte dans son intégralité. Pour les lésions de plus de 8 mm x 8 mm, soit imager les zones préoccupantes en fonction de la dermoscopie, soit effectuer des séances d’imagerie distinctes pour couvrir l’ensemble de la lésion.
    2. Acquisition d’images dermostiques (Figure 1C,D)
      NOTE: Une image de dermoscopie est acquise pour servir de guide pour naviguer dans la lésion. Les étapes suivantes doivent être utilisées pour assurer un enregistrement parfait entre l’image dermoscopie et l’image confocale.
      1. Passez la sonde WP-RCM au-dessus du capuchon de fenêtre en plastique et obtenez approximativement le meilleur angle d’insertion pour la sonde (Figure 1C). Repérez la petite flèche blanche située sur le côté de la sonde (Figure 1C) et alignez-la avec la flèche située sur le côté de la caméra de dermoscopie (Figure 1C).
      2. Insérez l’appareil photo de dermoscopie dans le capuchon de fenêtre en plastique (Figure 1D). Appuyez sur la gâchette de l’appareil photo pour acquérir une image. Retirez le dermatoscope. Avant de commencer la séance d’imagerie, assurez-vous que l’image du dermatoscope couvre toute la surface de la lésion.
    3. Pour fixer la sonde RCM au capuchon jetable en plastique (Figure 1E,F), placez une quantité de gel à ultrasons de la taille d’un pois à l’intérieur du capuchon de fenêtre en plastique jetable (Figure 1E). Insérez la sonde dans le capuchon jusqu’à ce qu’un clic aigu se fasse entendre (Figure 1F).
      REMARQUE: Pour obtenir les meilleures images, insérez la sonde perpendiculaire (à un angle de 90°) à la fenêtre en plastique. La hauteur de la chaise d’examen peut être augmentée pour obtenir une surface plus plate, réduire les artefacts de mouvement, expulser les bulles d’air (Figure 3 et Figure 4) et assurer une fixation sûre à la peau.
    4. Acquisition d’images RCM (Figure 2, Figure supplémentaire S1 et Figure supplémentaire S2)
      1. Utilisez l’image de dermoscopie (étape 5.2.) pour guider l’acquisition de l’image RCM (figure supplémentaire S1). Sélectionnez le centre de la lésion et identifiez la couche supérieure (la plus brillante) de la peau – la couche anucléée de la couche cornée (figure supplémentaire S1).
      2. Réglez la profondeur d’imagerie à zéro à ce niveau (figure supplémentaire S1).
        REMARQUE: Cette profondeur sert de point de référence pour déterminer la profondeur z réelle des couches suivantes dans la lésion.
      3. Acquérir une pile au centre de la lésion (Figure 2 et Figure supplémentaire S1) en appuyant sur l’icône de pile . Sélectionnez un site anatomique dans le menu déroulant : visage ou corps. Définissez une taille de pas de 4,5 μm et une profondeur de 250 μm.
        NOTE: Commencez les empilements à partir de la couche cornée et terminez aux couches visibles les plus profondes du derme. La figure supplémentaire S1 montre un exemple de la façon d’acquérir une pile, tandis que la figure 2 donne un exemple d’une pile.
      4. Acquérir une mosaïque : prendre la première mosaïque à la jonction dermo-épidermique (DEJ) (Figure supplémentaire S2). Identifiez la couche DEJ dans la pile acquise, puis utilisez la souris pour sélectionner un carré de 8 mm x 8 mm pour couvrir toute la lésion. Appuyez sur l’icône de mosaïque pour terminer l’opération (Figure supplémentaire S2). Acquérir au moins 5 mosaïques à différentes profondeurs : stratum corneum, stratum spinosum, couche suprabasale, DEJ, et derme papillaire superficiel.
      5. Ouvrez la mosaïque DEJ pour guider l’acquisition des mosaïques suivantes. Cliquez sur n’importe quelle structure de la mosaïque DEJ pour afficher cette zone sur l’image en direct. Faites défiler vers le bas pour acquérir des mosaïques au niveau du derme puis vers le haut (à partir du DEJ) pour prendre des mosaïques dans l’épiderme.
      6. Faites évaluer les mosaïques acquises par le lecteur expert RCM présent au chevet du patient pour identifier la région d’intérêt et prendre des piles. En l’absence d’un expert au chevet du patient, prélever 5 piles : une dans chaque quadrant et une au centre de la lésion avec un motif homogène à la dermoscopie (étapes 1.5.2.). Pour les lésions hétérogènes, acquérir des piles supplémentaires pour couvrir toutes les caractéristiques de la dermoscopie.
        REMARQUE : Une « pile » (Figure 2) est une collection séquentielle d’images haute résolution, mono-image, à petit champ de vision (0,5 mm x 0,5 mm) acquises en profondeur à partir de la couche supérieure de l’épiderme jusqu’au derme superficiel (~200 μm). Une « mosaïque » (figure supplémentaire S2) est un grand champ de vision d’images obtenu en assemblant des images individuelles de 500 μm x 500 μm en « X-Y » (plan horizontal en face ).
    5. Réalisation d’une séance d’imagerie
      1. Cliquez sur Done Imaging.
      2. Détachez le microscope de la fenêtre en plastique. Retirez la fenêtre en plastique en tenant doucement la peau tendue du patient et jetez-la. Essuyez l’huile sur la peau avec un tampon imbibé d’alcool.
      3. Détachez le cône de protection entourant la lentille du microscope. Nettoyez la pointe de la lentille de l’objectif avec un tampon imbibé d’alcool pour retirer le gel à ultrasons. Sécher la lentille de l’objectif avec une serviette en papier. Refixez le cône en plastique à la sonde du microscope.
        REMARQUE: Les images peuvent être lues et un rapport peut être généré et signé au chevet du patient par un médecin qualifié. En l’absence d’un lecteur expert, un expert à distance peut être consulté soit en transférant les images via le cloud, soit via une session téléconfocale en direct26.
    6. Génération d’un rapport d’évaluation diagnostique confocale (figure supplémentaire S3)
      1. Cliquez sur Nouvelle évaluation. Entrez le diagnostic à partir des options présélectionnées dans le menu déroulant.
      2. Si une autre séance d’imagerie est nécessaire, sélectionnez les images inadéquates et doivent être recapturées. Si un diagnostic descriptif est nécessaire, sélectionnez autre et décrivez-le dans la zone de texte libre à la fin du formulaire. Entrez le code CPT pour la facturation7 (figure supplémentaire S3A). Sélectionnez les caractéristiques applicables observées lors de l’imagerie dans la liste de contrôle du rapport (figure supplémentaire S3B). Sélectionnez la gestion applicable dans la liste de contrôle.
        REMARQUE: Aucun code de facturation n’est applicable pour l’imagerie HH-RCM.
      3. Cliquez sur Terminer et signer. Générez le rapport au format PDF et imprimez-le. Faites signer le rapport par un médecin et ajoutez-le au dossier du patient pour la facturation.
  6. Acquisition d’images à l’aide du dispositif HH-RCM (Figure 5)
    REMARQUE: Les appareils HH-RCM sont capables de capturer des piles, des vidéos mono-images en direct et des images à cadre unique.
    1. Encerclez la lésion identifiée par le médecin avec un anneau en papier. Suivez les étapes détaillées à la section 3. pour positionner le patient et nettoyer le site de la lésion.
      REMARQUE : Sélectionnez la taille de l’anneau de papier (5-15 mm) en fonction de la taille de la lésion pour définir les limites de la lésion et vous assurer que l’imagerie est effectuée dans la lésion. Si un anneau en papier n’est pas disponible, utilisez du ruban adhésif pour définir la lésion.
    2. Retirez le capuchon en plastique recouvrant la lentille du microscope. Appliquez une quantité de gel à ultrasons de la taille d’un pois sur la lentille de l’objectif du HH-RCM et recouvrez-la avec le capuchon en plastique (figure supplémentaire S3A). Ajoutez une goutte généreuse d’huile minérale sur le côté du capuchon en plastique qui touchera la peau.
      REMARQUE: Augmentez la quantité d’huile pour les peaux très sèches, si nécessaire.
    3. Appuyez la sonde sur le site de la lésion sur la peau avec une pression ferme. Utilisez les commandes de profondeur z de l’appareil HH-RCM pour monter et descendre à différentes profondeurs dans la lésion (figure supplémentaire S3B). Acquérir plusieurs images et piles à image unique dans les régions d’intérêt. Prélever les piles comme décrit à l’étape 1.5.4.3.
    4. Pour les lésions de grande taille où le dispositif WP-RCM ne peut pas être fixé, prenez des vidéos continues à différentes couches en déplaçant la sonde HH-RCM sur toute la surface de la lésion. Cliquez sur le symbole de capture vidéo pour le faire. Enregistrer le mouvement des cellules sanguines dans les vaisseaux, si nécessaire.
      REMARQUE: Ces vidéos peuvent être assemblées ultérieurement à l’aide d’un logiciel pour fournir de grandes images de champ de vision similaires aux mosaïques.
    5. Appuyez sur Terminé l’imagerie une fois la session d’imagerie terminée. Nettoyez la lésion avec un tampon imbibé d’alcool pour enlever l’huile. Retirez le gel à ultrasons de la lentille de l’objectif de la sonde en la nettoyant avec une lingette imbibée d’alcool et en refixant le capuchon en plastique.
      REMARQUE: Contrairement à l’appareil WP-RCM, qui peut être utilisé par un technicien, le HH-RCM doit être utilisé par un lecteur RCM qui peut interpréter les images en temps réel pour naviguer dans la lésion et arriver à un diagnostic correct.

2. Dispositif RCM-OCT combiné et protocole d’imagerie

Remarque : Il n’existe qu’un seul prototype du périphérique RCM-OCT. Cet appareil dispose d’une sonde portative et peut être utilisé sur toutes les surfaces du corps, similaire au dispositif HH-RCM. Il acquiert des piles RCM (similaires au dispositif RCM) et des rasters OCT (une vidéo d’images séquentiellesen coupe transversale 22). Les images RCM et OPO sont en niveaux de gris. Les images RCM ont un champ de vision de ~200 μm x 200 μm, tandis que l’image OCT a un champ de vision de 2 mm (en largeur) x 1 mm (en profondeur). Vous trouverez ci-dessous le protocole d’acquisition d’images utilisant le dispositif RCM-OCT, ainsi que leurs indications cliniques. La figure 6 montre une image du périphérique RCM-OCT, tandis que la figure 7 montre le système logiciel du périphérique RCM-OCT.

  1. Sélection des lésions
    1. Recherchez une lésion rose ou pigmentée dermoscopiquement équivoque pour exclure le CBC.
    2. Évaluer la profondeur du CBC pour la prise en charge et évaluer le CBC résiduel après le traitement.
  2. Positionnement du patient pour l’imagerie : L’imagerie d’une seule lésion peut nécessiter jusqu’à 20 minutes avec l’appareil RCM-OCT. L’appareil est également une sonde portative similaire au dispositif HH-RCM et, par conséquent, peut être déplacé librement sur la lésion. Pour plus de détails sur le positionnement du patient, reportez-vous à la rubrique 1.4. au-dessus.
  3. Préparation du site pour l’imagerie: Lors de l’utilisation de cette sonde, assurez-vous que la limite de la lésion est exempte de poils excessifs et d’impuretés topiques et est clairement définie. Reportez-vous à l’étape 1.4.1. ci-dessus pour plus de détails.
  4. Acquisition d’images à l’aide du dispositif RCM-OCT (Figure 6 et Figure 7)
    1. Préparer la sonde de la même manière que celle utilisée pour le HH-RCM (étapes 1.6.1-1.6.2.)
    2. Acquérir des images en mode d’imagerie linéaire et en mode raster .
      1. Cliquez sur Paramètres d’imagerie (Figure 7A). Sélectionnez le mode d’imagerie linéaire pour acquérir une image RCM (résolution cellulaire) (Figure 7B). Réglez la taille des pas sur 5 μm et le nombre de pas sur 40 (Figure 7A).
      2. Cliquez sur Saisir. Acquérir des piles en suivant l’étape 1.5.4.3. Une fois terminé, cliquez sur le bouton Congeler .
      3. Cliquez sur Paramètres d’imagerie. Sélectionnez le mode raster pour acquérir une vidéo OCT corrélative pour l’architecture de la lésion (Figure 7B). Passez à l’onglet technicien (Figure 7C). Une fois terminé, cliquez sur le bouton Grab (Figure 7A) et appuyez immédiatement sur le bouton Enregistrer .
      4. Acquérir plusieurs piles et vidéos en fonction de l’intérêt du médecin.
      5. Nettoyez la lésion et la machine comme décrit à l’étape 1.6.5.

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Representative Results

Microscopie confocale à réflectance (MCR)
Interprétation d’images sur RCM :
Les images de la MCR sont interprétées d’une manière qui imite l’évaluation des lames d’histopathologie. Les mosaïques sont d’abord évaluées pour obtenir les détails architecturaux globaux et identifier les domaines de préoccupation, semblable à l’évaluation des sections histologiques sur le grossissement de la numérisation (2x). Ceci est suivi par un zoom avant sur la mosaïque pour l’évaluation des détails cellulaires, similaire à l’évaluation des diapositives à fort grossissement (20x). La figure 8 montre un tel schéma de l’analyse d’image.

Qualité d’image :
Des images de haute qualité sans artefacts significatifs, acquises à des profondeurs pertinentes dans la peau, sont essentielles pour un diagnostic correct. La figure 4A montre une telle image. La principale raison pour laquelle les images sont ininterprétables est liée aux artefacts ou au manque d’expérience dans l’acquisition d’images. La figure 3 et la figure 4B montrent des images avec des artefacts tels que des bulles d’air, des débris de surface et des artefacts de mouvement, qui entravent l’évaluation diagnostique. En plus de maîtriser l’aspect technique de l’acquisition d’images, l’opérateur RCM doit connaître la morphologie des différentes couches de peau pour permettre l’acquisition d’images à des profondeurs pertinentes.

Apparition de couches cutanées normales sur la MCR :
Des images de qualité « quasi-histologique » en face (plan horizontal) sont acquises avec le dispositif RCM à différentes profondeurs, de la couche supérieure de l’épiderme jusqu’au derme papillaire superficiel de la peau. La MCR a sa propre terminologie qui permet d’identifier les différentes couches de la peau 5,27. La figure 2 montre cinq images mono-image acquises à différentes profondeurs à partir d’une pile.

Apparition de diverses cellules sur la MCR :
Les images sur RCM apparaissent en échelle de gris, allant de structures très lumineuses à des structures sombres en raison des tailles variables et des indices de réfraction des différentes cellules de la peau. La mélanine, la kératine et le collagène sont les sources de la plus grande réflectance dans la peau28,29. Ainsi, les cellules contenant de la mélanine telles que les mélanocytes (banals et malins), les kératinocytes mélanisés et les mélanophages apparaissent brillantes. De même, les cellules riches en kératine telles que la couche cornée et les kystes kératiniques apparaissent brillantes. Les granules kératohyalines présents dans les kératinocytes de la strate granulosum apparaissent également brillants. Une autre source possible de réflectivité élevée est les granules de Birkbeck dans les cellules de Langerhans30 et les cellules inflammatoires28,29. En revanche, le contenu intranucléaire manque de réflectance et apparaît sombre sur la confocale31. Cela est également vrai pour les sécrétions de mucine. Les vaisseaux sanguins se trouvent dans le derme papillaire. Ils apparaissent comme des structures hyporéfléchissantes horizontales ou verticales. Les leucocytes apparaissent comme de petites cellules brillantes, hyperréfléchissantes, rondes et minuscules dans ces vaisseaux sanguins hyporéfléchissants32. Le trafic de leucocytes est important lors de l’imagerie en direct. La figure 9 montre l’apparence de couches cutanées normales sur la MCR. La vidéo 1 montre un exemple de trafic de leucocytes sur la MCR.

Caractéristiques spécifiques à la tumeur sur la MCR:
Les caractéristiques spécifiques de la tumeur sont bien établies et aident à différencier les lésions bénignes des lésions malignes. Par exemple, les nodules tumoraux avec palissade périphérique et espace « fendu » sont des caractéristiques spécifiques de BCC33. De même, des cellules nucléées pagetoïdes dans l’épiderme, des cellules atypiques au DEJ et un profil épidermique désordonné suggèrent un diagnostic de mélanome34. Les motifs en nid d’abeille atypiques et désorganisés sont des caractéristiques clés pour diagnostiquer le CSC33 sur la MCR. La figure 10 montre un exemple de CBC, de mélanome et de CSC tels qu’ils apparaissent sur les images de la MCR.

Dispositif combiné RCM-OCT
Interprétation d’images sur RCM-PTOM :
Pour l’interprétation des images RCM-OCT, les piles et les rasters sont évalués. Les piles donnent des informations au niveau cellulaire et à différentes profondeurs de la lésion, tandis que le raster fournit une vue verticale de la lésion et fournit des informations sur l’architecture globale de la lésion. Cette vue verticale est cruciale pour la détection des CBC, en particulier des CBC superficiels, qui, parfois, apparaissent comme des ombres sombres sur la MCR et peuvent être manquées25. Dans la vue verticale des images OCT, la continuité du nodule tumoral BCC avec l’épiderme sus-jacent et la séparation du derme par une zone sombre de fente sont clairement perceptibles. La figure 11 montre un exemple de dermoscopie, de MCR, d’OCT et de corrélation histologique du CBC.

Apparition de couches cutanées normales sur la MCR-OCT :
Les couches d’habillage ressemblent aux images RCM acquises avec le dispositif HH-RCM. Plus de détails sont fournis dans les sections « apparence de diverses couches de peau sur confocale » et « apparence de diverses cellules sur confocales » et la figure 9.

Comme RCM, les images raster OCT sont en niveaux de gris. Cependant, les rasters OCT présentent une vue verticale similaire aux lames histologiques traditionnelles, mais manquent de résolution cellulaire. Les images OCT ont une apparence similaire aux images de périphérique OCT conventionnelles disponibles dans le commerce. La couche cornée apparaît comme une ligne mince et brillante (hyperréfléchissante), avec l’épiderme sous-jacent apparaissant grisâtre (hyporéfléchissant) en couleur. Le derme papillaire apparaît plus brillant que l’épiderme, et la partie la plus profonde du derme réticulaire apparaît la plus sombre (non réfléchissante) en raison de la perte de signal35. Le DEJ peut être identifié comme une zone de transition entre l’épiderme grisâtre et le derme papillaire brillant. La figure 12 montre des images de MCR et de TCO acquises à partir de la peau normale de la main d’un volontaire en bonne santé.

Bien que la résolution cellulaire ne soit pas possible, de nombreuses structures sont visibles sur l’OCT. Les vaisseaux sanguins peuvent être facilement vus dans le derme papillaire comme des structures tubulaires réfléchissantes (sans signal), horizontales ou verticales. Les follicules pileux sont généralement des structures hyporéfléchissantes, rondes ou tubulaires dans le derme. Leur infundibulum (la partie supérieure du follicule pileux) est vu émergeant du derme et dépassant de l’épiderme à un angle lors d’une séance d’imagerie raster en direct. Ils projettent souvent une ombre de signal à la surface de l’épiderme36. Parfois, on peut voir des tiges capillaires émerger des follicules pileux, ce qui facilite leur identification. La figure 11 donne une vue de ces structures.

Apparition de BCC sur RCM-OCT :
L’apparition du CBC dans la MCR est abordée dans la section « Caractéristiques spécifiques à la tumeur » de la MCR. Dans l’OCT, les nodules tumoraux BCC peuvent être facilement détectés comme des nodules grisâtres, ronds et hyporéfléchissants observés entourés d’une zone réfléchissante et sombre de « fente ». Ce nodule peut être vu attaché avec la bande grisâtre sus-jacente de l’épiderme dans le CBC superficiel. Les nodules tumoraux BCC sont souvent entourés de faisceaux de collagène hyperréfléchissants, blancs et épaissis23. D’autres sous-types, tels que les CBC infiltrants ou morphéaformes, sont difficiles à diagnostiquer avec l’OCT. La figure 11 fournit une vue du CBC capturé par le raster OCT.

Figure 1
Figure 1 : Fixation WP-RCM : dispositif WP-RCM de génération 4. (A) Placez une goutte d’huile minérale au centre de la fenêtre en plastique. (B) Centrer la fenêtre en plastique sur la lésion. (C) Faites correspondre la flèche sur la tête du microscope (cercle pointillé vert) avec la flèche (cercle pointillé jaune) sur le dermatoscope. (D) Insérez le dermatoscope dans la fenêtre en plastique et cliquez pour prendre une image dermatoscopique avec une orientation correcte. (E) Retirez le dermatoscope et ajoutez du gel à ultrasons à l’intérieur de la fenêtre en plastique. (F) Fixez complètement la tête du microscope à la fenêtre en plastique à un angle de 90° par rapport à la lésion. Abréviation : WP-RCM = microscopie confocale à réflectance à large sonde. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

Figure 2
Figure 2 : Exemple de pile. Une pile montrant une collection d’images à image unique acquises à des profondeurs z consécutives à partir d’une peau normale. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

Figure 3
Figure 3 : Image de faible qualité. (A) Une image de mauvaise qualité au niveau épidermique montrant quelques bulles d’air (flèches jaunes), un matériau externe (cercle jaune), très probablement une fibre de papier, et les franges du capuchon en plastique (boîte rouge), indiquant une mauvaise fixation du microscope à la peau. (B,C) Zones agrandies à partir du panneau A. Barres d’échelle = 50 μm. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

Figure 4
Figure 4 : Comparaison des images confocales de haute qualité et de faible qualité. (A) Une mosaïque de haute qualité (d’après la figure 6) au niveau de l’épiderme sans aucun artefact. (B) Une mosaïque de mauvaise qualité au niveau épidermique montre plusieurs grosses bulles (flèches bleues), qui peuvent avoir un impact sur l’évaluation. Barres d’échelle = 50 μm. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

Figure 5
Figure 5 : Fixation HH-RCM à l’aide d’un dispositif HH-RCM de génération 4. (A) Retirez le capuchon en plastique et ajoutez du gel à ultrasons sur le dessus de la lentille. (B) Refixez le capuchon en plastique (flèche verte) à l’appareil et placez-le sur la lésion pour l’imagerie. Abréviation : HH-RCM = microscopie confocale à réflectance portative. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

Figure 6
Figure 6 : Périphérique RCM-OCT. (A) La sonde portative (flèche jaune) du dispositif combiné RCM-OCT. (B) Le dispositif RCM-OCT avec une fenêtre d’imagerie en direct affichant simultanément une image OCT (flèche noire) et une image RCM (flèche verte). Abréviations : MCR = microscopie confocale à réflectance; OCT = tomographie par cohérence optique. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

Figure 7
Figure 7 : Plateforme logicielle RCM-OCT. Instantanés de fenêtres d’imagerie en direct montrant simultanément (A) une image OCT (losange bleu) et une image RCM avec une résolution cellulaire (étoile jaune). La taille des pas, le nombre de pas et la profondeur z sont tous contrôlés par les systèmes d’échelle mobile (boîte noire; flèches noires). B) Basculement entre les modes « image linéaire » et « raster » (flèches jaunes); (C) le bouton utilisé pour enregistrer les images raster (cercle noir). Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

Figure 8
Figure 8 : Schéma d’analyse d’images au niveau de l’épiderme. (A) L’image est d’abord analysée au niveau de la mosaïque (8 mm x 8 mm), ce qui correspond à un grossissement d’environ 4x en histologie. (B) Les zones d’intérêt peuvent ensuite être évaluées au niveau cellulaire en zoomant sur la fenêtre d’imagerie en direct pendant l’acquisition de l’image. Ce panneau montre une vue agrandie en sous-mosaïque à partir de la zone encadrée orange du panneau A, ce qui correspond à une vue d’agrandissement d’environ 20x sur l’histologie. Barre d’échelle = (A) 50 μm. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

Figure 9
Figure 9 : Apparition de couches cutanées normales sur la MCR. (A) Stratum corneum: la couche la plus brillante et la première de la peau composée de kératinocytes anucléés. (B) Stratum spinosum: composé de cellules nucléées serrées (les noyaux sont sombres) avec un cytoplasme brillant créant un « motif en nid d’abeille » typique. (C) Stratum basale: identifié par le « motif pavé » caractéristique (cercle jaune) formé par la présence de la coiffe mélanique des kératinocytes basaux. (D) DEJ : interface entre la strate basale et le derme papillaire, qui se caractérise par le brillant « motif annelé » (flèche jaune). (E) Derme papillaire composé de fibres de collagène brillantes (flèche verte) et de vaisseaux sanguins. Barres d’échelle = 50 μm. Abréviations : MCR = microscopie confocale à réflectance; DEJ = jonction dermo-épidermique. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

Figure 10
Figure 10 : Images confocales des cancers de la peau les plus courants. (A) Carcinome basocellulaire présentant des nodules tumoraux (flèche jaune) avec fente (flèche bleue) et palissade. (B) Carcinome épidermoïde présentant un motif atypique en nid d’abeilles (astérisques jaunes) et des vaisseaux à boutonnières (losange bleu). (C) Mélanome montrant des amas de cellules paguétoïdes brillantes, grandes et rondes (flèches vertes) dans l’épiderme. FOV = (A-C) 750 μm x 750 μm. Barres d’échelle = 50 μm. Abréviation : FOV = champ de vision. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

Figure 11
Figure 11 : Dermoscopie, MCR, OCT et corrélation histopathologique du CBC acquis avec le dispositif RCM-OCT. (A) Une papule rose sur la poitrine après la radiothérapie (cercle jaune). (B) Sur la MCR, des cordons tumoraux basaloïdes (étoiles bleues) avec palissade (flèche rouge) et fente (flèche jaune) sont observés au DEJ avec du collagène épaissi (étoile verte) sans nodule tumoral définitif. (C) Une image de la même lésion capturée avec le dispositif RCM-OCT. Un nodule tumoral gris distinct (étoile bleue) est visible connecté à l’épiderme avec une fente (flèche jaune). Des faisceaux de collagène épaissis sont visibles (étoile verte). (D) La biopsie colorée H & E a confirmé le diagnostic de carcinome basocellulaire superficiel sur la coloration H & E montrant une palissade (flèche rouge), une fente (flèche jaune) et des faisceaux de collagène épaissis (étoile verte) (grossissement 10x). Barres d’échelle = 500 μm. Abréviations : MCR = microscopie confocale à réflectance; OCT = tomographie par cohérence optique; CBC = carcinome basocellulaire; DEJ = jonction dermo-épidermique; H & E = hématoxyline et éosine. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

Figure 12
Figure 12 : Images de MCR et de TCO de peau normale. Ces images ont été acquises à partir de la peau normale sur la main d’un volontaire en bonne santé. (A) Montre une image RCM à face unique au DEJ. (B) Affiche une image de l’OPO correspondante dans une vue verticale avec toutes les couches d’habillage. FOV = (A) 750 μm x 750 μm; (B) 1,0 mm x 2,0 mm. Barre d’échelle = 50 μm. Abréviations : MCR = microscopie confocale à réflectance; OCT = tomographie par cohérence optique; DEJ = jonction dermo-épidermique. Veuillez cliquer ici pour voir une version agrandie de cette figure.

Vidéo 1 : Vidéo RCM du trafic de leucocytes acquise à l’aide d’un dispositif HH-RCM. Cette vidéo capturée avec un appareil RCM montre un vaisseau sanguin dilaté avec trafic de leucocytes. Le derme environnant montre des cellules inflammatoires brillantes. Abréviation : HH-RCM = microscopie confocale à réflectance portative. Veuillez cliquer ici pour télécharger cette vidéo.

Figure supplémentaire S1 : Acquisition d’une « pile » à l’aide d’un dispositif WP-RCM de génération 4. Sélectionnez le centre de la lésion (losange vert) et cliquez sur l’option de pile (case orange). Assurez-vous que la pile commence à partir de la couche cornée (croix bleue), la première et la plus brillante couche de la peau. Définissez la profondeur zéro (étoile orange) où commence la première couche de la pile. Sélectionnez le site de la lésion approprié (croix blanche), l’espacement entre deux couches et la profondeur d’imagerie (triangle jaune). La boîte bleue au-dessus de la vue en direct contient des icônes correspondant aux autres fonctionnalités de ce système. Icônes (flèches bleues) de gauche à droite : pour capturer une mosaïque, pour capturer un cube, pour capturer une pile, pour capturer une seule image encadrée et pour capturer un enregistrement vidéo. Abréviation : WP-RCM = microscopie confocale à réflectance à large sonde. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.

Figure supplémentaire S2 : Acquisition d’une « mosaïque » à l’aide d’un dispositif WP-RCM de génération 4. (A) À l’aide de la vue en direct (croix bleue), allez à la profondeur de lésion souhaitée. Sélectionnez toute la zone de la lésion (si elle est inférieure à 8 mm) ou la partie de la lésion entière à capturer pour l’imagerie (losange vert). Sélectionnez l’option mosaïque (boîte orange) pour démarrer la capture. (B) Un exemple de mosaïque capturée à la DEJ à partir de la lésion dans le panneau A. Abréviations : WP-RCM = microscopie confocale à réflectance à sonde large; DEJ = jonction dermo-épithéliale. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.

Figure supplémentaire S3 : Exemple de rapport d’évaluation diagnostique confocale. (A) Remplissez le diagnostic (flèche noire) en sélectionnant dans le menu déroulant (B), les codes CPT pour la facturation (flèche jaune) et les caractéristiques pertinentes observées lors de la séance d’imagerie confocale (étoile bleue). Abréviation : CPT = Terminologie procédurale actuelle. Veuillez cliquer ici pour télécharger ce fichier.

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Discussion

Dans cet article, nous avons décrit les protocoles d’acquisition d’images à l’aide de dispositifs RCM in vivo et RCM-OCT. À l’heure actuelle, il existe deux dispositifs RCM disponibles dans le commerce : un dispositif RCM (WP-RCM) à sonde large ou monté sur bras et un dispositif RCM PORTATIF (HH-RCM). Il est crucial de comprendre quand utiliser ces dispositifs en milieu clinique. Le type et l’emplacement du cancer sont les principaux facteurs déterminant le choix de l’appareil.

L’appareil WP-RCM est bien adapté aux lésions sur les surfaces planes et légèrement ondulées du corps, telles que le tronc et les extrémités, car il nécessite un contact avec la peau. Comme la tête de sonde est large, elle ne peut pas être attachée à des zones étroites ou à des coins du corps. Cependant, HH-RCM est un dispositif plus flexible et a une tête de sonde plus étroite. En conséquence, cet appareil est fréquemment utilisé pour imager les lésions sur les zones courbes et relativement ondulées du corps, y compris le nez, les paupières, les lobes d’oreilles et les organes génitaux, où le WP-RCM ne peut pas être fixé.

Les deux appareils peuvent acquérir des images, des piles et des vidéos à résolution cellulaire unique et peuvent être utilisés pour imager tous les cancers de la peau. Cependant, le dispositif WP-RCM permet de visualiser une lésion entière mesurant jusqu’à ~ 8 mm x 8 mm en acquérant des mosaïques. Les mosaïques donnent un aperçu des détails architecturaux de la lésion (tels que la symétrie et la circonscription). Un appareil WP-RCM est également équipé d’une caméra dermatoscopique numérique pour acquérir des images dermoscopies de la lésion, qui guident l’acquisition d’images RCM tout au long de la séance d’imagerie. Ces deux caractéristiques uniques rendent le dispositif WP-RCM préférable pour l’évaluation des lésions mélanocytaires pour différencier les naevus du mélanome. En revanche, l’appareil portatif est plus adapté aux lésions kératinocytaires, car ces lésions ne nécessitent généralement pas d’évaluation architecturale, mais dépendent davantage d’images à faible champ de vision et à haute résolution (0,75 mm x 0,75 mm). Cependant, le dispositif HH-RCM est très utile pour l’imagerie de grandes lésions (mesurant >8 mm) pour la cartographie des marges tumorales pour le mélanome (lentigo maligna) et les CBC et pour guider la sélection du site de biopsie.

La MCR est principalement utilisée comme outil complémentaire à la dermoscopie dans le triage des lésions cutanées qui semblent malignes et nécessitent une biopsie, tout en épargnant la biopsie pourles lésions bénignes 7,19. D’autres indications comprennent la surveillance non invasive d’une lésion suspecte, l’évaluation de la réponse au traitement topique ou chirurgical 19,37,38, la délimitation des marges chirurgicales des grandes lésions faciales du lentigo malin (LM)39,40,41, l’orientation des biopsies ciblées dans les grandes lésions de LM et de MPEM 42, et le diagnostic des lésions inflammatoires 43,44 . Un avantage majeur de l’utilisation de la MCR est la possibilité de poser un diagnostic au chevet du patient sans biopsie45, ce qui facilite la prise en charge immédiate. De plus, contrairement à l’évaluation histopathologique, où seule une petite fraction du volume de la lésion est analysée, la MCR permet de visualiser des volumes beaucoup plus importants de la lésion en temps réel45 et fournit des informations sur des phénomènes dynamiques tels que le trafic des leucocytes 32,46.

La GCR a certaines limites. Contrairement à la dermoscopie, l’imagerie RCM nécessite ~15 min par lésion, ce qui peut perturber le flux de travail clinique, et l’évaluation de l’image nécessite une expertise pathologique. Il n’est pas adapté à l’évaluation des lésions situées plus profondément dans le derme ou la sous-cutanée en raison de sa profondeur d’imagerie limitée (jusqu’à ~250 μm).

Le dispositif combiné « multimodal » MCR-OCT a été construit pour surmonter les limites de la MCR22. Il offre les avantages de l’imagerie à résolution cellulaire avec la MCR et les images plus profondes et verticales (similaires à l’histopathologie) de l’OCT. Les premières études ont montré des résultats prometteurs pour l’utilisation de la MCR-OCT dans le diagnostic et la prise en charge des CBC23,24,25,47 (55 patients). La MCR-OCT a démontré une grande précision (sensibilité de 100 %, spécificité de 75 %) dans le diagnostic des CBC dans les lésions cliniquement suspectes et non biopsiées et a déterminé avec précision la profondeur des lésions pour une prise en charge appropriée. Il a également montré une sensibilité de 100% dans la détection du CBC résiduel dans les lésions précédemment biopsiées25. Récemment, Monnier et coll. ont utilisé ce dispositif dans des contextes cliniques réels pour l’évaluation du CBC dans des lésions dermoscopiquement équivoques (petites, non pigmentées)23 (18 patients). Ils ont comparé les résultats du dispositif combiné RCM-OCT avec le dispositif RCM-seul sur la même lésion. L’étude a montré une nette amélioration de la spécificité de 62,5% à 100% et de la sensibilité de 90% à 100% en utilisant le dispositif combiné par rapport au dispositif RCM seul, démontrant ainsi l’avantage et la complémentarité de ces deux dispositifs d’imagerie optique. Une étude de Navarrete-Dechent et al. a également prouvé l’utilité du dispositif RCM-OCT par rapport au dispositif RCM seul pour la détection du CBC résiduel chez les patients « BCC complexes », ce qui a facilité leur prise en charge et amélioré les soins aux patients24 (10 patients). En dehors des cliniques de dermatologie, le RCM-OCT est étudié comme outil d’évaluation préchirurgicale du CBC, où il a montré une sensibilité élevée de 82,6% et une spécificité élevée de 93,8%, avec une forte corrélation entre la profondeur observée sur OCT et la profondeur finale sur histopathologie47 (35 patients). Ainsi, ce dispositif a surtout été décrit pour le diagnostic et la prise en charge du CBC; son utilité pour le mélanome et le CSC n’a pas encore été explorée.

Au-delà de son utilisation pour l’évaluation du CBC, Bang et al. ont également exploré ce dispositif pour la détection des métastases cutanées (CM) chez les patientes atteintes d’un cancer du sein48 (sept patientes). Ils ont décrit pour la première fois les caractéristiques de la MC sur RCM-OCT qui faciliteraient leur diagnostic et leur prise en charge à l’avenir. Grâce à la combinaison d’images à haute résolution et à la capacité d’évaluer les lésions en profondeur, ils ont pu détecter la CM dans les six lésions imagées et différencier d’une lésion ectatique vasculaire bénigne. Des études à grande échelle avec plus de lésions sont justifiées pour prouver le potentiel diagnostique du dispositif pour la CM.

Quel que soit l’appareil utilisé, les étapes suivantes doivent être exécutées avec soin pour éviter les artefacts et garantir des images de haute qualité. Pour éviter les artefacts de mouvement, le patient doit être positionné confortablement. Des oreillers ou des repose-pieds ou accoudoirs supplémentaires peuvent être fournis pour soutenir les sites d’imagerie. Les artefacts de mouvement causés par la respiration peuvent être minimisés en plaçant une main ferme sur la sonde pendant l’imagerie. Pour réduire les artefacts causés par tout matériau externe, nettoyez le site de la lésion avec un tampon imbibé d’alcool ou du savon et de l’eau avant l’imagerie. Si nécessaire, coupez les cheveux au site de la lésion pour éviter la formation de bulles d’air. Toutes les précautions doivent être prises pour éviter la contamination croisée. La fenêtre en plastique jetable doit être jetée après chaque utilisation, et la sonde d’imagerie doit être nettoyée à fond avec une lingette désinfectante après chaque utilisation.

Les progrès de l’imagerie non invasive visent à améliorer la précision du diagnostic et à étendre leur utilisation dans le monde entier. Des ajouts au dispositif HH-RCM existant ont été explorés, tels que l’incorporation d’une caméra à grand champ pour permettre une double vue de la morphologie de la surface de la lésion et des détails cellulaires plus profonds dans la lésion49. D’autres ajouts au HH-RCM incluent la mosaïque vidéo - une technique de conversion de vidéo en image mosaïque, élargissant ainsi le FOV50. Pour étendre l’utilisation de ces technologies, des dispositifs portatifs moins chers, plus petits et plus portables sont en cours de développement 51,52,53, y compris une sonde portative plus petite et plus flexible qui sera utilisée pour l’imagerie intra-orale 54. En outre, les chercheurs explorent des sondes fluorescentes ciblées pour améliorer la sensibilité et la spécificité de la détection tumorale31. Il existe divers algorithmes basés sur l’intelligence artificielle pour aider à capturer l’imagerie en identifiant automatiquement la meilleure profondeur pour capturer le DEJ55 ou en supprimant les artefacts56. De plus, certains algorithmes sont en cours de développement pour aider les cliniciens à détecter automatiquement les cancers de la peau57,58. Enfin, à l’aide de l’imagerie RCM in vivo en direct, à distance26, un technicien à distance guidé par un expert peut capturer des images de haute qualité et guider les cliniciens pour établir des diagnostics en temps réel.

Les dispositifs concurrents disponibles dans le commerce sont les OCT confocaux en champ ligne (LC-OCT)15,16 et les OCT plein champ (FF-OCT)17,18. Ces appareils peuvent générer des images à la fois dans des plans verticaux (comme l’OPO) et en face (comme RCM). Les images OCT acquises avec ces dispositifs ont une résolution latérale plus élevée de ~1-3 μm que les images OCT ~7 μm du dispositif RCM-OCT22. Cependant, cette augmentation de la résolution s’est faite au prix d’une diminution de la profondeur d’imagerie de ~300-500 μm et d’un champ de vision plus petit de ~1-2mm à 500 μm x 500 μm par rapport au dispositif RCM-OCT. Ainsi, ils ne sont pas idéaux pour fournir des détails architecturaux. Leur utilisation a été décrite pour l’imagerie de tous les cancers de la peau. En conclusion, les dispositifs RCM et RCM-OCT sont des outils de diagnostic non invasifs précieux et ont des applications cliniques uniques en dermatologie. Alors que la MCR, en tant que dispositif autonome (en particulier le dispositif WP-RCM), est excellente pour l’évaluation des lésions cutanées pigmentées, y compris le mélanome, le dispositif RCM-OCT est plus utile pour le diagnostic et la prise en charge du CBC. À l’avenir, l’intégration de capacités de mosaïque pour transmettre de grandes images de champ de vision (essentielles pour l’évaluation du mélanome) dans le dispositif RCM-OCT existant pourrait être explorée afin de fournir un dispositif multimodal complet à usage clinique, qui serait la « machine à rêves » pour l’imagerie non invasive pour tous les cancers de la peau.

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Disclosures

Ucalene Harris n’a aucun intérêt financier concurrent. Le Dr Jain est consultant pour Enspectra Health Inc. Le Dr Milind Rajadhyaksha est un ancien employé de Caliber ID (anciennement Lucid Inc.), la société qui fabrique et vend le microscope confocal VivaScope. Le VivaScope est la version commerciale d’un prototype de laboratoire original qui a été développé par le Dr Rajadhyaksha lorsqu’il était au Massachusetts General Hospital, Harvard Medical School.

Acknowledgments

Un merci spécial est donné à Kwami Ketosugbo et Emily Cowen pour être bénévoles pour l’imagerie. Cette recherche est financée par une subvention du National Cancer Institute / National Institutes of Health (P30-CA008748) accordée au Memorial Sloan Kettering Cancer Center.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Crystal Plus 500FG mineral oil STE Oil Company, Inc. A food grade, high viscous mineral oil used with our various devices during in vivo imaging.
RCM-OCT Physical Science Inc. - A “multi-modal” combined RCM-OCT device simultaneously images skin lesions in both horizonal and vertical modes.
Vivascope 1500 Caliber I.D. - A wide-probe RCM (WP-RCM) device that attaches to the skin to campture in vivo devices.
Vivascope 3000 Caliber I.D. - A hand-held RCM (HH-RCM) device that is moved across the skin to capture in vivo images.

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rétractation No. 186
Combinaison de la microscopie confocale à réflectance avec la tomographie par cohérence optique pour le diagnostic non invasif des cancers de la peau par acquisition d’images
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Harris, U., Rajadhyaksha, M., Jain,… More

Harris, U., Rajadhyaksha, M., Jain, M. Combining Reflectance Confocal Microscopy with Optical Coherence Tomography for Noninvasive Diagnosis of Skin Cancers via Image Acquisition. J. Vis. Exp. (186), e63789, doi:10.3791/63789 (2022).

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