改良尾静脉和静脉穿刺用于大鼠模型中的血液采样
Summary
在这里，我们提出了一种协议，为大鼠模型提供快速，简单和可靠的血液采集替代方案。我们根据上下文描述了三种不同的血液采样方法：麻醉下或有意识的动物的尾静脉穿刺，以及麻醉下的背静脉穿刺。
Abstract
大多数实验动物设计都需要血液样本来评估各种血液学参数。本文介绍了两种大鼠采血程序：侧尾静脉穿刺和背静脉穿刺，与其他先前描述的技术相比具有显着优势。该研究表明，这两种程序允许快速采样（10 分钟内）并为大多数测定（202 μL ± 67.7 μL）产生足够的血容量。背静脉穿刺必须在麻醉下进行，而侧尾静脉穿刺可以在有意识、约束的动物身上进行。
因此，交替使用这两种技术可以在任何情况下抽血。虽然始终建议在手术过程中协助操作员以确保动物福利，但这些技术只需要一名操作员，这与大多数需要两名血液采样方法不同。此外，虽然这些先前描述的方法（例如颈静脉棒，锁骨下静脉抽血）需要广泛的事先训练以避免动物的伤害或死亡，但尾静脉和背静脉穿刺很少是致命的。由于所有这些原因，并根据具体情况（例如，对于包括雄性大鼠的研究，在围手术期或术后立即，对于尾静脉细的动物），这两种技术可以交替使用以实现重复抽血。
Introduction
血液采样对于大多数动物研究都是必要的，无论是 体内 还是 体外。在大鼠中，由于血液采样的频率和数量可能很大，因此有不同的收集选择是有帮助的。在以前的研究中已经描述了各种方法。
最常用的技术是尾静脉穿刺和大隐静脉抽血。尾静脉取样适用于所有大鼠品系。通过适当的训练，该程序易于执行，并且对动物造成的痛苦最小1.同样，大隐静脉抽血，只要操作得当，也是一种快速简单的采集方法。这两种方法都不需要麻醉，并且都允许重复抽取少量血液。然而，大隐静脉穿刺通常产生较低的血容量1 ，并且需要两个人在场，留下一个后肢暴露进行穿刺2。
如果需要从单个动物收集大量血液，可以使用心脏穿刺或腔静脉穿刺（可以从心脏穿刺的 150 g 大鼠中抽取多达 10 mL 的血液2）。这些技术需要麻醉，并且是终末程序。在这两种技术中的任何一种之后，动物都必须被安乐死2.颈静脉棒是一种替代方案，如果在尚未达到终点的研究中需要收集大量血液，可以使用。然而，这种技术还需要大量的技术技能来避免对动物造成伤害;因此，应限制其使用3。
其他技术，如锁骨下静脉抽血，在采血前不需要使用麻醉剂，并允许对少量血液进行重复采样。然而，这种技术需要克制的处理和适当的针切口。操作不当可能导致动物疼痛甚至死亡，这种方法的培训可能很挑剔4.
其他轶事程序包括眼眶穿刺和舌下静脉穿刺，两者都需要麻醉剂，既不推荐也不广泛使用。尽管先前的研究表明，通过眼眶穿刺比尾静脉穿刺更快地采血，但发现在乙醚麻醉下进行眼眶穿刺的耐受性不如后一种方法（基于动物的兴奋评分和尿液产生）5。此外，这种方法在很大程度上受到执行该程序的人的技能的影响，并且主要由经验丰富的兽医执行。相比之下，舌下静脉穿刺的痛苦较小，建议重复采血6。然而，这种技术存在严重的不良反应，例如食物和水摄入量减少，这可能导致动物死亡7。
本研究描述了我们实验室用于重复血液采样的两种方法。尾静脉穿刺可以对有意识的动物进行，组织损伤和不良反应很小。在这项研究中，这项技术的修改包括用食指和中指稳定尾巴，这允许单个操作员进行采血。背静脉穿刺已被描述为简单的静脉注射。该技术在麻醉下进行，并在其他方法遇到困难的情况下（例如，在术后立即，与小动物一起，在麻醉下进行围手术期抽血时）允许可靠的血源。与尾静脉取样类似，与上述技术相比，穿刺部位的损伤对动物的整体影响较小8.该方法论文的目的是根据上下文为没有经验的研究人员提供简单可靠的血液采样替代方案（例如，对于在麻醉下进行的手术，对于包括雄性大鼠的研究，对于具有细尾静脉的动物）。
Protocol
Representative Results
Discussion
尾静脉穿刺是从有意识的大鼠身上获取血液的有效方法。然而，当动物处于麻醉状态时，异氟醚的作用会导致血管痉挛，并使尾静脉穿刺不合适11。如本研究所示，在这种情况下的另一种选择是从静脉收集血液，这更成功，并且在更短的时间内产生显着更大的血液量。请务必记住，如果此方法在第一次尝试时失败，则后续尝试可能会失败。相比之下，尾静脉穿刺允许在第一次尝?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
这项工作由Shriners Children’s Boston（B. E. U.， K.U.， C.L.C.）资助。L.C.由“La Bourse des Gueules Cassées”，“La Bourse Année Recherche”和“La Bourse de l’Amicale des Anciens Internes des Hôpitaux de Paris”资助。Y.B.由“La Bourse des Gueules Cassées”资助。Y.B.和I.F.v.R.由Shriners儿童医院资助（奖学金ID分别为#84308-BOS-22 #84302-BOS-21）。本材料部分基于美国国家科学基金会根据资助号支持的工作。欧洲经济共同体1941543。非常感谢美国国立卫生研究院（R01EB028782、R56AI171958 和 R01DK114506）的部分支持。图 1 是使用 BioRender.com 创建的。
Materials
| 0.5 mL | 28 G ½ Insulin Syringes | BD | 329424 | for tail vein puncture |
| 0.5 mL | 30 G x 5/16 Insulin Syringes | BD | 320468 | for penile vein puncture |
| 250 L Microtainer blood collection tubes with K2EDTA | BD | 365974 | |
| Gauze Sponges | Curity | 6939 | |
| Isoflurane Auto-Flow Anesthesia Machine | E-Z Systems | EZ-190F | for penile vein puncture |
| Isoflurane, USP | Patterson Veterinary | 1403-704-06 | for penile vein puncture |
| Nosecone for Anesthesia | World Precision Instruments | EZ-112 | for penile vein puncture |
| Rodent Restraint Cone | Harvard Apparatus | ST2 52-95-86 | for tail vein puncture |
| Small Animal Heated Operating Table (Adjustable) | Peco Services Ltd | 69023 | |
| Webcol Alcohol prep pads | Simply Medical | 5110 |
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