Summary
עמידות הצמח אל אוכלי צמחים חרקים לעיסה ניתן לבדוק בכמה דרכים. כאן, אנו מדגימים כיצד הגדרת בחירה ניסוי אין ברירה עם thaliana הצמח ארבידופסיס מודל לזהות התנגדות המינים הדברה פיאריס ראפא.
Abstract
הזחלים של פרפר כרוב קטן הלבן הם מזיקים במסגרות חקלאיות. זה מין זחל הזנות מצמחים במשפחה כרוב, הכוללים יבולים רבים כגון כרוב, ברוקולי, כרוב ניצנים ועוד לגידול חרקים מתרחשת על צמחים כרוב בחממה. לפחות שני כלובים יש צורך בגידול של פיאריס ראפא. אחת עבור הזחלים והשני להכיל את המבוגרים, את הפרפרים. כדי לחקור את תפקידה של הורמונים צמחיים וכימיקלים רעילים המפעל התנגדות הדברה זה חרק, אנחנו מדגימים שני ניסויים. ראשית, קביעת תפקידה של חומצה jasmonic (JA - הורמון צמחי ציינו לעתים קרובות התנגדות חרקים) ב התנגדות החרק לעיסה פיאריס ראפא. צמיחה קטרפילר ניתן להשוות על צמחי בר, סוג מוטציה לקויי בייצור של JA. ניסוי זה נחשב "אין ברירה", כי הזחלים נאלצים להתקיים על מפעל בודד אשר מסנתז או חסר JA. שנית, אנו להדגים ניסוי חוקר את תפקידם של glucosinolates, אשר משמשים ההטלה (הטלה) אותות. כאן, אנו משתמשים ארבידופסיס WT ו מוטנטים לקויה בייצור glucosinolate ב ניסוי "בחירה" שבו פרפרים נקבה רשאים לבחור להטיל את ביציהם על צמחים או של גנוטיפ. וידאו זה מדגים את הגדרת הניסוי עבור שני מבחני כמו גם תוצאות נציג.
Protocol
אין ניסוי בחירה:
- בזהירות להקיף את הצמח ארבידופסיס עניין בכוס פלסטיק. במקרה זה: Col-0 (WT) ו מוטציה לקויה בייצור של JA. ודא שיש לך להגביל את הנזק על העלים. לשם כך אני משתמש האחורי של מכחול זה.
- שימוש במכחול דק לקחת זחלים שבקעו זה עתה מן המושבה על כרוב.
- בזהירות במקום זחל על צמחי ארבידופסיס.
- משקל זחל על 4 ביממה, 7, 10. טיפ: לגדל צמחים בתנאים שלך יום קצר (8 שעות אור) כדי להגדיל את הצמיחה של צמח (1 הזחל יכול למלא את מחזור החיים המלא על צמח 1).
הבחירה ניסוי:
- שני צמחים נבחרים, אחד לכל גנוטיפ. הטוב ביותר הוא לגדל צמחים בסיר עם זאת, כדי להגביל גורמים אחרים, כגון אפקטים מגש, וכו '
- הנח את הצמחים בכלוב פרפר.
- בחר נקבה פורייה. אני בדרך כלל לתפוס נקבה כי הוא פעיל המטילה ביצי במושבה גידול.
- שחרר את הנקבה בכלוב עם הבחירה של שני מפעלים למשך 24 שעות.
טיפ 1: כדי למנוע להשפיע על למידה, אין שימוש חוזר נשים לבדיקות הבחירה הבאים.
טיפ 2: אפשר רק להשוות צמחים בעלי פנוטיפ צמיחה דומה. לחלופין, תוכל לעלות עלה מ גנוטיפ על גבי כל בקבוק Erlenmeyer ולהשוות את האטרקטיביות שלהם נקבה.
בקר ביקורות שנתי של ביולוגיה הצמח לקבלת מידע נוסף על חסינות פרוטוקול צמח זה herbivory חרקים.
