في هذا الفيديو ، فإننا نبين كيفية تسمية الخلايا الجذعية الجنينية البشرية (hESC) مع كلوريد المنغنيز (MnCl<sub> 2</sub>) التي يمكن أن تدخل الخلايا عبر قنوات الكالسيوم الجهد بوابات عندما كانت الخلايا النشطة بيولوجيا. بالإضافة إلى ذلك ، وتبين لنا من استخدام MnCl<sub> 2</sub> الخلوية وكيل النقيض التصوير بالرنين المغناطيسي لتحديد الجدوى من المختبر في hESC.
Abstract
وقد أظهرت الخلايا الجذعية الجنينية البشرية (hESC) القدرة على استعادة عضلة القلب المصاب. وقد برز التصوير بالرنين المغناطيسي (MRI) باعتبارها واحدة من طرائق التصوير السائد لتقييم ترميم عضلة القلب المصاب. وعلاوة على ذلك ، تم توظيف وكلاء العلامات السابقين الحية ، مثل الحديد وأكسيد النانوية ، لتعقب وتوطين الخلايا الجذعية المزروعة. ومع ذلك ، فإن هذا الأسلوب لا مراقبة الممتلكات الأساسية البيولوجيا الخلوية بشأن الجدوى من الخلايا المزروعة. لقد كان من المعروف أن كلوريد المنغنيز (MnCl 2) يدخل الخلايا عبر الجهد بوابات الكالسيوم (كا 2 +) قنوات عندما كانت الخلايا النشطة بيولوجيا ، ويتراكم intracellularly لتوليد تأثير تقصير T 1. لذا ، نقترح أن المنغنيز الموجهة التصوير بالرنين المغناطيسي يمكن أن تكون مفيدة لمراقبة سلامة الخلية بعد زرع hESC في عضلة القلب.
في هذا الفيديو ، وسوف نعرض كيفية تسمية hESC مع MnCl (2) وكيف يمكن رؤيتها بوضوح تلك الخلايا باستخدام التصوير بالرنين المغناطيسي في المختبر. في الوقت نفسه ، والنشاط البيولوجي للكا 2 + القنوات سوف يتم استخدام التضمين سواء كا 2 + قناة ناهض وخصم لتقييم التغيرات المصاحبة إشارة.
Protocol
المنغنيز وصفها من الخلايا الجذعية الجنينية البشرية يعرض للتريبسين ينبع الجنينية البشرية التي تم تربيتها في التغذية الخالية من الشروط لمدة 5 دقائق. تحييد وسائل الإعلام عن طريق إضافة التربسين الثقافة. <li style=";text-align:rig…
Discussion
هذه النتائج تشير إلى أن المنغنيز لا يدخل عبر قنوات الكالسيوم الجهد مسور ، ويمكن استخدامها المنغنيز كعامل النقيض من التصوير بالرنين المغناطيسي ، والتي يمكن أن تظهر أيضا بقاء الخلية. لذا ، نقترح أن المنغنيز الموجهة التصوير بالرنين المغناطيسي يمكن أن تكون مفيدة لمراقبة سلامة الخ?…