Bu video, manganez klorür ile insan embriyonik kök hücreleri (hESC) (MnCl etiket nasıl gösteriyor<sub> 2</sub>) Hücrelerinin biyolojik olarak aktif voltaj bağımlı kalsiyum kanalları üzerinden hücreleri girebilirsiniz. Ayrıca, biz MnCl kullanımı gösteriyor<sub> 2</sub> Hücresel MRG kontrast madde olarak in vitro hESC canlılığını belirlemek için.
Abstract
İnsan embriyonik kök hücreleri (hESC) yaralı miyokardın geri yeteneğini göstermiştir. Manyetik rezonans görüntüleme (MRG), yaralı miyokardın yeniden değerlendirmek için baskın görüntüleme yöntemlerinin biri olarak ortaya çıkmıştır. Ayrıca, demir-oksit nano gibi ex-vivo etiketleme ajanlar, izlemek için istihdam ve nakledilen kök hücrelerin lokalize edilmiştir. Ancak, bu yöntem nakledilen hücrelerin canlılığı ile ilgili temel bir hücre biyolojisi özelliği izlemez. Manganez klorür (MnCl 2) voltaj bağımlı kalsiyum (Ca 2 +) hücreleri biyolojik olarak aktif kanallar aracılığıyla hücrelere girer ve T 1 kısalma efekti oluşturmak için intraselüler olarak birikir bilinmektedir. Bu nedenle, mangan güdümlü MRG miyokard içine hESC nakli sonra hücre canlılığı izlemek için yararlı olabilir öneririz.
Bu video, MnCl 2 ve nasıl bu hücrelerin in vitro MRI kullanarak açıkça görüleceği hESC etiket nasıl gösterecektir. Aynı zamanda, biyolojik aktivite Ca 2 + kanalları eşlik eden sinyal değişiklikleri değerlendirmek için Ca 2 + kanal agonist ve antagonist kullanan modüle olacaktır.
Protocol
İnsan Embriyonik Kök Hücre Manganez Etiketleme Besleyici 5 dakika için koşullar kültüre sahip insan embriyonik kaynaklanıyor Trypsinize. Kültür ortamı ekleyerek tripsin nötralize. 20 800 rpm'de 5 dakika santrifüj hücreleri aşağı Spin ° C. Yeniden askıya hücre pelletini sonra, Tripan mavisi hücre sayısını. Elde edilen hücre sayımı dayanarak, dört alikotları konik tüpler içine 3 milyon hücre içine hücreleri bölün. Santrifüj tekrar Pelet hücreleri. Sad…
Discussion
Bu sonuçlar, manganez de hücre canlılığı gösterebilir voltaj kapılı kalsiyum kanal ve manganez MRG kontrast madde olarak kullanılan, yoluyla girin. Göstermektedir. Bu nedenle, mangan güdümlü MRG, insan embriyonik kök hücre transplantasyonu sonrası miyokard hücre canlılığı izlemek için yararlı olabilir öneririz.