Canlı İmmobilize Maya Hücreleri Görselleştirme Hızlı Tekniği
Summary
Burada sessiz çiftleşme lokusların HML ve HMR floresan gazetecilere uygulanan büyüyen immobilize maya hücreleri görünüm için hızlı bir tekniği,
Abstract
Biz burada Epifloresans mikroskobu ile büyüyen maya hücreleri immobilizasyon ve görselleştirme için basit, hızlı ve son derece esnek bir teknik de mevcut. Teknik eşit uzunlukta on saat kadar statik maya nüfus, ya da zaman içerisinde deneyler görünüm için uygundur. Benim mikroskopi S. cerevisiae sessiz çiftleşme lokusların epigenetik miras inceler. Heterokromatin paketlenmiş olarak normal ifade edilmeyen iki sessiz çiftleşme lokusların HML ve HMR vardır. Sir1 mutant arka plan susturulmasında her lokus ya açık ya da susturulmuş epigenetik devlet olabilir zayıflar, bu nedenle bir bütün olarak nüfus HML ve HMR için farklı epigenetik devletlerin hücrelerinin bir karışımı var. Benim mikroskopi ayrı bir hücrede HML ve HMR epigenetik devlet arasında herhangi bir ilişki olduğunu gösterdi. sir1 hücreleri modelin önceden ifade lokustaki susturulması kurulması ya da önceden susturuldu lokus ifade, epigenetik devletler geçin. Benim zaman ders mikroskopi sıklığı, her dört olası epigenetik anahtarlar ve böylece her sir1 hücrelerinde epigenetik devletlerin istikrarını puan paletli bireysel sir1 hücreler ve onların çocukları. Ayrıca Xu ve ark. Mol. Hücre 2006.
Protocol
Discussion
Bu, hala büyüme izin verirken, maya hücreleri durağanlaştırır hızlı bir tekniktir. Biz, on saat kadar maya maya deney boyunca vahşi tip bölünme oranları gösteren büyüme izlemiştir. Bu kurulum, mikroskop aşamasında altında objektif lens gerektirdiğini unutmayın.
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Biz Pete Houston ve Eugenia Xu yardım ettikleri için teşekkür etmek istiyorum.
References
- Xu, E. Y., Zawadzki, K. A., Broach, J. R. Single-cell observations reveal intermediate transcriptional silencing states. Mol. Cell. 23, 219-229 (2006).
