Американская подковы краба, Limulus Полифема, вероятно, является наиболее удобным источником для большого количества крови любого беспозвоночных. Кровь простой по составу, только с одним камерного типа в общую циркуляцию, гранулированных амебоцит, и только три обильных белков в плазме, гемоцианин, С-реактивного белка, и α2-макроглобулина. Кровь собирается из сердца и клеток крови и плазмы центрифугированием.
Подковы краба имеет лучшие характеризуется иммунная система любого долгоживущих беспозвоночных. Изучение иммунитета у мечехвостов способствовало легкости в сборе больших объемов крови и от простоты крови. Мечехвостов показать только один тип ячейки в общую циркуляцию, гранулированных амебоцит. Плазме содержания соли в морской воде, и только три обильных белков, гемоцианин, дыхательной белок, С-реактивного белка, которые функционируют в цитолитического уничтожение чужеродных клеток, в том числе бактериальной клетки и α2-макроглобулина, который ингибирует протеазы вторжение болезнетворных микроорганизмов. Кровь собирается прямой пункции сердца в условиях, которые сводят к минимуму загрязнение липополисахарида (ака, эндотоксин, ЛПС), продукт грам-отрицательных бактерий. Большое животное может принести 200 – 400 мл крови. Для изучения плазмы, клеток крови, немедленно удаляются из плазмы путем центрифугирования и плазмы может быть фракционированного на составляющие ее белки. Клетки крови удобно изучать микроскопически, собирая небольшие объемы крови в LPS-свободный изотонический солевой раствор (0,5 М NaCl) в условиях, допускающих прямое микроскопическое исследование, поставив один из более ЛПС без coverglasses на поверхности блюда культуры, то установка этих coverglasses в простых камер наблюдения следующие ячейки привязанности. Второй подготовки к непосредственному наблюдению является сбор 3 – 5 мл крови в LPS-свободный эмбрион блюдо, а затем культивирующий в искусственной среде фрагменты агрегированных amebocytes к камере, что бутерброды ткани между предметным и покровного стекла. В этой подготовке, подвижных amebocytes мигрировать на поверхность покровного стекла, где они могут легко быть соблюдены. Систему свертывания крови включает в себя совокупность amebocytes и формирование внеклеточного сгусток белка, coagulin, который выделяется из секреторных гранул из клеток крови. Биохимический анализ отмытых клеток крови, что требует агрегации и дегрануляции не происходит, что может быть осуществлено путем сбора крови в 0,1 объемах 2% Твин-20, 0,5 М ЛПС без NaCl, с последующим центрифугированием клеток и мытье 0,5 М NaCl.
Есть четыре вида подковы краба, Limulus Полифема с восточного побережья Северной Америки и три вида, которые варьируются от Японии до Бенгальского залива. Животных определяется как "живое ископаемое", потому что анатомически подобные формы были найдены в ископаемом состоянии от 445 миллионо…
Оригинальные исследования, описанные выше была поддержана NSF гранта 0344630.