Name: Fare Nöral Kök Hücre Öncüleri Kültür (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-02-25T00:00:00.000+00:00
Duration: 27 min 44 s
Description: Keşfedin fare embriyo korteksinden nöral kök hücre öncüleri izolasyon yöntemini. Laminin kaplama, doku diseksiyonu ve hücre kültürü teknikleriyle güvenilir bir protokol sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li> E12.5 embriyo korteks Fare sinir öncüleri (NPC) izole edildi. </li><li> Deri ve mezenkimal katmanları disseke telencephalic veziküller çıkarıldı. </li><li> Veziküller, 37% 0.02 EDTA ve 20 dakika boyunca HBSS% 0,2 BSA ° C ile% 0.05 tripsin inkübe edildi. </li><li> Trypsinization HBSS 1 mg / ml soya tripsin inhibitörü eşit hacmi (Sigma T6522) tarafından durduruldu. </li><li> Doku yangın cilalı Pasteur pipetler öğütme birkaç tur kullanarak ayrışmış sindirir. </li><li> Hücreler HBSS içinde% 0.2 BSA ile bir kez yıkanmış ve 20 ng / ml EGF, 10 ng / ml FGF2 (R &amp; D Sistemleri veya Peprotech), ve 2 ug / ml heparin (medya laminin-kaplı lamelleri 50.000 hücreleri / ml kaplama edildi Sigma). </li></ol>

<ol><li>Currle, D., Cheng, X., Hsu, C., Monuki, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+and+indirect+roles+of+CNS+dorsal+midline+cells+in+choroid+plexus+epithelial+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Direct and indirect roles of CNS dorsal midline cells in choroid plexus epithelial formation.</a> Development. 132 (15), 3549-3559 (2005).</li>
<li>Flanagan, L., Rebaza, L., Derzic, S., Schwartz, P., Monuki, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+human+neural+precursor+cells+by+laminin+and+integrins%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Res%22%5BJournal%5D)">Regulation of human neural precursor cells by laminin and integrins.</a> J Neurosci Res. 83, 845-856 (2006).</li>
</ol>

Yeteneğimizi embriyonik nöral kök hücreler, hasat, izole etmek ve kültür merkezi sinir sistemi gelişimi ve kök hücre biyolojisi anlayışımıza büyük gelişmeler ile mümkün olmuştur. Bu video E12.5 fare serebral korteks ve embriyonik nöral kök hücrelerin sonraki ayrıştırılmasıyla ve kültür diseksiyonu göstermektedir. Birçok diğer benzer yöntemlerle başarılı bir şekilde diğer araştırmacılar tarafından istihdam edilmiştir.

<table><tbody><tr><td>Düz İris Makası</td><td>Araç</td><td>Fine Science Tools</td><td>14060-11</td><td></td></tr><tr><td>Orta Boy Makas</td><td>Araç</td><td>Fine Science Tools</td><td>15024-10</td><td></td></tr><tr><td>Mikro Makas</td><td>Araç</td><td>Fine Science Tools</td><td>15002-08</td><td></td></tr><tr><td>Eğri Pens</td><td>Araç</td><td>Fine Science Tools</td><td>11251-35</td><td></td></tr></tbody></table>

fare nöral kök hücre Öncüleri kültür

Culture of Mouse Neural Stem Cell Precursors

İlköğretim nöral kök hücre kültürleri, merkezi sinir sistemi gelişimi altında yatan mekanizmaları inceleyerek için yararlıdır. Kök hücre araştırmaları sinir sistemi anlayışımız artacak ve bize şu anda tedavisi mümkün olmayan beyin hastalıkları ve yaralanmalar için tedavi geliştirmek için izin verebilir. Buna ek olarak, kök hücreleri, sinir farklılaşma ve transdiferansiye mekanizmaları ve genetik ve çevresel sinyaller detaylı bir çalışma amaçlayan kök hücre araştırmaları için kullanılması gerektiğini, özellikle hücre tipleri içine hücreleri doğrudan uzmanlaşma. Bu video hücreleri embriyonik gün 12.5 fare dorsal önbeyin parçalara ayırma için kullanılan bir tekniktir göstermektedir. Diseksiyonu prosedür E12.5 fare embriyoları rahim, hasat, ince diseksiyon forseps ile &quot;deri&quot; kaldırma ve sonunda serebral korteks parçaları izole içerir. Diseksiyonu takiben, doku ve mekanik ayrışmış sindirilir. Yeniden süspanse ayrışmış hücreler daha sonra sinir kök hücrelerinin büyüme yana &quot;kök hücre&quot; medya kültürü vardır.

Bu video embriyonik farelerin gelişmekte olan korteks neuroprecursors izolasyonu için kullanılan yöntem açıklanır. , Embriyoların rahim kaldırarak, kortikal doku diseksiyon, ve sindirerek izole serebral korteks prosedür gösterilmiştir.

Fare Nöral Kök Hücre Öncüleri Kültür

Primer nöral kök hücre kültürleri, merkezi sinir sistemi gelişiminin altında yatan mekanizmaları incelemek için faydalıdır. Kök hücre araştırmaları artacaktır...

Bu, nöral öncül hücre izolasyonu, disosiasyonu ve kültürü işleminin ilk adımıdır. İlk olarak, doku kültürü için işlem görmemiş bir 24 kuyucuklu plakayı kaplayacağım.Hücrelerin yapışması için laminin ile kaplama yapacağım. Öncelikle, kuyucukları su ve poli-D-lisin karışımı ile kaplayacağım. Her kuyucuğa yaklaşık 450 µL ekleyeceğim.Şöyle yapacağım, plakanın yarısını, buradaki bu iki sırayı poly D lysine çözeltisi ile kapladım. ve burada, sadece çeker ocak içinde oda sıcaklığında beş dakika inkübe edeceğim. Beş dakikadır inkübe oluyor.Şimdi PDL solüsyonunu burada bir vakumla uzaklaştıracağım. Ev tipi vakum işlemi. Şimdi kuyucukları tekrar suyla, yaklaşık 450 µL ile durulayacağım.Suyla durulama işlemi için gerçekten herhangi bir inkübasyon süresi yoktur. Şimdi suyu aspire edeceğim. Ardından laminin solüsyonunu ekleyeceğim.Laminat, EM EM besiyerinde mililitre başına iki mikrogram konsantrasyonda çözülmüştür. Bu nedenle, her bir kuyucuğa 450 µL laminat çözeltisi ekleyeceğim; şu anda plastik kaplama yapıyorum. Bu kuyucuklarda kaplanmış lamel camlar da kullanabilirdiniz.Hücreleri, bir doku kültürü inkübatöründe 37 °C'de en az dört saat inkübe edeceğim. Ayrıca, 45 derecelik açıyla bükülmüş

culture-of-mouse-neural-stem-cell-precursors

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Burada fare epidermal nöral krest kök hücreleri (EPI-NCSC) izole etmek için yöntem gösteriyor. Tekniği içerir mikro diseksiyon, bıyık kıl follikülleri, şişlik izole ve doku kültürü içine placeing. 4 gün - 3 gün içinde EPI-NCSC alt tabaka üzerine çıkıntı eksplantlar göç etmeye başlar.

Fare Epidermal Sinir Crest Kök Hücre (EPI-NCSC) Kültürler

Bu video protokolü, embriyonik gün 14-fare beyninde ganglion eminences nöral kök hücrelerin izolasyonu ve genişleme için neurosphere testinin uygulama göstermektedir.

Neurosphere Testi kullanarak Embriyonik Fare Nöral Kök Hücre Kültürü oluşturulması

Nöral tüpten embriyonik nöral krest izolasyonu kullanımını...

Embriyonik Mürin Nöral Tüp çıkan sinirsel Crest Hücre İzolasyonu ve Kültür

Bu video, yetişkin fare beyninden lateral ventrikül duvarlarını izole etmek ve tek hücreler elde etmek için enzimatik doku ayrışması gerçekleştirmek için ayrıntılı bir protokol göstermektedir. Bu hücreler daha sonra nöral kök hücrelerin proliferasyonunu seçici olarak artıran ve bunların oligodendrositlerin ve astrositlerin ko-kültürlerine farklılaşmasını teşvik eden spesifik kültür koşullarına tabi tutulur.

Yetişkin fare nöral kök hücrelerinden karışık oligodendrosit ve astrosit kültürü elde edilmesi

Bu video, fare embriyonik kök hücrelerinden (mESC'ler) nöral progenitör hücrelerin (NPC'ler) in vitro olarak üretilmesi için bir yöntemi göstermektedir. mESC'ler, embriyoid cisimcikleri (EB'ler) oluşturmak için süspansiyon halinde kültürlenir ve daha sonra yapışık bir kültürde retinoik asit tedavisi yoluyla NPC'lere farklılaşmaya yönlendirilir.

Fare Embriyonik Kök Hücrelerinden Nöral Progenitör Hücreler Üretmek İçin Bir Teknik

Burada subventricular bölgesi ve bireysel yetişkin farelerin kıvrımlarının gelen yapışkan tek katman veya neurospheres ya gibi, sinir öncü hücre kültürlerinin eş zamanlı üretimi için ayrıntılı bir protokol açıklar.

Bir Fare, İki Kültür: İzolasyon ve Yetişkin Nöral Kültür Bireysel Farelerde iki Nörojenik Bölgeler&#39;den Kök Hücre

Bu protokol, serum içermeyen tek katmanlı bir yöntem kullanarak embriyonik kök hücrelerden nöral progenitörler üretme yöntemini ayrıntılı olarak açıklar. Bu progenitörler, olgun nöral hücre tiplerini türetmek veya nöral spesifikasyon sürecini incelemek için kullanılabilir ve bileşik tarama için çok kuyulu format ölçeklendirmesine uygundur.

Serum serbest Tek tabakalı Kültüründe Fare Embriyonik Kök Hücre Sinir Farklılaşma

Erişkin nöral kök hücrelerin (aNSC'ler) genişletilmesi için kültür sistemlerinin kurulması, aNSC'lerin tedavi için incelenmesine ve uygulanmasına olanak sağlar. Subkallozal bölge (SCZ) son zamanlarda yetişkin farelerde yeni bir nöroblast oluşturan bölge olarak kabul edilmiştir. Burada, SCZ-aNSC'lerin izolasyonu, genişletilmesi ve farklılaştırılması için yöntemler açıklanmaktadır.

Fare Subcallosal Zone İzolasyon ve Yetişkin Nöral Kök Hücre Kültürü

Burada, E13 fare embriyo ganglionic itibar bir roman mikrocerrahi teknik nöral kök hücrelerin izolasyonu için tanıtmak.

Yalıtım ve kültür embriyonik fare nöral kök hücrelerin

Fare embriyonik kök hücrelerinin asma damlası yöntemini kullanarak nöronal hücrelere in vitro farklılaşması prosedürünü açıklıyoruz. Ayrıca RT-qPCR, immünofluoresans, RNA-seq ve akış sitometrisi ile kapsamlı bir fenotipik analiz gerçekleştiriyoruz.

Nöral Progenitörlerin ve Nöronların Fare Embriyonik Kök Hücrelerinden Farklılaşması ve Karakterizasyonu

Keşfedin fare embriyo korteksinden nöral kök hücre öncüleri izolasyon yöntemini. Laminin kaplama, doku diseksiyonu ve hücre kültürü teknikleriyle güvenilir bir protokol sunar.

Fare Nöral Kök Hücre Öncüleri Kültür

Daha fazla video keşfet