JoVE Deneyler Ansiklopedisi
İmmünoloji
0 görüntülenme • 3:05 dk. • July 8th, 2025
Chikungunya virüsü benzeri parçacıklar, VLP'ler, bir lipid çift tabakası içine gömülü viral zarf proteinlerinden oluşan ve genetik materyalden yoksun bulaşıcı olmayan yapılardır.
Chikungunya VLP'leri üretmek için, Spodoptera frugiperda Sf9 böcek hücrelerini bir Chikungunya yapısal gen kaseti eksprese eden rekombinant bakulovirüslerle enfekte edin. Kaset, kapsid kodlayan chikungunya yapısal genleri ve zarf proteinleri ile kaynaşmış bir bakulovirüs promotöründen oluşur.
İnkübasyon sırasında, bakulovirüs zarf glikoproteinleri böcek hücreleri üzerindeki yüzey reseptörlerine bağlanır. Bu, bakulovirüsün sitoplazmaya girişini ve viral DNA'nın salınmasını kolaylaştırır, chikungunya kapsid ve zarf proteinleri içeren poliproteinler üretir.
Sentez sonrası, kapsid proteininin otokatalitik bölünmesi, endoplazmik retikulum, ER'de zarf proteinlerine sahip öncü poliproteini üretir. ER lümeninde, enzimler öncü poliproteini parçalayarak, daha sonraki işlemler için Golgi bölmesine giren ve protein heterotrimerleri oluşturan bireysel proteinler üretir.
Golgi yerleşik proteazları, E2 ve E1 proteinleri ile olgun zarf proteinleri üreterek protein heterotrimerlerini parçalar. Bu zarf proteinleri zara yer
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin