Mechanotransduction Cues Etkileri Ayırma için Hidroksi-PAAm Hidrojeller hazırlanması

Bu prosedürün genel amacı, hücre mikro ortamının çeşitli parametrelerini bağımsız olarak kontrol etmek için poli akrilamid hidrojeller üzerinde ilgilenilen herhangi bir proteini hareketsiz hale getirmek için basit ve verimli bir strateji geliştirmektir. Bu, önce protein çözeltisinin PDMS damga yüzeyine yayılmasıyla gerçekleştirilir. İkinci adım, PDMS damgasının yapılandırılmış yüzeyini sabit bir yüksek saflıkta nitrojen gazı akışıyla dikkatlice kurutmaktır.

Daha sonra, protein kaplı damga, kurutulmuş hidrojel yüzeyi ile temas halinde yapılandırılmış bir yüzeye yerleştirilir ve damga mikro özellikleri ile hidrojel yüzeyi arasında iyi bir temas sağlamak için PDMS damgasının üstüne kısa basınç noktaları uygulanır, son adım, PDMS damgasını hidrojel yüzeyinden nazikçe çıkarmak ve baskı olmayan bölgelerin yerleştirilmesinden sonra damgayı temizlemektir. BSA ile hücreler mikro desenli hidrojel yüzeyine oturtulabilir. Sonuç olarak, protein mikro özelliklerini gözlemlemek için ters çevrilmiş bir floresan mikroskobu kullanılır.