Name: İnsan CD14+ Monositlerinden Tolerojenik Dendritik Hücrelerin Üretilmesi için İmmünomodülatör Ajanları Test Etmek İçin Basit ve Etkili Bir Yöntem (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-04-11T14:50:00.000+00:00
Duration: 11 min 34 s
Description: Öğrenin, insan CD14+ monositlerinden tolerojenik dendritik hücre üretmek için immünomodülatör ajanları nasıl test edeceğinizi. Bu yöntem, otoimmün ve transplantasyon araştırmalarında regülatuar T hücre indüksiyonu için kritik öneme sahiptir.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Banchereau, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunobiology+of+dendritic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">Immunobiology of dendritic cells.</a> Annu Rev Immunol. 18 (1), 767-811 (2000).</li>
<li>Blander, J. M., Medzhitov, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toll-dependent+selection+of+microbial+antigens+for+presentation+by+dendritic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Toll-dependent selection of microbial antigens for presentation by dendritic cells.</a> Nature. 440 (7085), 808-812 (2006).</li>
<li>Anderson, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LPS+activation+is+required+for+migratory+activity+and+antigen+presentation+by+tolerogenic+dendritic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Leukoc+Bio%22%5BJournal%5D)">LPS activation is required for migratory activity and antigen presentation by tolerogenic dendritic cells.</a> J Leukoc Bio. 85 (2), 243-250 (2009).</li>
<li>Iberg, C. A., Hawiger, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Natural+and+induced+tolerogenic+dendritic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Natural and induced tolerogenic dendritic cells.</a> J Immunol. 204 (4), 733-744 (2020).</li>
<li>Ness, S., Lin, S., Gordon, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulatory+dendritic+cells%2C+T+cell+tolerance%2C+and+dendritic+cell+therapy+for+immunologic+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Regulatory dendritic cells, T cell tolerance, and dendritic cell therapy for immunologic disease.</a> Front Immunol. 12, 633436(2021).</li>
<li>Ali, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sources+of+type+I+interferons+in+infectious+immunity%3A+Plasmacytoid+dendritic+cells+not+always+in+the+driver%27s+seat%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Sources of type I interferons in infectious immunity: Plasmacytoid dendritic cells not always in the driver's seat.</a> Front Immunol. 10, 778(2019).</li>
<li>Fossum, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+antigens+to+different+receptors+on+conventional+type+1+dendritic+cells+impacts+the+immune+response%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Targeting antigens to different receptors on conventional type 1 dendritic cells impacts the immune response.</a> J Immunol. 205 (3), 661-673 (2020).</li>
<li>Kedl, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Migratory+dendritic+cells+acquire+and+present+lymphatic+endothelial+cell-archived+antigens+during+lymph+node+contraction%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Comm%22%5BJournal%5D)">Migratory dendritic cells acquire and present lymphatic endothelial cell-archived antigens during lymph node contraction.</a> Nat Comm. 8 (1), 2034(2017).</li>
<li>Chow, K. V., Sutherland, R. M., Zhan, Y., Lew, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heterogeneity%2C+functional+specialization+and+differentiation+of+monocyte-derived+dendritic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Immun+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Heterogeneity, functional specialization and differentiation of monocyte-derived dendritic cells.</a> Immun Cell Biol. 95 (3), 244-251 (2017).</li>
<li>Johnson, R. K., Overlee, B. L., Sagen, J. A., Howe, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Peripheral+blood+mononuclear+cell+phenotype+and+function+are+maintained+after+overnight+shipping+of+whole+blood%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Peripheral blood mononuclear cell phenotype and function are maintained after overnight shipping of whole blood.</a> Sci Rep. 12 (1), 19920(2022).</li>
<li>Boks, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IL-10-generated+tolerogenic+dendritic+cells+are+optimal+for+functional+regulatory+T+cell+induction+-+A+comparative+study+of+human+clinical-applicable+DC%5BTitle%5D)+AND+%22Clinl+Immunol%22%5BJournal%5D)">IL-10-generated tolerogenic dendritic cells are optimal for functional regulatory T cell induction - A comparative study of human clinical-applicable DC.</a> Clinl Immunol. 142 (3), 332-342 (2012).</li>
<li>Navarro-Barriuso, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vitamin+D3-induced+tolerogenic+dendritic+cells+modulate+the+transcriptomic+profile+of+T+CD4%2B+cells+towards+a+functional+hyporesponsiveness%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Vitamin D3-induced tolerogenic dendritic cells modulate the transcriptomic profile of T CD4+ cells towards a functional hyporesponsiveness.</a> Front Immunol. 11, 599623(2021).</li>
<li>Moorman, C. D., Sohn, S. J., Phee, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emerging+therapeutics+for+immune+tolerance%3A+Tolerogenic+vaccines+T+cell+therapy%2C+and+IL-2+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Emerging therapeutics for immune tolerance: Tolerogenic vaccines T cell therapy, and IL-2 therapy.</a> Front Immunol. 12, 657768(2021).</li>
<li>Kenison, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tolerogenic+nanoparticles+suppress+central+nervous+system+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Tolerogenic nanoparticles suppress central nervous system inflammation.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 117 (50), 32017-32028 (2020).</li>
<li>Neshat, S. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improvement+of+islet+engrafts+via+Treg+induction+using+immunomodulating+polymeric+tolerogenic+microparticles%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Biomater+Sci+Eng%22%5BJournal%5D)">Improvement of islet engrafts via Treg induction using immunomodulating polymeric tolerogenic microparticles.</a> ACS Biomater Sci Eng. 9 (6), 3522-3534 (2023).</li>
<li>Deak, P., Knight, R., Esser-Kahn, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Robust+tolerogenic+dendritic+cells+via+push%2Fpull+pairing+of+toll-like-receptor+agonists+and+immunomodulators+reduces+EAE%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Robust tolerogenic dendritic cells via push/pull pairing of toll-like-receptor agonists and immunomodulators reduces EAE.</a> Biomaterials. 286, 121571(2022).</li>
<li>Møller, S. H., Wang, L., Ho, P. -C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+programming+in+dendritic+cells+tailors+immune+responses+and+homeostasis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Mol+Immunoly%22%5BJournal%5D)">Metabolic programming in dendritic cells tailors immune responses and homeostasis.</a> Cell Mol Immunoly. 19 (3), 370-383 (2022).</li>
<li>Adamik, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+metabolic+states+guide+maturation+of+inflammatory+and+tolerogenic+dendritic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Comm%22%5BJournal%5D)">Distinct metabolic states guide maturation of inflammatory and tolerogenic dendritic cells.</a> Nat Comm. 13 (1), 5184(2022).</li>
<li>Hals, I. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Investigating+optimal+%CE%B2-cell-preserving+treatment+in+latent+autoimmune+diabetes+in+adults%3A+Results+from+a+21-month+randomized+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+Obes+Metab%22%5BJournal%5D)">Investigating optimal β-cell-preserving treatment in latent autoimmune diabetes in adults: Results from a 21-month randomized trial.</a> Diabetes Obes Metab. 21 (10), 2219-2227 (2019).</li>
<li>Gammon, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineering+the+lymph+node+environment+promotes+antigen-specific+efficacy+in+type+1+diabetes+and+islet+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Comm%22%5BJournal%5D)">Engineering the lymph node environment promotes antigen-specific efficacy in type 1 diabetes and islet transplantation.</a> Nat Comm. 14 (1), 681(2023).</li>
<li>Sim, W. J., Malinarich, F., Fairhurst, A. -M., Connolly, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+immature%2C+mature+and+tolerogenic+dendritic+cells+with+differing+metabolic+phenotypes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Generation of immature, mature and tolerogenic dendritic cells with differing metabolic phenotypes.</a> J Vis Exp. (112), e54128(2016).</li>
<li>Jia, S., Kim, J., Esser-Kahn, A. P., Deak, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-throughput+screening+identification+of+novel+immunomodulatory+combinations+for+the+generation+of+tolerogenic+dendritic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Med%22%5BJournal%5D)">High-throughput screening identification of novel immunomodulatory combinations for the generation of tolerogenic dendritic cells.</a> Front Med. 10, 1298424(2024).</li>
<li>Dinh, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+cryopreservation+of+highly+viable+human+peripheral+blood+mononuclear+cells+from+whole+blood%3A+A+guide+for+beginners%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Isolation and cryopreservation of highly viable human peripheral blood mononuclear cells from whole blood: A guide for beginners.</a> J Vis Exp. (212), e66794(2024).</li>
<li>Akkaya, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulatory+T+cells+mediate+specific+suppression+by+depleting+peptide-MHC+class+II+from+dendritic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Immunol%22%5BJournal%5D)">Regulatory T cells mediate specific suppression by depleting peptide-MHC class II from dendritic cells.</a> Nat Immunol. 20 (2), 218-231 (2019).</li>
<li>Stallone, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((mTOR+inhibitors+effects+on+regulatory+T+cells+and+on+dendritic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Trans+Med%22%5BJournal%5D)">mTOR inhibitors effects on regulatory T cells and on dendritic cells.</a> J Trans Med. 14 (1), 152(2016).</li>
<li>Dahlqvist, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modulatory+effect+of+rapamycin+and+tacrolimus+on+monocyte-derived+dendritic+cells+phenotype+and+function%5BTitle%5D)+AND+%22Immunobiology%22%5BJournal%5D)">Modulatory effect of rapamycin and tacrolimus on monocyte-derived dendritic cells phenotype and function.</a> Immunobiology. 226 (1), 152031(2021).</li>
<li>Cimen Bozkus, C., Blazquez, A. B., Enokida, T., Bhardwaj, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+T-cell-based+immunogenicity+protocol+for+evaluating+human+antigen-specific+responses%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">A T-cell-based immunogenicity protocol for evaluating human antigen-specific responses.</a> STAR Protoc. 2 (3), 100758(2021).</li>
<li>Nakayama, M., Michels, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determining+antigen+specificity+of+human+islet+infiltrating+T+cells+in+type+1+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Determining antigen specificity of human islet infiltrating T cells in type 1 diabetes.</a> Front Immunol. 10, 365(2019).</li>
<li>Gregori, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differentiation+of+type+1+T+regulatory+cells+%28Tr1%29+by+tolerogenic+DC-10+requires+the+IL-10-dependent+ILT4%2FHLA-G+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Differentiation of type 1 T regulatory cells (Tr1) by tolerogenic DC-10 requires the IL-10-dependent ILT4/HLA-G pathway.</a> Blood. 116 (6), 935-944 (2010).</li>
<li>Taner, T., Hackstein, H., Wang, Z., Morelli, A. E., Thomson, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapamycin-treated%2C+alloantigen-pulsed+host+dendritic+cells+induce+Ag-specific+T+cell+regulation+and+prolong+graft+survival%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transpl%22%5BJournal%5D)">Rapamycin-treated, alloantigen-pulsed host dendritic cells induce Ag-specific T cell regulation and prolong graft survival.</a> Am J Transpl. 5 (2), 228-236 (2005).</li>
<li>Baroja-Mazo, A., Revilla-Nuin, B., Ramírez, P., Pons, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunosuppressive+potency+of+mechanistic+target+of+rapamycin+inhibitors+in+solid-organ+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22World+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">Immunosuppressive potency of mechanistic target of rapamycin inhibitors in solid-organ transplantation.</a> World J Transplant. 6 (1), 183-192 (2016).</li>
<li>Phillips, B. E., Garciafigueroa, Y., Trucco, M., Giannoukakis, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+tolerogenic+dendritic+cells%3A+Exploring+therapeutic+impact+on+human+autoimmune+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">Clinical tolerogenic dendritic cells: Exploring therapeutic impact on human autoimmune disease.</a> Front Immunol. 8, 1279(2017).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0.1-10 ve mikro; L Filtrelenmiş Pipet uçları</td><td>VWR</td><td>76322-158</td><td>Genel Hücre Kültürü</td></tr><tr><td>1.5 mL Santrifüj Tüpü</td><td>VWR</td><td>77508-358</td><td>Genel Hücre Kültürü</td></tr><tr><td>10 mL Serolojik Pipetler</td><td>VWR</td><td>414004-267</td><td>Genel Hücre Kültürü</td></tr><tr><td>100-1000 &mikro; L Filtreli Pipet uçları</td><td>VWR</td><td>76322-164</td><td>Genel Hücre Kültürü</td></tr><tr><td>15 mL Konik Tüp</td><td>VWR</td><td>77508-212</td><td>Genel Hücre Kültürü</td></tr><tr><td>20-200 & mikro; L Filtreli Pipet uçları</td><td>VWR</td><td>76322-160</td><td>Genel Hücre Kültürü</td></tr><tr><td>2-Merkaptoetanol</td><td>MP Biyomedikal</td><td>194834</td><td>T Hücre Kültürü</td></tr><tr><td>50 mL Konik Boru</td><td>VWR</td><td>21008-736</td><td>Genel Hücre Kültürü</td></tr><tr><td>60 x 15 mm Çanak, Nunclon Delta</td><td>Thermo Fischer</td><td>150326</td><td>Genel Hücre Kültürü</td></tr><tr><td>96 Kuyu Konik (V) Alt Plaka, İşlem Görmemiş Yüzey</td><td>Thermo Fischer</td><td>277143</td><td>Genel Hücre Kültürü</td></tr><tr><td>96 kuyulu Düz Tabanlı Plaka</td><td>Thermo Fischer</td><td>161093</td><td>Genel Hücre Kültürü</td></tr><tr><td>APC / Siyanin7 anti-insan CD272 (BTLA) Antikor</td><td>Biyoefsanesi</td><td>344518</td><td>Akış Sitometrisi</td></tr><tr><td>Attune NxT (Kırmızı / Mavi Lazer, 7 Kanal)</td> <td>Thermo Fischer</td><td>A24863</td><td>Akış Sitometrisi</td></tr><tr><td>BSA</td><td>Thermo Fischer</td><td>15260-037</td><td>Genel Hücre Kültür</td></tr><tr><td>CD14 Monoklonal Antikor (61D3), PE</td><td>Thermo Fischer</td><td>12-0149-42</td><td>Flow Sitometri</td></tr><tr><td>CD1c Monoklonal Antikor (L161), PE-Siyanin7</td><td>Thermo Fischer</td><td>25-0015-42</td><td>Akış Sitometrisi</td></tr><tr><td>CD209 (DC-SIGN) Monoklonal Antikor (eB-h209), PerCP-Cyanine5.5</td><td>Thermo Fischer</td><td>45-2099-42</td><td>Flow Sitometri</td></tr><tr><td>CD25 Monoklonal Antikor (CD25-4E3), APC</td><td>Thermo Fischer</td><td>17-0257-42</td><td>Akış Sitometrisi</td></tr><tr><td>CD274 (PD-L1, B7-H1) Monoklonal Antikor (MIH1), PE</td><td>Termo Fischer</td><td>12-5983-42</td><td>Akış Sitometrisi</td></tr><tr><td>CD4 Monoklonal Antikor (RPA-T4), Alexa Fluor 488</td><td>Thermo Fischer</td><td>53-0049-42</td><td>Akış Sitometrisi</td></tr><tr><td>CD40 Monoklonal Antikor (5C3), APC</td><td>Thermo Fischer</td><td>17-0409-42</td><td>Akış Sitometrisi</td></tr><tr><td>CD40 Monoklonal Antikor (5C3), APC-eFluor 780</td><td>Thermo Fischer</td><td>47-0409-42</td><td>Flow Sitometri</td></tr><tr><td>CD69 Monoklonal Antikor (FN50), PE</td><td>Thermo Fischer</td><td>MA1-10276</td><td>Flow Sitometri</td></tr><tr><td>CD86 Monoklonal Antikor (BU63), FITC</td><td>Thermo Fischer</td><td>MHCD8601</td><td>Flow Sitometri</td></tr><tr><td>CD8a Monoklonal Antikor (RPA-T8), PE-Siyanin7</td><td>Thermo Fischer</td><td>25-0088-42</td><td>Flow Sitometri</td></tr><tr><td>Konik Alt (V-kuyulu) 96 Kuyulu Plaka</td><td>Thermo Fischer</td><td>2605</td><td>Akış Sitometrisi</td></tr><tr><td>Kriyojenik Şişeler, 2 mL</td><td>Thermo Fischer</td><td>430488</td><td>T Hücre Kültürü</td></tr><tr><td>Dimetilsülfoksit (DMSO), Sıralama Sınıfı</td><td>Thermo Fischer</td><td>20688</td><td>Genel Hücre Kültürü</td></tr><tr><td>DPBS</td><td>Thermo Fischer</td><td>14200166</td><td>Genel Hücre Kültürü</td></tr><tr><td>EasySep İnsan Monosit İzolasyon Kiti</td><td>Kök Hücre Teknolojileri</td><td>19359</td><td>Hücre Ayırma</td></tr><tr><td>EasySep İnsan T Hücre İzolasyon Kiti</td><td>Kök Hücre Teknolojileri</td><td>17951</td><td>Hücre Ayırma</td></tr><tr><td>EasySep Mıknatıslı</td><td>Kök Hücre Teknolojileri</td><td>18000</td><td>Hücre Ayırma</td></tr><tr><td>EDTA</td><td>Thermo Fischer</td><td>AIM9260G</td><td>Genel Hücre Kültürü</td></tr><tr><td>Falcon Yuvarlak Tabanlı Polistiren Tüpler, 5 mL</td><td>Kök Hücre Teknolojileri</td><td>38025</td><td>Hücre Ayırma</td></tr><tr><td>Fc Reseptör Bağlanma İnhibitörü Poliklonal Antikor</td><td>Thermo Fischer</td><td>14-9161-73</td><td>Akış Sitometrisi</td></tr><tr><td>Fetal Sığır Serumu</td><td>Thermo Fischer</td><td>A5670701</td><td>Genel Hücre Kültürü</td></tr><tr><td>Sabitlenebilir Canlılık Boyası eFluor 780</td><td>Thermo Fischer</td><td>65-0865-18</td><td>Akış Sitometrisi</td></tr><tr><td>Foxp3 / Transkripsiyon Faktörü Boyama Tampon Seti</td><td>Thermo Fischer</td><td>00-5523-00</td><td>Akış Sitometrisi</td></tr><tr><td>FOXP3 Monoklonal Antikor (PCH101), PE-Siyanin5.5</td><td>Thermo Fischer</td><td>35-4776-42</td><td>Akış Sitometrisi</td></tr><tr><td>HBSS</td><td>Thermo Fischer</td><td>14170-112</td><td>Genel Hücre Kültürü</td></tr><tr><td>Isıyla İnaktive Edilmiş Fetal Sığır Serumu</td><td>Thermo Fischer</td><td>A5670801</td><td>Genel Hücre Kültürü</td></tr><tr><td>HEPES (1 M)</td><td>Thermo Fischer</td><td>15630106</td><td>moDC Hücresi Kültür</td></tr><tr><td>HLA-DR Monoklonal Antikor (L243), Alexa Fluor 488</td><td>Thermo Fischer</td><td>A51009</td><td>Akış Sitometrisi</td></tr><tr><td>İnsan CD3 / CD28 / CD2 T Hücre Aktivatörü</td><td>Kök Hücre Teknolojileri</td><td>10970</td><td>T Hücre Kültürü</td></tr><tr><td>İnsan GM-CSF Rekombinant Protein</td><td>Thermo Fischer</td><td>300-03</td><td>moDC Hücre Kültürü</td></tr><tr><td>İnsan IL-10 ELISA Kiti, Yüksek Hassasiyetli</td><td>Thermo Fischer</td><td>BMS215-2HS</td><td>ELISA (ELISA)</td></tr><tr><td>İnsan IL-4, Hayvansız Rekombinant Protein</td><td>Thermo Fischer</td><td>AF-200-04</td><td>moDC Hücre Kültürü</td></tr><tr><td>İnsan PBMC (Taze İzole)</td><td>UPenn HIC</td><td>N/A</td><td>Hücreleri</td></tr><tr><td>İnsan TNF alfa ELISA Kiti</td><td>Thermo Fischer</td><td>BMS223-4</td><td>ELISA</td></tr><tr><td>Işık Mikroskobu (DMi1)</td><td>Lucia</td><td>391240</td><td>Genel Hücre Kültürü</td></tr><tr><td>Lipopolisakkarit (LPS)</td><td>İnvivojen</td><td>tlrl-eblps</td><td>moDC Hücre Kültürü</td></tr><tr><td>CANLI/ÖLÜ Sabitlenebilir Yakın IR Ölü Hücre Leke Kiti</td><td>Thermo Fischer</td><td>L34975</td><td>Akış Sitometrisi</td></tr><tr><td>MEM Esansiyel Olmayan Amino Asit Çözeltisi (100x)</td><td>Thermo Fischer</td><td>11140050</td><td>T Hücre Kültürü</td></tr><tr><td>Penisilin-Streptomisin (100x)</td><td>Thermo Fischer</td><td>15140122</td><td>Genel Hücre Kültürü</td></tr><tr><td>Pipet Kontrol Cihazı</td><td>VWR</td><td>77575-370</td><td>Genel Hücre Kültürü</td></tr><tr><td>Rapamisin, %98+</td> <td>Thermo Fischer</td><td>J62473. MF</td><td>moDC Hücre Kültürü</td></tr><tr><td>RPMI 1640, Glutamax</td><td>Thermo Fischer</td><td>61870-036</td><td>ile Genel Hücre Kültürü</td></tr><tr><td>Ayırma Tamponu</td><td>Kök Hücre Teknolojileri</td><td>20144</td><td>Hücre Ayırma</td></tr><tr><td>T Hücre Stimülasyon Kokteyli (500x)</td><td>Thermo Fischer</td><td>00-4970-93</td><td>T Hücre Kültürü</td></tr><tr><td>UltraComp eBead Plus Kompanzasyon</td><td>Boncukları Thermo Fischer</td><td>01-3333-41</td><td>Akış Sitometri</td></tr><tr><td>Değişken Pipet Seti</td><td>Fischer Scientific</td><td>05-403-152</td><td>Genel Hücre Kültürü</td></tr></tbody></table>

İnsan cd14+ monositlerinden tolerojenik dendritik hücrelerin Üretilmesi için İmmünomodülatör ajanları test etmek İçin basit ve etkili bir yöntem

A Simple and Efficient Method for Testing Immunomodulatory Agents for Generation of Tolerogenic Dendritic Cells from Human CD14+ Monocytes

İnsan PBMC'leri için bir protokol tanımladık, ticari olarak temin edilebilen manyetik ayırma kitlerini kullanarak hem CD3 + T hücrelerini hem de CD14 + monositlerini izole ettik, monositleri GM-CSF ve IL-4 kullanarak CD14-, HLA-DR +, CD141 +, CD1c + moDC'lere farklılaştırdık, 24 saat tedavi ettik ve 72 saat boyunca anti-CD3 / CD28 stimülasyonu ile otolog T hücreleri ile kokültür yaptık. Deneysel bir şema Şekil 1'de gösterilmiş...

İnsan CD14+ Monositlerinden Tolerojenik Dendritik Hücrelerin Üretilmesi için İmmünomodülatör Ajanları Test Etmek İçin Basit ve Etkili Bir Yöntem

Tolerogenic dendritic cells (tolDCs) are a subset of dendritic cells (DCs) that are known to influence na&#239;ve T cells toward a regulatory T cell ...

a-simple-efficient-method-for-testing-immunomodulatory-agents-for

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Dendritik hücreler tarafından ikincil lenfoid organlara Antijen sunumu T hücre aracılı adaptif immün yanıt başlatılması için çok önemlidir. Burada kemik iliği kültürü elde edilen fare dendritik hücreler, aktivasyon, 2-foton görüntüleme için etiketleme göstermektedir.

Kemik İliği Üretimi 2-foton Görüntüleme Kullanım murin Dendritik Hücreler Türetilmiş

Bu video, insan monositlerinden olgunlaşmamış, olgun ve tolerojenik dendritik hücrelerin veya DC'lerin oluşumunu göstermektedir. Monositlerin büyüme faktörleri ve sitokinlerle inkübasyonu, olgunlaşmamış DC'lerin üretimine yol açar. İmmün düzenleyici moleküllere yanıt olarak, olgunlaşmamış DC'ler tolerojenik ve olgun DC'lere farklılaşır.

Monositlerden Olgunlaşmamış, Olgun ve Tolerojenik Dendritik Hücrelerin Üretilmesi

Bu videoda, immünomodülatör bir farmakolojik ajan kullanarak dendritik hücreleri (DC'ler) tolerojenik DC'lere (TolDC'ler) dönüştürme yöntemi gösterilmektedir. Bu dönüşüm, CD4 + T hücreleri üzerindeki immünosüpresif etkileri yoluyla TolDC fonksiyonunun değerlendirilmesiyle doğrulanır.

İmmünomodülatör Farmakolojik Bir Ajanın Dendritik Hücreler ve CD4+ T Hücreleri Arasındaki Etkileşim Üzerine Etkisi

Olgunlaşmamış dendritik hücreler, bağışıklık ve tolerans arasındaki dengeyi düzenlemek için seçici olarak tolerojenik veya olgun dendritik hücrelere farklılaştırılabilir. Bu çalışma, metabolik fenotiplerde farklılık gösteren olgunlaşmamış monosit türevli dendritik hücrelerden (moDC'ler), in vitro tolerojenik ve olgun moDC'lerden üretmek için bir araç sunmaktadır.

Metabolik fenotipleri farklı olarak sahip Olgunlaşmamış, Olgun ve tolerojenik Dendritik Hücrelerinin Üretimi

Bu çalışma, in vitro dendritik hücreler (DC'ler) elde etmek için iki farklı insan monosit izolasyonu yöntemini karşılaştırmaktadır. Monositler yapışma ile seçilir veya manyetik ayırma ile negatif olarak zenginleştirilir. Monosit verimi ve canlılığı ile MDDC canlılığı, proliferasyonu ve CD11c/CD14 yüzey marker ekspresyonu her iki yöntem arasında karşılaştırılacaktır.

Görüntüleme Sitometrisi ile İnsan Monosit türetilmiş dendritik hücrelerle Karakterizasyonu: İki Monosit İzolasyon Protokoller Arasında Bir Karşılaştırma

Burada, insan anti-pıhtılaşmış kanının yoğunluk gradyanlı santrifüjlenmesinden sonra periferik kan mononükleer hücrelerinden manyetik boncuk ayrılması ile monositlerin nasıl izole edildiğini gösteriyoruz. 5 günlük inkübasyonun ardından, insan monositleri olgunlaşmamış dendritik hücrelere ayrılır ve klinik olmayan bir ortamda deneysel prosedürler için hazır hale gelir.

Tüm kan İnsan monosit türevli dendritik hücrelerin oluşumu

Burada, geliştirmek ve tolerogenic dendritik hücreler (TolDCs) karakterize ve onların immunotherapeutic yardımcı programı değerlendirmek için bir protokol mevcut.

Geliştirme ve işlevsel fare Tolerogenic dendritik hücrelerin karakterizasyonu

Transimmünizasyon (TI) cihaz veya plaka ve ilgili protokoller, deneysel bir ortamda, ekstrorporeal fotokemoterapi (ECP) temel özelliklerini çoğaltmak için geliştirilmiştir, fizyolojik olarak aktif, ayarlanabilir dendritik üretimi için izin kanser immünoterapi için hücreler (DCs).

Fizyoloji Immunogenic dendritik hücreler oluşturma için yeni protokol

Burada bağırsak-homing düzenleyici T hücre indüksiyon invivo büyütme için bir protokol sıyoruz. Bu protokolde, dendritik hücreler lokal olarak aktif D vitamini (1,25-dihidroksivitamin D veya 1,25[OH]2D) ve aktif A vitamini (retinoik asit veya RA) de novo yüksek konsantrasyonlarda üretmek için tasarlanır.

Bağırsak-Homing Düzenleyici T Hücre İndüksiyon In Vivo Augmentation

Metodoloji, sığır monosit kaynaklı dendritik hücrelerin (MoDC'ler) oluşumunu ve sığırlarda potansiyel veteriner aşılarının geliştirilmesi sırasında antijenik adayların in vitro değerlendirilmesi için uygulamalarını açıklamaktadır.

Sığır Monosit Kaynaklı Dendritik Hücreler Kullanılarak Aşı İmmünojenitesinin Belirlenmesi

Bir sialidaz tedavisi kullanılarak izole edilmiş periferik kan mononükleer hücrelerinden (PBMC'ler) de-sialillenmiş insan monosit türevli dendritik hücreler (mo-DC'ler) oluşturmak için benzersiz, kapsamlı bir protokol sunulmaktadır. Ayrıca, mo-DC'lerin fenotipik ve fonksiyonel karakterizasyonunu değerlendirmek ve sialidaz tedavisinin mo-DC'lerin olgunlaşma seviyesini nasıl iyileştirdiğini değerlendirmek için yöntemler açıklanmaktadır.

Farklı Sialillenmiş Fenotiplere Sahip Monosit Kaynaklı Dendritik Hücrelerin Üretimi

Öğrenin, insan CD14+ monositlerinden tolerojenik dendritik hücre üretmek için immünomodülatör ajanları nasıl test edeceğinizi. Bu yöntem, otoimmün ve transplantasyon araştırmalarında regülatuar T hücre indüksiyonu için kritik öneme sahiptir.

İnsan CD14+ Monositlerinden Tolerojenik Dendritik Hücrelerin Üretilmesi için İmmünomodülatör Ajanları Test Etmek İçin Basit ve Etkili Bir Yöntem (Video) | JoVE Journal

İnsan CD14⁺ Monositlerinden Tolerojenik Dendritik Hücrelerin Üretilmesi için İmmünomodülatör Ajanları Test Etmek İçin Basit ve Etkili Bir Yöntem

Daha fazla video keşfet