Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Science Education
Lab Animal Research

A subscription to JoVE is required to view this content.

JoVE Science Education Lab Animal Research
אבחון נקרופסיה וקציר רקמות
Blood Withdrawal I
Science Education (Lab Animal Research)
Blood Withdrawal I
Rodent Identification II
Science Education (Lab Animal Research)
Rodent Identification II
 
Automatic Translation
Add to Playlist
Click here for the English version

אבחון נקרופסיה וקציר רקמות

Automatic Translation

Overview

מקור: קיי סטיוארט, RVT, RLATG, CMAR; ואלרי א. שרודר, אר.די.ג'י, אר-אל-ג'י. אוניברסיטת נוטרדאם, IN

ניסויים בבעלי חיים רבים מסתמכים על נקודות זמן איסוף נתונים סופיות שנאספו מקציר ובדיקה של איברים ורקמות. השימוש בשיטות מתאימות לאיסוף איברים ורקמות יכול להשפיע על איכות הדגימות וניתוח הנתונים שלקט לבדיקת הרקמות. שיטת המתת החסד של החיה יכולה גם להשפיע על איכות הדגימות. כתב יד זה יתווה טכניקות נמק מתאימות לחולדות.

Principles

שיטת המתת החסד הנפוצה ביותר לעכברים וחולדות היא מנת יתר של גז פחמן דו חמצני (CO2). בהתאם לאיגוד הרפואי הווטרינרי האמריקאי (AVMA), השימוש בפחמן דוחמצני מקובל בתנאים הממזערים סלידה ומצוקה. 1 בעלי החיים נשארים בכלוב הביתי שלהם, אשר ממוקם לתוך תא. CO2 הוא הציג בהדרגה לתוך התא בשיעור עקירה מ 10% עד 30% של נפח התא / דקה, מה שגורם לבעלי החיים לאבד את ההכרה לפני תפיסת הכאב הקשורים הפעלת nociceptor על ידי חומצה פחמתית. לאחר מכן הזרימה נשמרת בתא לאחר התרחשות דום נשימה כדי להבטיח שהחיה מתה. מנת יתר של הרדמה במשאף מקובלת גם, במיוחד עבור פרויקטים הדורשים שימוש ברקמת ריאה, כמו CO2 גורם נזק לרקמת הריאה. הדממה של החיה עשוי להידרש גם עבור כמה ניסויים כדי להפחית את נפח הדם ברקמות.

הקלטה מדויקת של כל הממצאים חיונית במהלך נמק. יש ליזום טופס המתעד היסטוריה מלאה של החיה, כולל זיהוי בעלי חיים, מין, תנאי דיור, תאריך לידה, תאריך מוות, מספר מחקר /מספר פרוטוקול, ואת שמו של החוקר העיקרי. בדיקה פנימית גסה מתבצעת כאשר חללי הגוף נחשפים לחשוף את האיברים הפנימיים. יש לציין כל חריגה ברורה. 2

נקרופסיה וקציר רקמות חייבים להתחיל מיד לאחר המתת חסד של החיה, כמו דליפת חיידקים ממערכת העיכול יכול לבלבל כמה בדיקות. יש לראות את האיברים הפנימיים החל מחלל הבטן ועובר לחלל בית החזה. לפני הסרת כל דגימות רקמה, חשוב להתבונן באיברים במקום. 2 קציר איברים ורקמות לבדיקה היסתולוגית דורש כי הרקמות מוכנות כראוי. דגימות רקמה עבור היסתולוגיה צריך להיות 0.5-1 ס"מ בעובי כדי לאפשר חדירה מספקת של הפתרון הקיבוינטיבי. הקיבעון משמר רקמות ביולוגיות המונעות ריקבון, אוטוליזה ותיקון. זה גם עוצר כל תגובות ביוכימיות מתמשכות ועלול להגביר את הכוח המכני או היציבות של הרקמות המטופלות. המטרה הרחבה של קיבוע רקמות היא לשמר תאים ורכיבי רקמות כדי לאפשר הכנת חלקים דקים ומוכתמים. אלא אם צוין אחרת, הקיבעון הנפוץ ביותר הוא 10% פורמלין ניטרלי." פורמרין מוכן לשימוש של 10% עם אגירה נייטרלית זמין מסחרית מספקים גדולים. 3

Figure 1
איור 1. איברי בטן ובית החזה של חולדה נקבה.

Figure 2
איור 2. איברי בטן ובית החזה של חולדה זכרית.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Procedure

1. בחינה חיצונית

בדיקה חיצונית גסה של הגוף, הכוללת בדיקה חזותית של הגוף עבור נגעים ומסות, צריכה להתבצע כשלב ראשוני בנקרופסיה. יש לבדוק את מעיל השיער עבור אזורים של נשירת שיער. השיניים והציפורניים מוערכים לצמיחה מוגזמת או ללבוש. יש לציין כל כתמים של הפרווה בפה, nares, עיניים, anal, ופתחים איברי המין יש לציין. בדיקות סרט, גירוד העור ובדיקות פרווה יש לבצע כדי לזהות טפילים חיצוניים (ראה נהלים להלן).

  1. בדיקת קלטת
    1. הציוד הנדרש לבדיקת סרט הדבקה כולל כפפות, רצועה של סרט צלופן שקוף, שקופית מיקרוסקופ זכוכית ומספריים.
    2. כפפות תמיד משוחקות בעת הטיפול בקלטת, שכן הדבק ירים שמנים ותאי עור מהאצבעות, יטשטש ממצאים או יגרום לבלבול בעת הערכת השקופית.
    3. גזור פיסת סרט שהיא מעט צרה יותר מהרוחב, וקצרה מהאורך של שקופית המיקרוסקופ.
    4. לחץ בזהירות על הצד הדביק של הקלטת לפי הטבעת והסביבה, והסר אותו במהירות.
    5. באמצעות הקצה הנגדי של הקלטת, לחץ עליו בין השכמות והסר אותו במהירות.
    6. החל את הקלטת על שקופית המיקרוסקופ.
    7. בדיקת הקלטת מוכנה לבדיקה מיקרוסקופית. ביצי טפיל נראות בהגדלה פי 4, אך לאחר מכן יש לבחון בהגדלה פי 10 כדי לזהות כראוי את המינים.
    8. חשוב להימנע מלגעת בצד הדבק של הקלטת. הקלטת תרים פסולת מהידיים עם הכפפות ותקשה על קריאת השקופית.
  2. גירוד העור
    1. בדיקת גירוד העור מבוצעת על כל אזורים של התקרחות, נגעים בעור, או excoriation.
    2. הציוד הנדרש לגירוד העור הוא מגלשת מיקרוסקופ זכוכית נקייה, שמן מינרלי, ומרית מתכת או להב אזמל.
    3. מניחים כמה טיפות של שמן מינרלי על שקופית המיקרוסקופ.
    4. צבוט את העור לקפל בקצה הנגע או אזור העניין.
    5. מניחים כמות קטנה של שמן מינרלי על העור.
    6. מניחים את קצה המרית או להב האזמל על העור, ומגרדים כנגד כיוון צמיחת השיער.
    7. ממשיכים לגרד עד שנראה כמות קטנה של אדמומיות על העור.
    8. מניחים את השיער והרקמה מגרדים מפני העור לתוך השמן על שקופית המיקרוסקופ. במידת הצורך, מורחים את החומר כך שהוא מופץ באופן שווה בשמן.
    9. השקופית מוכנה כעת להיבדק מתחת למיקרוסקופ. אם תרצה, ניתן להחיל כיסוי על טיפת השמן בשקופית. בדוק את השקופית בהגדלה של פי 4 ו- 10.
  3. מבחן פלט
    1. בדיקת הפרווה היא הבדיקה החיצונית האחרונה שבוצעה; עם זאת, זה נעשה למעשה לאחר הבדיקה הפנימית הושלמה.
    2. החיה ממוקמת בצלחת פטרי או פלסטיק לאחר שכל דגימות האיברים הפנימיות נאספו.
    3. המנה ממוקמת במקרר למשך 15 דקות.
    4. לאחר 15 דקות, המנה ממוקמת תחת מיקרוסקופ מנתח ואת הפרווה נבדק לטפילים חיצוניים. רוב קרדית הפרווה תעבור לקצוות השערות והן נצפות בקלות.

2. בדיקה פנימית ברוטו של חלל הבטן

  1. כריתת העור
    1. חתך קטן נעשה רק קהורי לאגן אצל הנקבות ומעל ההקדמה אצל הזכרים.
    2. החתך בעור מורחב לסנטר.
    3. ניתוח קהה משמש כדי לשחרר את העור מן fascia והשרירים.
    4. חתכים רוחביים נעשים הקדמיים לגפיים האחוריות ואחוריים לגפיים הקדמיות. יש להזהירות לא לנתק את כלי הדם באזור האקסילרי.
    5. השתמש בניתוח קהה כדי לחשוף את אזור צוואר הרחם ואת החזה. טיפול נוסף צריך להיות מופעל כדי למנוע קרע של כלי הצוואר וערר האוויר בצוואר.
  2. בלוטות החלב
    1. אצל נקבות, בדוק את רקמת המאמרי כדי לחפש גושים, שינויי צבע או חריגות.
    2. נקבות מניקות או בהריון יהיה נפח רקמת החלב מוגברת, חלב עשוי להיות נוכח.
    3. רקמת המכפלה נמצאת מראש החזה במנובריום אל פתח איברי המין על פני השטח הגחון, ומשתרעת לרוחב משני הצדדים כמעט נוגעת במשטח הגפי בירכיים ובכתפיים.
    4. כריתה של בלוטות החלב דורשת אחיזה בקצה הבלוטה עם מלקחיים אגודל ושימוש בביתור קהה כדי לשחרר קבצים מצורפים לעור. לאחר הבלוטה הופרדה מן העור, מספריים קשתית ניתן להשתמש כדי לחתוך את כל קבצים מצורפים שנותרו לפני הצבת הבלוטה בתמיסה קבועה.
  3. בלוטות תת עוריות
    1. בלוטות ידועות הן מזווגות וממוקמות רק לפני קדם בחולדה הזכרית. הם נראים גדולים והם בצבע אפור עד צהבהב עם מראה מוקצף.
    2. בלוטות הרוק התת-קרקעיות מזווגות, ממוקמות בלסת התחתונה, ונמשכות לאורך הצוואר עד לירך החזה של המנובריום. יש להם כיסוי קשה והם דבקים היטב בשרירים.
    3. הסרת בלוטות אלה דורשת ניתוח בוטה וטיפול נוסף בעת עבודה באזור צוואר הרחם כדי למנוע קרע של כלי הדם. ניתוח בוטה הוא טכניקה בביתור אנטומי שבו רקמות מופרדות ומבנים בסיסיים חשופים ללא חיתוך.
    4. עבור ניתוח קהה, המספריים משמשים כדי להפיץ רקמות זה מזה, ולא לחתוך אותם לגזרים. הטיפים הסגורים נדחפים לרקמה ואז נפתחים לפיצול רקמות לאורך מישורים טבעיים. תהליך זה דורש סבלנות ומגע עדין, שכן מתיחת הרקמה עלולה לגרום נזק לאיברים וכלי הדם הסמוכים.
    5. הבלוטות, לאחר ששוחררו מהשרירים הבסיסיים, מוסרות וכל שאריות ההחזקה מנותקות.
    6. הבלוטות דורשות לפחות חתך אחד כדי לאפשר חדירה של הקיבויעה.
    7. שומן תת עורי מוערך עבור כמות ותצהיר. בעל חיים שמן עשוי להיות כמות גדולה של שומן עם העור מרגיש מעובה. בעלי חיים מיובשים יהיו גמישות מופחתת של העור, וזה ירגיש דק יותר.
  4. שריר
    1. שימו לב לשרירים הבטן, הבין-צילומית והחשופים של הצוואר והגפיים. שים לב לכל עיבוי חריג, מסות או שינוי צבע.
    2. אם יש צורך בשריר לניתוח, בחר וחתוך את המדגם לפני נטילת איברי בטן כדי להפחית את זיהום הדם.
  5. פתיחת חלל הגוף
    1. חתך רוחבי קטן נעשה בנקודה הקדחתנית ביותר של שריר הבטן החשוף.
    2. מרים את השריר הרחק מהאיברים, לחתוך לאורך אלבה לינאה כדי xiphoid.
    3. חותכים את שרירי הבטן מקו האמצע לרוחב, ממש מעל הגפיים האחוריות משני הצדדים.
    4. חותכים את שריר הבטן לאורך עקומת הצלעות משני הצדדים.
  6. שומן בטן
    1. להעריך את הכמות והצטברות של שומן הגוף. בעל חיים בריא יהיה רפידות שומן בבטן וכמה שומן לאורך פני השטח של הבטן בחלל הבטן. בעל חיים רזה יתר על המידה, או חיה צעירה מאוד, לא יהיו כמויות ניכרות של שומן סביב הכליות.
    2. שימו לב לצבע שומן הגוף ושימו לב לחריגות.

3. איברי בטן

  1. כבד
    1. בדרך כלל, צבע הכבד צריך להיות אדום כהה. השוליים צריכים להיות חלקים ויש להם קצה חד. לכבד לא תקין יהיה קצה מעובה ויכולים להיות חריצים או קצוות מסולסלים.
    2. יש להקפיד בעת טיפול בכבד, שכן הוא רקמה פריך. כל הפרעה לשלמות האיבר תגרום לדם לדלוף לחלל הגוף ולהסתיר את האיברים.
    3. לשקף בעדינות את הכבד הרחק הסרעפת, ולעשות לחתוך דרך כלי הדם מראש לכבד.
    4. משקפים את הכבד בחזרה לכיוון הסרעפת ותופסים את הצומת הסיבי המחבר את כל האונות של הכבד באופן מרכזי. הרם את הכבד תוך ניתוק כל ההחזקות למערכת העיכול ולבטן.
    5. הסר את הכבד בחתיכה אחת כתם דם עודף מפני השטח של האיבר. זה עשוי להיות ממוקם באמבט מלוח, או שטוף מלוח סטרילי, לפני חיתוך לתוך קטעים דקים יותר כדי לאפשר חדירה של פתרונות קבועים.
  2. כיס המרה
    1. כיס המרה הוא שק שקוף קטן שלעתים קרובות נראה צהוב עקב הצטברות של מרה. הוא קיים בעכברים, אבל לא בחולדות.
    2. כיס המרה ממוקם בין רוב האונות העליונות של הכבד לאורך קו האמצע. זה בדרך כלל מחובר הסרעפת על ידי frenulum דק שיכול להיקרע בטעות, גורם כיס המרה לקרוע.
    3. כיס המרה ניתן להסיר עם הכבד מופרד מאוחר יותר לבדיקה.
  3. טחול
    1. הטחול הוא אדום כהה וממוקם לאורך העקמומיות התחתונה של הבטן. זה צריך להיות רגיל בצורה, עם משטח מט מעט.
    2. זה בדרך כלל גדול יותר אצל גברים מאשר נקבות. בעלי חיים עם זיהומים טפיליים פנימיים, זיהומים חיידקיים או מחלות דם עשויים להיות טחול מוגדל.
    3. כמו הטחול מסנן תאי דם אדומים פגומים מהמחזור, הוא מלא בדם. בעת הסרת הטחול, הימנע ניקוב האיבר.
    4. כדי להסיר אותו, הטחול הוא הרים ואת ההחזקות לחתוך בין הבטן ואת הטחול.
  4. מערכת העיכול
    1. שינויים לאחר המוות מתרחשים במהירות וכוללים איגום של דם ברקמות, וכתוצאה מכך הופעת חבורות ובלון של המעיים עם גז המיוצר לעתים קרובות על ידי גידול יתר חיידקי. מערכת העיכול נבדקת ביסודיות לאחר שהוסרה מהגוף.
  5. קיבה
    1. הקיבה ממוקמת בקצה הדיסטלי של הוושט. זה נראה שני בונים, הבחנה החלקים השריריים והבלוטות.
    2. הבטן צריכה להיות מוערכת לנוכחות של מזון על ידי תחושה. מכרסמים בדרך כלל לאכול כל הזמן בשל קצב חילוף החומרים גבוה. יש לציין בטן ריקה, שכן היא יכולה להצביע על מחלה.
    3. אין לחתוך את הבטן, כמו התוכן יזהם את האיברים בחלל הבטן.
    4. כדי להסיר את הבטן ממערכת העיכול, הוושט מנותק רק לפני הבטן. אם הבטן היא להיות ממוקמת לתוך מיכל משותף של קיבוץ, חתיכת תפירה ניתן לקשור סביב הוושט כדי למנוע שפיכה של תוכן הקיבה לפני חיתוך.
  6. המעי הדק
    1. המעי הדק מורכב משלושה חלקים: התריסריון, הג'ג'ונום והאיליאום. זה לא יכיל כדורי צואה.
    2. התריסריון הוא קטע קצר יותר מ הסוגר האחורי של הקיבה לתחילת הג'ונום. צינור המרה נכנס למעי הדק בתריסריון, ורקמת הלבלב מחוברת בצורה חזקה יותר לחלק זה של המעי הדק.
    3. הג'ונום הוא החלק המרכזי של המעי הדק.
    4. התיקונים של פייר המורכבים מרקמת לימפה בחלקות אליפסה קטנות - נמצאים על פני השטח הלא-מזנטיים של הג'ונום והאיליאום בחולדה. 3 אלה הם חלק ממערכת החיסון ויכולים להיות מועילים באבחון מחלות חיסוניות.
    5. האילול הוא החלק הדיסטלי של המעי הדק והוא החלק הארוך ביותר, המסיים ב cecum.
  7. צ'קום
    1. cecum הוא צבע ירקרק ורך מאוד.
    2. הוא ממוקם בצומת של המעי הדק והגדול.
    3. תסיסה מתרחשת ב cecum, כך ניקוב של האיבר יגרום ריח רע וזיהום של האיברים עם חיידקים.
  8. מעי גס
    1. המעי הגס מתחיל ב cecum וממשיך לפי הטבעת. זה ניתן לזיהוי בקלות, כמו כדורי צואה ניתן לדמיין בתוך לומן של המעי.
    2. לא צריכים להיות אזורים של דימום או שינוי צבע מיד לאחר המתת חסד.
  9. מזנטריה
    1. המעיים הדקים והגדולים מעוגנים לגוף על ידי mesentery, קרום המכיל כלי דם, שומן, ובלוטות הלימפה.
    2. יש לבדוק בלוטות לימפה מוגדלות ומסות כלשהן לפני הסרת מערכת העיכול.
  10. לבלב
    1. הלבלב הוא איבר מפוזר הממוקם מתחת לקיבה ובין הקפלים הראשונים של התריסריון. זהו שיזוף בהיר לצבע אפור ומורכב מאונות קטנות מרובות עם קצוות לא סדירים.
    2. ייתכן שלא ניתן להסיר את הלבלב בחתיכה אחת.
    3. אם יש לקצור את רקמת הלבלב, יש לעשות זאת לפני הסרת מערכת העיכול.
    4. רקמה המזוהה כלבלב חייבת להיות מתגרה בזהירות הרחק מהרקמה המסטרית המקיפה אותו.
  11. הסרת מערכת העיכול
    1. מערכת העיכול מוסרת כחתיכה אחת, החל מהבטן ומתרחבת לפי הטבעת.
    2. חתך נעשה דרך המעי הגס, רק קהורי לפי הטבעת. ניתן להסיר את כל מערכת העיכול ולהיקטע כל קבצים מצורפים membranous. לאחר מכן ניתן להסיר את מערכת העיכול מן mesentery, לחתוך לחלקים, ולתקן.
    3. בעת הצבת חלקים של המעי לתוך צנצנות המכילות איברים אחרים, זה הכרחי כי הקצוות להיות קשור כדי למנוע זיהום של רקמות עם חיידקי מעיים.
    4. לומן של מערכת העיכול יכול להיחשף על ידי חיתוך אורכו באמצעות מספריים קטנים, קצה עדין. ניתן לשטוף את הפנים לאחר חשיפת הלומן.
    5. מחקרים מסוימים עשויים לדרוש כי חלק המעי יוסר ושוטף ולא לחתוך. על ידי אבטחת מחט קהה לקצה אחד של הרקמה המובאת, תמיסת מלח או פתרון קבוע ניתן לכפות לתוך המעי כדי לשטוף את התוכן.
  12. כליה
    1. הכליות הן איברים מזווגים הממוקמים כנגד שרירי הגב. הכליה הימנית גבוהה יותר מהשמאל. הכליות בבעלי חיים מבוגרים עשויות להיות מוקפות במרבצי שומן, מה שמקשה על הדמיון.
    2. זה בערך בגודל ובצבע של שעועית כליה כהה, ואת המשטחים שלה צריך להיות חלק.
    3. מיד לפני הכליה היא בלוטת יותרת הכליה, המופיעה כמו גוש קטן, ורוד בהיר.
    4. כדי להסיר את הכליה, לבודד אותו באמצעות מלקחיים, לחתוך בין הכליה לבין השופך.
    5. הכליות יש כמוסה החיצונית קשה שניתן לקלף כדי לדמיין טוב יותר את המשטחים. חותכים כליה אחת לשניים לאורך הציר הארוך והכליה השנייה לרוחב. שים לב כל חצץ בתוך הכליה יכול להצביע על נוכחות של גבישים או מרבצים מינרליים.
  13. מערכת הרבייה הנשית
    1. הרחם הוא מבנה בצורת Y. גוף הרחם קצר עם הקרניים המשויך משמאל ומימין. הקרניים מסתיימות בחוצרות והשחלות. אצל נקבה לא שחקנית, הקרניים יהיו ורודות חיוורות ודקות. בחיה בהריון, הקרניים ייראו כהות יותר ויש להם כלי דם בולטים הפועלים בסמוך לקרני הרחם. ככל שההיריון יתקדם, לקרני הרחם תהיה מראה של "מחרוזת פנינים". העוברים המתפתחים ייצרו אזור חיוור בתוך הצופר, וככל שיתפתחו הרחם יימתח והרקמה תהפוך לדלל יותר, ותאפשר הדמיה.
    2. השחלות יהיו ממוקמות ממש מתחת לכליות. יהיה להם משטח מחוספס בשל שלבי התבגרות שונים של הזקיקים. השחלות הציסטיות יהיו של שליש מלא נוזלים. נוזל זה יכול לנוע בין קש בצבע ל sanguineous.
    3. כדי להסיר את השחלות, לחתוך את קבצים מצורפים עורקיים הקדמי ואת החצוצרות אחורי. אם תרצה, השחלות ניתן להוציא מחובר לרחם.
    4. כדי להסיר את הרחם, זה צריך להיות נאחז בעדינות ומתיחה מוחל כדי להיות מסוגל לחתוך מתחת לצוואר הרחם. לאחר החתך, להרים את הגוף ואת הקרניים של הרחם, שבירת כל התקשרות בחלל הגוף.
  14. מערכת הרבייה הגברית
    1. שלפוחיות הזרע הן לבנות, מבנים מזווגים בצורת קרן של איל הממוקמים באופן עורפי לשלפוחית השתן ומחוברים בקו האמצע בבלוטת הערמונית. הגודל משתנה, אבל הם יכולים להיות גדולים כמו cecum.
    2. בלוטת הערמונית ממוקמת סביב שלפוחית השתן בבסיס. רקמה זו היא בדרך כלל שיזוף קל. אצל בעלי חיים מבוגרים יותר, זה עלול להפגין היפרפלזיה. בעלי חיים מבוגרים בדרך כלל יהיה יותר שומן בגוף שעשוי להפוך את הדמיה של בלוטת הערמונית קשה.
    3. האשכים משויכים וממוקמים בסקאקים. המשטח צריך להיות חלק עם כלי דם עדינים ניכר על פני השטח. עכברים וחולדות חסרים טבעת מפשעה או הסוגר, המאפשרת לחיה למשוך את האשכים לחלל הבטן. כדי לדמיין את אלה, לתפוס את רפידות השומן בבטן הממוקמת בבטן התחתונה ולמשוך אותם באופן הקדמי. זה ימשוך את האשכים משק האשכים כדי לאפשר בדיקה. האפידימיס נמצא לאורך השוליים התחתונים של האשכים ומתכודד לכיוון החלק העליון. vas deferens מחובר לסוף האפידימיס ומוביל בחזרה לערמונית.
    4. הסרת האשכים יכולה להתבצע על ידי חיתוך הקובץ המצורף בשק האשכים וחיתוך vas deferens.
    5. הסרת הערמונית ושלפוחיות הזרע דורשת אחיזה בבסיס שלפוחית השתן והרמה, תוך ניתוק ההחזקות מתחת לערמונית.

4. חלל בית החזה

  1. ריאות
    1. הריאות הן בדרך כלל בצבע ורוד בהיר, וספוגיות במרקם עם משטח חלק. עם זאת, המתת חסד עם CO2 יכול לגרום לדימום ריאתי, וכתוצאה מכך כתמים אדומים כהים שיכולים לכסות את כל פני הריאה.
  2. לב
    1. הלב אדום כהה עם ארבעה תאים. החדרים שריריים ומרגישים מוצקים למגע. האטריה בצבע אדום כהה יותר ויושבות בחלק העליון של החדרים. הם הרבה פחות שריריים ונראים רפויים.
    2. שק קרום הלב הוא קרום דק ושקוף המקיף את הלב.
  3. התימוס
    1. התימוס ממוקם באופן ברור אל הלב ויושב מעל קנה הנשימה. זה צריך להיות חלק במרקם.
    2. אצל בעלי חיים צעירים, הוא נראה שזוף עם מרקם שומני.
    3. לבעלי חיים מבוגרים יותר תהיה חדירה של רקמת שומן לתוך התימוס, הגדלתו ולתת את התימוס צבע לבן.
  4. קנה הנשימה
    1. קנה הנשימה משתרע מן האפיגלוטיס לביפורציה של הסימפונות. זהו צינור סחוס וסחוס שהוא גמיש.
    2. זה צריך להיות ברור ולא יש נוזל או נוזל מוקצף בלומן. המתת חסד עם CO2 יכול לגרום לנוזל (erosanguinous ו/או קצף) הצטברות בריאות וקנה הנשימה עקב דימום.
  5. הוושט
    1. הוושט משתרע מחלל הפה לקיבה. זהו צינור דק מאוד השוכן ישירות מאחורי קנה הנשימה ומאחורי הלב, ועובר דרך הסרעפת אל הבטן.
    2. הוושט קשה להסיר, כפי שהוא נקרע בקלות למרות הרקמה היא מתוחה. הסרת הוושט נעשית בקלות רבה ביותר על ידי לנתח אותו הרחק קנה הנשימה לאחר הסרת הלב והריאות.
  6. הסרת איברי בית החזה
    1. הלב והריאות מוסרים בקלות רבה יותר יחד.
    2. מניחים את המלקחיים בניצב אל קנה הנשימה ותופסים את קנה הנשימה בחוזקה, ממש מעל התימוס.
    3. באמצעות המספריים, לעשות לחתוך בניצב קנה הנשימה רק קהור למלקחיים. חתך זה צריך לנתק את קנה הנשימה והוושט.
    4. מבלי לשחרר את האחיזה על קנה הנשימה, הרם את קנה הנשימה למעלה, וצץ כל קבצים מצורפים של הריאות למשטח עמוד השדרה בכלוב הצלעות.
    5. הוושט עשוי להיות חתוך כדי להיות מסוגל להרים את הלב והריאות ללא חלל החזה.
    6. לאחר שהלב מוסר מהגוף, ניתן לשטוף אותו עם תמיסת מלח כדי להסיר שאריות דם וקרישי דם, או שניתן למלא אותו עם קיבוע דרך אבי העורקים.
    7. ברגע שהריאות נקטעות, הן מנופחות עם קיבעון. קשירה ממוקמת באופן רופף סביב קנה הנשימה. מחט המחוברת למזרק המכיל את הקיבעון של בחירה הוא השחלה לתוך לומן של קנה הנשימה. הקשירה מתהדקת סביב המחט, והקובע מוזרק עד שהריאות מנופחות. עם הסרת המחט, הקשירה מתהדקת כדי למנוע דליפה.
  7. חלל הפה
    1. לשון
      1. לשון המכרסמים חלקה.
      2. בדוק את פני השטח עבור נגעים, כולל החלק התחתון.
      3. הלשון נקצרים לעתים רחוקות למעט חקירות מיוחדות כגון מחקרי סרטן הפה.
      4. כדי להסיר את הלשון, לחתוך דרך משטחי buccal בכל צד של חלל הפה למפרק temporal-הלסת התחתונה.
      5. לפרוק את הלסתן ולשקף את maxilla לחשוף את epiglottis ואת הבסיס של הלשון.
      6. באמצעות מלקחיים כדי להאריך את הלשון, לחתוך את ההחזקות מתחת caudally לבסיס הלשון.
      7. שמירה על המתיחה, לחתוך אופקית בבסיס הלשון כדי לשחרר אותו מחלל הפה.
    2. השיניים
      1. שיניים חולדה מורכב משלושה שיניים שיניים ושיניים שיניים שיניים אחת בכל רבע המופרד על ידי דיאסטמה חסרת שיניים. הם מכוסים על ידי אמייל רק בצד הלבה; על פני השטח הפנימיים של השן הוא דנטין.
      2. שיני חולדה הן בדרך כלל צבע צהוב/כתום. צבע זה בולט ביותר על אמייל השן החותכת והוא בשל נוכחות של פיגמנט המכיל ברזל. הצבע מתחיל בערך 21 ימים לאחר הלידה ומעמיק עם הגיל.
      3. בדוק את השיניים לצמיחת יתר או מלולציה.

5. ראש

  1. העיניים
    1. העיניים צריכות להיות שוות בגודלן וברורות של פירוד. הלחמית צריכה להיות חלקה.
    2. כדי להסיר את העיניים, להפעיל לחץ על העור המקיף את העין אחורה ולמטה כדי לבלוט את העין מהמסלול. בעזרת מלקחיים מעוקלים, בודדו את הגלובוס וחתכו את ההחזקות שמחזיקות אותו בשקע.
  2. האוזניים
    1. שימו לב לאוזניים לזיהוי. חלק מהחוקרים מבקשים כי תגי אוזניים ייכללו בדגימות איברים לאישור זהות בעלי חיים.
    2. תעלות האוזן נבדקות עבור נגעים, מסות או הפרשה.
  3. אף
    1. האף הוא ציין נוזל או להפיץ.
    2. הנארים צריכים להיות סימטריים וברורים.

בדיקה שלאחר המוות בעלת משמעות נקרופסיה של קציר איברים ורקמות הם מרכיבים אינטגרליים של ניסויי מעבדה רבים, אשר מסתמכים על נקודות הזמן הסופיות לאיסוף נתונים שנאספו מהניתוחים של האיברים שנקטפו. לכן, חשוב ללמוד את נמק האבחון הנכון וטכניקת קצירת רקמות, שכן ההליך יכול להשפיע באופן משמעותי על איכות הדגימות שנאספו. מצגת זו תבחן את שיטת הניתוח וההפקה של איברי בטן, רבייה ובית החזה מחיות מעבדה.

לפני תחילת ההליך, יש ליזום טופס הכולל היסטוריה מלאה של החיה: מספר זיהוי בעלי חיים, מין, תנאי דיור, תאריך לידה, תאריך מוות, מספר מחקר / פרוטוקול, ואת שמו של החוקר העיקרי.

לאחר מכן, הכינו את אזור הניתוח. הניחו כיסוי ספסל, מגש ניתוח, מכשירים המיועדים לנמק, הכולל מספריים, מלקחיים, להב אזמל סטרילי, חותכי עצמות, בדיקה קהה, מרית קטנה וחומר תפר שאינו נספג. קציר איברים ורקמות לבדיקה היסתולוגית דורש כי הרקמות יישמרו בתמיסה קבועה. אלא אם צוין אחרת, הקיבעון הנפוץ ביותר הוא 10% פורמלין חוצץ נייטרלי. שים לב כי דגימות הרקמה צריך להיות 0.5-1 ס"מ בעובי כדי לאפשר חדירה מספקת של הפתרון הקיבוטיבי. קיבעון מונע ריקבון, אוטוליזה, ו decrefaction; עוצר כל תגובות ביוכימיות מתמשכות; ועשוי להגביר את הכוח המכני והיציבות של הרקמות המטופלות.

שיטת המתת החסד של החיה יכולה גם להשפיע על איכות הדגימות. שיטת המתת החסד הנפוצה ביותר לעכברים וחולדות היא מנת יתר של גז פחמן דו חמצני. בעלי החיים נשארים בכלוב הביתי שלהם, אשר ממוקם, לתוך תא, ופחמן דו חמצני הוא בהדרגה נכנס לחדר בשיעור עקירה של 10-30% של נפח החדר / דקה. זה גורם לבעלי החיים לאבד את ההכרה לפני התפיסה של כאב הקשורה להפעלת nociceptor על ידי חומצה פחמתית. לאחר מכן הזרימה נשמרת בתא עד לדום נשימה והחיה מתה.

לאחר המתת חסד, בצע תחילה בדיקה חיצונית ראשונית על ידי בדיקה חזותית של הפגר עבור נגעים ומסות, צמיחת שיניים מוגזמת, או כל כתם של הפרווה בפה, nares, אוזניים, עיניים ואת פתחי האנאלי ואיברי המין. אם הדבר מוצדק, בצע בדיקת סרט, גירוד עור ובדיקות פרווה כדי לזהות טפילים חיצוניים. לאחר הבדיקה החיצונית הושלמה, הגיע הזמן להתחיל את הנמק, החל מחלל הבטן. שים לב כי לפני הסרת כל דגימות רקמה חשוב להתבונן האיבר במקום.

כדי להתחיל לחתוך את העור, מניחים חתך קטן רק קהורי לאגן אצל הנקבות ומעל ההקדמה אצל הזכרים. לאחר מכן, באמצעות טכניקת הניתוח הבוטה, לשחרר את העור מן fascia ואת השריר. ניתוח בוטה הוא טכניקה בביתור אנטומי שבו רקמות מופרדות ומבנים בסיסיים חשופים ללא חיתוך. בטכניקה זו, המספריים משמשים להפצת רקמות זה מזה ולא כדי לחתוך אותם לגזרים. הטיפים הסגורים נדחפים לרקמה ואז נפתחים לפיצול רקמות לאורך מישורים טבעיים. תהליך זה דורש סבלנות ומגע עדין, שכן מתיחת הרקמה עלולה לגרום נזק לאיברים וכלי הדם הסמוכים. ואז להאריך את החתך לסנטר. הבא לעשות, חוצה חותך הקדמי לגפיים האחוריות ואחוריים לרגליים הקדמיות, ולהשתמש בחיתוך קהה כדי לחשוף את אזור צוואר הרחם ואת החזה. יש לתרגל טיפול נוסף כדי למנוע קרע של כלי הצוואר וערר העורק בעורף.

אצל נקבות, עם העור excised, להתבונן רקמת המאמרי מראש החזה במנובריום אל פתח איברי המין על פני השטח הגחון; הרחבה לרוחב משני הצדדים. הנקה או נקבות בהריון יהיה נפח רקמת החלב מוגברת חלב עשוי להיות נוכח. כדי לחתוך את בלוטות החלב, לתפוס את קצה הרקמה עם מלקחיים ולהשתמש ב ניתוח קהה כדי לשחרר קבצים מצורפים לעור. לאחר הבלוטה הופרדה, זה יכול להיות ממוקם פתרון קבוע לניתוח היסתולוגי לאחר מכן.

בשלב זה, ניתן לצפות בבלוטות הרוק התת-קרקעיות, שזווגות וממוקמות בלסת התחתונה -- הנמשכות לאורך הצוואר עד לקרום החזה של המנובריום. הסרת בלוטות אלה דורשת ניתוח בוטה וטיפול נוסף בעת עבודה באזור צוואר הרחם כדי למנוע קרע של כלי הדם. לאחר ששוחרר מן השרירים הבסיסיים, להרים את הבלוטות ולנתק את כל קבצים מצורפים שיורית. הבלוטות דורשות לפחות חתך אחד כדי לאפשר חדירה של הקיבויעה.

בנוסף, אתה יכול לראות את קנה הנשימה, אשר משתרע מן epiglottis כדי bifurcation של הסימפונות. זהו צינור סחוס וסחוס שהוא גמיש. בעוד בדרך כלל ברור, המתת חסד עם CO2 יכול לגרום הצטברות נוזלים בריאות וקנה הנשימה שנראה כמו נוזל צלול קצף. שומן תת עורי יהיה נוכח גם באזור זה. להעריך אותו עבור כמות ותצהיר. בעל חיים שמן עשוי להיות כמות גדולה של שומן עם העור מרגיש מעובה.

לפני פתיחת חלל הגוף, יש לצפות בשרירי הצוואר, הבין-צילומיים והחשופים, והגפיים לכל עיבוי, גושים או שינוי צבע. כדי לפתוח את חלל הגוף, תחילה לעשות חתך רוחבי קטן בנקודה caudal ביותר של שריר הבטן החשוף. ואז להרים את השריר מן האיברים, לחתוך לאורך אלבה לינאה כדי xiphoid. לאחר מכן, לנתח את השרירים לרוחב מקו האמצע רק מעל הגפיים האחוריות משני הצדדים. לבסוף, לחתוך לאורך העקומה של הצלעות משני הצדדים. לאחר חלל הגוף נפתח, להעריך את הכמות ואת הצטברות של שומן הבטן. בעל חיים בריא יהיה רפידות שומן בבטן וכמה שומן לאורך פני השטח של הבטן בחלל. שים לב לצבע של רקמה זו ולשים לב לכל חריגות.

עכשיו אנחנו מוכנים להתחיל את הקציר של איברי בטן. התחל על ידי איתור הטחול, שהוא אדום כהה וממוקם לאורך העקמומיות התחתונה של הבטן. זה צריך להיות רגיל בצורה עם משטח מט מעט. כדי להסיר את הטחול, להרים את האיבר ולגזור את ההחזקות לבטן.

הקיבה ממוקמת בקצה הדיסטלי של הוושט. זה נראה שני בונים, הבחנה החלקים השריריים והבלוטות. תרגיש את זה לנוכחות של מזון. יש לציין בטן ריקה, שכן היא יכולה להצביע על מחלה. אין לחתוך את הבטן, כמו התוכן יזהם את האיברים בחלל הבטן.

המעי הדק מחוברים בצורה דקיקה ונחותה לקיבה. ישנם שלושה חלקים נפרדים של המעי הדק. הראשון הוא התריסריון - קטע קצר יותר מ הסוגר הקיבה האחורי לתחילת הג'ונום. צינור המרה נכנס לכאן ורקמת הלבלב מחוברת בצורה חזקה יותר לחלק זה של המעי הדק. הג'ג'ונום הוא החלק המרכזי. כתמים של פייר, שהם אזורים אליפטיים קטנים המורכבים מרקמת לימפה, ניתן לראות על פני השטח של jejunum ו ileum. האילול הוא החלק הארוך ביותר של המעי הדק המסתיים ב cecum - הממוקם בצומת של המעי הדק והגדול. cecum נראה ירקרק בצבע והוא רך מאוד.

המעי הגס ממשיך מצקום לפי הטבעת. זה ניתן לזיהוי בקלות כמו כדורי צואה ניתן לדמיין בתוך לומן של מבנה זה. המעיים הדקים והגדולים מעוגנים לגוף על ידי mesentery, קרום המכיל כלי דם, בלוטות שומן ולימפה. זה צריך להיבדק עבור בלוטות לימפה מוגדלות וכל המסות לפני הסרת מערכת העיכול. הלבלב הוא איבר מפוזר הממוקם בחלק האחורי של הבטן. זהו שיזוף בהיר לצבע אפור ומורכב מאונות קטנות מרובות עם קצוות לא סדירים. כדי לקצור את הלבלב, לתפוס את האיבר ולהקניט אותו בעדינות מן הרקמה mesenteric שמסביב. זה חייב להיעשות לפני הסרת מערכת העיכול.

כדי להסיר את כל מערכת העכוסת כמו חתיכה אחת מתחיל עם הבטן מתרחב פי הטבעת, ראשית למקם קשירה על פי הטבעת ולאחר מכן לעשות לחתוך דרך המעי הגס רק קהורי לפי הטבעת. לאחר מכן, מניחים קשירה בצומת הוושט והבטן, שלאחריה ניתן להרים את כל מערכת העיכול וכל קבצים מצורפים membranous נותק. לאחר מכן ניתן להפריד את כל העניין מהמסנטריה, לחתוך למקטעים ולתקן.

הכליות הן איברים מזווגים הממוקמים כנגד שרירי הגב. הם צריכים להיות בגודל ובצבע של שעועית כליה כהה ויש להם משטח חלק. מיד מראש לכליה היא בלוטת יותרת הכליה המופיעה כמו גוש ורוד בהיר קטן.

כדי להסיר כליה, לבודד אותו באמצעות מלקחיים לחתוך בין האיבר לבין השופך. לאחר מכן ניתן לקלף את השכבה החיצונית הקשוחה כדי לבחון את פני השטח. חותכים כליה אחת לשניים לאורך הציר הארוך והשנייה לרוחב. כל חצץ בפנים עשוי להצביע על נוכחות של גבישים או מרבצי מינרלים. לבסוף, להסיר את הכבד, שהוא צבע אדום כהה ושוליו צריכים להיות חלקים עם קצה חד. יש להקפיד בעת טיפול בכבד, שכן הוא רקמה פריך. כל הפרעה לשלמות האיבר תגרום לדם לדלוף לחלל הגוף ולטשטש איברים אחרים.

כדי להסיר את הכבד, תחילה לשקף בעדינות את האונות מן הסרעפת ולעשות לחתוך דרך כלי הדם קדמיים למבנה. לאחר מכן, לשקף את הכבד בחזרה לכיוון הסרעפת ולתפוס את הצומת סיבי המחבר את כל האונות באופן מרכזי. לבסוף, להרים את האיבר תוך ניתוק כל ההחזקות למערכת העיכול והבטן.

מערכת הרבייה הנשית מורכבת מהרחם והשחלות. הרחם הוא מבנה קצר בצורת Y עם קרניים המשתרעות בשני הכיוונים. הקרניים מסתיימות בחתניות והשחלות -- הממוקמות ממש מתחת לכליות. השחלות יהיו משטח מחוספס בשל שלבי התבגרות שונים של הזקיקים.

כדי להסיר את השחלות, לחתוך את קבצים מצורפים עורקיים הקדמי ואת החצוצרות אחורי. כדי להסיר את הרחם, בעדינות לתפוס ולחתוך מתחת לצוואר הרחם. לאחר החתך, להרים את הגוף ואת הקרניים של הרחם לשבור כל קבצים מצורפים בחלל הגוף.

אצל זכרים, אתה יכול גם להתבונן בלוטות preputial ממוקם רק קהור prepuce. הם נראים גדולים והם בצבע אפור עד צהבהב עם מראה מוקצף. הסרה ותיקון של בלוטות אלה דומה בלוטות תת-קרקעיות. בנוסף, מערכת הרבייה הגברית מורכבת של שלל הזרע, בלוטת הערמונית והאשכים. שלפוחיות הזרע הן לבנות, מבנים "בצורת קרן איל" הממוקמים בחלקו החזיתי של שלפוחית השתן ומחוברים בקו האמצע בבלוטת הערמונית.

בלוטת הערמונית - בדרך כלל שיזוף בהיר בצבע - ממוקמת סביב שלפוחית השתן בבסיס. כדי לדמיין את האשכים, לתפוס את רפידות השומן בבטן התחתונה ולמשוך אותם באופן הקדמי. זה ימשוך את האשכים משק האשכים כדי לאפשר בדיקה. המשטח צריך להיות חלק עם כלי דם עדינים ניכר על פני השטח.

האפידימיס נמצא לאורך השוליים התחתונים של האשכים ומתכודד לכיוון החלק העליון. vas deferens מחובר לסוף האפידימיס ומוביל בחזרה לערמונית. כדי להסיר את האשכים, לחתוך את הקובץ המצורף בשק האשכים לחתוך את vas deferens. כדי להסיר את הערמונית ושלפוחיות הזרע, לתפוס את הבסיס של שלפוחית השתן ולהרים תוך ניתוק ההחזקות מתחת לערמונית.

נעבור לאיברים בתוך חלל בית החזה. כדי לחשוף את המבנים החיוניים, להסיר את הסרעפת מן הקובץ המצורף לצלעות. לאחר מכן, לחתוך דרך כלוב הצלעות לרוחב משני הצדדים עד החלק העליון של עצמות החזה manubrium, ולאחר מכן לשקף את העצמות cranially לדמיין את איברי בית החזה.

הריאות הן בדרך כלל צבע ורוד בהיר, ספוגי במרקם עם משטח חלק. עם זאת המתת חסד עם CO2 יכול לגרום לדימומים ריאתיים וכתוצאה מכך כתמים אדומים כהים שיכולים לכסות את כל משטחי הריאות.

הלב אדום כהה והפתחים שריריים, שמרגישים מוצקים למגע. האטריה בצבע אדום כהה יותר ויושבות בחלק העליון של החדרים. הם הרבה פחות שריריים ונראים רפויים. קרום שקוף דק הנקרא שק קרום הלב מקיף את הלב.

התימוס ממוקם לפני הלב ויושב מעל קנה הנשימה. זה צריך להיות חלק במרקם. אתה יכול לראות את קנה הנשימה כפי שתואר קודם לכן, והוושט הוא צינור דק מאוד שנמצא ממש מאחורי קנה הנשימה ומאחורי הלב ועובר דרך הסרעפת לקיבה.

כדי להסיר את האיברים בחלל בית החזה, להתחיל על ידי אחיזת קנה הנשימה ממש מעל התימוס ולעשות חתך מאונך רק קהור למלקחיים. תוך שמירה על האחיזה, הרם את קנה הנשימה למעלה בקדנציה וצץ כל קבצים מצורפים של הריאות אל פני עמוד השדרה בכלוב הצלעות. הוושט עשוי להיות חתוך כדי להיות מסוגל להרים את הלב והריאות ללא חלל החזה

לאחר שהלב מוסר לגוף, לשטוף אותו עם מלוחים כדי להסיר שאריות דם וקרישי דם, או למלא אותו עם הקיבויעה דרך אבי העורקים. ברגע שהריאות נקטעות, מניחים קשירה רופפת סביב קנה הנשימה. לאחר מכן, להשחיל מחט מחובר מזרק המכיל את הקיבעון לתוך הלומן של קנה הנשימה, ולהדק את הקשירה. ואז להזריק את הקיבוע עד הריאות מנופחות. לבסוף, להסיר את המחט ולהדק את הקשירה עוד יותר כדי למנוע דליפה.

עם נשימה זו של ידע לגבי נמק מכרסם וקציר רקמות, בואו נסתכל על כמה ניסויי המעבדה הנוכחיים מעורבים הליכים אלה.

נמק אבחון הוא נקודת קצה נפוצה בניסויי גרורות סרטן. בדוגמה זו, החוקרים הזריקו תאים סרטניים לתוך הטחול של המכרסם ואז, שלושים עד שישים יום לאחר מכן, הם ערכו נמק, אשר חשף גרורות כבד משמעותיות.

מיצוי רקמות מלווה לעתים קרובות על ידי ניתוח היסתולוגי, אשר מסייע בחקר האנטומיה המיקרוסקופית של המדגם. על ידי ביצוע הפרוטוקול של קיבעון, הטבעה, חתך והכתמה של רקמות, החוקרים מסוגלים לחקור את המבנים המיקרוסקופיים באיברים אלה, ולחשוף את ההשפעה של התערבויות גנטיות או פרמקולוגיות ברמה אטומית.

לפעמים חוקרים מסירים רקמות כדי לחקור תהליכים פיזיולוגיים, כמו אנגיוגנזה. כאן, הנסיינים חצצו רקמה מזנטית של חולדה כדי לעורר את צמיחת כלי הדם. לאחר מכן, הם קצרו כמה חלקים, וטיפלו בהם בסמנים שמכתימים את התאים של כל כלי דם, כדי לחקור את הדינמיקה התאית המעורבת בצמיחת רשת כלי הדם.

הרגע צפית בסרטון של ג'וב המפרט את השלבים של נמק אבחוני וקציר רקמות בחיות מעבדה. חשוב להשתמש בטכניקות מתאימות להסרת איברים ושימור איברים, כך שלהליך החילוץ אין השפעה על פרשנות הנתונים שנאספו. כמו תמיד, תודה שצפית!

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Applications and Summary

השלב האחרון בפרויקטים מחקריים רבים הוא הנמק של בעלי החיים הניסיוניים. תצפית מפורטת על מבנים חיצוניים ופנימיים ואחריה איסוף רקמות לניתוח נוסף מספקת כמות גדולה של נתוני מחקר. טכניקות מתאימות להסרת רקמות ושימור עם פתרונות הקיבעון המתאימים חיוניות לפרשנות נכונה של הממצאים.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

References

  1. Leary, S., Underwood, W., Anthony, R., Cartner, S., Corey, D., Grandin, T., et al. 2013. AVMA guidelines for the euthanasia of animals: 2013 edition.
  2. Parkinson, C.M., O'Brien, A., Albers, T.M., Simon, M.A., Clifford, C.B. and Pritchett-Corning, K.R. 2011. Diagnostic Necropsy and Selected Tissue and Sample Collection in Rats and Mice. 54. e2966. 1-7.
  3. Fiette, L. and Slaoui, M. 2011. Necropsy and Sampling Procedures in Rodents. Drug Safety Evaluation: Methods and Protocols, 39-67.
  4. Youngson, R.M. 2005. Collins dictionary of Medicine fourth edition.

Transcript

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the English version.

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter