Overview
מקור: תמרה מ. פאוורס, המחלקה לכימיה, אוניברסיטת טקסס A&M
בעוד שרוב המולקולות האורגניות הן דימגנטיות, שבהן כל האלקטרונים שלהן משויכים לקשרים, מתחמי מתכת מעבר רבים הם פרמגנטיים, שיש בהם מצבי קרקע עם אלקטרונים לא מתואמים. זכור את הכלל של הונד, הקובע כי עבור מסלוליות של אנרגיות דומות, אלקטרונים ימלאו את המסלולים כדי למקסם את מספר האלקטרונים שלא שולמו לפני זיווג. מתכות המעבר אכלסו חלקית d-orbitals שהאנרגיות שלהם מוטרדות במידה משתנה על ידי תיאום של ליגנדים למתכת. לפיכך, ה-d-orbitals דומים באנרגיה זה לזה, אך לא כולם מנוונים. זה מאפשר למתחמים להיות דימגנטיים, עם כל האלקטרונים מזווגים, או פרמגנטיים, עם אלקטרונים לא מזווגים.
ידיעת מספר האלקטרונים הלא מנוצלים בקומפלקס מתכת יכולה לספק רמזים למצב החמצון והגיאומטריה של קומפלקס המתכת, כמו גם לשדה ליגנד (שדה קריסטל) של הניגנדים. מאפיינים אלה משפיעים מאוד על הספקטרוסקופיה והתגובה של מתחמי מתכת מעבר, ולכן חשוב להבין.
דרך אחת לספור את מספר האלקטרונים הלא מזווגים היא למדוד את הרגישות המגנטית, χ, של תרכובת התיאום. רגישות מגנטית היא מדד המגנטיזציה של חומר (או תרכובת) כאשר הם ממוקמים בשדה מגנטי מיושם. אלקטרונים משויך נדחים מעט על ידי שדה מגנטי מיושם, ודחייה זו גדלה באופן ליניארי ככל שכוח השדה המגנטי גדל. מצד שני, אלקטרונים לא מתורבתים נמשכים (במידה רבה יותר) לשדה מגנטי, והמשיכה גדלה באופן ליניארי עם חוזק השדה המגנטי. לכן, כל תרכובת עם אלקטרונים לא מתווספים תימשך לשדה מגנטי. 1
כאשר אנו מודדים את הרגישות המגנטית, אנו מקבלים מידע על מספר האלקטרונים הלא מנוצלים מהרגע המגנטי, μ. הרגישות המגנטית קשורה לרגע המגנטי, μ על ידי משוואה 12:
(1)
הקבוע 
= [(3kB)/Nβ2)],שם β= בוהר מגנטון של האלקטרון (0.93 x 10-20 erg gauss-1), N = המספר של אבוגדרו, ו- kB = קבוע בולצמן
XM= רגישות מגנטית לטוחנת (ס"מ3/מול)
T = טמפרטורה (K)
μ = רגע מגנטי, נמדד ביחידות של מגנטון בוהר, μB = 9.27 x 10-24 JT-1
הרגע המגנטי עבור מתחמים ניתן על ידי משוואה 21:
(2)
g = יחס ג'ירומגנטי = 2.00023 μB
S = מספר קוונטי ספין = ∑ms = [מספר אלקטרונים לא מנופצים, n]/2
L = מספר קוונטי מסלולי = ∑ml
למשוואה זו יש גם תרומות מסלוליות וגם ספין. עבור מתחמי מתכת מעבר בשורה הראשונה, תרומת המסלול קטנה ולכן ניתן להשמיט אותה, כך שהרגע המגנטי של ספין בלבד ניתן על-ידי משוואה 3:
(3)
כך, הרגע המגנטי של ספין בלבד יכול לתת ישירות את מספר האלקטרונים הלא-משולמים. קירוב זה יכול להיעשות גם עבור מתכות כבדות יותר, אם כי תרומות מסלולית עשויות להיות משמעותיות עבור מתכות מעבר בשורה השנייה והשלישית. תרומה זו עשויה להיות כה משמעותית שהיא מנפחת את הרגע המגנטי מספיק, עד שנראה כי לתרכובת יש יותר אלקטרונים לא מתורבתים מאשר לה. לכן, ייתכן שיידרש אפיון נוסף למתחמים אלה.
בניסוי זה, הפתרון של טריס (אצטילאצטון) ברזל(III) (Fe(acac)3) נקבע באופן ניסיוני באמצעות שיטת אוונס בכלורופורם.
Principles
ישנן שיטות רבות למדידת הרגישות המגנטית. בסוףהמאה ה-19 פיתח לואי ז'ורז' גוי את מאזן הגוי, שהוא שיטה מדויקת ביותר למדידת רגישות מגנטית. בגישה זו, איזון אנליטי משמש למסה של מגנט, והשינוי במסה שנצפה בעת הצבת מדגם פרמגנטי בין הקטבים של המגנט קשור לרגישות המגנטית. שיטה זו אינה מעשית, שכן השעיית המדגם בין הקטבים של המגנט אינה טריוויאלית. זה דורש ארבע מדידות של מסה שביניהם המגנט לא יכול לזוז, עבור דגימות רגישות לאוויר, מדידה זו חייבת להתבצע בתוך תא כפפות. יתרות רגישות מגנטיות מודרניות יותר זמינות, אך הדבר דורש רכישה של יתרה כזו.
שיטה נוספת היא להשתמש במגנטומטר SQUID (התקן הפרעה קוונטית מוליך-על). זה דורש כמה מ"ג של מדגם מוצק, אלא אם כן מדידות מגנטיות אחרות ייעשו על המדגם, אינו מעשי או חסכוני עבור מתחמים paramagnetic שניתן להפוך לפתרונות.
לבסוף, ומה שיודגם כאן, הוא השימוש בספקטרומטר NMR כדי למדוד את הרגישות המגנטית. גישה זו פותחה על ידי דניס אוונס בשנת 1959. זה פשוט מסתמך על ההשפעה paramagnet בתמיסה יש על המשמרת הכימית של תרכובת ייחוס, בדרך כלל הממס. איסוף נתונים יכול להיעשות על כל ספקטרומטר NMR, הנתונים קל לפרש, והכנת מדגם היא פשוטה ודורש מעט חומר. זה הפך לשיטה הסטנדרטית כדי לקבל נתוני רגישות מגנטית עבור מתחמים אנאורגניים.
מדידת הרגישות המגנטית בשיטת אוונס מסתמכת על העובדה שהאלקטרונים הלא-מנוצלים מהפרמגנט בתמיסה יביאו לשינוי השינוי הכימי של כל המינים בתמיסה (איור 1). לכן, על ידי ציין את ההבדל בשינוי הכימי של מולקולת ממס בנוכחות ובהיעדר מין פרמגנטי, ניתן להשיג את הרגישות המגנטית באמצעות משוואה 4 (עבור ספקטרומטר NMR שדה גבוה)3
(4)
Δf = הפרש תדרים בהרץ בין התהודה המוזזת לבין התהודה הממסית הטהורה
F = ספקטרומטר גלי רדיו בהרץ
c = ריכוז מינים פרמגנטיים (מול/מ"ל)
הנתונים מתקבלים בקלות על ידי איסוף ספקטרום NMR 1H של מדגם המכיל נימי של ממס טהור, עם פתרון של paramagnet המקיף את נימי בתוך צינור NMR (איור 2).
איור 1. דוגמה 1H NMR ספקטרום של הניסוי
איור 2. תמונה של נימי בהתקנת צינור NMR
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Procedure
1. הכנת תוספת נימית
- באמצעות להבת גז קלה יותר או אחרת, להמיס את הקצה של פיפטה פסטר ארוך. סובבו בעדינות את קצה הפיפטה בלהבה עד שנוצרת נורה קטנה. תן לכוס להתקרר.
- במין נוצץ, להכין פתרון 50:1 (נפח) של deuterated:proteo כלורופורם. Pipette 2 מ"ל של ממס deuterated, וזה להוסיף 40 μL של ממס פרוטאו. תכובע את ההון.
- מוסיפים בזהירות כמה טיפות של תערובת ממסים לפיפטה זכוכית אטומה. מזיזים בעדינות את קצה הפיפטה האטומה כך שהנוזל נכנס לנוף. חזור על הפעולה עד הפתרון יש עומק של ~ 2 אינץ 'מתחתית הנימי. ודא שאין בועות של אוויר.
- מכסים את הפיפטה במחיצת גומי 14/20. באמצעות מזרק 3 מ"ל מכוסה במחט, להכניס את המחט לתוך pipette ולשלוף 3 מ"ל של אוויר. זה יוצר ואקום חלקי, להקל על השלב הבא.
- לאטום את החלק העליון של הנימי. מהדקים אופקית את הפיפטה לעמדת טבעת. השתמש מצית כדי לרכך את הזכוכית מעל הפתרון בתחתית הפיפטה. ברגע שהזכוכית מתרככת, מתחילים לסובב את קצה הפיפטה ומושכים את קצה הפיפטה הרחק מהבסיס המהודק. תן לנוף האטום להתקרר.
2. הכנת פתרון פרמגנטי
- באמצעות איזון אנליטי, מסה של מקטורן נוצץ ומכסה. שים לב למסה.
- מסה החוצה 5-10 מ"ג של Fe (acac)3 בלוויית הניצוצות, ולשים לב המסה. Fe(acac)3 יש רגע מגנטי פתרון גבוה מאוד. לכן 5-10 מ"ג יפיק שינוי גדול של השינוי הכימי. בדרך כלל, 10 - 15 מ ג היא מסה מתאימה יותר לשימוש עבור דגימות שיטת אוונס.
- פיפטה ~ 600 μL של תערובת ממס מוכן לתוך המשחקון המכיל את המינים paramagnetic. תכובע את הקרבון, ושים לב למסה. ודא כי מוצק מתמוסס לחלוטין.
3. הכנת מדגם NMR
- בצינור NMR סטנדרטי, בזהירות טיפה את ההוספה נימי בזווית, כדי להבטיח שזה לא לשבור אותו.
- פיפטה בתמיסה המכילה את המינים הפרמגנטיים.
- כיפה צינור NMR. לקבלת דגימות רגישות לאוויר, עטפו את Parafilm סביב המכסה.
4. איסוף נתונים
- לרכוש ולשמור ספקטרום 1H NMR סטנדרטי.
- שימו לב לטמפרטורת הגשוש.
- שים לב לתדר הרדיו.
5. ניתוח נתונים ותוצאות
- באמצעות המסה והצפיפות של הממס, לחשב את הנפח של הממס המשמש להכנת הפתרון paramagnetic.
- חשב את הריכוז (M) של הפתרון הפרמגנטי.
- חשב את הפרדת השיא של התהודה הממסית בין זה של ממס טהור (בניני) וזה השתנה על ידי paramagnet (מחוץ נימי) (Δppm). אם פעולה זו מתבצעת ב- ppm, המר אותו ל- Hz על ידי משוואה 5:
(5)
F = ספקטרומטר גלי רדיו בהרץ - חשב את הרגישות המגנטית באמצעות משוואה 4.
- חשב את הרגע המגנטי באמצעות משוואה 1.
- השווה את הרגע המגנטי המתקבל עם זה הצפוי עבור אלקטרונים לא מנופצים ממשוואה 3. הרגישות המגנטית תהיה מעט גדולה יותר מהערך הצפוי של ספין בלבד שניתן בטבלה, אך צריכה להיות נמוכה מזו המתאימה לאלקטרונים n+1 שלא שולמו.
- תן את מספר האלקטרונים הלא-משולמים למינים העל-מגנטיים.
(5)6. פתרון בעיות
- אם לא נצפו שתי פסגות ממס שנפתרו היטב, נסה את הפעולות הבאות:
- השתמש בספקטרומטר עם כוח שדה גדול יותר כדי להגדיל את הפרש המשמרת הכימית (ב- ppm) של שתי הפסגות.
- הפוך את המדגם מרוכז יותר, כך המשמרת גדולה יותר.
- לפעמים הערך לא הגיוני. אם מתקבל ערך נמוך מדי, נסה לבצע את הפעולות הבאות:
- אני חוזר, לוקח טיפול רב יותר במאסות את המינים הממסים והעל-מגנטיים.
- ודא שהמין הפרמגנטי המשמש הוא טהור. אפילו זיהומים ממס בגבישים ישפיעו על המסה ומכאן הריכוז.
- עבור מולקולות גדולות, הדיאמגנטיות עשויה להיות כה משמעותית שיש לבצע תיקון דימגנטי. מונח זה מופחת למשוואה 4:
- לפעמים הערך לא הגיוני. אם מתקבל ערך גבוה מדי, נסה לבצע את הפעולות הבאות:
- בצע את אותם שלבים כמו 6.2.1-6.2.3.
- עבור מתכות כבדות יותר, הכללת תרומות מסלולית עשויה להיות נחוצה.
7. דגימות רגישות לאוויר
- ניתן לנתח בקלות דגימות רגישות לאוויר באמצעות טכניקה זו. שלבים 1.2-1.4, שלב 2, ושלב 3 מבוצעים פשוט בתוך תא כפפות.
שיטת אוונס היא טכניקה לחישוב מספר האלקטרונים הלא משולמים במתחמי מתכת במצב פתרון.
למתחמי מתכת מעבר רבים יש אלקטרונים לא מתומשים, מה שהופך אותם נמשכים לשדות מגנטיים. מתחמים אלה נקראים פרמגנטיים. קומפלקסים עם כל האלקטרונים המשויך נקראים דיאמגנטיים.
לדעת את מספר האלקטרונים שלא נוכו חשוב לחזות את התגובה של תרכובת. שיטת אוונס משתמשת בספקטרוסקופיית NMR כדי למדוד את הפרמטרים הדרושים לחישוב מספר האלקטרונים שלא שולמו.
וידאו זה ימחיש את ההליך לביצוע שיטת אוונס, להדגים את הניתוח של Fe(acac) 3 , ולהציג כמהיישומיםשל ספירת אלקטרונים לא מנודה בכימיה.
ניתן לקבוע את מספר האלקטרונים הלא-מנופחים בקומפלקס מהרגע המגנטי של המולקולה הנתונה. ניתן להעריך את הרגעים המגנטיים של מתחמי מתכת מעבר בשורה1 מתוך תרומות של אלקטרונים לא מנופחים, הנקראים הרגע המגנטי ספין בלבד. עבור מתחמי מתכת המעבר בשורההשנייה והשלישית, יש לקחת בחשבון הן את הספין והן את התרומות מסלולית.
הרגע המגנטי קשור לרגישות המגנטית, המספקת את מידת המגנטיזציה של קומפלקס בשדה מגנטי מיושם.
השינוי הכימי של מין בספקטרום NMR מושפע מהרגישות המגנטית הכוללת של פתרון המדגם. לכן, השינוי הכימי של ממס משתנה אם solute הוא paramagnetic. שיטת אוונס משתמשת במערכת יחסים זו כדי להשיג את הרגישות המגנטית, וכך את הרגע המגנטי, של אותו תלולה טחורה.
דגימת שיטה של אוונס משתמשת בתוסף נימי המכיל תערובת של ממס מפורק וממס פרוטם תואם. תרכובת העניין מומסת באותה תערובת ממס ומונחת בצינור NMR עם נימי.
ספקטרום NMR שנרכש מציג שתי פסגות ממס: אחת מתאימה לממס proteated בתמיסה עם המתחם, והשני מתאים ממס proteated נימי.
הרגישות המגנטית מחושבת מהפרש התדרים וריכוז התרכובת הפרמגנטית במדגם.
הרגע המגנטי מחושב מהרגישות המגנטית ביחידה מיוחדת הנקראת מגנטון בוהר. לאחר מכן ניתן להשוות את הרגע המגנטי לערכי ספין תיאורטיים בלבד כדי להעריך את מספר האלקטרונים הלא-מנופחים במדגם.
עכשיו שאתם מבינים את העקרונות של שיטת אוונס, בואו נעבור הליך למציאת מספר האלקטרונים הלא משולמים ב-Fe(acac)3 בשיטת אוונס.
כדי להכין את ההוספה נימי, להמיס את הקצה של פיפטה פסטר ארוך עם להבה עד הקצה נמס לתוך נורת זכוכית. תן לכוס להתקרר.
לאחר מכן, לשלב במוסך נוצץ נקי 2 מ"ל של ממס deuterated ו 40 μL של ממס proteated. מכסים את הוויאל ומערבבים בעדינות.
מוסיפים בזהירות כמה טיפות של תערובת הממס לפיפטה מקוררת. החלק בעדינות או הקש על קצה הפיפטה עד שהממס יתאסף בתחתית הקצה.
ממשיכים להוסיף את תערובת הממסים בדרך זו עד שהתמיסה ממלאת את קצה הפיפטה האטום לעומק של כ -2 אינץ ', ללא בועות אוויר.
מכסים את הפיפטה במחיצת גומי 14/20. צייד מזרק 3 מ"ל במחט. הכנס את המחט דרך המחיצה בזהירות למשוך 3 מ"ל של אוויר.
מוציאים את המזרק ומהדקים את הפיפטה לטבעת. השתמש במצית כדי לרכך את הזכוכית מעל הפתרון בקצה הפיפטה.
ברגע שהזכוכית מתחילה להתרכך, סובבו לאט לאט את קצה הפיפטה המלא בתמיסה כדי לאטום את הפתרון. המשיכו לסובב את הנימי החדש שנוצר עד שהוא נפרד בקלות מגוף הפיפטה.
תן נימי להוסיף מגניב, ולאחר מכן לאחסן אותו במיכל מסומן.
כדי להכין דגימה לשיטת אוונס, תחילה להקליט את המסה של מסילת נוצץ וכובע. לאחר מכן, מניחים 5 מ"ג של תרכובת העניין paramagnetic לתוך מבחן הניצוץ ולתעד את המסה.
פיפטה על 600 μL של תערובת של ממיסים deuteated proteated לתוך מטען הניצוץ. מערבבים את הקרבון עד שהתרכובת המוצקה מתמוססת לחלוטין.
הקלט את המסה של הנקניקיון עם הכתרים של פתרון מדגם. לאחר מכן, להשיג צינור NMR סטנדרטי כובע.
החלק בזהירות את ההוספה הנימית לתוך צינור NMR בזווית. העבר את הפתרון של המתחם paramagnetic לצינור NMR וכובע הצינור. ודא כי הכנס יושב בתחתית הצינור.
לרכוש ולשמור ספקטרום 1H NMR סטנדרטי.
ראשית, לחשב את הריכוז של פתרון המדגם מולים לסנטימטר מעוקב באמצעות המסות המתועדים ואת הצפיפות של הממס. לאחר מכן, להמיר את ההבדל בין פסגת ממס כימיות מppm ל הרץ. לחשב את הרגישות המגנטית הטוחנת של המדגם.
לאחר מכן, לחשב את הרגע המגנטי מטמפרטורת הבדיקה ואת הרגישות המגנטית הטוחנת. השווה את הערך המחושב עם טבלה של ערכים ידועים כדי לקבוע את מספר האלקטרונים שלא שולמו במתחם.
מספר האלקטרונים הלא מנודים חשוב למידול קומפלקסים כימיים וביולוגיים. בואו נסתכל על כמה יישומים.
מתחמי מתכת מעבר ניתן לדגמן עם תאוריה מסלולית מולקולרית. במודל זה, אלקטרונים מוקצים למסלולים מולקולריים המשותפים בין אטומים. מידע על מספר האלקטרונים שלא שולמו מסייע לאשר כי נעשה שימוש במודל מתאים. יתר על כן, מספר המסלולים הכבושים והבלתי מאוכלסים בסינגלס חוזה כיצד הקומפלקס יגיב עם מולקולות אחרות.
מולקולות יכולות להיות מסווגות על ידי פעולות סימטריה שהן יכולות לבצע, כגון שיקוף על פני ציר. סימטריה מולקולרית יכולה לחזות תכונות רבות, כגון מצבי הרטט של תרכובת. מכיוון שמספר האלקטרונים הלא מתווספים יכול לספק מידע על גיאומטריה מולקולרית, חשוב לקבוע במדויק את מספר האלקטרונים הלא מתווספים בעת אפיון תרכובות.
הרגע צפית בהקדמה של ג'וב לשיטת אוונס. כעת עליכם להבין את העקרונות הבסיסיים של שיטת אוונס, את הליך חישוב מספר האלקטרונים הלא משולמים, וכיצד אלקטרונים לא מתורבתים רלוונטיים להבנת התגובה הכימית. תודה שצפיתם!
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Results
Experimental Results
| פה(acac)3 | כלורופורם | |
| m (ז) | 0.0051 | 0.874 |
| MW (g/מול) | 353.17 | n/a |
| n (מול) | 1.44⋅10-5 | n/a |
| צפיפות (g/mL) | n/a | 1.49* |
| עוצמת קול (מ"ל) | n/a | 0.587 |
| ג (מול/מ"ל) | 2.45⋅10-5 | |
| משמרות NMR | שיא 1 | שיא 2 |
| δ (ppm) | 7.26 | 5.85 |
| Δppm | 1.41 | |
| כלי NMR | ||
| טמפרטורה (K) | 296.3 | |
| שדה, F (הרץ) | 500⋅106 |
* ניתן להעריך את צפיפות הממס לצפיפות הממס המשמש
חישובים:
= 0.0137 ס"מ3/מול
= 5.70 μB
תוצאות תיאורטיות עבור ערכי S ו- n נתון:
| S | n | μS |
| 1/2 | 1 | 1.73 |
| 1 | 2 | 2.83 |
| 3/2 | 3 | 3.87 |
| 2 | 4 | 4.90 |
| 5/2 | 5 | 5.92 |
עבור 4.5 מ"ג של Fe(acac)3 מומס בממס 0.58 מ"ל, עם מכשיר 300 MHz הפרדת שיא של 1.41 ppm הוא ציין, אשר נותן XM= 1.37 x 10-2 ו μeff = 5.70. ערךeff μ זה עולה בקנה אחד עם קומפלקס S = 5/2, הכולל 5 אלקטרונים לא מתובלים.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Applications and Summary
שיטת אוונס היא שיטה פשוטה ומעשית להשגת הרגישות המגנטית של מתחמי מתכת מסיסים. זה מספק את מספר האלקטרונים הלא מתווספים בקומפלקס מתכת, אשר רלוונטי לספקטרוסקופיה, תכונות מגנטיות, ותגובה של המתחם.
מדידת הרגישות המגנטית של מינים פרמגנטיים מעניקה למספר האלקטרונים הלא משופצים, שהוא מאפיין מרכזי של מתחמי מתכת. כמו התגובה של מתחמי מתכת מושפעת המבנה האלקטרוני שלה - כלומר, איך d-orbitals מאוכלסים - חשוב לקבוע את מספר האלקטרונים שלא שולמו. הרגישות המגנטית יכולה לשמש כדי לקבוע את הגיאומטריה של קומפלקס המתכת בתמיסה, לתת תובנה על כוח שדה ליגנד, והוא יכול לספק ראיות עבור המשימה הרשמית הנכונה חמצון-מצב של קומפלקס המתכת. במודולים על "תורת הקבוצות" ו "תיאוריית MO של מתחמי מתכת מעבר", נציג כיצד לחזות דיאגרמות פיצול d-מסלולית, כמו גם כיצד להשתמש בנתונים משיטת אוונס כדי לעזור לקבוע את הגיאומטריה של קומפלקס מתכת ולספק ראיות למצב החמצון של מרכז המתכת.
ישנם מכשירים מרובים שניתן להשתמש בהם כדי למדוד את הרגישות המגנטית של מין פרמגנטי כולל איזון גוי, SQUID או מכשיר NMR. שיטת אוונס היא טכניקה פשוטה ומעשית המשתמשת ב- NMR כדי לקבוע את הפתרון של רגע מגנטי של פרמגנט. בעוד שיטת אוונס היא כלי רב עוצמה בתחום המגנטיות, ישנם מספר חסרונות לטכניקה. ראשית, המולקולה חייבת להיות מסיסה בממס המשמש בניסוי. אם המדגם הפרמגנטי אינו מומס במלואו, ריכוז הפתרון יהיה שגוי, מה שיוביל לשגיאות ברגע המגנטי של הפתרון שנקבע באופן ניסיוני. שגיאות אחרות בריכוז יכולות להתעורר אם המדגם הפרמגנטי יש זיהומים דימגנטיים (ממס) או paramagnetic.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
References
- Miessler, G. L., Fischer, P. J., Tarr, D. A. Inorganic Chemistry. 5 ed. Pearson. (2014).
- Drago, R. S. Physical Methods for Chemists. 2 ed. Saunders College Publishing. (1992).
- Girolami, G. S., Rauchfuss, T. B., Angelici, R. J. Synthesis and Technique in Inorganic Chemistry: A Laboratory Manual. 3 ed. University Science Books. Sausalito, CA, (1999).
