Encyclopedia of Experiments: Biology
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Transcript
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-为了获得开发中的小狗, 从角质层分离后或幼虫阶段 P5 后取出幼崽。首先,将完整的小狗与它的腹腔侧朝向你。 使用钳子将幼崽放在套管前端和 pupa头部之间的空位。 然后,轻轻打破并取出前片,露出头部。
在保持腹腔方向的同时,使用钳子沿幼虫前后轴创建小断层,并确保在此过程中形成连续间隙。小心不要直接损坏下面的任何 pupa组织。 然后继续从缝隙向外碎裂,一次一个部分,并在此过程中展开撕裂的外壳。使用精细的湿画笔,拿起暴露的pupa作进一步调查。 在示例协议中,我们将看到如何去除磷酸内脏,并准备成像的pupa。
-要开始去除幼虫,在一块纸巾上贴一块双面胶带。将pupa 放在双面胶带上,腹侧向上。 定位幼崽前侧和内部脓包之间的空间。使用钳子抓住并取出此间隙周围的幼崽,并暴露 pupa 头部前侧。
将钳尖与前后轴平行移动,插入钳尖。抬起钳子尖端,局部分解幼崽。 重复此操作,直到破损到达幼崽的后部。确保在幼崽和幼崽腿之间形成间隙,并打破幼崽的腹侧,同时尽量减少对内脓肿的损伤。尽可能多地打破幼崽后,用细画笔取出小狗。将pupa 放在一张用 ddH2O 滋润并放入塑料培养皿中的纸巾上。立即拍照,因为暴露的小狗是脆弱的,容易干燥。