Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Encyclopedia of Experiments
Encyclopedia of Experiments: Biology

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

Smagspræference assay

 
Click here for the English version

Smagspræference assay: En metode til måling af fodringsadfærd i Drosophila

Article

Transcript

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the English version.

- For at udføre smagspræferenceanalysen skal du bruge et kammer, for eksempel en petriskål opdelt i lige sektioner. Hvis du måler valget mellem to opløsninger af forskellig smag, skal du mærke den ene i rødt og den anden i blåt ved hjælp af smagløse madfarvestoffer.

Tilføj nu bedøvede og tidligere udsultede fluer til midten af kammeret og dæk skålen. Udfør eksperimentet i mørket for at udelukke potentiel farve bias, og inkuber ved 25 grader Celsius over en bestemt tidsperiode. Når de får et valg mellem to løsninger, foretrækker flere emner at forbruge løsninger, hvis smag er mere attraktiv, for eksempel sød, samtidig med at man undgår afvisende muligheder som bitre løsninger. Stop eksperimentet ved at flytte kammeret til en fryser.

For at måle fodringsadfærd og smagspræference skal du sammenligne antallet af fluer med forskellige farvede maver. I eksempelprotokollen vil vi se en demonstration af smagspræferenceanalysen, der måler valget mellem forskellige saccharoseopløsninger.

- For at starte forsøget, mætte en bomuldskugle med vand i bunden af en standard flue hætteglas. Næste, indsamle fluer i sæt af 100 dyr en CO2-pad, og tilsæt derefter fluerne til et forberedt hætteglas. Brug en bomuldskugle til at sikre hætteglassene lukket.

Dernæst forberede den eksperimentelle smag af 5 millimolar saccharose. Derefter skabe analysen kamre ved at opnå en 100 millimeter med 15 millimeter plast Petri parabol og placere tre 10 microliter dråber kontrol smagsstof tæt kanten af pladen som muligt 12 klokken position. Ved klokken 3 placeres tre 10 mikroliter dråber eksperimentelt smagsstof tæt på kanten af pladen som muligt. Placer yderligere tre dråber af kontrolstæmpningsmidlet ved 6-tidens position. Placer derefter yderligere tre dråber af det eksperimentelle smagsstof ved 9-tidens position.

Dernæst tømmes et hætteglas med 100 udsultede fluer en CO2-pad lige længe nok til at bedøve alle dyr. Børst dyrene ind i midten af et forberedt analysekammer og dæk det med skållåget. Placer analysekammeret i en uigennemsigtig papkasse. Sæt derefter ydersiden af kassen med den tilstand og genotype, der testes. Flyt hele opsætningen til en inkubator. Efter to timer skal du placere analysekamrene, der stadig er indeholdt i papkasser, direkte i en negativ 20 grader Celsius fryser, indtil de er klar til quantitation.

Tags

Tom værdi Problem
Read Article

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter