Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- Eksperimenter for å kvantifisere egglegging har avdekket de nevrologiske komponentene og miljøsignalene som påvirker denne oppførselen. Endringer i eggleggingsatferd kan indikere toksiske effekter på nevromuskulære eller reproduktive systemer.
For å teste for toksisitet, øk utviklingssynkroniserte egg på nematode vekstmedieplater med og uten interesse. Disse eksperimentene bruker varme-drept bakteriell ormmat for å forhindre at bakteriene metaboliserer forbindelsen. La denne generasjonen vokse til de blir unge voksne.
Flytt deretter ormer til nye plater under passende kontroll eller eksperimentelle forhold, og la dem legge egg i 24 timer. Hver dag, overfør de voksne til en ny tallerken, og tell eggene på forrige tallerken. Fortsett til de voksne slutter å legge, omtrent fem dager for wild-type ormer. Beregn antall egg lagt per voksen orm hver dag, og legg opp totalen på slutten av eksperimentet.
I eksempelprotokollen vil vi bruke C. elegans eggleggingsanalyse for å teste etoposide - et kjemoterapimedisin - for reproduksjonstoksisitet.
- Inkuber de alderssynkroniserte eggene på NGM-platen som inneholder DMSO eller etoposide ved 20 grader Celsius i 64 timer, til den unge voksne scenen. Overfør fem voksne ormer til nye NGM-plater uten kjemikalier eller nye NGM-plater som inneholder samme kjemiske forbehandling, og inkuber dem i 24 timer.
Overfør de voksne til nye NGM-plater, som nettopp demonstrert, og tell antall egg hver dag. I tillegg teller ormene som krøp av, døde eller ble internt klekket ut.
