Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- Yumurtlamayı ölçmeye yönelik deneyler, bu davranışı etkileyen nörolojik bileşenleri ve çevresel ipuçlarını ortaya çıkardı. Yumurtlama davranışındaki değişiklikler nöromüsküler veya üreme sistemleri üzerinde toksik etkilere işaret edebilir.
Toksisiteyi test etmek için, nematod büyüme ortam plakalarında gelişimsel olarak senkronize yumurtaları ilgi bileşiği ile ve ilgi bileşiği olmadan yükseltin. Bu deneyler, bakterilerin bileşiği metabolize etmesini önlemek için ısıdan öldürülmüş bakteri solucanı yiyecekleri kullanır.
Daha sonra solucanları uygun kontrol veya deneysel koşullar altında yeni plakalara taşıyın ve 24 saat boyunca yumurta bırakmaya bırakın. Her gün yetişkinleri yeni bir tabağa aktarın ve önceki plakadaki yumurtaları sayın. Yetişkinler yumurtlamayı bırakana kadar devam edin, vahşi tip solucanlar için yaklaşık beş gün. Her gün yetişkin solucan başına bırakılan yumurta sayısını hesaplayın ve deneyin sonunda toplamı toplayın.
Örnek protokolde, C. elegans yumurtlama testini üreme toksisitesi için bir kemoterapi ilacı olan etoposide'ı test etmek için kullanacağız.
- DMSO veya etoposide içeren NGM plakasındaki yaş senkronize yumurtaları, genç yetişkin aşamasına kadar 64 saat boyunca 20 santigrat derecede kuluçkaya yatırın. Beş yetişkin solucanı kimyasal içermeyen yeni NGM plakalarına veya aynı kimyasal ön işlem içeren yeni NGM plakalarına aktarın ve 24 saat boyunca kuluçkaya yatırın.
Yetişkinleri az önce gösterildiği gibi yeni NGM plakalarına aktarın ve her gün yumurta sayısını sayın. Ayrıca, sürünen, ölen veya dahili olarak yumurtadan çıkan solucanları sayın. Metin protokolüne göre hesaplamalar gerçekleştirin.
