Fotomotorische responstest: een methode om de gedragsrespons van larvale zebravissen op een plotselinge verandering in verlichtingsconditie te meten

- Breng om te beginnen 10 zebravisembryo's, met behulp van een transferpipet, over naar een bekerglas gevuld met 20 milliliter water. Kweek nu de embryo's op 28 graden Celsius, onder de juiste licht donkere cyclus die nodig is voor een experiment. Breng vervolgens de larven over in putplaten. Zorg ervoor dat elke put één larve bevat om voldoende ruimte te geven om te zwemmen.

Vul nu elke put volledig met water. Plaats de putplaat in de gedragsopnamekamer en volg de larvale beweging met behulp van videotrackingsoftware. De larven vertonen een verhoogde beweging in het donker en verminderde beweging in het licht bij blootstelling aan een abnormale licht- en donkere cyclus als gevolg van verhoogde stressniveaus. Het berekenen van het verschil tussen de gemiddelde afgelegde afstand tijdens de laatste minuut van een beginperiode en de eerste minuut van de volgende periode vertelt ons de fotomotorische reactie van de vis.

In dit protocol zullen we de fotomotorische respons onderzoeken bij zebravissen en dikkopminnowlarven die zijn blootgesteld aan cafeïne. Plaats eerst de putplaat met de experimentele vis in de gedragsopnamekamer. Open vervolgens het eerder ontwikkelde trackingprotocol. Zorg er in de videotrackingviewer voor dat alle larven zichtbaar zijn, dat er slechts één larve in elke put aanwezig is en dat de putten zijn uitgelijnd met de gedefinieerde observatiegebieden.

Klik vervolgens op Experimenteren en uitvoeren. Geef de naam op en sla de locatie van de gegevens op en klik op het pictogram Meerdere livebeelden om alle vooraf gedefinieerde weergavegebieden te markeren. Sluit ten slotte het paneel van de opnamekamer en klik op Achtergrond gevolgd door Start op de computermonitor.