Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- Pour commencer, transférez 10 embryons de poisson zèbre, à l’aide d’une pipette de transfert, à un bécher rempli de 20 millilitres d’eau. Maintenant, cultivez les embryons à 28 degrés Celsius, sous le cycle sombre clair approprié requis pour une expérience. Ensuite, transférez les larves dans des plaques de puits. Assurez-vous que chaque puits contient une larve pour donner suffisamment d’espace pour la baignade.
Remplissez maintenant complètement chaque puits d’eau. Placez la plaque de puits dans la chambre d’enregistrement comportementale et suivez le mouvement larvaire à l’aide d’un logiciel de suivi vidéo. Les larves présentent un mouvement accru dans l’obscurité et une diminution du mouvement dans la lumière lorsqu’elles sont exposées à un cycle anormal de lumière et d’obscurité en raison de niveaux de stress accrus. Le calcul de la différence entre la distance moyenne parcourue au cours de la dernière minute d’une période initiale et la première minute de la période suivante nous indique la réponse photomotrice du poisson.
Dans ce protocole, nous examinerons la réponse photomotrice chez les larves de poisson zèbre et de ménés à tête grasse exposées à la caféine. Tout d’abord, placez la plaque de puits contenant les poissons expérimentaux dans la chambre d’enregistrement comportementale. Ensuite, ouvrez le protocole de suivi précédemment développé. Dans la visionneuse de suivi vidéo, assurez-vous que toutes les larves sont visibles, qu’une seule larve est présente dans chaque puits et que les puits sont alignés sur les zones d’observation définies.
Ensuite, cliquez sur Expérimenter et exécuter. Spécifiez le nom et enregistrez l’emplacement des données et cliquez sur l’icône Plusieurs images en direct pour mettre en évidence toutes les zones de visualisation prédéfinis. Enfin, fermez le panneau de la chambre d’enregistrement et cliquez sur Arrière-plan suivi de Démarrer sur le moniteur d’ordinateur.
