Photomotor Response Assay: Eine Methode, um die Verhaltensreaktion von Larval Zebrafish auf eine plötzliche Änderung des Beleuchtungszustands zu messen

- Zu Beginn, übertragen Sie 10 Zebrafisch-Embryonen, mit Hilfe einer Transferpipette, auf einen Becher mit 20 Milliliter Wasser gefüllt. Jetzt wachsen die Embryonen bei 28 Grad Celsius, unter dem entsprechenden hellen dunklen Zyklus für ein Experiment erforderlich. Als nächstes übertragen Sie die Larven in Brunnenplatten. Stellen Sie sicher, dass jeder Brunnen enthält eine Larve, um genügend Platz zum Schwimmen zu geben.

Jetzt füllen Sie jeden Brunnen vollständig mit Wasser. Legen Sie die Brunnenplatte in die Verhaltensaufnahmekammer und verfolgen Sie Larvenbewegungen mit Video-Tracking-Software. Die Larven zeigen erhöhte Bewegung im Dunkeln und verringerte Bewegung im Licht, wenn sie einem abnormalen Hellen und Dunklen Zyklus durch erhöhte Belastungen ausgesetzt sind.

In diesem Protokoll untersuchen wir die photomotorische Reaktion bei Zebrafischen und Fettkopf-Minnow-Larven, die Koffein ausgesetzt sind. Legen Sie zunächst die Brunnenplatte mit den experimentellen Fischen in die Verhaltensaufnahmekammer. Öffnen Sie dann das zuvor entwickelte Tracking-Protokoll. Im Video-Tracking-Viewer stellen Sie sicher, dass alle Larven sichtbar sind, dass in jedem Brunnen nur eine Larve vorhanden ist und dass die Brunnen an den definierten Beobachtungsbereichen ausgerichtet sind.

Als nächstes klicken Sie auf Experimentieren und Ausführen. Geben Sie den Namen und den Speicherort der Daten an und klicken Sie auf das Symbol Mehrere Live-Bilder, um alle vordefinierten Anzeigebereiche hervorzuheben. Schließen Sie schließlich das Bedienfeld der Aufnahmekammer und klicken Sie auf Hintergrund gefolgt von Start auf dem Computermonitor.