A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
Photomotor Response Assay: A Method to Measure the Behavioral Response of Larval Zebrafish to a Sudden Change in Lighting Condition

בדיקת תגובה פוטומוטורית: שיטה למדידת התגובה ההתנהגותית של דגי זברה זחלים לשינוי פתאומי במצב התאורה

Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Transcript

- כדי להתחיל, להעביר 10 עוברים של דגי זברה, בעזרת פיפטת העברה, לכוס מלאה ב -20 מיליליטר מים. כעת, גדלו את העוברים בטמפרטורה של 28 מעלות צלזיוס, תחת מחזור האור הכהה המתאים הנדרש לניסוי. לאחר מכן, להעביר את הזחלים לתוך צלחות באר. ודא שכל באר מכילה זחל אחד כדי לתת מספיק מקום לשחייה.

עכשיו לגמרי למלא כל באר עם מים. הניחו את צלחת הבאר בתא ההקלטה ההתנהגותי ועקבו אחר תנועת הזחל באמצעות תוכנת מעקב וידאו. הזחלים מפגינים תנועה מוגברת בחושך ותנועה מופחתת באור כאשר הם נחשפים למחזור אור וחושך חריג עקב רמות מתח מוגברות. חישוב ההפרש בין המרחק הממוצע שעבר במהלך הדקה האחרונה של התקופה הראשונית לבין הדקה הראשונה של התקופה הבאה אומר לנו את התגובה הפוטומוטורית של הדגים.

בפרוטוקול זה נבחן את התגובה הפוטומוטורית בדגי זברה ובזחלי מיננו שמנים החשופים לקפאין. ראשית, הניחו את צלחת הבאר המכילה את דגי הניסוי בתא ההקלטה ההתנהגותי. לאחר מכן, פתח את פרוטוקול המעקב שפותח בעבר. בצופה המעקב בווידאו, יש לוודא שכל הזחלים גלויים, שבכל באר נמצא רק זחל אחד, ושהבארות מיושרות עם אזורי התצפית שהוגדרו.

לאחר מכן, לחץ על ניסוי וביצוע. ציינו את השם ואת מיקום שמירת הנתונים ולחצו על הסמל 'מספר תמונות חיות' כדי להדגיש את כל אזורי התצוגה שהוגדרו מראש. לבסוף, סגור את הלוח של תא ההקלטה ולחץ רקע ואחריו התחל על צג המחשב.

Related Videos

Read Article