Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- Til å begynne med, overfør 10 sebrafiskembryoer, ved hjelp av en overføringspipette, til et beger fylt med 20 milliliter vann. Nå, vokse embryoene ved 28 grader Celsius, under riktig lys mørk syklus som kreves for et eksperiment. Deretter overfører larvene til brønnplater. Sørg for at hver brønn inneholder en larve for å gi nok plass til svømming.
Fyll nå hver brønn helt med vann. Plasser brønnplaten i atferdsopptakskammeret og spor larvebevegelsen ved hjelp av videosporingsprogramvare. Larvene viser økt bevegelse i mørket og redusert bevegelse i lyset når de utsettes for en unormal lys- og mørk syklus på grunn av økte stressnivåer.
I denne protokollen vil vi undersøke den fotomotoriske responsen i sebrafisk og fathead minnow larver utsatt for koffein. Først legger du brønnplaten som inneholder den eksperimentelle fisken i atferdsopptakskammeret. Åpne deretter den tidligere utviklede sporingsprotokollen. I videosporingsviseren må du sørge for at alle larvene er synlige, at bare en larve er til stede i hver brønn, og at brønnene er på linje med de definerte observasjonsområdene.
Deretter klikker du på Eksperimenter og utfør. Spesifiser navnet og lagre plasseringen av dataene og klikk på Flere Live Images-ikonet for å markere alle de forhåndsdefinerte visningsområdene. Til slutt lukker du panelet i opptakskammeret og klikker på Bakgrunn etterfulgt av Start på dataskjermen.
