Encyclopedia of Experiments: Biology
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- Para começar, transfira 10 embriões de zebrafish, com a ajuda de uma pipeta de transferência, para um béquer cheio de 20 mililitros de água.
Agora encha completamente cada poço com água. Coloque a placa do poço na câmara de gravação comportamental e rastreie o movimento larval usando software de rastreamento de vídeo. As larvas exibem movimento aumentado no escuro e diminuição do movimento na luz quando expostas a uma luz anormal e ciclo escuro devido ao aumento dos níveis de estresse. Calculando a diferença entre a distância média percorrida durante o último minuto de um período inicial e o primeiro minuto do período seguinte nos diz a resposta fotomotor do peixe.
Neste protocolo, examinaremos a resposta fotomotora em zebrafish e larvas de peixinho-cabeçudo expostas à cafeína. Primeiro, coloque a placa de poço contendo o peixe experimental na câmara de gravação comportamental. Em seguida, abra o protocolo de rastreamento previamente desenvolvido. No visualizador de rastreamento de vídeo, certifique-se de que todas as larvas são visíveis, que apenas uma larva está presente em cada poço, e que os poços estão alinhados com as áreas de observação definidas.
Em seguida, clique em Experimentar e Executar. Especifique o nome e salve a localização dos dados e clique no ícone Várias Imagens Ao Vivo para destacar todas as áreas de visualização predefinidas. Por fim, feche o painel da câmara de gravação e clique em Plano de Fundo seguido de Iniciar no monitor do computador.
