Saggio di cattura delle prede: un metodo per studiare il comportamento di cattura delle prede della larva di Zebrafish

- Per iniziare, posizionare una larva di pesce zebra in una camera di registrazione, ad esempio un pozzo con fondo di vetro, in cui una larva può nuotare. Raccogliere la paramecia, la preda, con l'aiuto di una micropipetta, e posizionarle nella camera di registrazione. Successivamente, mettere una piccola goccia d'acqua al centro dello scivolo di copertura e posizionarla sopra la camera per evitare una bolla d'aria.

Ora posiziona la camera sul sistema di illuminazione dotato di una luce ad anello a LED bianca per eliminare le ombre e rendere gli organismi chiaramente visibili. Osservate il comportamento di cattura delle prede utilizzando un sistema di registrazione comportamentale. Non appena la preda viene vista, la larva converge con gli occhi e prende una curva J per orientare il suo corpo verso la preda e lo cattura. Possiamo quantificare il comportamento di cattura delle prede registrando il numero di paramecia che rimangono nella camera per un certo periodo di tempo. Nel protocollo seguente valuteremo il comportamento di cattura delle prede della larva di pesce zebra dopo il laser ablazione di specifici neuroni.

- Dopo aver istituito il sistema di registrazione comportamentale e aver posizionato una larva in una camera di registrazione secondo il protocollo di testo, utilizzare una micropipetta per raccogliere 50 paramecia e posizionarle nella camera di registrazione. Per posizionare uno slittamento di copertura sopra la camera di registrazione, mettere una piccola goccia d'acqua sullo scivolo di copertura prima di posizionarlo sulla superficie dell'acqua della camera di registrazione per evitare di introdurre aria nella camera.

Posizionare la camera di registrazione nell'impianto di illuminazione. Avviare la registrazione time lapse a 10 fotogrammi al secondo per 11 minuti. Infine, eseguire l'analisi in base al protocollo di testo.