Encyclopedia of Experiments: Biology
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- एक संभोग टैंक के साथ शुरू करें, एक हटाने योग्य डालने वाला टैंक जो अंडे को गिरने की अनुमति देता है। भ्रूण संग्रह से पहले शाम को एक विभाजित संभोग टैंक में दो नर और तीन मादा वयस्क मछली जोड़ें।
अगली सुबह मछली को सिस्टम वाटर युक्त नए संभोग टैंक में स्थानांतरित करें और डिवाइडर को हटा दें। 15 से 30 मिनट तक इंतजार करें ताकि मछली को मेट और स्पॉन का समय दिया जा सके।
अब भ्रूण को इकट्ठा कर के हांक के भ्रूण माध्यम वाले पेट्री डिश में स्टोर करें। 28.5 डिग्री सेल्सियस पर उन्हें पूरे प्रोटोकॉल में उगाएं। एक विच्छेदन माइक्रोस्कोप के तहत भ्रूण की आकृति विज्ञान की जांच करें।
आप कई विकासात्मक विशेषताओं का अवलोकन करेंगे। ब्लास्टोडिक का क्लीवेज कई कोशिकाओं को जन्म देता है। ब्लास्टोडर्म जर्दी कोशिका के ऊपर एक उल्टे कप का आकार लेता है। पैराक्सियल मेसोडर्म खंड भ्रूण के पृष्ठीय भाग पर विकसित होते हैं और इसी तरह।
निषेचन के बाद 24 घंटे से अधिक, बस कुल शरीर की लंबाई से भ्रूण सॉर्ट । उदाहरण प्रोटोकॉल में, हम ट्रांसजेनिक mCherry रिपोर्टर मछली के संभोग की स्थापना की और जिसके परिणामस्वरूप भ्रूण सॉर्ट करेंगे ।
- शुरू करने के लिए, संस्कृति भ्रूण तीन महीने की उम्र के लिए, जो प्रजनन परिपक्वता है । भ्रूण संग्रह से पहले शाम को ताजा प्रणाली के पानी के विभाजित संभोग टैंकों में वांछित तनाव से दो वयस्क पुरुष और तीन मादा मछली को अलग करें । अगले सुबह रोशनी के बाद, डिवाइडर को हटा दें और मछली को स्वाभाविक रूप से तब तक चलने दें जब तक कि टैंक के नीचे भ्रूण नहीं देखा जाता ।
30 मिनट के अंतराल में भ्रूण ले लीजिए और वांछित संख्या एकत्र होने तक भ्रूण माध्यम के अलग पेट्री व्यंजन। भ्रूण को मंचित करने के लिए, उन्हें 50 से 75 प्रति 10 सेंटीमीटर पेट्री डिश के समूहों में संस्कृति दें ताकि सभी भ्रूणों के लगातार विकास के समय को बढ़ावा दिया जा सके। 28.5 डिग्री सेल्सियस पर प्लेटें रखें।
निषेचन, या एचपीएफ के लगभग 24 घंटे बाद तक विभाजन के बाद सोमाइट संख्या का उपयोग करके भ्रूण की उम्र को मापें, और विकासात्मक आयु के आधार पर भ्रूण को अलग करें।
