ゼブラフィッシュ心筋症モデル:薬物による心毒性

心筋症は、心筋が弱まり、血液を送り出す能力を失う状態です。 この状態はゼブラフィッシュで再現することができます。まず、ハンクスのバランスドソルト溶液中の心毒性を担当する薬物のストック溶液を希釈していくつかの作業濃度を準備します。

針を腹腔に1~2ミリメートルそっと押し込み、ゆっくりと薬物溶液を注入します。針を抜いて溶液が漏れるのを防ぐのに5秒待ちます。

生存曲線、各薬物濃度の生存率を示すグラフを作成します。例では、ドキソルビシン(DOX)を注入して、成体ゼブラフィッシュに心筋症を2つの方法で誘導します。

魚にDOXを注入する前に、魚を24時間速くします。次に、魚をグループ化します。麻酔しながら、きれいなろ過用紙を使って各魚を乾燥させ、体重を測定します。

その後、1x HBSSでDOXのストックを希釈し、希釈液を渦で混ぜ、希釈液をパルススピンしてチューブに溜め続けます。

次に、34ゲージの針に10マイクロシリンジを取り付け、1x HBSSで針をすすいで、シリンジとチューブから泡やブロックを取り除きます。 さて、トリカインで成魚を簡単に麻酔します。その後、トリカインで胚水にスポンジを浸し、注射のために腹部を上げてスポンジに魚を移します。

その後、DOX溶液をすべてゆっくりと解放し、針を引き込む前に5秒待ちます。あるいは、魚は内側を右に横方向に配置することができます。

注射後、回復できる新鮮なシステムの水で満たされたきれいな交差タンクに魚を素早く移します。その後、HBSSで針を洗い流し、次の魚を注入します。