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Quantitative FRET (Förster Resonance Energy Transfer) Analysis for SENP1 Protease Kinetics Determination
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Cuantitativo FRET (transferencia de energía de resonancia de Förster) Análisis para SENP1 Proteasa Determinación Kinetics

DOI:
10.3791/4430-v

•

16:02 min

•

February 21, 2013

•

,
1Department of Bioengineering, Bourns College of Engineering,University of California, Riverside

Chapters

  • 00:05Title
  • 02:20Plasmid Constructs
  • 03:07Protein Expression and Purification
  • 06:16FRET-based Protease Assay for Enzyme Kinetic Study
  • 08:54Quantitative FRET Spectrum Analysis
  • 13:36Representative Results
  • 15:11Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Un nuevo método que implica el análisis cuantitativo de FRET (transferencia de energía por resonancia de Förster) señales se describe para el estudio de la cinética de enzimas.<em> K<sub> M</sub</em> Y<em> K<sub> Cat</sub</em> Fueron obtenidos para la hidrólisis del dominio catalítico de SENP1 (SUMO / sentrin proteasa específica 1) para pre-SUMO1 (Small ubiquitina-como modificador). Los principios generales de este estudio cuantitativo proteasa-FRET basada cinética se puede aplicar a otras proteasas.

Tags

Quantitative FRET AnalysisF&246;rster Resonance Energy TransferSENP1 Protease Kinetics DeterminationPosttranslational ModificationsUbiquitinUbiquitin-like ProteinsProtein Activity RegulationSUMO ModificationCellular ProcessesSUMO-specific ProteaseEndopeptidaseIsopeptidaseCatalytic EfficiencySpecificityKinetic ConstantsKcat/KM RatioMethods For Determining Kinetic ParametersPolyacrylamide Gel-based Western-blotRadioactive-labeled SubstrateFluorescent CompoundProtein Labeled Substrate

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