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Cuantitativo FRET (transferencia de energía de resonancia de Förster) Análisis para SENP1 Proteasa Determinación Kinetics
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Bioengineering
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JoVE Journal Bioengineering
Quantitative FRET (Förster Resonance Energy Transfer) Analysis for SENP1 Protease Kinetics Determination
DOI:

16:02 min

February 21, 2013

,

Chapters

  • 00:05Title
  • 02:20Plasmid Constructs
  • 03:07Protein Expression and Purification
  • 06:16FRET-based Protease Assay for Enzyme Kinetic Study
  • 08:54Quantitative FRET Spectrum Analysis
  • 13:36Representative Results
  • 15:11Conclusion

Summary

Automatic Translation

Un nuevo método que implica el análisis cuantitativo de FRET (transferencia de energía por resonancia de Förster) señales se describe para el estudio de la cinética de enzimas.<em> K<sub> M</sub</em> Y<em> K<sub> Cat</sub</em> Fueron obtenidos para la hidrólisis del dominio catalítico de SENP1 (SUMO / sentrin proteasa específica 1) para pre-SUMO1 (Small ubiquitina-como modificador). Los principios generales de este estudio cuantitativo proteasa-FRET basada cinética se puede aplicar a otras proteasas.

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