Journal
/
/
Kvantitativ FRET (Förster Resonance Energy Transfer) Analyse for SENP1 Protease Kinetics Bestemmelse
JoVE Journal
Bioengineering
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Bioengineering
Quantitative FRET (Förster Resonance Energy Transfer) Analysis for SENP1 Protease Kinetics Determination
DOI:

16:02 min

February 21, 2013

,

Chapters

  • 00:05Title
  • 02:20Plasmid Constructs
  • 03:07Protein Expression and Purification
  • 06:16FRET-based Protease Assay for Enzyme Kinetic Study
  • 08:54Quantitative FRET Spectrum Analysis
  • 13:36Representative Results
  • 15:11Conclusion

Summary

Automatic Translation

En hidtil ukendt fremgangsmåde indebærer kvantitativ analyse af FRET (Förster Resonance Energy Transfer) signaler beskrives til undersøgelse af enzymkinetik.<em> K<sub> M</sub</em> Og<em> K<sub> Kat</sub</em> Opnåedes til hydrolyse af det katalytiske domæne af SENP1 (SUMO / Sentrin specifik protease 1) til præ-SUMO1 (Small ubiquitin-lignende modifier). De generelle principper i denne kvantitative-FRET-baserede protease kinetisk undersøgelse kan anvendes på andre proteaser.

Related Videos

Read Article