PCR: La reazione a catena della polimerasi

La reazione a catena della polimerasi, o PCR, è una tecnica utilizzata per amplificare il DNA attraverso il termociclizzazione – cicli di variazioni di temperatura a intervalli di tempo fissi. Utilizzando una DNA polimerasi termostabile, la PCR può creare numerose copie di DNA da blocchi di costruzione del DNA chiamati dNTP. Ci sono tre passaggi nella PCR: denaturazione, ricottura e allungamento. La denaturazione è il primo passo del ciclo e fa sì che il DNA si sciolga interrompendo i legami idrogeno tra le basi con conseguente DNA a singolo filamento. La ricottura abbassa la temperatura abbastanza da consentire il legame dei primer oligonucleotidici al modello di DNA. Durante la fase di allungamento la DNA polimerasi sintetizza nuovo DNA a doppio filamento.

Questo video fornisce un’introduzione alla procedura PCR. Vengono descritti i principi di base della PCR e una procedura passo-passo per l’impostazione di una reazione PCR generalizzata. Il video mostra i componenti necessari per una reazione PCR, include istruzioni per la progettazione del primer e fornisce suggerimenti utili per garantire reazioni PCR di successo.