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Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
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JoVE Science Education Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
PCR: The Polymerase Chain Reaction
  • 00:00Overview
  • 00:35The Reaction
  • 04:46Reaction Components
  • 07:10Setting up the Reaction
  • 09:54Helpful Hints
  • 11:23Applications
  • 12:56Summary

PCR: La reacción en cadena de polimerasa

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Overview

La reacción en cadena de polimerasa, o PCR, es una técnica utilizada para amplificar DNA a través de termociclaje rápido – cyles de cambios de temperatura en intervalos de tiempo fijo. Usando una polimerasa termoestable de la DNA, PCR puede crear numerosas copias de ADN de bloques de ADN llamado Dinucleósido trifosfatos o dNTPs. Hay tres pasos en PCR: desnaturalización, recocido y elongación. Desnaturalización es el primer paso en el ciclo y hace que el ADN derretir interrumpiendo enlaces del hidrógeno entre las bases en el ADN. Recocido disminuye la temperatura suficiente para permitir a la Unión de las cartillas del oligonucleótido a la plantilla de la DNA. Durante la elongación paso polimerasa de la DNA sintetiza nuevo ADN de doble hebra.

Este video proporciona una introducción al procedimiento de PCR. Se describen los principios básicos de la PCR así como un procedimiento paso a paso para configurar una generalizada reacción de PCR. El video muestra los componentes necesarios para una reacción de PCR, incluye la instrucción para el diseño de la cartilla y proporciona consejos útiles para garantizar el éxito reacciones de PCR.

Procedure

La reacción en cadena polimerasa o PCR es un método ampliamente usado para amplificar fragmentos de ADN. PCR utiliza termociclaje rápido, que es el repetido calentamiento y enfriamiento de la reacción a través de tres temperaturas distintas, llamada desnaturalización, recocido y extensión o alargamiento. La reacción de termociclaje rápido comienza una vez que los reactivos de PCR se ponen en un termociclador una máquina, que está programada para precisamente calentar…

Disclosures

No conflicts of interest declared.

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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. PCR: The Polymerase Chain Reaction. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

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