A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
טיהור ג'ל
English
Share
Overview
טיהור ג’ל משמש לשחזור שברי DNA לאחר הפרדה אלקטרופורטית. שחזור DNA מג’ל אגרוז כולל שלושה שלבים בסיסיים: כריכה, כביסה ואלגנטיות מעמוד סיליקה. DNA הוא האמין להיקשר סיליקה בנוכחות מלח גבוה דרך גשר מלח. לאחר הכריכה, DNA נשטף מטומאים ונבהר בתנאי מלח נמוכים המפריעים לאינטראקציה זו.
וידאו זה עובר צעד אחר צעד, הליך כללי לחיתוך רצועה מן הג’ל, סולוביליזציה ג’ל, טיהור באמצעות כריכה לעמוד סיליקה, ו elution של DNA מטוהר. בנוסף, המצגת דנה במספר טיפים להבטחת טיהור ג’ל מוצלח, כולל החשיבות של הפעלת ג’ל אגרוז עם סמן או סולם שיש לו DNA בגדלים ידועים.
Procedure
טיהור ג’ל הוא הליך סטנדרטי המבוצע כדי לשחזר שברי DNA הרצויים מג’לים אגרוז לאחר הפרדה אלקטרופורטית. לאחר המסת שבר הג’ל והפעלתו דרך מסנן מיוחד, הליך זה מניב DNA משוחרר מ זיהומים כגון מלחים, נוקלאוטידים חופשיים ואנזימים, המתאימים ליישומים במורד הזרם. העיקרון הבסיסי מאחורי שחזו?…
Disclosures
No conflicts of interest declared.
Transcript
Tags
Gel PurificationDNA RecoveryAgarose GelElectrophoretic SeparationSpecialized FilterImpuritiesDownstream ApplicationsBindWashEluteSilica-filterCentrifugationSolubilizing BufferSalt ConcentrationCation Salt BridgeNegative ChargesEthanol WashElutionPurified DNACasting Agarose GelElectrophoresisUV Light VisualizationMolecular Weight Comparison
Cite This
JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Gel Purification. JoVE, Cambridge, MA, (2023).
