Purificación del gel se utiliza para recuperar los fragmentos de ADN después de la separación electroforética. Recuperación de ADN de un gel de agarosa incluye tres pasos básicos: encuadernación, lavado y liberador de una columna de sílice. ADN se cree que se unen a la sílice en presencia de sal alta a través de un puente de sal. Siguiendo el enlace, ADN es lavado de impurezas y eluyen condiciones bajo sal interrumpir esta interacción.
Este video va a través de un procedimiento generalizado, paso a paso de cortar una banda de gel, gel de solubilización, purificación mediante el enlace a una columna de sílice y la elución de DNA purificado. Además, la presentación discute varios consejos para asegurar la purificación del gel de éxito, incluyendo la importancia de correr un gel de agarosa con un marcador o una escalera que tiene ADN de tamaño conocido.
Procedure
Gel-purificación es un procedimiento estándar para recuperar deseados fragmentos de ADN de geles de agarosa después de la separación electroforética. Después de disolver el fragmento de gel y ejecutar a través de un filtro especializado, este procedimiento produce ADN liberado de impurezas tales como sales, nucleótidos libres y las enzimas, convenientes para los usos aguas abajo. El principio básico detrás de recuperación de la DNA del gel de agarosa consiste en una…