초파리유지

성공적인 Drosophila 멜라노가스터 연구는 이 귀중한 모형 유기체의 정확한 유지 보수 및 축산에 달려 있습니다. 다음 비디오는 적절한 영양, 하우징 및 플라이 처리를 제공하는 데 필요한 단계에 대해 설명합니다.

일반적으로 과일 비행으로 알고 있지만, Drosophila 멜라노가스터는 실제로 발효 과일에 성장 효모와 같은 미생물에 사속. 실험실에서, 플라이의 다이어트는 실용적인 목적을 위해 수정됩니다. 설탕과 효모 : 몇 가지 조리법을 사용할 수 있으며, 모든 필수 구성 요소를 포함합니다. 다음 조리법은 블루밍턴에있는 인디애나 대학에서입니다, 플라이 주식의 광대 한 다양성으로 유명합니다. 그것은 구성: 멸균 물, 효모, 콩 가루, 노란 옥수수 가루, 질감에 대 한 천, 옥수수 시럽, 그리고 프로 피온 산 곰팡이와 세균 성장을 억제 하는. 이러한 성분은 결합, 가열, 교반, 다음 펌프를 사용하여 플라스틱 하우징 바이알에 배포됩니다. 그(것)들이 채워진 후에, 바이알은 면 상판으로 연결되고, 감싸고, 4°C에서 냉각됩니다. 일단 고화되면, 음식은 오토클레이브를 통해 살균됩니다.

이제 우리는 파리가 무엇을 먹는지 에 대해 조금 배웠으므로 그들이 사는 곳과 처리 방법을 살펴 보겠습니다.

다양한 컨테이너가 하우징 파리에 사용됩니다. 바이알은 플라이 유지 보수에 사용되며 성인 50-100명을 최적으로 함유하고 있습니다. 병은 더 큰 문화와 300-600 성인 파리집에 사용됩니다. 인큐베이터는 환경을 제어하고 수백 개의 바이알과 병을 보유 할 수 있습니다. 파리의 일반적인 저장 조건은 25°C및 60-65%의 상대 습도입니다.

파리와 함께 작업할 때적절한 라벨링 및 문서화를 연습하고 플라이 라인과 실험의 무결성을 유지하기 위해 깨끗한 환경을 유지하는 것이 중요합니다. 푸파의 절반 정도가 동봉되었거나 푸팔 케이스를 떠날 때 컨테이너를 변경해야 합니다. 케이스가 명확해 보입니다.

참고로, 푸팔 단계는 애벌레와 성인 단계 사이에 발생하며 애벌레가 배양되어 성인으로 발전하는 시간입니다. pupal 케이스를 선명하게 식별하려면 컨테이너를 광원까지 잡고 강아지를 검사합니다.

파리는 "파리 뒤집기"라는 과정을 통해 플라이 푸드의 멋진 이름인 신선한 미디어를 가진 바이알로 옮겨갑니다. 파리를 뒤집기 전에 미디어를 검사하여 무결성을 검사합니다. 파리는 건조함으로 갈라지거나 곰팡이나 박테리아로 오염된 음식에서 살아남을 수 없습니다.

먼저 파리를 뒤집으려면 카운터에서 플라이 바이알을 부드럽게 눌러 유리병의 측면을 떨어 뜨십시오. 그런 다음 스토퍼를 신속하게 제거하고 이전 컨테이너에서 파리를 신속하게 새로운 컨테이너로 반전시면 됩니다. 이 과정은 파리가 스토퍼에 의해 탈출하거나 분쇄되는 것을 방지하고, 뒤집는 동안 느슨한 파리가 바이알에 들어가는 것을 방지하기 위해 신속하게 수행됩니다.

파리를 뒤집는 것이 드로소필라의 대량 이송에 바람직한 방법이지만, 파리 를 분류하는 데 마취가 필요합니다. 마취의 두 가지 방법은 여기에서 논의 될 것이다: 냉각, 이산화탄소를 사용하여. 차가운 파리는 8-12 분 동안 -20 ° C 냉동고에 문화를 배치합니다. 그런 다음 선택을 위해 차갑고 평평한 작업 공간에 파리를 배치합니다. 파리는 또한 냉동 표면에 직접 냉각하여 추위를 사용하여 마취 될 수있다.

이산화탄소는 파리에 급성 사망을 일으키지 않거나 연구자에게 위험을 초래하지 않기 때문에 마취를 위한 바람직한 방법입니다. CO2 전달 시스템은 CO2 탱크로 구성됩니다. 바늘에 연결된 튜브는 바이알과 병에 파리를 마취하는; 현미경하에서 분석을 위해 CO2 플레이트에 연결된 튜브.

파리를 마취하려면 스토퍼를 통해 CO2 바늘을 삽입하십시오. 또는 표면에 있는 용기를 탭하고 정지를 제거하고 파리가 움직이지 않을 때까지 닫힌 씰을 유지하면서 CO2 플레이트에 파리를 빠르게 반전시수 있습니다. 브러시 나 집게를 사용하여 파리를 새 용기로 부드럽게 이동합니다.

원치 않는 파리를 버리려면 이소프로판올이나 에탄올, 미네랄 오일로 채워진 큰 병으로 구성된 플라이 모그로 덤프합니다.

이제 실험실에서 파리가 어떻게 유지되고 처리되는지 보았으므로 다양한 실험을 위해 주택 및 공급 조건이 어떻게 수정되는지 살펴보겠습니다.

일부 실험은 더 많은 양의 파리를 포함하기 위해 대체 하우징이 필요합니다.

이 실험에서, 연구원은 다량의 배아를 수집하기 위하여 플라이 인구 케이지를 이용합니다. 플라이 인구 케이지는 수천 마리의 파리를 수용할 수 있는 플라스틱 상자가 분명합니다. 연구원은 여러 병에서 원하는 파리를 플라이 모집단 케이지로 방출한 다음 한천 판을 케이지에 넣어 배아를 수집합니다.

일부 실험은 플라이 다이어트의 조작을 요구한다.

이 실험에서, 연구원은 파리의 탈출 반응을 조절하는 뉴런에 있는 빛 활성화 이온 채널을 표현하는 형질 전환 파리의 탈출 반응을 관찰하고 싶습니다. Drosophila 다이어트는 "모든 트랜스 망막"으로 보충, 이 채널에 대 한 공동 요소는 작동 하도록 허용. 이것은 음식을 녹이고 시약을 추가하여 수행됩니다. 그런 다음 비행이 채널을 활성화하고 탈출 응답을 유도하는 청색광에 노출되고 측정된 비행에 걸린 시간입니다.

실험을 위해 다양한 하우징 및 취급 조건을 조작할 수 있습니다.

이 실험에서는 드로소필라에 대한 운동의 효과를 연구하기 위해 정교한 "파워 타워"가 만들어집니다. 파워 타워는 "부정적인 지질택시"로 알려진 중력에 대항하여 위쪽으로 이동하는 플라이의 자연적인 반응을 활용하여 지속적으로 상승하고 떨어지는 기계입니다.

파워 타워에서 행사되는 파리의 성능은 신속한 반복 음성 지질 분석 또는 짧은 반지 분석법을 사용하여 측정됩니다. 비어 있는 바이알의 파리는 카메라 앞에 놓입니다. 바이알을 탭하고 상승거리는 기록됩니다. 이 실험은 대조군 운동과 비교하여 시간이 지남에 따라 활동에 긍정적인 영향을 미쳤다는 것을 보여줍니다.

이 JoVE 비디오는 드로소필라 멜라노가스터의유지 보수와 축산에 대해 다루었습니다. 이 비디오를 시청한 후에는 플라이 푸드 미디어를 준비하고, 적절한 하우징을 올바르게 식별하고, 파리를 뒤집고, 간단한 실험을 수행할 수 있어야 합니다. 시청해 주셔서 감사합니다!