עריכת גנום

טכניקה מבוססת היטב לשינוי רצפים ספציפיים בגנום היא פילוח גנים על ידי רקומבינציה הומולוגית, אך שיטה זו יכולה להיות מייגעת ופועלת רק באורגניזמים מסוימים. ההתקדמות האחרונה הובילה לפיתוח “עריכת גנום”, אשר פועלת על ידי גרימת שבירות גדיל כפול ב- DNA באמצעות אנזימי נוקלאז מהונדסים מונחים לאתרים גנומיים ממוקדים על ידי חלבונים או RNAs המזהים רצפים ספציפיים. כאשר תא מנסה לתקן נזק זה, מוטציות ניתן להכניס לתוך אזור ה- DNA היעד.

בסרטון זה, JoVE מסביר את העקרונות שמאחורי עריכת הגנום, ומדגיש כיצד טכניקה זו מתייחסת למנגנוני תיקון DNA. לאחר מכן נבדקות שלוש שיטות עיקריות לעריכת גנום – גרעיני אצבע אבץ, TALENs ומערכת CRISPR-Cas9 – ולאחריהן פרוטוקול לשימוש ב-CRISPR ליצירת שינויים גנטיים ממוקדים בתאי יונקים. לבסוף, אנו דנים במחקר הנוכחי המיישם עריכת גנום כדי לשנות את החומר הגנטי באורגניזמים מודל או תאים בתרבית.