A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
Genome Editing
  • 00:00Overview
  • 00:45Principles of Genome Editing
  • 04:10Generalized CRISPR Protocol
  • 06:11Applications
  • 08:03Summary

עריכת גנום

English

Share

Overview

טכניקה מבוססת היטב לשינוי רצפים ספציפיים בגנום היא פילוח גנים על ידי רקומבינציה הומולוגית, אך שיטה זו יכולה להיות מייגעת ופועלת רק באורגניזמים מסוימים. ההתקדמות האחרונה הובילה לפיתוח “עריכת גנום”, אשר פועלת על ידי גרימת שבירות גדיל כפול ב- DNA באמצעות אנזימי נוקלאז מהונדסים מונחים לאתרים גנומיים ממוקדים על ידי חלבונים או RNAs המזהים רצפים ספציפיים. כאשר תא מנסה לתקן נזק זה, מוטציות ניתן להכניס לתוך אזור ה- DNA היעד.

בסרטון זה, JoVE מסביר את העקרונות שמאחורי עריכת הגנום, ומדגיש כיצד טכניקה זו מתייחסת למנגנוני תיקון DNA. לאחר מכן נבדקות שלוש שיטות עיקריות לעריכת גנום – גרעיני אצבע אבץ, TALENs ומערכת CRISPR-Cas9 – ולאחריהן פרוטוקול לשימוש ב-CRISPR ליצירת שינויים גנטיים ממוקדים בתאי יונקים. לבסוף, אנו דנים במחקר הנוכחי המיישם עריכת גנום כדי לשנות את החומר הגנטי באורגניזמים מודל או תאים בתרבית.

Procedure

עריכת הגנום כוללת טכניקות שבהן חוקרים יכולים “לערוך” או לשנות רצף דנ”א ספציפי. שיטות אלה מסתמכות על יצירת “חתכים” קטנים ב- DNA, אשר תאים מנסים לתקן, לעתים קרובות באופן חלקי. באופן זה, מדענים יכולים לגרום מוטציות ברצפים ממוקדים עם יעילות רבה יותר בהשוואה פילוח גנים קלאסי. בסרטון זה נסקור את …

Disclosures

No conflicts of interest declared.

Transcript

Tags

Cite This
JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Genome Editing. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

Related Videos